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一例雛鵝痛風的診斷與防控

2024-12-31 00:00:00張紅田秋豐陳志峰鄒躍董佳強苗艷張蕾
家禽科學 2024年7期
關(guān)鍵詞:診斷防控

摘 要: 雛鵝痛風是由鵝星狀病毒感染引起的一種傳播范圍極廣的傳染病。自2017年國內(nèi)發(fā)現(xiàn)雛鵝痛風病例后,該病在我國多省份養(yǎng)鵝地區(qū)發(fā)生,且暫無特效藥使用,嚴重制約我國養(yǎng)鵝業(yè)健康快速發(fā)展。本文介紹了一例雛鵝痛風病例的鑒別診斷,并提出了防控措施,旨在為雛鵝痛風的綜合防控提供參考。

關(guān)鍵詞:雛鵝痛風;鵝星狀病毒;診斷;防控

中圖分類號:S858.33 文獻標識碼:C 文章編號:1673-1085(2024)07-0097-03

引起鵝痛風的原因有多種,包括腎臟功能障礙、飼料蛋白質(zhì)過高、嚴重飲水不足、中毒或疾病等因素。近年來,一種引起雛鵝痛風的傳染性疾病在我國江蘇、山東、河南、遼寧、黑龍江等養(yǎng)鵝地區(qū)發(fā)生,該病主要感染2周齡以內(nèi)的雛鵝,患病雛鵝主要以心臟、肝臟表面和關(guān)節(jié)處有大量尿酸鹽沉積為主要癥狀,隨后被研究證實致病原為鵝星狀病毒。

1 "病例情況

2020年5月,黑龍江省齊齊哈爾地區(qū)某養(yǎng)殖戶低溫送檢病死雛鵝6只。經(jīng)詢問。該鵝場養(yǎng)殖了1 000只雛鵝,發(fā)病群體為三花鵝,鵝群5~6日齡開始發(fā)病,12日齡時死亡雛鵝達到210只,給養(yǎng)殖戶造成較大的經(jīng)濟損失,隨后來我處就診。

2 "臨床癥狀

患病雛鵝精神沉郁,采食量下降,消瘦體弱、羽毛蓬亂,四肢無力、關(guān)節(jié)腫脹、單腿跛行,排白色水樣稀便等。

3 "剖檢病變

對病死雛鵝剖檢,打開腹腔可見皮下及腹膜上有點狀尿酸鹽沉積,心臟表面及肝臟表面有大量白色尿酸鹽沉積。膽囊腫大,內(nèi)有灰白色尿酸鹽顆粒沉積。腎臟明顯腫大、斑駁,輸尿管內(nèi)可見大量白色尿酸鹽沉積(圖1)。剖開腕關(guān)節(jié)和趾關(guān)節(jié),可見大量白色尿酸鹽沉積。

4 "流行情況

鵝養(yǎng)殖業(yè)是我國傳統(tǒng)產(chǎn)業(yè),隨著該行業(yè)的不斷發(fā)展,鵝疫病漸漸有舊病新發(fā)的趨向。2017年以來,我國多省份地區(qū)雛鵝群發(fā)生一種以內(nèi)臟表面和關(guān)節(jié)尿酸鹽沉積為典型病癥的傳染病,病原確診為鵝星狀病毒[1]。該病一年四季均可發(fā)生,高發(fā)季節(jié)在每年冬季到次年夏季前這一期間。該病主要感染4周齡以內(nèi)的雛鵝,其中2周齡以內(nèi)的雛鵝最易感,且死亡率可高達50%[2]?;疾※Z和帶毒鵝是本病的主要傳染源,星狀病毒主要通過水、飼料和糞便等被病毒污染的物質(zhì)水平傳播,在鵝胚中檢測到鵝星狀病毒,證明該病也可以垂直傳播[3]。

5 "實驗室診斷

根據(jù)臨床癥狀和剖檢病變可以做出初步診斷,確診需進行實驗室診斷。目前在流行病學調(diào)查和臨床病例確診中,分子生物學檢測方法作為檢測病毒的常規(guī)方法被廣泛應用。實時熒光定量PCR方法被應用于鵝星狀病毒的檢測,該方法重復性高、靈敏度強、特異性強,為鵝星狀病毒的早期快速診斷以及定量提供了新的技術(shù)手段[4]。有研究顯示,環(huán)介導等溫擴增技術(shù)被應用于鵝星狀病毒檢測,能夠快速準確地檢測出病原,為檢疫部門和養(yǎng)殖基地等提供了一種快速、便捷、有效的檢測手段[5]。隨著鵝產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展,鵝疫病出現(xiàn)了混合感染的現(xiàn)象,越來越多的多重檢測方法被建立,用來檢測鵝星狀病毒和可能混合感染的其他病毒[6]。多重檢測方法使流行病學的調(diào)查更簡便、快捷、省時。

