摘 要：【目的】研究不同貯藏溫度和種子含水量條件下秤錘樹種子活力和生理生化指標(biāo)的變化規(guī)律，探尋秤錘樹種子的適宜貯藏溫度和種子含水量，為秤錘樹種子貯藏提供科學(xué)依據(jù)?！痉椒ā繉⒊渝N樹種子脫水至2種不同的含水量（7.3%和10.1%），并貯藏在不同溫度中（4 ℃和-18 ℃），共4種處理。對貯藏60、120、180、240、300 d的種子分別測定種子生活力和相對電導(dǎo)率、SOD活性、CAT活性、AsA含量、GSH含量、游離脯氨酸含量、O2·-含量、MDA含量、H2O2含量等生理生化指標(biāo)?！窘Y(jié)果】貯藏溫度、種子含水量和貯藏時間協(xié)同影響秤錘樹種子活力。隨著貯藏時間的延長，各處理的種子生活力均下降；隨著貯藏溫度和種子含水量的下降，種子生活力顯著提升；至貯藏結(jié)束300 d時，4種處理的種子生活力都保持在80%以上，特別是在含水量為7.3%貯藏在-18 ℃條件下，種子生活力達(dá)到了90%，顯著高于其他處理。貯藏時間延長導(dǎo)致種子發(fā)生不同程度的劣變，不同處理下的種子相對電導(dǎo)率、O2·-含量、MDA含量、H2O2含量整體均呈逐漸上升的變化趨勢；在貯藏前期游離脯氨酸含量升高，后期均有所下降；SOD活性、CAT活性、AsA含量、GSH含量整體均呈逐漸下降的趨勢。采用模糊數(shù)學(xué)隸屬函數(shù)值法綜合分析不同處理中的秤錘樹種子耐貯藏性結(jié)果為L/Lt>L/St>H/Lt>H/St?！窘Y(jié)論】隨著貯藏時間的繼續(xù)延長，降低種子含水量和貯藏溫度有利于減少貯藏過程中的劣變，提高種子抗氧化能力。同時，由模糊數(shù)學(xué)隸屬函數(shù)值法綜合評價得出L/Lt處理下種子貯藏性最強。綜合分析貯藏效果，將含水量7.3%的秤錘樹種子貯藏在-18 ℃溫度下可能是保存該物種種質(zhì)較為合適的方法。

關(guān)鍵詞：秤錘樹；種子貯藏；生理生化；種子活力

中圖分類號：S792.99 文獻標(biāo)志碼：A 文章編號：1673-923X（2024）12-0106-09

基金項目：江蘇省珍稀鄉(xiāng)土樹種種質(zhì)資源離體保護長期科研基地項目（LYKJ〔2021〕03）；江蘇高校優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程資助項目（PAPD）。

The effect of different storage conditions on physiology biochemistry and vigor of the Sinojackia xylocarpa seeds

CAI Hao， SHI Fenghou， SHEN Yongbao

（a. College of Forestry； b. Co-Innovation Center for Sustainable Forestry in Southern China， Nanjing Forestry University， Nanjing 210037， Jiangsu， China）

