【摘 要】目的：探討熱休克因子1（heat shock factor 1，HSF1）/5'-單磷酸腺苷活化蛋白激酶（adenosine monophosphate activatedprotein kinase，AMPK）信號(hào)通路調(diào)控鐵死亡對(duì)糖尿病心肌?。╠iabetic cardiomyopathy，DCM）發(fā)病的影響。方法：本研究為實(shí)驗(yàn)研究，采用空白對(duì)照與多組實(shí)驗(yàn)對(duì)照。H9c2細(xì)胞隨機(jī)分為4組：低葡萄糖組（control，Con）、高葡萄糖組（high glucose，HG）、HG+HSF1組、HG+HSF1+化合物C（compound C，CC）組。分別對(duì)細(xì)胞進(jìn)行羅丹明膠質(zhì)蛋白染色、細(xì)胞線粒體（reactive oxygenspecies，ROS）檢測和細(xì)胞脂質(zhì)ROS檢測，并通過Western blot分析AMPK信號(hào)表達(dá)。雄性C57/BL6小鼠隨機(jī)分為4組：NC組、NC+HSF1組、DM組和DM+HSF1組，每組12只。通過超聲心動(dòng)圖評(píng)估了小鼠心血管功能參數(shù)。結(jié)果：與Con組相比，HG組HSF1、pAMPK/AMPK水平明顯下調(diào)（P=0.005、0.002），和相對(duì)細(xì)胞表面積、線粒體Fe2+水平、線粒體ROS水平、細(xì)胞脂質(zhì)ROS水平明顯增加（P=0.001、0.003、0.006、0.002）。與HG 組相比，HG+HSF1組明顯逆轉(zhuǎn)了這些變化（P=0.001、0.001、0.002、0.006、0.007、0.003），但加入CC時(shí)HSF1的逆轉(zhuǎn)作用明顯減弱（Plt;0.05）。與NC組相比，DM組EF%、FS%、E/A、E'/A'和心臟組織中HSF1、pAMPK/AMPK表達(dá)明顯降低（均Plt;0.01），和心臟組織中Fe2+、ROS、丙二醛（Malondialdehyde，MDA）水平和4-羥基壬烯酸（4-Hydroxynonenal，4-HNE）蛋白水平明顯增加（P=0.004、0.003、0.001、0.004），DM+HSF1組明顯逆轉(zhuǎn)了這些變化。結(jié)論：HSF1在DCM病理過程中發(fā)揮心臟保護(hù)作用，其抗鐵死亡作用可能與AMPK依賴性的脂質(zhì)代謝和線粒體穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】熱休克因子1；5'-單磷酸腺苷活化蛋白激酶；糖尿病心肌??；小鼠；鐵死亡

【中圖分類號(hào)】R587.2 【 文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A 【收稿日期】2023-09-21

糖尿病心肌?。╠iabetic cardiomyopathy，DCM）是在糖尿?。╠iabetes mellitus，DM）患者中發(fā)現(xiàn)的一種特殊類型的心肌病，可引起病理異常，包括心肌細(xì)胞凋亡、左心室功能障礙、心臟重塑、炎癥、氧化反應(yīng)和心肌代謝紊亂[1]。目前預(yù)防DCM的治療策略結(jié)果不能令人滿意。因此，新的藥物或分子干預(yù)措施對(duì)遏制DCM患者心室功能障礙和重塑的發(fā)生率不斷上升至關(guān)重要。最近研究發(fā)現(xiàn)，鐵死亡與各種疾病有關(guān)，包括心臟疾病[2]。鐵死亡是一種非凋亡形式的調(diào)節(jié)性細(xì)胞死亡，由磷脂氫過氧化物以鐵依賴的方式過量產(chǎn)生而誘導(dǎo)[3]。鐵死亡與心臟缺血/再灌注損傷和多柔比星誘導(dǎo)的心肌病相關(guān)的病理過程有關(guān)[4]。然而，目前尚不清楚鐵死亡是否也在慢性疾病相關(guān)的心臟功能障礙（如DCM）中起作用。越來越多的證據(jù)表明，糖尿病患者體內(nèi)的鐵過載不僅會(huì)增加胰島素抵抗和糖尿病進(jìn)展的風(fēng)險(xiǎn)，還會(huì)通過芬頓反應(yīng)加重心血管并發(fā)癥[5]。因此，本研究旨在明確鐵死亡在擴(kuò)張型心肌病發(fā)病機(jī)制中的作用。熱休克因子1（heat shock factor 1，HSF1）是一種應(yīng)激反應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子，在各種應(yīng)激因素下調(diào)節(jié)熱休克蛋白的表達(dá)[6]。由HSF1介導(dǎo)的熱休克是生物體長期進(jìn)化過程中形成的一種分子應(yīng)激防御反應(yīng)[6]。在心血管方面，HSF1在壓力過載心力衰竭模型中可以通過積極調(diào)節(jié)環(huán)磷酸腺苷途徑來緩解心力衰竭[7]。此外，最近研究證實(shí)，HSF1可能通過維持細(xì)胞的鐵平衡和谷胱甘肽過氧化酶4（glutathione Peroxidase 4，GPX4）的表達(dá)，成為對(duì)抗鐵死亡的關(guān)鍵防御者[6]。但目前仍缺乏關(guān)于HSF1在DCM保護(hù)方面的更多細(xì)節(jié)。因此，本研究擬通過體內(nèi)外DCM模型探討HSF1在鐵死亡和心臟損傷中的保護(hù)作用和潛在機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 H9c2細(xì)胞培養(yǎng)

