摘" 要： 冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟?。ü谛牟。┦且环N常見(jiàn)的心血管疾病，嚴(yán)重影響全球人類健康。由于其復(fù)雜的發(fā)病機(jī)制和治療難度，冠心病的研究一直備受關(guān)注。近年來(lái)，動(dòng)物模型在心血管疾病研究中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，豬的心血管系統(tǒng)在解剖結(jié)構(gòu)和病理生理機(jī)制等方面均與人類較為相似，因此模式豬已被廣泛認(rèn)可為動(dòng)脈粥樣硬化研究中的優(yōu)良模型。本文旨在通過(guò)參照人類冠心病的診斷指標(biāo)與高危因素，探討建立可用于模擬人類臨床冠心病的醫(yī)用模式豬的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)和構(gòu)建方法，為冠心病發(fā)病機(jī)制與臨床應(yīng)用前研究提供良好的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。本綜述將為冠心病新型診療藥物和檢測(cè)方法的開(kāi)發(fā)提供參考。

關(guān)鍵詞： 冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟??；模式豬；心血管疾病

中圖分類號(hào)： S858.28

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：0366-6964（2024）12-5349-19

doi： 10.11843/j.issn.0366-6964.2024.12.003

收稿日期：2024-06-06

基金項(xiàng)目：湖南省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目 （2023DK2004）

作者簡(jiǎn)介：駱慶龍（2000-），男，湖南長(zhǎng)沙人，碩士，主要從事豬遺傳育種研究，E-mail：2324746999@qq.com

*通信作者：劉" 梅，主要從事豬遺傳育種與繁殖研究，E-mail：Mei.Liu@hunau.edu.cn

Research Progress of Coronary Heart Disease Model Pigs

LUO" Qinglong1， YUAN" Zhaoshun2， ZHANG" Zhiyuan2， LIAO" Xiaobo2， YIN" Yulong3， LIU" Mei1*

（1.College of Animal Science and Technology， Hunan Agricultural University， Changsha 410128，" China;

2.Second Xiangya Hospital， Central South University， Changsha 410011，" China;

3.Institute of Subtropical Agriculture， Chinese Academy of Sciences， Changsha 410125，" China）

Abstract： Coronary heart disease （CHD） is a common cardiovascular disease that seriously affects human health worldwide. Considering its complex pathogenesis and the difficulty of treatment， the study of CHD has been paid much attention. In recent years， animal models have played a key role in the study of cardiovascular diseases. The cardiovascular system of pigs is similar to that of humans in terms of anatomical structure and pathophysiological mechanism， so the model pig has been widely recognized as an excellent model in the study of atherosclerosis. By referring to the diagnostic indicators and risk factors of human CHD， this manuscript aims to explore the evaluation criteria and construction methods of pigs with CHD model similar to human， so as to provide a good experimental model for pathogenesis and clinical application studies related to CHD. This review will lay the foundation for the development of new diagnosis and treatment methods for CHD.

Key words： coronary heart disease; model pig; cardiovascular disease

*Corresponding author： LIU Mei， E-mail：Mei.Liu@hunau.edu.cn

隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展和人們生活方式的改變，代謝綜合征的患病率急劇升高，其中包括肥胖、糖尿病和脂質(zhì)代謝紊亂等。這些因素導(dǎo)致心血管疾病，尤其是冠心?。╟oronary heart disease，CHD）的發(fā)病率明顯增加。根據(jù)《中國(guó)心血管健康與疾病報(bào)告2022》的數(shù)據(jù)顯示［1］，心血管病已成為我國(guó)居民最主要的致死性疾病，我國(guó)目前約有1 139萬(wàn)CHD患者，且CHD死亡率逐年上升，尤其是農(nóng)村地區(qū)上升更為明顯，已超過(guò)城市水平。這不僅給醫(yī)療系統(tǒng)帶來(lái)了嚴(yán)重負(fù)擔(dān)，也給經(jīng)濟(jì)發(fā)展造成了巨大壓力。

因此，提高CHD的預(yù)防和診療水平、改善國(guó)民身體健康和生活質(zhì)量成為當(dāng)前醫(yī)學(xué)發(fā)展的重要環(huán)節(jié)。構(gòu)建合適的CHD疾病模型，用于研究CHD發(fā)生發(fā)展機(jī)制、開(kāi)發(fā)新型治療藥物及器械材料，成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。然而，直接在人體上進(jìn)行CHD治療和研究存在風(fēng)險(xiǎn)，而且成本極高。長(zhǎng)期以來(lái)，建立與臨床相關(guān)的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀⒓夹g(shù)和方法，以便更好地為臨床服務(wù)，一直是心血管疾病基礎(chǔ)研究的重點(diǎn)和難點(diǎn)。在藥物研究中，建立與疾病相符的動(dòng)物模型也成為關(guān)鍵科學(xué)問(wèn)題之一。在動(dòng)物模型的選擇上，小鼠［2］、大鼠［3］、兔子［4］、犬［5］、非人類靈長(zhǎng)動(dòng)物［6］和小型豬［7］等都被視為重要的研究對(duì)象，為了更好地推進(jìn)對(duì)人類CHD的研究和治療，找到最適合的模型動(dòng)物至關(guān)重要。

1" 研究趨勢(shì)

小鼠作為目前研究較多的動(dòng)物模型，具有體積小、周期短、易于處理、遺傳穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)，并且可迅速形成動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）病變［8］。然而，研究發(fā)現(xiàn)小鼠與人類存在明顯的種屬差異性，以他汀類藥物為例，臨床上已明確其預(yù)防和治療CHD的作用，但在小鼠相關(guān)研究中卻并未表現(xiàn)出顯著的治療效果［9］；而且小鼠和人類的心臟之間存在顯著的生理差異，小鼠體型過(guò)小也使得介入支架等大型手術(shù)無(wú)法進(jìn)行，只能評(píng)估心電圖和超聲心動(dòng)圖等非侵入性指標(biāo)，并不能很好反映人類病理生理特征。這些都表明小鼠并非CHD研究的完美模型。

相較之下，豬在解剖學(xué)、生理學(xué)、免疫力和體型等方面更接近人類。與其他大型動(dòng)物相比，豬易于處理、經(jīng)濟(jì)、高產(chǎn)，并且其基因組可以在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行編輯。此外，豬與人的心臟相似度極高，其冠狀動(dòng)脈系統(tǒng)的形態(tài)功能與人類的相似度高達(dá)90%，大動(dòng)脈的解剖結(jié)構(gòu)也與人類極其相似［10］。苗蘭等［11］研究發(fā)現(xiàn)，在CHD豬模型與人的血清蛋白組比較中，疾病相關(guān)的蛋白在種類上存在相似性。另外，國(guó)際科研小組成功將人類干細(xì)胞注入豬胚胎中，首次培育出人豬嵌合體胚胎，為解決移植器官來(lái)源不足的難題提供了新的思路和途徑［12］。

因此，豬作為動(dòng)物模型在CHD研究中成為全球趨勢(shì)之一。其與人類的親緣性高、相似的生理結(jié)構(gòu)和體況體征，以及在AS引起的CHD研究中的重要性，使其具有重要的研究意義。這些優(yōu)勢(shì)加速了豬作為CHD動(dòng)物模型的發(fā)展。

2" 冠心病模式豬的建立

2.1" 模式豬的選擇

目前，國(guó)內(nèi)外都擁有豐富的豬種資源可用于構(gòu)建CHD模型。國(guó)內(nèi)品系涵蓋五指山小型豬、貴州小香豬、巴馬小型豬、滇南小耳豬、藏豬、中國(guó)實(shí)驗(yàn)用小型豬、合作小型豬和臺(tái)灣小型豬等［13］。例如：五指山小型豬具有體型小、對(duì)高脂飼喂敏感的優(yōu)勢(shì)；巴馬小型豬是目前用于心血管研究最常用的小型豬模型；中國(guó)實(shí)驗(yàn)用小型豬對(duì)應(yīng)激的耐受程度較好，手術(shù)死亡率低，這些優(yōu)勢(shì)使得其在心臟介入領(lǐng)域具有較好的應(yīng)用前景［14］。國(guó)外品系包括尤卡坦小型豬、Obbassaw豬、Rapacz豬、明尼蘇達(dá)-霍麥爾系、辛克萊品系、皮特曼-摩爾系、海福特系、尤卡坦系、奧薩博系、哥廷根系、科西嘉系、阿米尼系、克勞恩咪尼和系會(huì)津系等［13］。例如：尤卡坦小型豬除采用傳統(tǒng)的造模方法外，還可使用基因編輯的方法；Ossabaw 豬是肥胖相關(guān)代謝紊亂的既定模型，具備強(qiáng)大的脂肪儲(chǔ)備能力，較其他品系Ossabbaw豬容易通過(guò)高脂高糖飼喂誘導(dǎo)代謝綜合征，以及用于研究基于全食物的飲食模式對(duì)AS發(fā)展的機(jī)制途徑［15］；Rapacz豬具有家族性高脂血癥，可自發(fā)性出現(xiàn)AS［14］。所以選擇合適的小型豬品系對(duì)于研究和治療CHD至關(guān)重要。