Abstract：【Objective】Reveal the changing rules of the Sinojackia xylocarpa seeds viability and physiology and biochemistry indexes under different storage temperatures and seed moisture contents， identify the optimal storage temperature and seed moisture content of the seeds and provide scientific basis for the storage of the Sinojackia xylocarpa seeds.【Method】The seeds were dehydrated to two different seed moisture contents （7.3% and 10.1%） and stored at two different temperatures （4 ℃ and -18 ℃） across four treatment groups. Comprehensive assessments were conducted at intervals （60， 120， 180， 240， and 300 days）， measuring seed viability， Relative conductivity， SOD activity， CAT activity， AsA content， GSH content， free proline， O2·- content， MDA content， H2O2 content.【Result】Storage temperature， seed moisture content and storage time had synergistic influence seed vigor. With the extension of storage time， the seed viability of each treatment decreased； With the decrease of storage temperature and seed moisture content， seed viability increased significantly； By the end of storage 300 d， the seed of viability the four treatments remained above 80%， especially when the moisture content was 7.3% and stored at -18 ℃， the seed viability reached 96.6%， which was significantly higher than other treatments. Prolonged storage time led to the deterioration of seeds in different degrees， and the relative conductivity， O2·- content， MDA content and H2O2 content of seeds under different treatments showed a gradual upward trend. The content of free proline increased in the early stage of storage and decreased in the later stage. SOD activity， CAT activity， AsA content， GSH content all showed a decreasing trend. The fuzzy mathematical membership function method was used to comprehensively analyze seed storability of S. xylocarpa in different treatments， which was L/Lt>L/St>H/Lt>H/St.【Conclusion】With the extension of storage time， reducing the moisture content and lowering storage temperature can be conducive to reducing the deterioration during storage and improving the antioxidant capacity of seeds. At the same time， the comprehensive evaluation of the fuzzy mathematical membership function method showed that the seed storability was the most robust in L/Lt treatment. Based on the comprehensive analysis of the storage effect， we suggest that it may be the more suitable method to store the S. xylocarpa seeds with seed moisture content of 7.3% at -18 ℃.

Keywords： Sinojackia xylocarpa Hu； seed storage； physiology and biochemistry； seed viability

秤錘樹Sinojackia xylocarpa Hu，為安息香科Styracaceae秤錘屬Sinojackia的落葉灌木，是中國特有Ⅱ級瀕危保護植物[1]。秤錘樹的花潔白芬芳，果實形似秤錘，懸掛于樹體，具有很高的觀賞價值[2]。隨著人為干擾的加劇，秤錘樹的生境受到極大破壞，使得秤錘樹種群數(shù)量銳減[3]。此外，秤錘樹種子胚乳和內(nèi)果皮的機械束縛，導(dǎo)致其種子在自然狀態(tài)下很難萌發(fā)，這就加速了該物種的瀕危[4]。因此，如果要拯救該物種免于野外滅絕，就需要進行有效的保護工作。將種子長期貯藏在種子庫中是目前最佳方法之一，這是因為種子庫可以在小空間內(nèi)以最低成本長期安全保存遺傳多樣性[5]。目前，我國已經(jīng)成功保護了瀕危樹種翠柏Calocedrus macrolepis的種子，它在種子庫中貯藏了5年，仍然具有較高活力[6]。

種子的劣變?nèi)Q于貯藏溫度、種子含水量和貯藏時間[7]。即使在低溫和低濕度條件下貯藏種子，其活力在長期貯藏過程中也會降低或喪失。據(jù)報道，種子活力喪失與某些細(xì)胞代謝和生化有關(guān)，包括脂質(zhì)過氧化、酶失活、膜完整性破壞和DNA損傷[8]。雖然種子老化的確切機制尚不清楚，但活性氧（ROS）包括超氧陰離子自由基（O2·-）和過氧化氫（H2O2）的過量積累被認(rèn)為是種子變質(zhì)的主要原因[9]。丙二醛（MDA）是ROS的產(chǎn)物，是氧化損傷的生物標(biāo)志物[10]。為了延長種子貯藏壽命，種子進化出高效的ROS清除系統(tǒng)，例如抗氧化酶和非酶抗氧化劑清除種子中過量積累的有害物質(zhì)[9]。抗氧化酶如超氧化物歧化酶（SOD）和過氧化氫酶（CAT）可以清除種子在貯藏過程中積累的過量自由基，最大限度地減少ROS破壞作用。非酶抗氧化劑如抗壞血酸（AsA）和還原型谷胱甘肽（GSH）在清除ROS上起著關(guān)鍵的作用。同時，脯氨酸（Pro）也被證明可以消除ROS[11]。