從中國科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會(huì)細(xì)胞庫獲得H9c2細(xì)胞系。將細(xì)胞在含有10%胎牛血清和1%青霉素-鏈霉素的達(dá)爾伯克（氏）必需基本培養(yǎng)基（dulbecco's minimum essen?tial medium，DMEM）（美國Hyclone公司）中培養(yǎng)。細(xì)胞隨機(jī)分成4組：低葡萄糖組（Con；加入5.5 mmol/L葡萄糖培養(yǎng)48h）、高葡萄糖組（high glucose，HG；加入33 mmol/L葡萄糖培養(yǎng)48 h）、HG+HSF1（重組人HSF1蛋白，美國Abcam公司）、HG+HSF1+化合物C（compound C，CC，美國MedChemExpress公司）。HG+HSF1組細(xì)胞用33 mmol/L葡萄糖培養(yǎng)前，用50ng/mL HSF1處理1 h。HG+HSF1+CC組細(xì)胞用33 mmol/L葡萄糖培養(yǎng)前，用50 ng/mLHSF1和5 μmol/L CC處理1 h。

1.2 羅丹明膠質(zhì)蛋白染色

通過羅丹明標(biāo)記鬼筆環(huán)肽染色（上海宜勝生物科技有限公司）評(píng)估相對(duì)細(xì)胞表面積。首先，H9c2心肌細(xì)胞在37 ℃下用羅丹明標(biāo)記鬼筆環(huán)肽（5 μg/mL）染色1 h；然后，在黑暗中用4'，6-二氨基-2-苯基吲哚（4，6-diamino-2-phenylindole，DAPI）反應(yīng)5 min。用BX53熒光顯微鏡（日本Olympus公司）觀察染色情況。

1.3 細(xì)胞線粒體超氧化物產(chǎn)生（mitochondrion reactive oxygenspecies，mitoROS）檢測

將H9c2 細(xì)胞與100 nmol/L Mito-Tracker Green（美國Thermo Fisher Scientific公司）在37 ℃的低血清培養(yǎng)基中孵化30 min。然后將細(xì)胞與磷酸鹽緩沖鹽水中的5 μmol/L Mito?Sox Red（美國Thermo Fisher Scientific公司）在37 ℃下在黑暗中孵育30 min。此外，用溫?zé)岬牧姿猁}緩沖液（phosphatebuffered salin，PBS）緩沖液輕輕清洗細(xì)胞3 次，并立即用ImageXpress? Micro Confocal High-Content Imaging System（美國Molecular Devices公司）進(jìn)行檢測，以確定ROS水平。

1.4 細(xì)胞脂質(zhì)ROS檢測

將H9c2細(xì)胞與C11-BODIPY（美國Thermo Fisher Scien?tific公司）在37 ℃下孵育30 min。孵育后，用Hoechst33342（上海碧云天生物科技有限公司）染色，并用ImageXpress?Micro Confocal High-Content Imaging System（美國MolecularDevices公司）進(jìn)行分析。