2.2" 模式豬的構(gòu)建方法

2.2.1" 高脂飼喂

通過(guò)長(zhǎng)時(shí)間喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物含膽固醇的高脂飼料，誘導(dǎo)其出現(xiàn)AS、硬化斑塊的病變，造成血管壁狹窄，長(zhǎng)期可導(dǎo)致心臟血氧供應(yīng)不足。該方法制備的CHD模型與臨床病理生理過(guò)程較接近，可以較好地觀察CHD的病理變化和藥物的綜合療效［16］。

2018年，Matthan等［15］將 Ossabaw 豬飼喂高脂日糧 6 個(gè)月后通過(guò)組織病理學(xué)確定AS程度，CHD大多由冠狀A(yù)S引起，病變易發(fā)于心外膜下的前降支上、中1/3段和右冠狀動(dòng)脈中1/3段，其次為左主干、左旋支［16］；2019年，郁晨等［17］取雄性五指山小型豬、西藏小型豬各5只，高脂飼喂連續(xù)6個(gè)月，每月檢測(cè)血脂和血常規(guī)，目的在于觀察在高脂環(huán)境下五指山小型豬、西藏小型豬血脂和炎癥細(xì)胞的變化，分析CHD相關(guān)血脂和炎癥易感基因的表達(dá)；2022年，沈利葉等［18］將雄性五指山小型豬12只按體重分為兩組，即正常對(duì)照組和模型組，每組6只。正常組飼喂正常飼料，模型組飼喂高脂高糖飼料，連續(xù)飲食24周后，成功構(gòu)建的模型具有肥胖、糖脂代謝紊亂和明顯的AS病變等CHD相關(guān)特點(diǎn)。

2.2.2" 冠脈損傷

2018年，Lin等［19］在模式豬左前降支（left anterior descending coronary artery，LAD）周?chē)踩肓藘?nèi)徑為 2.5 mm 的環(huán)狀體收縮器。環(huán)狀體收縮器旨在通過(guò)誘導(dǎo)進(jìn)行冠狀動(dòng)脈狹窄來(lái)實(shí)現(xiàn)心肌缺血，其進(jìn)展與在人類中觀察到的進(jìn)展相似；2019年，宋海英等［20］通過(guò)開(kāi)胸，在游離前降支近段，第一對(duì)角支下1cm置入2.5 mm Ameroid縮窄環(huán)，從而建立CHD相關(guān)心肌缺血模式豬。2020年，王希龍［21］通過(guò)手術(shù)結(jié)扎冠狀動(dòng)脈法成功構(gòu)建蕨麻小型豬的心肌梗塞模型，其模型表征可與臨床指標(biāo)相吻合，便于手術(shù)且成模穩(wěn)定；同年，田毅等［22］通過(guò)采用自制的改進(jìn)型球囊作為栓子（球囊結(jié)合凝膠海綿）進(jìn)行冠狀動(dòng)脈的動(dòng)脈栓塞，經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈栓塞的方法，可靠的將栓子置于擬栓塞冠狀動(dòng)脈的部位，建立持久穩(wěn)定的急性心肌梗死小型豬模型，并采用單光子發(fā)射型計(jì)算機(jī)斷層顯像心肌灌注顯像評(píng)價(jià)所建模型的可靠性；2022年，Ramirez-Carracedo等［23］使用 JL3 6F 導(dǎo)管和血管成形球囊閉塞LAD 45 min產(chǎn)生的冠狀動(dòng)脈缺血/再灌注豬模型。

2.2.3" 高脂飼喂結(jié)合冠脈損傷

2009年，李欣志等［24］進(jìn)行了一項(xiàng)研究，他們將12只小型豬隨機(jī)分成對(duì)照組和模型組，每組6只，在該研究中，豬被飼喂普通或高脂飼料2周后，通過(guò)介入技術(shù)球囊損傷LAD，進(jìn)而繼續(xù)將模型組豬喂養(yǎng)高脂飼料8周，以建立小型豬CHD模型；2011年，王勇等［25］則利用中國(guó)微型豬進(jìn)行了類似研究，他們將豬分成模型組和假手術(shù)組，模型組有18頭，假手術(shù)組有8頭。通過(guò)在豬LAD放置Ameroid窄環(huán)誘導(dǎo)慢性心肌缺血，成功建立了CHD豬模型；2013年，李磊等［26］也進(jìn)行了小型豬CHD模型的研究，他們將豬分成正常對(duì)照組和模型對(duì)照組，分別用普通飼料和高脂飼料喂養(yǎng)14周，在喂養(yǎng)2周后，采用介入技術(shù)球囊損傷LAD，最終成功制備了小型豬CHD模型；2020年，潘嘉祥等［27］采用高脂喂飼聯(lián)合機(jī)械損傷術(shù)的方法，在短時(shí)間內(nèi)成功建立了巴馬小型豬冠狀A(yù)S模型。2022年，Wang等［28］采用高脂/高蔗糖/高膽固醇飲食聯(lián)合鏈脲佐菌素和冠狀動(dòng)脈球囊損傷誘導(dǎo)糖尿病相關(guān)性冠心病（diabetes mellitus-related coronary heart disease ，DM-CHD）迷你豬模型。2023年，李瑛等［29］在高脂飼料喂養(yǎng)的基礎(chǔ)上， 用介入法將冠狀動(dòng)脈血管內(nèi)皮損傷，建立痰瘀互結(jié)證CHD小型豬模型。這些研究均為構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)的CHD豬模型提供了可靠的試驗(yàn)基礎(chǔ)。

2.2.4" 基因編輯

近年來(lái)，隨著罕見(jiàn)變異關(guān)聯(lián)分析研究（rare variant association studies，RVAS）被廣泛應(yīng)用于尋找與CHD關(guān)聯(lián)的罕見(jiàn)變異及致病基因，已確認(rèn)至少有11個(gè)基因的罕見(jiàn)或低頻變異能夠改變CHD的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。這些基因包括與膽固醇代謝相關(guān)的LDLR、PCSK9、NPC1L1基因，與TG代謝相關(guān)的APOA5、APOC3、LPL、ANGPTL4、ANGPTL3、LPA基因，與非高密度脂蛋白膽固醇相關(guān)的ASGR1以及血壓相關(guān)的SVEP1基因。部分功能失活性突變?nèi)鏛DLR、APOA5、LPL、SVEP1會(huì)增加CHD風(fēng)險(xiǎn)，而另外7個(gè)基因的功能失活性突變則可能降低CHD風(fēng)險(xiǎn)，這也意味著這些基因的功能增強(qiáng)性突變可能增加CHD的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)［30］。

早在2013年，Al-Mashhadi等［31］成功培育出人PCSK9轉(zhuǎn)基因小型豬，并在給予高脂飼料4周后發(fā)現(xiàn)其血脂升高，持續(xù)喂食43～48周后明顯觀察到AS病變；2014年，Davis 等［32］培育出LDLR基因敲除克隆豬，普通喂養(yǎng)7個(gè)月后就能觀察到AS病變；2015年，Ozawa等［33］構(gòu)建了ApoA轉(zhuǎn)基因小型豬，發(fā)現(xiàn)通過(guò)飲食調(diào)控可以誘導(dǎo)AS病變；2017年，Huang 等［34］利用CRISPR/Cas9方法應(yīng)用于巴馬小型豬，同時(shí)靶向ApoE和LDLR基因，這些轉(zhuǎn)基因豬表現(xiàn)出與AS相關(guān)的脂質(zhì)代謝異常；2018年，方斌［35］構(gòu)建的ApoE敲除克隆豬在高脂飲食3個(gè)月后出現(xiàn)嚴(yán)重的高脂血癥，6個(gè)月后觀察到明顯的AS模型，與市面上的AS豬模型相比，這種模型的發(fā)病速度更快，是目前AS動(dòng)物模型中較為理想的一種。

在冠心病模式豬的構(gòu)建中，選擇合適的方法至關(guān)重要，因?yàn)椴煌姆椒ㄔ谀M疾病的機(jī)制和特征方面具有不同的優(yōu)缺點(diǎn)。例如高脂飼喂方法簡(jiǎn)單易行，成本較低，但疾病進(jìn)展較慢，難以模擬冠心病的復(fù)雜性。冠狀動(dòng)脈損傷則能快速模擬冠心病的主要病理特征，但手術(shù)侵入性大，操作技術(shù)要求高。高脂飼喂結(jié)合冠脈損傷綜合了飲食和機(jī)械損傷的效果，更全面地模擬冠心病的多因素病理過(guò)程，但實(shí)驗(yàn)復(fù)雜且成本較高?；蚓庉嬆軌騽?chuàng)建具有特定遺傳缺陷的模式豬，模擬遺傳性冠心病的機(jī)制，精準(zhǔn)度高，但技術(shù)要求和成本較高，對(duì)動(dòng)物倫理和實(shí)驗(yàn)條件要求也更嚴(yán)格。選擇合適的構(gòu)建方法應(yīng)根據(jù)研究目標(biāo)和資源條件，以實(shí)現(xiàn)對(duì)冠心病更準(zhǔn)確和全面的研究。