以往對秤錘樹的研究主要集中在種子生理[12]、染色體核型和比較形態(tài)學(xué)[13]等方面，至今尚未對秤錘樹貯藏方法進行科學(xué)、系統(tǒng)地研究。本研究以不同含水量的秤錘樹種子為對象，分析在不同貯藏條件下種子活力、有害物質(zhì)、抗氧化系統(tǒng)及游離脯氨酸的相關(guān)變化。研究結(jié)果可能有助于為瀕危物種秤錘樹提供保存種質(zhì)的方案，在一定程度上也能為其他鄉(xiāng)土瀕危樹種的保護研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗所用秤錘樹種子于2022年10月采收自江蘇省句容市下蜀鎮(zhèn)南京林業(yè)大學(xué)下蜀實習(xí)林場（119°13′30″E，32°7′33″N）。種子的橫徑為（24.5±2.6）mm，縱徑為（13.3±2.0）mm，初始含水量40.3%。隨后置于室溫（10～25 ℃）下自然干燥至含水量10.1%與7.3%，并包裝在塑料袋中，以便后續(xù)貯藏。

1.2 試驗方法

當(dāng)種子含水量降至目標(biāo)量時，設(shè)置4種貯藏條件。H/St，含水量10.1%，貯藏溫度（4±2）℃；H/Lt，含水量10.1%，貯藏溫度（-18±2）℃；L/St，含水量7.3%，貯藏溫度（4±2）℃；L/Lt，含水量7.3%，貯藏溫度（-18±2）℃。貯藏時間為2022年12月至2023年11月，共貯藏300 d，每隔60 d取樣1次，共取樣5次，測定種子生活力和相對電導(dǎo)率、SOD活性、CAT活性、AsA含量、GSH含量、游離脯氨酸含量、O2·-含量、MDA含量、H2O2含量。

1.3 指標(biāo)測定與數(shù)據(jù)分析

TTC參考De Barros Franca-Neto等[14]的方法測定，種子相對電導(dǎo)率采用DDS-11A型號電導(dǎo)儀測定，MDA含量采用硫代巴比妥酸法測定[15]，脯氨酸含量測定采用酸性茚三酮顯色法[16]，O2·-含量參考朱愛生等[17]的方法測定，SOD活性采用氮藍(lán)四唑法測定，AsA采用GSH用分光光度計法測定，具體測定方法參照《植物生理學(xué)模塊實驗指導(dǎo)》[18]，CAT、H2O2采用南京建成生物工程研究所的試劑盒。

1.4 數(shù)據(jù)分析

2 結(jié)果與分析

2.1 貯藏過程中種子活力的變化

由表1可知，貯藏溫度、種子含水量、貯藏時間以及三者的交互作用對貯藏秤錘樹種子生活力的影響均達(dá)到了顯著水平（P<0.05）。由圖1a可知，不同處理的秤錘樹種子的生活力在貯藏過程中整體呈下降的變化趨勢。在貯藏60 d時，H/St處理中種子生活力最高，其次是L/St，接著是H/Lt，最低是L/Lt。貯藏120 d后，L/Lt處理中的種子生活力顯著高于其他處理組（P<0.05）。隨著貯藏時間的延長，各處理種子的生活力不斷下降，不同處理種子生活力差異逐漸增大。至貯藏結(jié)束（300 d）時，4種處理的種子生活力仍然可以保持在80%以上，特別是在L/Lt貯藏條件下，種子生活力達(dá)到了90%，顯著高于其他處理（P<0.05）。H/St、H/Lt、L/St處理中貯藏的秤錘樹種子生活力分別下降了16.7%、10%和7.3%。由圖1b可知，在貯藏60 d時，H/St處理中種子相對電導(dǎo)率顯著高于其他處理（P<0.05）。至貯藏結(jié)束300 d，H/St、H/Lt、L/Lt和L/St處理中種子相對電導(dǎo)率分別上升了28.7%、26.9%、24.6%和20.5%，其中H/St處理上升最多。在整個貯藏過程中，L/St處理中種子相對電導(dǎo)率顯著低于其他處理（P<0.05）。試驗結(jié)果表明，當(dāng)秤錘樹種子的含水量為7.3%時，-18 ℃環(huán)境中存放的種子貯藏效果明顯優(yōu)于其他處理，降低種子含水量和貯藏溫度有助于秤錘樹種子活力的保存。