1.5 Western blot分析

使用放射免疫沉淀法裂解緩沖液裂解小鼠心臟組織和心肌細(xì)胞。使用二辛可寧酸蛋白定量試劑盒測定細(xì)胞裂解液的蛋白濃度。使用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)，然后轉(zhuǎn)移到聚偏二氟乙烯（polyvinylidenefluoride，PVDF）膜上（美國Millipore公司）。在室溫下用5%的脫脂牛奶在Tris-緩沖鹽水中阻斷非特異性結(jié)合點(diǎn)2 h，在4 ℃下將膜與一級(jí)抗體孵育過夜。此外，將膜與相應(yīng)的二抗一起孵育，通過ChemiDoc XRS（美國Bio-Rad公司）對(duì)斑點(diǎn)進(jìn)行可視化和定量。用Image J軟件分析斑點(diǎn)強(qiáng)度。

本研究中使用的主要抗體包括抗GPX4抗體（1∶1 000，美國abcam公司），抗心鈉肽（atrial natriuretic peptide，ANP）抗體（1∶1 000，美國Abcam 公司），抗4-羥基壬烯酸（4-hy?droxynonenal，4-HNE）抗體（1∶2 000，美國Abcam 公司），抗乙酰輔酶A 羧化酶（acetyl-CoA carboxylase，ACC）抗體（1∶1 000，美國Cell Signaling Technology 公司），抗磷酸化ACC抗體（1∶1 000，美國Cell Signaling Technology 公司），抗磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（adenosine monophosphate acti?vated protein kinase，AMPK）抗體（1∶1 000，美國Cell SignalingTechnology公司），抗磷酸化AMPK抗體（Thr172；1∶1 000，美國Cell Signaling Technology公司），抗長鏈?；o酶a合成酶4（long-chain acyl-CoA synthetase 4，ACSL4）抗體（1∶1 000，美國proteintech group 公司）和抗甘油醛-3-磷酸脫氫酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）抗體（1∶1 000，美國proteintech group公司）。

1.6 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

雄性C57/BL6小鼠（8周，20～22 g）購自北京維通達(dá)生物技術(shù)有限公司。所有小鼠均在標(biāo)準(zhǔn)化條件下飼養(yǎng)（12 h光/暗循環(huán)，溫度22～24 ℃，濕度35%～60%），可自由飲用食物和水。喂養(yǎng)1 周后，將小鼠隨機(jī)分為4 組：正常對(duì)照（normal"control，NC）組、NC+HSF1組、DM組和DM+HSF1組，每組12只。DM組和DM+HSF1組小鼠喂食高脂飲食3個(gè)月以誘導(dǎo)胰島素抵抗，然后連續(xù)2 d腹腔內(nèi)注射鏈脲佐菌素（streptozocin，STZ，溶于檸檬酸緩沖液中，50 mg/kg）誘導(dǎo)部分胰島素缺乏和高血糖癥，以空腹血糖≥11.1 mmol/L確認(rèn)DM建模成功[8]。NC 組、NC+HSF1 組喂食正常飼料。建模后，DM 組和DM+HSF1組繼續(xù)給予高脂飲食。NC+HSF1組和DM+HSF1組小鼠從建模后皮下注射HSF1（0.5 mg/kg），每周3次，連續(xù)治療6個(gè)月。當(dāng)HSF1治療完成后，進(jìn)行超聲心動(dòng)圖檢查，然后處死小鼠（DM發(fā)病后6個(gè)月）。

1.7 超聲心動(dòng)圖

各組隨機(jī)選取6只小鼠，麻醉后通過超聲心動(dòng)圖測量（Vevo TM 2100，加拿大VisualSonics公司）評(píng)估小鼠的心臟功能。在乳頭肌水平記錄m型追蹤，分析了射血分?jǐn)?shù)（ejec?tion fraction，EF）和分?jǐn)?shù)縮短（fraction shortening，F(xiàn)S）。脈沖多普勒超聲心動(dòng)圖和組織多普勒成像分別用于測量E/A比值和E'/A'比值。

1.8 組織學(xué)和免疫組織化學(xué)分析

心肌樣品用4%多聚甲醛固定24 h，然后包埋在石蠟中。將5 μm的心肌橫截面橫向切成4 mm的切片，用蘇木精和伊紅（hematoxylin-eosin，Hamp;E）染色。此外，心臟切片用Masson三色染色以檢測細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix，ECM）沉積。將組織切片與抗HSF1（1∶500；美國Cell Signaling Tech?nology公司）抗體在4℃孵育過夜，隨后進(jìn)行DAB染色（上海Beyotime公司）。使用ImageProPlus6.0分析數(shù)據(jù)。