2.3" 臨床指標(biāo)檢測(cè)技術(shù)與標(biāo)準(zhǔn)

2.3.1" 生理指標(biāo)

由于高脂飲食易導(dǎo)致脂質(zhì)堆積，體重變化成為最顯著的指標(biāo)。在2009年，李欣志等［24］將0、2、6和10周時(shí)測(cè)量的小型豬體重指數(shù)（BMI）作為檢測(cè)指標(biāo)之一；2017年，李佳［36］在24、32、40和48周時(shí)測(cè)量各組小型豬的耳溫、肛溫、收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）、心率和呼吸，并計(jì)算平均動(dòng)脈壓（MAP）和心肌耗氧量來(lái)評(píng)估生命體征，在24周時(shí)發(fā)現(xiàn)經(jīng)高脂飼喂結(jié)合球囊損傷及過(guò)勞跑步干預(yù)的小型豬收縮壓、舒張壓、平均動(dòng)脈壓呈升高趨勢(shì)，提示心臟和動(dòng)脈的負(fù)荷增加；2018年，藺瑞等［37］在實(shí)驗(yàn)第4周時(shí)，除假手術(shù)組外的其余兩組小型豬采用Ameriod縮窄環(huán)植入法建立CHD心肌缺血血瘀證模型，通過(guò)觀察術(shù)前和術(shù)后各組小型豬的外在特征，如被毛、精神狀態(tài)、飲水、采食、糞便和尿液，發(fā)現(xiàn)宏觀體征存在差異；2022年，李增和張明雪［38］則通過(guò)對(duì)CHD痰瘀互結(jié)證進(jìn)行四診客觀化研究，旨在提高心血管疾病的診療水平。

2.3.2" 生化指標(biāo)

在徐一蘭等［39］的研究中，對(duì)CHD的生化指標(biāo)進(jìn)行了檢測(cè)，共包括7類28項(xiàng)指標(biāo)，下文將對(duì)這7大類生化指標(biāo)進(jìn)行闡述和補(bǔ)充。

2.3.2.1" 內(nèi)皮損傷指標(biāo)：

CHD患者血清中血管內(nèi)皮損傷標(biāo)志物水平為敏感指標(biāo)，可溶性細(xì)胞間黏附分子-1（s ICAM-1）和可溶性血管細(xì)胞黏附分子-1（s VCAM-1）可作為冠脈狹窄范圍增加的標(biāo)志物［40］。子宮內(nèi)膜損傷是AS的起始因素，會(huì)引起損傷標(biāo)志物內(nèi)皮素-1（endothelin-1，ET-1）和血管性血友病因子（von willebrand factor ，vWF）升高。而vWF又可激活血小板釋放凝血物質(zhì)，參與血小板聚集、血栓形成、AS斑塊形成，從而導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈狹窄、供血不足、心功能下降［41］。

內(nèi)皮細(xì)胞損傷還與腎素-血管緊張素系統(tǒng)（renin-angiotensin system，RAS）之間存在著密切的關(guān)系。RAS系統(tǒng)是一種調(diào)節(jié)血壓和體液平衡的重要系統(tǒng)，它在腎臟、血管和其他組織中起著關(guān)鍵作用［42］。當(dāng)內(nèi)皮細(xì)胞受到損傷時(shí)，例如由于炎癥、氧化應(yīng)激、高血壓等原因會(huì)導(dǎo)致內(nèi)皮功能受損，失去正常的調(diào)節(jié)血管張力和血管通透性的功能。這種內(nèi)皮細(xì)胞損傷可以引發(fā)一系列病理生理變化，其中之一就是激活RAS系統(tǒng)。激活的RAS系統(tǒng)會(huì)導(dǎo)致腎素的釋放，腎素進(jìn)而催化血漿中的血管緊張素原轉(zhuǎn)化為血管緊張素Ⅰ（angiotensin I， Ang I）。Ang I再由血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（angiotensin-converting enzyme，ACE）轉(zhuǎn)化為血管緊張素Ⅱ（angiotensin Ⅱ， Ang Ⅱ），Ang Ⅱ是一種強(qiáng)效的血管收縮劑，可以導(dǎo)致血管收縮、血壓升高，促進(jìn)水鈉潴留等。此外，Ang Ⅱ還能促進(jìn)炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激和內(nèi)皮細(xì)胞損傷的進(jìn)一步發(fā)展，形成了一種惡性循環(huán)［43］。

因此，兩者共同參與了多種心血管疾病的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程。通過(guò)干預(yù)RAS系統(tǒng)的活性，如使用ACE抑制劑或血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑等藥物，可以減輕內(nèi)皮細(xì)胞損傷引起的心血管病理生理變化，對(duì)CHD的治療具有重要意義［44］。

2.3.2.2" 脂質(zhì)代謝指標(biāo)：

血脂異常是導(dǎo)致心臟血液灌注不足的主要原因之一，也是CHD的主要發(fā)病因素之一［2，45］。總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）的增高以及高密度脂蛋白（HDL）的降低都被認(rèn)為是危險(xiǎn)因素，在臨床實(shí)踐中特別關(guān)注TC和LDL的增高［46，47］。Yang等［41］采集全血，并以3 000 r·min-1的速度離心15 min，分離血清用于檢測(cè)TC、TG、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）的水平，并計(jì)算動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)（AI）。AI的計(jì)算公式為：AI=（TC-HDL-C）/HDL-C。

2.3.2.3" 黏附分子指標(biāo)：

E選擇素（e-selectin）是一種細(xì)胞表面糖蛋白，是炎性反應(yīng)中最早出現(xiàn)的黏附分子之一，在免疫、炎癥和AS的形成過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。它可以在白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞之間、白細(xì)胞與血小板之間以及白細(xì)胞與白細(xì)胞之間的識(shí)別和黏附中發(fā)揮作用。作為炎癥反應(yīng)的介導(dǎo)因子，E-selectin能夠黏附和聚集多種白細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞亞群，因此被視為探測(cè)CHD發(fā)病機(jī)制的危險(xiǎn)性指標(biāo)［48-50］。

2.3.2.4" 金屬蛋白酶：

在斑塊發(fā)展和AS發(fā)病機(jī)制中，基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）發(fā)揮著關(guān)鍵作用，尤其是在疾病的晚期階段，其活性的增加會(huì)增加斑塊破裂的風(fēng)險(xiǎn)。MMPs催化細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的降解，參與血管平滑肌細(xì)胞的遷移，從而導(dǎo)致斑塊的不穩(wěn)定性。此外，在急性冠脈綜合征（acute coronary syndrome，ACS）中，外周血中MMP-2和MMP-9的升高已被證實(shí)可作為評(píng)估斑塊易感性的無(wú)創(chuàng)檢查［51］。同時(shí)，MMP-9被認(rèn)為是穩(wěn)定型CHD患者AS斑塊不穩(wěn)定性的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子，其水平與冠狀A(yù)S斑塊壞死核心的大小呈正相關(guān)［52］。

2.3.2.5" 同型半胱氨酸：

同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）作為一種不參與蛋白質(zhì)合成的氨基酸前體，主要由蛋氨酸和半胱氨酸代謝生成［47］。研究表明［53］，當(dāng)Hcy水平異常升高時(shí)，可嚴(yán)重?fù)p傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，并顯著促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞的增殖，隨后改變脂質(zhì)代謝，增加血小板的黏附性，進(jìn)而促進(jìn)AS的發(fā)生與發(fā)展。另有研究者［54，55］指出，Hcy水平與CHD的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)，約有超過(guò)1/3的CHD患者存在不同程度的高Hcy血癥，且與疾病嚴(yán)重程度呈明顯正相關(guān)。