2.2 貯藏過程中種子有害物質(zhì)含量的變化

由表1可知，貯藏溫度、種子含水量、貯藏時間以及3者的交互作用對貯藏秤錘樹種子的相對電導(dǎo)率、MDA含量和H2O2含量的影響均達(dá)到了顯著水平（P<0.05）。由圖2可知，不同處理的秤錘樹種子的相對電導(dǎo)率、MDA含量、O2·-含量和H2O2含量整體上均呈現(xiàn)上升趨勢。由圖2a可知，MDA含量至貯藏結(jié)束時達(dá)到了峰值，與貯藏60 d相比，H/St、H/Lt，L/Lt和L/St處理中貯藏秤錘樹種子分別是貯藏60 d的2.1、2.3、1.7、1.2倍。由圖2b可知，在貯藏60 d 時，L/Lt處理中O2·-含量顯著高于其他處理（P<0.05）。至貯藏結(jié)束H/St處理組中O2·-含量是貯藏60 d的 2.2倍，并且顯著高于貯藏300 d時的其他處理組（P<0.05）。由圖2c可知，在貯藏初期，H/St和H/Lt處理組中H2O2含量明顯低于L/Lt和L/St處理（P<0.05）。至貯藏240 d時，4種處理的H2O2含量不斷增加，并且H/St和H/Lt處理中H2O2含量增加較快。至貯藏結(jié)束時，H/St、H/Lt、L/Lt和L/St處理中H2O2含量比貯藏60 d時分別增加了98%、75%、34%和15%。試驗結(jié)果表明，貯藏溫度和種子含水量越低，種子細(xì)胞膜被破壞程度越低，細(xì)胞膜完整性越高，種子有害物質(zhì)積累也越少。其中，L/Lt處理中貯藏的種子效果最佳。

2.3 貯藏過程中種子抗氧化系統(tǒng)的變化

由表1可知，貯藏溫度、種子含水量、貯藏時間以及三者的交互作用對貯藏秤錘樹種子的SOD活性、CAT活性和GSH含量的影響均達(dá)到了顯著水平（P<0.05）。貯藏溫度、貯藏時間以及3者的交互作用對秤錘樹中的AsA含量達(dá)到了顯著水平（P<0.05），但種子含水量對其無顯著影響（P>0.05）。由圖3可知，不同處理的秤錘樹種子的SOD、CAT、AsA和GSH在貯藏過程中整體上呈現(xiàn)波動下降的變化趨勢。由圖3a可知，在整個貯藏過程中，L/Lt處理的SOD活性顯著高于其他處理，而H/St處理的種子生活力顯著下降并且保持較低的SOD活性水平（P<0.05）。與貯藏60 d相比，貯藏結(jié)束時H/St、H/Lt，L/Lt和L/St處理中的SOD活性分別下降了35.5%、39.9%、34.6%和24.4%。由圖3b可知，貯藏初期，H/St和L/St處理組中的CAT活性無顯著差異，但均高于其他處理組（P<0.05）。隨著貯藏時間的延長，L/Lt處理組中的CAT活性在120、180、240和300 d顯著高于其他處理組（P<0.05）。貯藏60 d相比，貯藏300 d時H/St、H/Lt，L/Lt和L/St處理中的CAT活性分別下降了53.4%、40.6%、45.8%和37.3%。由圖3c可知，在整個貯藏過程中，4種處理中的AsA含量總體變化幅度不大。其中，H/St處理組中的AsA含量在前180 d內(nèi)顯著高于其他處理組（P<0.05）。隨著貯藏時間的延長，L/Lt處理組中的AsA含量逐漸升高，并顯著高于（P<0.05）。由圖3d可知，在貯藏60 d時，H/St處理組中的GSH含量顯著高于其他處理組（P<0.05）。然而，隨著時間的延長，L/Lt處理組中的GSH含量在180、240和300 d顯著高于其他處理組（P<0.05）。至貯藏300 d時，H/St、H/Lt，L/Lt和L/St處理中的GSH含量分別是貯藏60 d的2.1、2.3、1.7、1.2倍。這些結(jié)果說明了，隨著貯藏時間的延長，秤錘樹種子內(nèi)部的抗氧化酶和抗氧化劑不斷下降，而降低含水和溫度可以保持抗氧化酶的活性。