1.9 ROS、谷胱甘肽（glutathione，GSH）、丙二醛（malondial?dehyde，MDA）和Fe2+水平測定

使用ROS、GSH和MDA檢測試劑盒（南京建成生物工程研究所）測定心臟組織中的ROS、GSH和MDA水平。使用鐵分析試劑盒（美國Abcam公司）測量心臟組織中的Fe2+水平。

1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

通過SPSS 25.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。使用單向方差分析和Tukey事后檢驗(yàn)進(jìn)行多組比較。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié) 果

2.1 HSF1上調(diào)對(duì)HG誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞肥大影響

首先，本研究測定了H9c2細(xì)胞中HSF1的水平，發(fā)現(xiàn)與HG處理0 h相比，HG處理12 h時(shí)細(xì)胞中HSF1蛋白表達(dá)明顯上調(diào)（相對(duì)水平：1.00±0.03 vs. 2.42±0.22，Plt;0.001），和24 h、48 h時(shí)明顯下調(diào)（相對(duì)水平：1.00±0.03 vs. 0.28±0.03、0.24±0.02，均Plt;0.001）（圖1A）。然后研究采用HSF1拯救HG誘導(dǎo)H9c2中HSF1水平的下調(diào)，結(jié)果顯示與HG組相比，HG+HSF1組HSF1水平顯著上調(diào)（相對(duì)水平：0.25±0.02 vs.1.63±0.07，Plt;0.001）。隨后，本研究通過測量肥大標(biāo)志物ANP的蛋白水平和用羅丹明磷灰素染色細(xì)胞，研究HSF1在心肌細(xì)胞肥大中的作用。與Con組相比，HG組ANP的蛋白水平和相對(duì)細(xì)胞表面積均明顯增加（均Plt;0.05）。HG+HSF1組ANP的蛋白水平和相對(duì)細(xì)胞表面積均較HG組明顯降低（Plt;0.05）（圖1B～D）。

2.2 HSF1上調(diào)對(duì)HG誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞鐵死亡影響

與Con組相比，HG組細(xì)胞脂質(zhì)ROS水平明顯增加（Plt;0.001）。HG+HSF1組細(xì)胞脂質(zhì)ROS水平明顯低于HG+Vector組（Plt;0.001）（圖2）。

2.3 HSF1通過激活A(yù)MPK對(duì)鐵死亡表現(xiàn)出保護(hù)作用

激活A(yù)MPK是治療HG誘導(dǎo)的心臟毒性的一種潛在應(yīng)對(duì)策略[5]。以前的一些研究廣泛地探討了AMPK在鐵死亡中的作用，并證實(shí)了HSF1對(duì)AMPK的激活作用[7]。與Con組相比，HG組細(xì)胞中pAMPK/AMPK、pACC/ACC、GPX4表達(dá)明顯降低（相對(duì)水平：1.00±0.02 vs. 0.65±0.06，1.00±0.02 vs.0.72±0.07，1.00±0.03 vs. 0.53±0.04，Plt;0.01），和ACSL4表達(dá)明顯增加（相對(duì)水平：1.00±0.02 vs. 1.23±0.08，Plt;0.01）。與HG 組相比，HG+HSF1 組細(xì)胞中pAMPK/AMPK、pACC/ACC、GPX4表達(dá)明顯增加（相對(duì)水平：0.65±0.06 vs. 0.98±0.07，0.72±0.07 vs. 0.90±0.06，0.53±0.04 vs. 0.89±0.07，Plt;0.01），和ACSL4表達(dá)明顯降低（相對(duì)水平：1.23±0.08 vs.1.03±0.08，Plt;0.01）。另一方面，化合物C（CC），一種AMPK的抑制劑，抑制了HSF1 對(duì)AMPK 信號(hào)的激活作用（圖3）。此外，CC 增加了HSF1干預(yù)后HG 處理的H9c2細(xì)胞的ANP蛋白水平（圖1B）、相對(duì)細(xì)胞表面積（Plt;0.01）（圖1C）和脂質(zhì)ROS水平（Plt;0.01）（圖2B）。