2.3.2.6" 炎癥介質(zhì)指標(biāo)：

CHD的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中伴隨著炎性反應(yīng)，其中炎癥因子白細(xì)胞介素-1β（interleukin-1β， IL-1β）、白細(xì)胞介素-6（interleukin-6， IL-6）、高敏C-反應(yīng)蛋白（high-sensitivity C-reactive protein ，hs-CRP）、腫瘤壞死因子（tumor Necrosis Factor-α，TNF-α）和核轉(zhuǎn)錄因子（nuclear factor-kappa B，NF-κB）等與CHD的發(fā)生及冠脈狹窄程度呈正相關(guān)［56-58］。IL-1β在AS斑塊病變局部產(chǎn)生并直接影響內(nèi)皮細(xì)胞的舒張功能、增加氧化應(yīng)激、激活血小板中促凝介質(zhì)的產(chǎn)生并介導(dǎo)其釋放，以上特性都會(huì)導(dǎo)致AS血栓形成［57］。研究顯示［59，60］，炎癥因子IL-6和hs-CRP可促進(jìn) 2型糖尿?。╰ype 2 diabetes mellitus，T2DM）和血管AS的發(fā)生發(fā)展。TNF-α是一種重要的促炎細(xì)胞因子，參與調(diào)節(jié)免疫和炎癥反應(yīng)，促進(jìn)機(jī)體內(nèi)免疫細(xì)胞產(chǎn)生、釋放和調(diào)節(jié)各種炎癥因子和細(xì)胞因子［61］。張翥等［62］發(fā)現(xiàn)，血清中干擾素誘導(dǎo)蛋白-10（interferon inducible protein-10， IP-10）、脂質(zhì)過(guò)氧化氫（lipid hydroperoxide， LHP）和TNF-α水平與患者冠脈病變呈正相關(guān)。崔翔［63］發(fā)現(xiàn)，NF-κB作為引發(fā)炎癥的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，可能對(duì)sVCAM-1、TNF-α和HDL-C的表達(dá)產(chǎn)生調(diào)節(jié)作用，共同影響CHD的發(fā)展。炎癥因子在CHD的發(fā)生、發(fā)展中具有重要的作用，各炎癥因子之間的相互作用和影響對(duì)CHD相關(guān)致病機(jī)制發(fā)揮著協(xié)同作用。

2.3.2.7" 凝血功能指標(biāo)：

凝血酶原時(shí)間（PT）、凝血酶時(shí)間（TT）和活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）與心臟細(xì)胞受損程度密切相關(guān)，CHD患者凝血時(shí)間縮短程度反映了該病征的危險(xiǎn)程度［64］。研究表明［65］，CHD患者的PT、APTT和TT等凝血功能指標(biāo)在病變過(guò)程中發(fā)揮重要作用，因此這些指標(biāo)的聯(lián)合應(yīng)用對(duì)于CHD的診斷具有較高的臨床價(jià)值。

2.3.2.8" 其他指標(biāo)：

在CHD實(shí)際的生化檢測(cè)中，除開(kāi)上述展開(kāi)的七大類以外，還有很多重要的指標(biāo)，例如：高水平的脂蛋白（a）（LP（a））是CHD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素之一；心肌肌鈣蛋白T （cTnT）是心肌損傷的生物標(biāo)志物，可用于診斷ACS和心肌梗死，并評(píng)估心肌損傷的程度；肌酸激酶（CK）和肌酸激酶同工酶-MB （CK-MB）這些酶也是心肌損傷的生物標(biāo)志物，用于診斷心肌梗死；乳酸脫氫酶（LDH）是心肌梗死后釋放的酶之一，還可作為心肌損傷的指標(biāo)；載脂蛋白A（apoA）和載脂蛋白B（apoB）是血液中載脂蛋白的組成部分，它們與CHD的發(fā)展和AS的形成密切相關(guān)；超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）可用于評(píng)估氧化應(yīng)激和氧化損傷；以及還有一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、總膽紅素（TBIL）、直接膽紅素（DBil）、間接膽紅素（IBiL）、尿酸（UA）、總膽汁酸（TBA）、肌酐（CREA）、血清淀粉樣蛋白A（SAA）和氧化三甲氨（TMAO）等，它們都在CHD的發(fā)生和演變中起到了重要作用［28，37，47，66-69］。表1列出了CHD相關(guān)生化指標(biāo)以及對(duì)應(yīng)的檢測(cè)方法。

2.3.3" 分子生物學(xué)

2.3.3.1" 基因組學(xué)：

基因組學(xué)由結(jié)構(gòu)基因組學(xué)和功能基因組學(xué)兩部分組成，前者以全基因組測(cè)序?yàn)橹饕繕?biāo)，后者以基因功能的鑒定為主要目的［70］。Li等［71］通過(guò)全基因組關(guān)聯(lián)和功能研究確定 SCML4 和 THSD7A 是冠狀動(dòng)脈疾?。╟oronary artery disease， CAD）的新型易感基因；許偉明［72］采用臨床樣本表達(dá)譜測(cè)序，同時(shí)進(jìn)行分組比較分析和相關(guān)分析確定了CHD痰瘀互結(jié)證與MMP-8、MMP-9/TIMP-3基因表達(dá)密切相關(guān)；rd等［73］使用原代人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞中的表觀遺傳定量性狀位點(diǎn)分析和平滑肌細(xì)胞中的自轉(zhuǎn)錄活性調(diào)節(jié)區(qū)測(cè)序 （STARR-Seq）大規(guī)模平行報(bào)告基因測(cè)定，對(duì)全基因組關(guān)聯(lián)研究中鑒定的CAD變體進(jìn)行了全基因組實(shí)驗(yàn)精細(xì)定位。該分析確定了30 多個(gè)CAD位點(diǎn)的潛在致病單核苷酸多態(tài)性和相關(guān)靶基因。

2.3.3.2" 蛋白組學(xué)：

分子生物學(xué)最有前途的領(lǐng)域之一是蛋白質(zhì)組學(xué)，其任務(wù)包括研究基因表達(dá)蛋白產(chǎn)物，以及它們的翻譯后修飾和比較分析。蛋白質(zhì)組學(xué)研究是對(duì)身體所有蛋白質(zhì)的系統(tǒng)進(jìn)行研究，研究每種蛋白質(zhì)在各種生理和病理過(guò)程中的功能，確定蛋白質(zhì)作為有效診斷標(biāo)志物的潛在用途［74］。研究指出，通過(guò)運(yùn)用蛋白質(zhì)組學(xué)方法和信息分析技術(shù)，在痰瘀互結(jié)證CHD生物過(guò)程中發(fā)現(xiàn)LDHB、ADH5、NRAS和KRAS是關(guān)鍵蛋白［29］。這些蛋白主要參與糖酵解/糖異生、丙酮酸代謝、脂質(zhì)與AS、Ras蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等生物過(guò)程，對(duì)后續(xù)臨床治療和藥物開(kāi)發(fā)具有重要的指導(dǎo)意義。

2.3.3.3" 轉(zhuǎn)錄組學(xué)：

轉(zhuǎn)錄組是指在給定細(xì)胞或生物體中轉(zhuǎn)錄的RNA分子的完整集合。RNA-Seq現(xiàn)在是測(cè)量基因表達(dá)的常規(guī)檢測(cè)方法，而且該技術(shù)在過(guò)去10年中不斷的在成熟和發(fā)展［75］。Gholipour等［76］利用RNA測(cè)序分析基因表達(dá)尋找一些潛在的基于轉(zhuǎn)錄組學(xué)的CHD生物標(biāo)志物。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，差異表達(dá)的基因ACSBG1和DEFA4可能作為CHD疾病的潛在生物標(biāo)志物。這兩個(gè)基因在CHD發(fā)病機(jī)制、對(duì)壓力的反應(yīng)以及免疫系統(tǒng)過(guò)程中扮演著重要角色。

2.3.3.4" 代謝組學(xué)：

與基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)相比，代謝組學(xué)更接近生物表型，能夠更直觀地反映生物或細(xì)胞的生理或病理狀態(tài)［77］。張國(guó)瑗等［78］利用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)CHD痰瘀互結(jié)證小型豬血漿中除磷脂外的代謝物進(jìn)行了代謝組學(xué)分析。他們發(fā)現(xiàn)，內(nèi)源性非磷脂類成分，如膽酸類、脂肪酸類、氨基酸類、?；鈮A類及其生物代謝途徑，都參與了CHD痰瘀互結(jié)證的發(fā)病過(guò)程。

2.3.4" 血液流變學(xué)

在過(guò)去的10年里，血液流變學(xué)的研究取得了顯著進(jìn)展，對(duì)各種心血管疾病的診斷和治療產(chǎn)生了潛在影響［79］。血液流變學(xué)檢查是一種檢查血液流動(dòng)物理狀態(tài)的方法，旨在了解機(jī)體血液流動(dòng)性、粘滯性、變形性、凝固性以及血液與血管、心臟之間的相互作用。在這些檢查中，全血高切黏度、全血低切黏度、血漿黏度、紅細(xì)胞沉降率以及血漿纖維蛋白原（fibrinogen，F(xiàn)ib）等指標(biāo)扮演著重要角色［80］。研究表明［81］，CHD患者相較于對(duì)照組，這些血液流變學(xué)指標(biāo)水平普遍較高。隨著冠狀動(dòng)脈狹窄程度的加重，這些指標(biāo)也呈現(xiàn)出明顯的異常。還發(fā)現(xiàn)患者的根西尼（Gensini）評(píng)分與Fib指標(biāo)存在顯著相關(guān)性，這進(jìn)一步表明了Fib與冠狀A(yù)S狹窄程度之間的密切關(guān)系，因此可作為監(jiān)測(cè)CHD病情的重要指標(biāo)。