本實驗室采用的聚合酶鏈式反應(PCR)方法是目前實驗室診斷鵝星狀病毒常用的技術(shù)手段之一。無菌采集病死雛鵝肝臟、脾臟和腎臟病料,分別接種于綿羊血瓊脂培養(yǎng)基和營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基進行細菌培養(yǎng),37 ℃培養(yǎng)24~48 h,結(jié)果顯示本次檢測無細菌感染。同時進行鵝胚病毒接種:將上述病料放入已滅菌研缽中,一邊加入生理鹽水一邊研磨,將研磨后病料懸液反復凍融、離心和過濾除菌;將獲得的病毒懸液經(jīng)尿囊膜接種于鵝胚,0.2 mL/枚,置溫箱37 ℃培養(yǎng)孵育,觀察鵝胚生長發(fā)育情況,棄去24 h內(nèi)死亡鵝胚,收集168 h內(nèi)死亡鵝胚尿囊液。根據(jù)病毒DNA/RNA提取試劑盒說明書對尿囊液進行病毒基因組提取,根據(jù)反轉(zhuǎn)錄試劑盒說明書將提取的基因組反轉(zhuǎn)錄為cDNA,以其作為模板進行PCR擴增。應用本實驗室設計的引物進行PCR擴增,引物序列:上游引物(F)5'-TTTCACGGGATGCCGATTAC-3';下游引物(R)5'-ACTCATGTCCGCCCTTCTCA-3'[6]。PCR反應體系(總體積50 μL):2×預混酶25 μL,上游引物1 μL,下游引物1 μL,模板1 μL,ddH2O 22 μL。PCR反應程序:94 ℃預變性5 min;94 ℃變性30 s,57 ℃退火30 s,72 ℃延伸1 min,共32個循環(huán)。PCR擴增產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳分析,結(jié)果顯示能夠擴增出885 bp的目的條帶,對目的條帶進行膠回收純化,送往試劑公司進行測序,經(jīng)過序列比對最終確診為鵝星狀病毒感染。目的基因的PCR擴增結(jié)果見圖2。

6 "防控措施

雛鵝感染星狀病毒后致死率高,即使雛鵝未死亡,生長也會受到抑制,嚴重影響鵝產(chǎn)業(yè)的健康快速發(fā)展。不同省份之間的流行毒株存在差異,疫苗適用性不強,應建立快速有效的檢測方法,早發(fā)現(xiàn)、早防疫。目前,針對鵝星狀病毒的研究重點應放在研制高效疫苗及特效治療藥物,這對鵝星狀病毒的防控極其重要。

6.1 "加強飼養(yǎng)管理

鵝星狀病毒主要是通過口糞途徑進行傳播擴散,所以一定要保證飼養(yǎng)環(huán)境的衛(wèi)生。鵝舍、舍外運動場等做到定期清掃和消毒,鵝群生活密度不易過高,保障空氣流通;及時清理排泄物,病死雛鵝和被污染的物品及時消毒、深埋或焚燒,以防止疾病的進一步擴散傳播;對飲食、飲水等器具定期進行消毒;在飼料營養(yǎng)及添加劑方面,根據(jù)鵝群不同生長階段對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求進行適宜的添加和適度飼喂,注意各種維生素的適宜供給量,確保鵝群對營養(yǎng)物質(zhì)正常代謝,避免尿酸在雛鵝體內(nèi)過分蓄積。應盡量避免可能引起鵝應激的各種因素,如換舍、轉(zhuǎn)群、低溫、高溫、捕捉、光照變化等,這些因素都會影響鵝的生長發(fā)育,進而降低鵝免疫力。當有誘使鵝產(chǎn)生應激的因素發(fā)生時,可在飼料中添加維生素C、維生素E和黃芪多糖粉劑等具有增強免疫力和提高抗應激能力的物質(zhì),增強機體抵抗力,盡量減少疾病的發(fā)生。

6.2 "治療方法

目前治療鵝星狀病毒尚無特效藥物,急需研制出一種快速、有效的獸用生物制品防治該病。有研究[7]顯示,建立鵝星狀病毒卵黃抗體生產(chǎn)工藝,研制出一種安全、有效的鵝星狀病毒卵黃抗體,對雛鵝攻毒保護效果可達80 %,具有潛在的臨床應用價值。此外,臨床上也可以嘗試對患病雛鵝進行中藥治療,治療原則為抗病毒、清熱、通淋等。由茯苓、板藍根、白術(shù)、黃連、黃芩、黨參、梔子、車前草、川木通、滑石等組成的中藥方劑,在連續(xù)用藥幾天后,可以降低雛鵝的死亡率[8]。目前有關(guān)中草藥治療鵝星狀病毒病的研究非常少,需要加強這一方向的研究,為該病的治療提供一定的應用參考。

參考文獻:

[1] "鄧昕竹,余群,朱盈名,等.鵝源星狀病毒TaqMan探針和SYBR GreenⅠ染料法熒光定量PCR檢測方法的建立及其應用比較[J].中國獸醫(yī)學報,2022,42(10):1970-1976.

[2] "蘇烜,劉久源,時九明,等.鵝星狀病毒的研究進展[J].中國獸醫(yī)學報,2023,43(12):2612-2617+2624.

[3] "張清水.新發(fā)腎致病型鵝星狀病毒的分離鑒定及弱毒株選育[D].北京:中國農(nóng)業(yè)大學,2019.

[4] "謝軍,張碩,王安平,等.鵝星狀病毒Ⅰ型熒光定量PCR檢測方法的建立及應用[J].中國動物傳染病學報,2023,31(03):106-112.

[5] "張玉霞,楊金興,孟凱,等.鵝星狀病毒LAMP快速檢測方法的建立與應用[J].中國預防獸醫(yī)學報,2019,41(11):1137-1140.

[6] "張紅,田秋豐,王志強,等.鵝星狀病毒鵝細小病毒和鵝坦布蘇病毒三重PCR檢測方法的建立與應用[J].中國獸醫(yī)科學,2023,53(02):163-169.

[7] "宋揚.鵝星狀病毒的分離鑒定及其卵黃抗體的研制與質(zhì)量評價[D].哈爾濱:東北農(nóng)業(yè)大學,2022.

[8] "陳琳.一例新型鵝星狀病毒引起雛鵝痛風的中藥治療[J].畜牧獸醫(yī)科技信息,2020(06):169-170.

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