2.4 HSF1上調(diào)對(duì)HG誘導(dǎo)的鐵死亡中線粒體毒性影響

在HG處理的H9c2細(xì)胞中，線粒體Fe2+水平增加，線粒體ROS水平隨之增加（Plt;0.01）。HSF1上調(diào)部分抑制了HG誘導(dǎo)的線粒體Fe2+和線粒體ROS產(chǎn)生的過度積累（Plt;0.01）。然而，HSF1 上調(diào)對(duì)線粒體的保護(hù)作用被CC 逆轉(zhuǎn)（Plt;0.01）（圖4）。

2.5 HSF1通過預(yù)防心肌細(xì)胞鐵死亡保護(hù)心臟功能

與NC組相比，DM組誘導(dǎo)心臟組織肥厚性改變，心肌內(nèi)的細(xì)胞外基質(zhì)沉積明顯增加（均Plt;0.01），和心肌組織中HSF1表達(dá)明顯降低（Plt;0.01）。與DM組相比，DM+HSF1組心臟組織肥厚性和細(xì)胞外基質(zhì)沉積顯著減輕，和心肌組織中HSF1表達(dá)明顯增加（均Plt;0.01）（圖5A～F）。超聲心動(dòng)圖分析顯示，與NC 組相比，DM 組EF%、FS%、E/A、E'/A'明顯降低（均Plt;0.01），和LVEDd明顯增加（均Plt;0.01），DM+HSF1組明顯逆轉(zhuǎn)了這些變化（圖5G、表1）。鐵死亡指標(biāo)分析顯示，與NC組相比，DM組心臟組織中Fe2+、ROS、MDA水平和4-HNE蛋白水平明顯增加（均Plt;0.01），以及GSH 水平和GPX4、pAMPK/AMPK表達(dá)明顯降低（均Plt;0.01），DM+HSF1組顯著逆轉(zhuǎn)了這些變化（圖5H～K、表1）。綜上所述，HSF1 上調(diào)通過激活A(yù)MPK對(duì)鐵死亡介導(dǎo)的DCM具有明顯的保護(hù)作用。

3 討 論

DM是導(dǎo)致異常心血管疾病的主要環(huán)境原因。目前，DCM的發(fā)病率在DM患者中逐漸增加。最近研究證實(shí)，鐵死亡是DCM的1個(gè)主要特征。心肌細(xì)胞的不斷喪失引發(fā)了心肌肥大、心肌纖維化，以及收縮和舒張功能受損[9]。鐵死亡是一種以鐵超載為特征的細(xì)胞死亡形式，導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化物的致死水平積累[10]。高鐵飲食導(dǎo)致嚴(yán)重的心臟損傷和肥厚性心肌病[10]。此外，鐵超載增加了AngⅡ誘導(dǎo)的心臟纖維化并促進(jìn)新生內(nèi)膜的形成[11]。本研究表明，HSF1通過限制鐵積累、恢復(fù)GPX4依賴的抗氧化能力以及防止細(xì)胞水平或線粒體水平的脂質(zhì)過氧化來抑制體外高糖模擬DCM模型的鐵中毒。體內(nèi)研究也證實(shí)了HSF1上調(diào)通過激活A(yù)MPK對(duì)鐵死亡介導(dǎo)的DCM具有顯著的保護(hù)作用。

心肌細(xì)胞損失是DM誘導(dǎo)的心臟損傷和功能障礙的主要原因[12]。此外，預(yù)防心肌細(xì)胞損失是治療DCM 的有效方法。據(jù)報(bào)道，不同類型的程序性細(xì)胞死亡，如細(xì)胞凋亡、壞死和鐵死亡等均參與了DCM[13-14]。鐵死亡的特點(diǎn)是鐵依賴性的脂質(zhì)過氧化的過度積累。本研究表明，在DM小鼠的心臟組織中，鐵死亡陰性調(diào)節(jié)劑GPX4的水平降低，而陽性標(biāo)志物如4-HNE則增加。這些變化與脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物和鐵含量的增加有關(guān)。值得注意的是，所有這些變化在體外經(jīng)HG處理的H9c2心肌細(xì)胞中也有表現(xiàn)。研究發(fā)現(xiàn)，HG處理的心肌細(xì)胞表現(xiàn)出鐵中毒的特征，如游離鐵的增加和脂質(zhì)過氧化物的積累[15]。因此，本研究的結(jié)果表明，針對(duì)鐵死亡的抑制是預(yù)防DCM的一種有效的心臟保護(hù)策略。