2.3.5" 核磁共振（magnetic resonance imaging，MRI）

心臟MRI能對(duì)靜態(tài)和負(fù)荷下的心肌灌注進(jìn)行定量評(píng)價(jià)，它能反映心肌缺血和微循環(huán)異常，其中最重要的指標(biāo)是心肌灌注儲(chǔ)備指數(shù)，并且該指標(biāo)還可反映冠狀動(dòng)脈微循環(huán)障礙嚴(yán)重程度［82］。梁潔和李葆青［83］將冠狀動(dòng)脈造影（coronaryartery angiography，CAG）檢查結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)參照，對(duì)比分析了心血管MRI用于CHD診療的價(jià)值，結(jié)果顯示，心血管MRI對(duì)CHD患者LAD病變、左回旋支（LCX）病變、右冠脈（RCA）病變?cè)\斷的靈敏度、特異度均較高，與CAG有很好的一致性。表明心血管MRI在CHD早期診療中應(yīng)用價(jià)值高，且無(wú)電離輻射和具有較高的安全性。

2.3.6" 其他診斷方式

心電圖是臨床上診斷心血管疾病的常用檢查手段，同時(shí)由于心電圖檢查無(wú)創(chuàng)、操作簡(jiǎn)單、費(fèi)用低，具有良好的可重復(fù)性，在心血管疾病的藥物治療評(píng)價(jià)中也較為常用［84，85］。常規(guī)心電圖檢查對(duì)心電信號(hào)的記錄持續(xù)時(shí)間短，對(duì)于部分冠狀動(dòng)脈狹窄血流量低于正常水平或者心肌缺血不明顯的患者容易漏診。而動(dòng)態(tài)心電圖則可以避免這種缺陷，在檢測(cè)過(guò)程中形成多幀圖像，獲得患者的動(dòng)態(tài)心電信號(hào)分析，能夠提供更全面、準(zhǔn)確的信息，提高診斷準(zhǔn)確性［86］ 。Wang等［28］采用多通道心電圖記錄系統(tǒng)，對(duì)各組小型豬進(jìn)行心電圖測(cè)試，分析其ST段振幅及T波振幅變化，發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組相比，模型組ST段和T波高度明顯升高。Ramirez-Carracedo等［23］在構(gòu)建冠狀動(dòng)脈缺血再灌注豬模型中，通過(guò)ST段抬高確診完全性心肌缺血。

CAG已是臨床公認(rèn)的CHD診斷“金指標(biāo)”，也是診斷AS最直接、最常見(jiàn)和最重要的一種檢測(cè)方法。在CHD的診斷中，該方法能夠以二維或三維圖像形式顯示冠狀動(dòng)脈，幫助了解其狹窄范圍與程度［87，88］。田毅等［22］通過(guò)CAG （左冠竇造影）顯示造模手術(shù)前血流正常，冠狀動(dòng)脈LAD與LCX皆顯影，栓塞后（導(dǎo)絲進(jìn)入LAD開(kāi)口進(jìn)行造影，更好的顯示LAD）LAD下段血流被完全阻斷。同時(shí)，隨著近年來(lái)醫(yī)學(xué)水平快速的發(fā)展，CHD治療取得良好進(jìn)展，其中經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療（percutaneouscoronary interventions，PCI）是目前應(yīng)用最廣泛的方法，通過(guò)球囊擴(kuò)張或置入支架可有效重建血運(yùn)，但同時(shí)也存在術(shù)后支架內(nèi)再狹窄（in stent restenosis，ISR）現(xiàn)象，CAG檢查結(jié)果作為目前ISR診斷主要依據(jù)，但因其創(chuàng)傷性和價(jià)格昂貴等原因不適合用于術(shù)后隨訪。隨著多層螺旋CT設(shè)備和技術(shù)逐漸發(fā)展成熟，CT冠脈造影作為無(wú)創(chuàng)性影像學(xué)檢查技術(shù)逐漸引起廣泛關(guān)注，在CHD診斷和PCI治療中的應(yīng)用效果已獲得認(rèn)可［88］。

超聲心動(dòng)圖是使用超聲波對(duì)心臟結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行無(wú)創(chuàng)評(píng)估的標(biāo)準(zhǔn)方法，是心臟評(píng)估和監(jiān)測(cè)的常規(guī)手段。但是對(duì)豬而言，很難被安全約束和處理，而麻醉劑和鎮(zhèn)靜劑普遍影響心血管功能。Hogen 等［89］發(fā)現(xiàn)站立超聲心動(dòng)圖是一種安全可行的方法，并描述了教導(dǎo)豬耐受這種無(wú)痛和非侵入性手術(shù)的訓(xùn)練技術(shù)，可以在小型豬中進(jìn)行最常見(jiàn)的心臟監(jiān)測(cè)測(cè)試，用于心血管研究。許穎等［90］發(fā)現(xiàn)，頸動(dòng)脈超聲相關(guān)參數(shù)可有效評(píng)估冠脈粥樣硬化病變程度，提示可有效預(yù)測(cè)CHD風(fēng)險(xiǎn)，為后續(xù)早期介入治療制定相關(guān)防控措施并提供參考依據(jù)，值得臨床推廣應(yīng)用。

3" 冠心病模式豬在心血管疾病研究中的應(yīng)用

CHD模式豬在心血管疾病研究中扮演著至關(guān)重要的角色，因其具備類似人類CHD的病理生理特征，包括AS、心肌缺血、心肌梗死等病理變化。與其他動(dòng)物模型相比，CHD模式豬更接近人類的心血管系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能，因此在心血管疾病研究中具有更高的可比性和預(yù)測(cè)性［7］。因此，它被廣泛應(yīng)用于心血管疾病的模擬和研究。下面我們將針對(duì)不同類別的CHD模式豬以及所對(duì)應(yīng)的構(gòu)建方法，分別探討其在心血管疾病研究中的應(yīng)用領(lǐng)域（表2）。

心血管疾病包括心力衰竭、心絞痛和非致死性心肌梗死等臨床表現(xiàn)，主要由冠狀A(yù)S引起［102］。冠狀A(yù)S是一種由動(dòng)脈壁炎癥、脂質(zhì)積聚和免疫失調(diào)引起的持續(xù)性炎癥性疾病，也是內(nèi)皮功能障礙和斑塊形成的特征［103，104］。在心血管疾病的研究中，CHD模式豬的建立不僅僅適用于CHD的治療與研究，在AS模型方面也具有廣泛的適用性，還包括在高血壓、高血脂和糖尿病等多種心血管疾病模型的構(gòu)建中，CHD模式豬同樣發(fā)揮著重要作用。舉例來(lái)說(shuō)，高血壓可導(dǎo)致頸動(dòng)脈內(nèi)-中膜厚度增加，從而使動(dòng)脈彈性下降，進(jìn)而引起頸AS；高血脂可導(dǎo)致血漿脂蛋白異常，引起動(dòng)脈管壁病變；在Ⅱ型糖尿病發(fā)病過(guò)程中，糖脂代謝紊亂導(dǎo)致血管內(nèi)皮受損、局部血管收縮、平滑肌細(xì)胞增殖與遷移，以及促進(jìn)血栓形成等后果［105，106］。這些癥狀都與CHD的病理生理特征相同或者類似，因此，在心血管疾病的研究中，CHD模式豬是不可或缺的一部分。

4" 冠心病模式豬在藥物治療研究中的作用

4.1" 藥效治療及評(píng)價(jià)

根據(jù)世界各國(guó)食品和藥物管理局的規(guī)定，在新藥臨床試驗(yàn)之前，必須在至少一種非嚙齒類大動(dòng)物（通常為豬、犬、猴）上進(jìn)行安全性及毒性評(píng)估［13］。使用CHD模式豬可以評(píng)估不同藥物對(duì)心血管系統(tǒng)的影響，包括改善心肌供血情況、減輕心肌缺血程度以及與人類心肌梗死具有相似性等［94］。在藥物治療方面，2018年，苯培多酸（bempedoic acid，BemA）作為一種靶向肝臟ATP-檸檬酸裂解酶的新型藥物，經(jīng)長(zhǎng)期在LDLR缺乏癥和AS的豬模型中應(yīng)用后，能有效降低LDL-C并減輕AS的發(fā)展［93］。同年，張成哲等［56］發(fā)現(xiàn)益氣健脾方能改善巴馬小型豬CHD癥狀，減輕心肌組織炎性反應(yīng)和水腫的發(fā)生。引導(dǎo)導(dǎo)管延長(zhǎng)是PCI的重要組成部分，2020年，F(xiàn)ischell等［107］在模式豬中研究發(fā)現(xiàn)CrossLine作為下一代指南擴(kuò)展系統(tǒng)，旨在實(shí)現(xiàn)安全、深層的冠狀動(dòng)脈插管。中藥復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂方（Fufang Zhenzhu Tiaozhi Formula，F(xiàn)TZ）作為一種傳統(tǒng)中草藥處方，在臨床上用于治療多種疾病，近年來(lái)備受關(guān)注［108］。2022年，Wang 等［28］ 發(fā)現(xiàn)FTZ能夠緩解DM-CHD迷你豬心臟的冠狀動(dòng)脈狹窄，降低高脂血癥，減輕冠狀動(dòng)脈炎癥和細(xì)胞凋亡。2023年，Sabe等［109］發(fā)現(xiàn)模式豬在慢性心肌缺血的情況下，卡格列凈治療可以改善心肌功能和缺血區(qū)域的灌注，而不改變側(cè)支。以上這些研究表明，通過(guò)觀察藥物治療或評(píng)價(jià)后，發(fā)現(xiàn)模式豬的心臟功能、心肌形態(tài)等指標(biāo)的變化可以客觀評(píng)價(jià)藥物的療效，這將使我們?cè)鰪?qiáng)對(duì)CHD有效治療方法的認(rèn)識(shí)。