2.4 貯藏過程中種子游離脯氨酸含量的變化

由表1可知，貯藏溫度、種含水量、貯藏時間以及交互作用對貯藏秤錘樹種子游離脯氨酸含量的影響均達(dá)到了顯著水平（P<0.05）。由圖4可知，不同處理的秤錘樹種子的游離脯氨酸含量在貯藏過程中呈現(xiàn)先上升后下降的變化趨勢。貯藏60 d時，H/St中游離脯氨酸含量顯著低于其他處理（P<0.05）。4種處理中的游離脯氨酸含量在貯藏240 d時達(dá)到了峰值，其中L/Lt處理最多，其次是H/St和L/St，H/Lt最少。至貯藏結(jié)束時，L/St和L/Lt處理無顯著差異，且顯著高于H/St和H/Lt處理。在整個貯藏過程中，L/Lt處理中的游離脯氨酸含量在貯藏期間保持較高水平。這些結(jié)果表明，秤錘樹種子在含水量降低時會積累更多的游離脯氨酸，以緩解失水對種子細(xì)胞的損害；而低溫條件則延緩了游離脯氨酸含量的減少，從而增強了抗衰老能力。

2.5 不同處理的秤錘樹種子耐貯藏性綜合評價

至貯藏結(jié)束時，秤錘樹種子仍保持較高的生活力，說明秤錘樹種子具有一定的耐貯藏性?，F(xiàn)使用模糊數(shù)學(xué)隸屬函數(shù)法，對4種處理秤錘樹種子的10個生理指標(biāo)的隸屬函數(shù)加權(quán)平均值進行計算，綜合評價不同處理秤錘樹種子的耐貯藏性。各測試指標(biāo)綜合性評價分析結(jié)果（表2）表明，不同處理秤錘樹的耐貯藏性強弱排序為L/Lt>L/St>H/Lt>H/St，即L/Lt處理中種子的隸函數(shù)值平均值最大，耐貯藏性最強；H/St處理中種子的隸函數(shù)值平均值最小綜合，耐貯藏性最弱。

3 討 論

3.1 貯藏過程中種子活力的變化

對于自然狀態(tài)下萌發(fā)困難的秤錘樹種子來說，很難通過發(fā)芽率快速地評估種子質(zhì)量。然而，氯化三苯基四氮唑（TTC）法則不受種子休眠程度影響。采用TTC法測定野黍Eriochloa villosa種子在貯藏8 a期間的種子生活力，發(fā)現(xiàn)與發(fā)芽結(jié)果相一致[20]。因此，本試驗采用TTC法來判斷種子活力狀況。總體上看，在4種處理下貯藏的秤錘樹種子，在長達(dá)300 d的時間里保持較理想的生活力（80%以上）。在本研究中，隨著貯藏時間的延長，秤錘樹種子生活力不斷下降，這也與南京椴Tilia miqueliana[17]、結(jié)縷草Zoysia japonica[21]和番茄Solanum lycopersicum[22]種子的研究結(jié)果相一致。隨著貯藏時間的延長，L/St顯著高于其他處理，表明種子含水量、貯藏溫度和貯藏時間對種子活力有很大影響[22]。電導(dǎo)率測量被用于指示種子活力，并且是檢測種子壽命的基本方法。原理是種子的衰老常伴隨著細(xì)胞膜完整性喪失，膜通透性的變化可以通過電導(dǎo)率的變化來響應(yīng)[23]。本研究發(fā)現(xiàn)，相對電導(dǎo)率和種子生活力結(jié)果大致相同。隨著貯藏時間的延長，秤錘樹種子浸出液的相對電導(dǎo)率不斷上升，H/St處理下貯藏種子的相對電導(dǎo)率上升最快，而L/Lt貯藏條件下的種子細(xì)胞膜的傷害最小，種子活力相對電導(dǎo)率變化也最小，說明降低種子含水和溫度可以有效地延長種子壽命。即在本試驗范圍內(nèi)，將含水量7.3%的秤錘樹種子貯藏在-18 ℃的環(huán)境中效果最佳。