HSF1是一種應(yīng)激誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄因子，通過轉(zhuǎn)錄激活各種熱休克蛋白，在熱休克反應(yīng)中起著關(guān)鍵作用。近年來，一些研究已經(jīng)注意到HSF1在調(diào)控應(yīng)激反應(yīng)的細(xì)胞氧化還原平衡中的重要性[6]。HSF1的缺乏導(dǎo)致心臟和腎臟中的谷胱甘肽（GSH）/谷胱甘肽二硫酸鹽（GSSG）比率下降約40%，并增加線粒體的氧化損傷，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞程序性死亡[16]。此外，HSF1可以通過轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)熱休克蛋白（如HSPA1A、HSPA4 和HSPB6）來應(yīng)對(duì)重金屬引起的應(yīng)激反應(yīng)[17]。HSF1已經(jīng)被發(fā)現(xiàn)參與了癌細(xì)胞的鐵死亡[18]。在本研究中，HG 暴露抑制H9c2 心肌細(xì)胞中HSF1表達(dá)，并導(dǎo)致細(xì)胞的肥大效應(yīng)、Fe2+水平積累和脂質(zhì)過氧化。通過上調(diào)H9c2心肌細(xì)胞中HSF1表達(dá)，逆轉(zhuǎn)了HG暴露誘導(dǎo)的這些變化。線粒體是連接新陳代謝和細(xì)胞死亡的重要調(diào)節(jié)器。最近研究報(bào)道，鐵中毒主要與線粒體形態(tài)和功能受損有關(guān)[19]。線粒體約占心肌細(xì)胞體積的45%，是關(guān)鍵的能量代謝場所。研究發(fā)現(xiàn)，線粒體觸發(fā)了HG誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞鐵中毒的細(xì)胞死亡[20]。此外，調(diào)節(jié)線粒體的ROS可能是HG誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞死亡和損傷的有效治療方案[21]。本研究發(fā)現(xiàn)，HSF1上調(diào)減輕了HG誘導(dǎo)的線粒體毒性作用，這可能有助于減輕H9c2心肌細(xì)胞中鐵死亡。

鐵中毒相關(guān)的代謝重塑最近受到越來越多的關(guān)注。研究發(fā)現(xiàn)，AMPK的激活賦予了抵抗鐵死亡的能力[5]。Lee M等[22]研究報(bào)告稱，AMPK對(duì)鐵死亡的調(diào)節(jié)與AMPK 介導(dǎo)的乙酰CoA 羧化酶的磷酸化和多不飽和脂肪酸的生物合成相關(guān)聯(lián)。AMPK 的ACC 磷酸化和失活抑制了乙酰CoA 向丙二酰CoA的轉(zhuǎn)化，而丙二酰CoA是脂肪酸（包括長鏈PUFA）生物合成所必需的，導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化物的生成減少，最終抑制了鐵中毒[23]。AMPK還與線粒體的脂肪酸氧化和平衡有關(guān)。它的激活會(huì)引起線粒體的生物生成。最近研究證實(shí)，HSF1可以通過轉(zhuǎn)錄激活上調(diào)AMPK 的轉(zhuǎn)錄水平，而敲除HSF1可逆轉(zhuǎn)這一過程[6]。本研究在體內(nèi)外研究均證實(shí)了HSF1可能通過激活A(yù)MPK 表現(xiàn)出對(duì)鐵死亡誘導(dǎo)心臟損傷的保護(hù)作用。值得注意的是，CC 是AMPK 的抑制劑，它逆轉(zhuǎn)了HSF1對(duì)用HG處理的心肌細(xì)胞鐵死亡的保護(hù)作用，進(jìn)一步表明HSF1對(duì)HG誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞鐵死亡的保護(hù)作用可能依賴于AMPK的激活。

總之，本研究揭示了鐵死亡在DCM病理過程中的重要作用，并確立了HSF1的心臟保護(hù)作用，其抗鐵死亡作用可能與AMPK 依賴性的脂質(zhì)代謝和線粒體穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)有關(guān)。這些發(fā)現(xiàn)可以更好地理解DCM心臟損傷的病理生理學(xué)基礎(chǔ)，并為其預(yù)防或緩解提供新的線索。

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（責(zé)任編輯：李青穎）