4.2" 機(jī)制研究

為進(jìn)一步探討藥物對(duì)CHD模式豬的作用機(jī)制，可通過(guò)分析藥物治療后動(dòng)物的基因表達(dá)、代謝物水平等變化，揭示藥物對(duì)CHD發(fā)病機(jī)制的影響，為新藥開(kāi)發(fā)提供理論依據(jù)。2018年，張成哲等［56］ 發(fā)現(xiàn)模式豬缺血區(qū)心肌組織明顯水腫，AQP1蛋白和mRNA表達(dá)水平均顯著性增加，提示AQP1可能參與調(diào)控心肌病變組織區(qū)域水腫的形成。同年，F(xiàn)an等［110］發(fā)現(xiàn)CHD相關(guān)的細(xì)胞因子變化以及經(jīng)導(dǎo)管關(guān)閉治療后的恢復(fù)與JNK和NF-κB信號(hào)通路有關(guān)，其中，TNF-α、IL-6、IL-8和IL-10是重要的炎癥或抗炎細(xì)胞因子，它們是有助于調(diào)節(jié)某些生物過(guò)程的多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，例如JNK和NF-κB信號(hào)通路。Yang等［111］在成年豬中建立了CHD模型組，發(fā)現(xiàn)薯蕷皂苷可以通過(guò)Sirt1/Nrf2和p38 MAPK通路調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激和炎癥來(lái)預(yù)防CHD。2019年，宋海英等［20］通過(guò)模式豬發(fā)現(xiàn)冠心丹參滴丸可以改善處于缺血狀態(tài)心臟的功能，提高射血分?jǐn)?shù)和室壁增厚率，其機(jī)制可能是冠心丹參滴丸可以增加心肌的高能磷酸化合物的含量，提高能荷，降低導(dǎo)致質(zhì)子漏的UCP2和其上游AMPK的基因水平和蛋白表達(dá)，減少AMPK的磷酸化，且結(jié)果符合其他以人類為研究對(duì)象的臨床研究結(jié)論。同年，Dong等［112］發(fā)現(xiàn)細(xì)胞凋亡和細(xì)胞自噬是程序性細(xì)胞死亡的兩種形式，參與了CHD的發(fā)病、發(fā)展和預(yù)后。它們分別被幾種不同的途徑激活，并可通過(guò)Beclin 1-Bcl-2/Bcl-xL復(fù)合物、mTOR、TRAIL、TNF-α、ER應(yīng)激和p53核途徑相互作用。過(guò)量的細(xì)胞凋亡可促進(jìn)心肌缺血、缺血/再灌注損傷、缺血后心臟重構(gòu)和冠狀A(yù)S，但血管平滑肌細(xì)胞誘導(dǎo)的AS進(jìn)展除外。2021年，Zhao等［113］發(fā)現(xiàn)細(xì)胞周期蛋白 D2 過(guò)表達(dá)增強(qiáng)了人誘導(dǎo)的多能干細(xì)胞來(lái)源的心肌細(xì)胞在心肌梗死豬模型中心肌修復(fù)的功效；2023年，Sukhanov 等［114］發(fā)現(xiàn)在家族性高膽固醇血癥豬出現(xiàn)的復(fù)雜冠狀A(yù)S與人類病變幾乎相同，而胰島素樣生長(zhǎng)因子1（IGF-1）會(huì)降低循環(huán)甘油三酯、全身氧化應(yīng)激標(biāo)志物和CXCL12趨化因子水平，再通過(guò)使用空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析顯示IGF-1抑制斑塊巨噬細(xì)胞中FOS/FOSB因子以及MMP9和CXCL14的基因表達(dá)。這些研究結(jié)果表明，CHD模式豬為進(jìn)一步了解CHD的分子機(jī)制提供了可能，為AS影響的心血管疾病提供了重要的機(jī)制見(jiàn)解以及為CHD的治療提供了潛在靶點(diǎn)。

5" 模式豬的局限性和未來(lái)展望

我國(guó)擁有豐富的小型豬資源，包括貴州小型豬、巴馬小型豬、西藏小型豬、五指山小型豬等多個(gè)品系。然而，目前利用小型豬構(gòu)建動(dòng)物模型的研究仍然存在不足之處，同時(shí)也面臨一些挑戰(zhàn)。這些挑戰(zhàn)包括構(gòu)建模型的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)缺乏統(tǒng)一、模型的穩(wěn)定性和可復(fù)制性有待提高、以及科學(xué)研究所需的條件較為苛刻等［101］。為了選擇適合的動(dòng)物模型，下文將對(duì)CHD常用的動(dòng)物模型進(jìn)行比較（表3）。

相較于嚙齒類模式動(dòng)物，模式豬作為大型動(dòng)物，在解剖學(xué)結(jié)構(gòu)、器官大小、生理學(xué)特征以及基因和蛋白等方面與人類高度相似，高繁殖能力也使得滿足模式動(dòng)物數(shù)量需求更為容易，在彌補(bǔ)人類疾病研究方面的缺陷上具有顯著優(yōu)勢(shì)［125-127］。例如：近交系小型豬具有遺傳背景清晰、個(gè)體差異小、試驗(yàn)結(jié)果可重復(fù)等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于遺傳學(xué)、免疫學(xué)、感染性疾病研究以及生物制品質(zhì)量檢驗(yàn)等領(lǐng)域，成為科學(xué)研究和應(yīng)用的重要基礎(chǔ)和支撐條件［128］ 。自2013年以來(lái)，CRISPR系統(tǒng)及其相關(guān)蛋白Cas9的第三代基因編輯技術(shù)的問(wèn)世，為哺乳動(dòng)物基因組編輯和器官移植帶來(lái)了新的希望［129］。人類面臨器官短缺問(wèn)題，而CRISPR/Cas9技術(shù)在豬身上的成功應(yīng)用為異種器官移植提供了最佳解決方案。豬的腎臟、心臟、胰島以及神經(jīng)細(xì)胞等與人類相應(yīng)的組織器官和細(xì)胞在結(jié)構(gòu)和功能上高度一致，因此被認(rèn)為是最佳的器官供體來(lái)源［130，131］。綜上所述，模式豬在科學(xué)研究和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域扮演著重要角色，未來(lái)隨著技術(shù)的進(jìn)步和合理應(yīng)用，其局限性也有望得到解決。因此，模式豬的開(kāi)發(fā)與利用具有廣闊的前景。

6" 總" 結(jié)

模式豬在心血管疾病研究中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，被認(rèn)可為CHD的優(yōu)良模型。根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求和條件選擇合適的構(gòu)建方法以及標(biāo)準(zhǔn)，盡可能建立類似于人類的CHD模式豬，通過(guò)對(duì)模式豬的研究，我們可以更深入地了解CHD的發(fā)生機(jī)制，為心血管疾病的預(yù)防、診斷和治療提供重要的科學(xué)依據(jù)。因此，CHD模式豬的研究對(duì)于推動(dòng)心血管醫(yī)學(xué)的發(fā)展具有重要意義，將為人類健康事業(yè)做出積極貢獻(xiàn)。

參考文獻(xiàn)（References）：

［1］" 《中國(guó)心血管健康與疾病報(bào)告》編寫(xiě)組.《中國(guó)心血管健康與疾病報(bào)告2022》概述［J］.中國(guó)心血管病研究，2023，21（7）：577-600.

The Writing Committee of the Report on Cardiovascular Health and Diseases in China 2022.Overview of report on cardiovascular health and diseases in China 2022［J］.Chinese Journal of Cardiovascular Research，2023，21（7）：577-600.（in Chinese）

［2］" MA X H，WANG Q，LIU C Y，et al.Regulation of phospholipid peroxidation signaling by a traditional Chinese medicine formula for coronary heart disease［J］.Phytomedicine，2023，114：154749.