3.2 貯藏過程中有害物質(zhì)的變化

呼吸作用產(chǎn)生的ROS促進種子衰老，衰老又導(dǎo)致種子O2·-和過H2O2的積累[9]。此外，過量的ROS又引起脂質(zhì)過氧化，導(dǎo)致MDA破壞細(xì)胞膜，進一步加速種子變質(zhì)[11]。在我們的研究中，高含水量和貯藏溫度產(chǎn)生更多的O2·-、H2O2和MDA，因此秤錘樹種子活力下降的原因可歸因于過量的O2·-、H2O2和MDA的積累。據(jù)報道，種子活力下降與翠柏[6]、向日葵Helianthus annuus[24]、歐洲山毛櫸Fagus sylvatica[25]種子中高水平的O2·-、H2O2和MDA有關(guān)。本試驗前期，4種處理中O2·-、H2O2和MDA含量都保持在很低的水平，說明抗氧化系統(tǒng)能夠有效清除自由基等有害物質(zhì)和抑制膜質(zhì)過氧化反應(yīng)，秤錘樹種子有害物質(zhì)還處于較低水平，貯藏后期種子的保護酶活性減弱，有害物質(zhì)含量持續(xù)上升。4種處理中，種子的O2·-、H2O2和MDA含量的增加幅度不同，其中，H/ St處理中增加最大，L/Lt處理中增加最小，H/Lt和L/St中種子有害物質(zhì)含量增加幅度介于兩者之間。試驗表明降低貯藏溫度和種子含水量可以有效延緩種子的劣變，從而保持種子的活力。

3.3 貯藏過程中抗氧化系統(tǒng)的變化

為了降低ROS的濃度，植物組織中存在抗氧化防御系統(tǒng)[26]。這些保護系統(tǒng)由抗氧化酶與抗氧化劑組成，包括SOD、CAT、AsA、GSH等[27]。SOD是細(xì)胞防御ROS最重要的酶之一[28]，可以將機體代謝產(chǎn)生的O2·-等轉(zhuǎn)化為H2O2，CAT將H2O2還原為水[29]。已有研究中向日葵種子[24]、大豆[30]、棉花Gossypium hirsutum[31]在貯藏過程中SOD和CAT活性有不同程度的下降趨勢，這與本研究相一致。種子含水量和貯藏溫度的增加，加速酶氧化并導(dǎo)致細(xì)胞損傷，從而降低種子活力。在本試驗范圍內(nèi)，L/Lt處理的SOD活性和CAT活性在貯藏期間均高于其他處理。這可能是因為降低種子含水量和貯藏溫度對L/Lt處理中的秤錘樹種子產(chǎn)生脅迫，種子為了適應(yīng)環(huán)境從而大幅提升SOD和 CAT酶活性。而在貯藏后期，種子內(nèi)的有害物質(zhì)緩慢增加，SOD和CAT酶活性隨之緩慢減少。此外，AsA是一種非常重要的抗氧化劑，可與OH-、O2·-和原子氧直接反應(yīng)[32]。谷胱甘肽作為氧化還原系統(tǒng)中重要的還原劑和調(diào)節(jié)信號分子，在清除ROS中發(fā)揮重要作用[11]。在本試驗范圍內(nèi)，貯藏結(jié)束，秤錘樹種子的GSH和AsA含量相比貯藏前顯著降低，且種子含水量和貯藏溫度越高，貯藏后種子活力越低，酶活性越低。因此，保持較高的抗氧化酶活性以及ROS清除能力是L/Lt處理中的秤錘樹種子活力較強的原因之一。

3.4 貯藏過程中游離脯氨酸含量的變化

Pro可以通過清除H2O2來保護細(xì)胞功能，并在響應(yīng)氧化應(yīng)激中發(fā)揮重要作用[33]。本研究中，L/Lt處理的游離脯氨酸含量顯著高于其他處理組，表明Pro在L/Lt處理中對清除H2O2起到了重要作用。L/Lt處理中H2O2含量較低和生活力較高進一步支持了這一結(jié)論。在貯藏初期到180 d的L/Lt處理中游離脯氨酸含量較高是對不利貯藏條件的適應(yīng)性反應(yīng)，游離脯氨酸含量的增加是一種防御機制，可能對受脅迫的植物有益。從180 d到貯藏結(jié)束，H/St、H/Lt和L/St處理中游離脯氨酸含量的下降可能是由于H2O2大量積累。因此，降低貯藏溫度和種子含水量可以增加游離脯氨酸含量，增強種子對不利環(huán)境的適應(yīng)力。

3.5 秤錘樹種子耐貯藏評價

在種子貯藏的過程中，其內(nèi)部會發(fā)生較為復(fù)雜的生理變化。因此，僅從單項指標(biāo)難以準(zhǔn)確衡量種子耐貯藏性。隸屬函數(shù)法可以綜合多項生理生化指標(biāo)，對脅迫中不同的植物做出較好的綜合評價[19]。呂艷貞等[34]利用隸屬函數(shù)法對紫花苜蓿Medicago sativa種子耐貯藏性進行綜合評價，并成功篩選出耐貯藏性強的種質(zhì)。本研究利用隸屬函數(shù)分析法對不同處理中秤錘樹種子的耐貯藏性進行綜合評價，各處理種子耐貯藏性排序依次為L/Lt>L/St>H/Lt>H/St，即L/Lt處理中種子的耐貯藏性最強。該方法所獲得的結(jié)論提高了秤錘樹種子耐貯藏性評價的全面性和客觀性。

種子含水量和貯藏溫度對貯藏期間的種子壽命有很大影響[35]。已有研究表明，種子含水量每減少1%或者貯藏溫度每下降5 ℃，種子壽命就會增加1倍[36]。在本試驗中，降低種子含水量和貯藏溫度可以顯著提高秤錘樹種子的抗氧化性，延長其壽命。然而，本試驗初步探討了秤錘樹種子在4種不同貯藏條件下，300 d內(nèi)的種子活力變化，貯藏時間相對較短。在今后的研究中，可以在此基礎(chǔ)上延長秤錘樹種子的貯藏時間，繼續(xù)觀測種子的活力變化，從而更準(zhǔn)確地判斷秤錘樹種子的最佳貯藏含水量和貯藏溫度及最長貯藏時間。此外，本研究主要集中于幾種核心的生理和生化指標(biāo)，未能涵蓋更廣泛的分子層面的變化。為了深入理解種子貯藏過程中的復(fù)雜生理機制，未來的研究可以采用更先進的生物技術(shù)手段，如轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)分析，以全面評估4種貯藏條件對種子生理狀態(tài)的影響。通過這些綜合方法，可以更準(zhǔn)確地研究影響種子耐貯藏性的關(guān)鍵因素，從而為種子的長期保存和利用提供科學(xué)依據(jù)和技術(shù)支持。

4 總 結(jié)

本研究初步探索了不同貯藏條件對秤錘樹種子活力及其生理生化反應(yīng)的影響。在秤錘樹種子貯藏過程中，隨著貯藏時間的延長，秤錘樹種子活力逐漸下降；經(jīng)過300 d貯藏后，在L/St處理（即含水量7.3%，貯藏溫度為-18 ℃）中貯藏的生活力最高，為96.6%。相比其他貯藏條件，在L/St處理中貯藏的種子相對電導(dǎo)率上升較為平緩。各貯藏處理條件下，隨著貯藏時間的延長，O2·-、H2O2、MDA含量逐漸增加，抗氧化酶SOD、CAT活性、非酶抗氧化劑GSH和ASA含量不斷上升，而游離脯氨酸含量先上升后下降。然而，隨著種子含水量和貯藏溫度的降低，有害物質(zhì)的產(chǎn)生在一定程度上受到抑制，使種子壽命得以延長。利用隸屬函數(shù)分析法綜合評價不同處理中秤錘樹種子的耐貯藏性，排序為L/Lt>L/St>H/Lt>H/ St。綜上所述，在-18 ℃下且含水量為7.3%的條件下貯藏秤錘樹種子可能是保存該物種種質(zhì)最合適的方法。本研究不僅篩選出了適宜秤錘樹種子的貯藏方法，同時也深入揭示了其劣變過程中的生理生化機制。

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[本文編校：戴歐琳]