［3］" ZHAO L L，QIU X J，WANG R Y，et al.1H NMR-based metabolomics study of the dynamic effect of Xue-Fu-Zhu-Yu capsules on coronary heart disease rats induced by high-fat diet，coronary artery ligation［J］.J Pharm Biomed Anal，2021，195： 113869.

［4］" SHIOMI M.The history of the WHHL Rabbit，an animal model of familial hypercholesterolemia （I）-contribution to the elucidation of the pathophysiology of human hypercholesterolemia and coronary heart disease［J］.J Atheroscler Thromb， 2020， 27（2）：105-118.

［5］" KHAN M S，SMEGO D，ISHIDOYA Y，et al.A canine model of chronic ischemic heart failure［J］.Am J Physiol Heart Circ Physiol，2023，324（6）：H751-H761.

［6］" MAES L，CLOET A S，F(xiàn)OURNEAU I，et al.A homogenized constrained mixture model of restenosis and vascular remodelling after balloon angioplasty［J］.J R Soc Interface，2021，18（178）：20210068.

［7］" STUREK M，ALLOOSH M，SELLKE F W.Swine disease models for optimal vascular engineering［J］.Annu Rev Biomed Eng， 2020， 22：25-49.

［8］" GROZA T，GOMEZ F L，MASHHADI H H，et al.The International Mouse Phenotyping Consortium：comprehensive knockout phenotyping underpinning the study of human disease［J］.Nucleic Acids Res，2023，51（D1）：D1038-D1045.

［9］" ENDO A.A historical perspective on the discovery of statins［J］.Proc Japan Acad Ser B，2010，86（5）：484-493.

［10］" 楊定法，趙慶宇婧，顏紅嬌，等.動(dòng)脈粥樣硬化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型及方法的研究進(jìn)展［J］.重慶醫(yī)學(xué)，2022，51（16）：2860-2865.

YANG D F，ZHAO Q Y J，YAN H J，et al.Study advances in experimental animal models and methods of atherosclerosis［J］.Chongqing Medicine，2022，51（16）：2860-2865.（in Chinese）

［11］" 苗" 蘭，孫明謙，林成仁，等.豬冠心病模型與臨床病人間血清蛋白組相似性比較初探［J］.中國(guó)藥事，2013，27（8）：822-827.

MIAO L，SUN M Q，LIN C R，et al.Primary comparative proteome exploration of similarities between pig heart disease model and clinical patients［J］.Chinese Pharmaceutical Affairs，2013，27（8）：822-827.（in Chinese）

［12］" 科學(xué)家首次培育出人豬嵌合體胚胎［J］.生物學(xué)教學(xué)，2017，42（7）：76.

Scientists create human-pig chimera embryos for the first time［J］.Biology Teaching，2017，42（7）：76.（in Chinese）

［13］" 連玉舉，張致遠(yuǎn)，廖曉波，等.醫(yī)用小型豬選育方法和應(yīng)用進(jìn)展［J］.畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2023，54（7）：2667-2682.

LIAN Y J，ZHANG Z Y，LIAO X B，et al.Breeding methods and application progress of medical miniature pigs［J］.Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica，2023，54（7）：2667-2682.（in Chinese）

［14］" 王達(dá)洋，王" 顯.小型豬動(dòng)脈粥樣硬化模型研究進(jìn)展［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào)，2020，28（3）：410-415.

WANG D Y，WANG X.Miniature swine models of atherosclerotic disease［J］.Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica，2020，28（3）：410-415.（in Chinese）

［15］" MATTHAN N R，SOLANO-AGUILAR G，MENG H C，et al.The Ossabaw pig is a suitable translational model to evaluate dietary patterns and coronary artery disease risk［J］.J Nutr，2018，148（4）：542-551.

［16］" 賈明賢，余" 婕，張" 媛，等.冠心病動(dòng)物模型建立研究［J］.世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2013，15（8）：1735-1740.

JIA M X，YU J，ZHANG Y，et al.Animal models of coronary heart disease［J］.World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica，2013，15（8）：1735-1740.（in Chinese）

［17］" 郁" 晨，劉志華，潘永明，等.高脂環(huán)境下五指山小型豬和西藏小型豬冠心病相關(guān)血脂和炎癥易感基因的表達(dá)［J］.中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志，2019，29（5）：1-10.

YU C，LIU Z H，PAN Y M，et al.Expression of coronary artery disease-related blood lipid and inflammatory susceptibility genes in Wuzhishan minipigs and Tibetan minipigs under a high-fat diet environment［J］.Chinese Journal of Comparative Medicine，2019，29（5）：1-10.（in Chinese）

［18］" 沈利葉，潘永明，徐雁云，等.高脂高糖飲食誘導(dǎo)五指山小型豬動(dòng)脈粥樣硬化模型腸道菌群的變化［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào)，2022，30（3）：299-308.

SHEN L Y，PAN Y M，XU Y Y，et al.Changes in intestinal flora in a Wuzhishan minipig atherosclerosis model induced by high-fat and high-sugar diet［J］.Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica，2022，30（3）：299-308.（in Chinese）

［19］" LIN R，DUAN J L，MU F，et al.Cardioprotective effects and underlying mechanism of Radix Salvia miltiorrhiza and Lignum Dalbergia odorifera in a pig chronic myocardial ischemia model［J］.Int J Mol Med，2018，42（5）：2628-2640.

［20］" 宋海英，王培利，劉劍剛，等.冠心丹參滴丸對(duì)缺血心肌AMPK-解偶聯(lián)蛋白2的調(diào)控作用［J］.中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2019，17（15）：2272-2276.

SONG H Y，WANG P L，LIU J G，et al.The modulation of AMPK-uncoupling protein 2 in ischemia myocardium by Guanxindanshen dropping pills［J］.Chinese Journal of Integrative Medicine on Cardio-Cerebrovascular Disease，2019，17（15）：2272-2276.（in Chinese）

［21］" 王希龍.小型豬心肌梗塞相關(guān)LncRNAs鑒定及其功能分析.廣東省，廣東省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物監(jiān)測(cè)所，2020-08-14.

WANG X L.Identification and functional analysis of LncRNAs associated with myocardial infarction in miniature pigs.Guangdong Provincial Laboratory Animal Monitoring Institute，2020-08-14.（in Chinese）

［22］" 田" 毅，李巨波，張寶杰，等.經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈球囊結(jié)合凝膠海綿聯(lián)合栓塞法建立急性心肌梗死小型豬模型方法探討［J］.心肺血管病雜志，2020，39（9）：1122-1126，1133.

TIAN Y，LI J B，ZHANG B J，et al.Establishment of acute myocardial infarction model by percutaneous coronary balloon combined with gelfoam embolization in miniature pigs［J］.Journal of Cardiovascular amp; Pulmonary Diseases，2020，39（9）： 1122-1126， 1133.（in Chinese）

［23］" RAMIREZ-CARRACEDO R，SANMARTIN M，TEN A，et al.Theranostic contribution of extracellular matrix metalloprotease inducer-paramagnetic nanoparticles against acute myocardial infarction in a pig model of coronary ischemia-reperfusion［J］.Circ： Cardiovasc Imaging，2022，15（6）：e013379.

［24］" 李欣志，劉建勛，任建勛，等.痰瘀互結(jié)證冠心病小型豬模型的建立［J］.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，2009，29（3）：228-232.

LI X Z，LIU J X，REN J X，et al.Establishment of coronary heart disease model of phlegm-stasis cementation syndrome type in mini-swines［J］.Chinese Journal of Integrated Traditional and Western Medicine，2009，29（3）：228-232.（in Chinese）

［25］" 王" 勇，李" 春，啜文靜，等.基于小型豬冠心病慢性心肌缺血模型氣虛血瘀證的證候評(píng)價(jià)［J］.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，2011，31（2）：233-237.

WANG Y，LI C，CHUO W J，et al.Establishment and evaluation on miniature pig model of ischemic coronary heart disease with qi-deficiency and blood-stasis syndrome［J］.Chinese Journal of Integrated Traditional and Western Medicine，2011， 31（2）：233-237.（in Chinese）

［26］" 李" 磊，林成仁，任建勛，等.小型豬痰瘀互結(jié)證冠心病證侯診斷研究［J］.世界中醫(yī)藥，2013，8（10）：1132-1136.

LI L，LIN C R，REN J X，et al.Research on symptoms for coronary heart disease model of mini swine with phlegm-stasis syndrome type［J］.World Chinese Medicine，2013，8（10）：1132-1136.（in Chinese）

［27］" 潘嘉祥，張" 哲，尹" 妮，等.高脂喂飼聯(lián)合機(jī)械損傷術(shù)建立巴馬小型豬冠狀動(dòng)脈粥樣硬化模型［J］.中華中醫(yī)藥雜志，2020，35（3）：1207-1212.

PAN J X，ZHANG Z，YIN N，et al.Establishment of coronary atherosclerosis model in Bama miniature pig by high-fat diet combined with mechanical injury［J］.China Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy，2020，35（3）： 1207-1212.（in Chinese）

［28］" WANG L X，ZHANG D X，ZHAN W J，et al.Chinese medicine Fufang Zhenzhu Tiaozhi capsule ameliorates coronary atherosclerosis in diabetes mellitus-related coronary heart disease minipigs［J］.Biomed Pharmacother，2022，156：113831.

［29］" 李" 瑛，李" 磊，孟紅旭，等.基于血小板蛋白質(zhì)組學(xué)探討小型豬痰瘀互結(jié)證冠心病的發(fā)病機(jī)制［J］.藥學(xué)學(xué)報(bào)，2023，58（7）：1904-1912.

LI Y，LI L，MENG H X，et al.The coronary heart disease of phlegm-stasis cementation syndrome in mini-swine based on platelet proteomics［J］.Acta Pharmaceutica Sinica，2023，58（7）：1904-1912.（in Chinese）

［30］" 滕雅群，杜" 天，田" 然，等.冠心病遺傳學(xué)的研究進(jìn)展與臨床轉(zhuǎn)化［J］.中華心血管病雜志，2021，49（7）：733-738.

TENG Y Q，DU T，TIAN R，et al.Genetics of coronary artery disease：research progress and prospect of clinical translation［J］.Chinese Journal of Cardiology，2021，49（7）：733-738.（in Chinese）

［31］" AL-MASHHADI R H，SRENSEN C B，KRAGH P M，et al.Familial hypercholesterolemia and atherosclerosis in cloned minipigs created by DNA transposition of a human PCSK9 gain-of-function mutant［J］.Sci Transl Med，2013，5（166）：166ra1.

［32］" DAVIS B T，WANG X J，ROHRET J A，et al.Targeted disruption of LDLR causes hypercholesterolemia and atherosclerosis in Yucatan miniature pigs［J］.PLoS One，2014，9（4）：e93457.

［33］" OZAWA M，HIMAKI T，OOKUTSU S，et al.Production of cloned miniature pigs expressing high levels of human apolipoprotein（a） in plasma［J］.PLoS One，2015，10（7）：e0132155.

［34］" HUANG L，HUA Z D，XIAO H W，et al.CRISPR/Cas9-mediated ApoE-/- and LDLR-/- double gene knockout in pigs elevates serum LDL-C and TC levels［J］.Oncotarget，2017，8（23）：37751-37760.

［35］" 方" 斌.ApoE基因敲除巴馬豬動(dòng)脈粥樣硬化模型的建立及表型分析［D］.南京：南京醫(yī)科大學(xué)，2018.

FANG B.Establishment and phenotyping of atherosclerotic model of ApoE knockout Bama pigs［D］.Nanjing：Nanjing Medical University，2018.（in Chinese）

［36］" 李" 佳.“從脾論治”對(duì)小型豬脾虛痰濁證冠心病模型療效影響的研究［D］.沈陽(yáng)：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)2017.

LI J.Effect of “spleen based treatment” on coronary heart disease model with spleen deficiency and phlegm turbidness in miniature pigs［D］.Shenyang：Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，2017.（in Chinese）

［37］" 藺" 瑞，段佳林，牟" 菲，等.丹參-降香油對(duì)冠心病心肌缺血血瘀證小型豬血脂及凝血系統(tǒng)的影響［J］.中國(guó)藥房，2018，29（9）：1233-1237.

LIN R，DUAN J L，MU F，et al.Effects of Salvia miltiorrhiza-volatile oil of Dalbergia odorifera on blood lipid and blood coagulation system in coronary heart disease myocardial ischemia miniature swine with blood stasis syndrome［J］.China Pharmacy，2018，29（9）：1233-1237.（in Chinese）

［38］" 李" 增，張明雪.精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)背景下冠心病痰瘀互結(jié)證辨治研究進(jìn)展［J］.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2022，24（9）：38-42.

LI Z，ZHANG M X.Research progress on syndrome differentiation and treatment of phlegm and blood stasis syndrome of coronary heart disease under the background of precision medicine［J］.Journal of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，2022，24（9）：38-42.（in Chinese）

［39］" 徐一蘭，高" 杉，許慧愚，等.冠心病穩(wěn)定性心絞痛痰瘀互結(jié)證多中心、小樣本、精細(xì)化臨床研究方案［J］.天津中醫(yī)藥，2018，35（2）：86-90.

XU Y L，GAO S，XU H Y，et al.Study protocol for a multi-center， small sample， fineness trial of phlegm and blood stasis syndrome for coronary heart disease［J］.Tianjin Journal of Traditional Chinese Medicine，2018，35（2）：86-90.（in Chinese）

［40］" 孫衛(wèi)寧，李海濤，李令娟，等.3種血管內(nèi)皮損傷指標(biāo)血清水平與冠心病病變范圍的關(guān)系探討［J］.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2013，22（35）：3948-3949.

SUN W N，LI H T，LI L J，et al.Relationship between serum levels of three vascular endothelial injury indicators and the lesion range of coronary heart disease［J］.Modern Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine，2013，22（35）：3948-3949.（in Chinese）

［41］" YANG Q Q，XU Y Y，SHEN L Y，et al.Guanxinning tablet attenuates coronary atherosclerosis via regulating the gut microbiota and their metabolites in Tibetan minipigs induced by a high-fat diet［J］.J Immunol Res，2022，2022（1）：7128230.

［42］" 崔亞娟，喬石媛，羅莉曼，等.腎素-血管緊張素系統(tǒng)在冠心病中的作用［J］.中國(guó)循證心血管醫(yī)學(xué)雜志，2022，14（12）：1530-1532，1536.

CUI Y J，QIAO S Y，LUO L M，et al.Role of renin-angiotensin system in coronary heart disease［J］.Chinese Journal of Evidence-Based Cardiovascular Medicine，2022，14（12）：1530-1532，1536.（in Chinese）

［43］" SANTOS R A S，SAMPAIO W O，ALZAMORA A C，et al.The ACE2/angiotensin-（1-7）/MAS axis of the renin-angiotensin system：focus on angiotensin-（1-7）［J］.Physiol Rev，2018，98（1）：505-553.

［44］" 徐義喜，史平煒.冠心病治療中血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑的應(yīng)用效果觀察［J］.智慧健康，2023，9（36）：36-39.

XU Y X，SHI P W.Application effect observation of angiotensin converting enzyme inhibitors in treatment of coronary heart disease［J］.Smart Healthcare，2023，9（36）：36-39.（in Chinese）

［45］" KURDI A，MARTINET W，DE MEYER G R Y.mTOR inhibition and cardiovascular diseases：dyslipidemia and atherosclerosis［J］.Transplantation，2018，102（2S）：S44-S46.

［46］" SONG L X，ZHANG D X，GUO C J，et al.The traditional Chinese medicine formula Fufang-Zhenzhu-Tiaozhi protects myocardia from injury in diabetic minipigs with coronary heart disease［J］.Biomed Pharmacother，2021，137：111343.

［47］" 李" 琳，宋婷婷.冠心病冠脈病變程度與Apo AI/Apo B、同型半胱氨酸、血脂指標(biāo)的相關(guān)性［J］.中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2019，16（17）：35-38.

LI L，SONG T T.Correlation between the degree of coronary artery disease and Apo AI/Apo B，homocysteine and blood lipids［J］.China Medical Herald，2019，16（17）：35-38.（in Chinese）

［48］" XU X M，LI W Z，LI Q W，et al.Manganese（III）-promoted highly stereoselective phosphorylation of acyclic tertiary enamides to synthesize E-selective β-phosphoryl enamides［J］.Org Biomol Chem，2022，20（28）：5566-5574.

［49］" CHEN W，CHEN R Y，HE L，et al.Development and optimization of Lysis gene E as a counter-selection marker with high stringency［J］.Biotechnol J，2022，17（8）：e2100423.

［50］" CHEN Y H，LIGHTMAN S，ESKANDARPOUR M，et al.Adhesion molecule targeted therapy for non-infectious uveitis［J］.Int J Mol Sci，2022，23（1）：503.

［51］ "OLEJARZ W，ACHETA D，KUBIAK-TOMASZEWSKA G.Matrix metalloproteinases as biomarkers of atherosclerotic plaque instability［J］.Int J Mol Sci，2020，21（11）：3946.

［52］" EZHOV M，SAFAROVA M，AFANASIEVA O，et al.Matrix metalloproteinase 9 as a predictor of coronary atherosclerotic plaque instability in stable coronary heart disease patients with elevated lipoprotein（a） levels［J］.Biomolecules，2019， 9（4）：129.

［53］" 魏慶民，程敏靜，程敏菊，等.急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者髓過(guò)氧化物酶和同型半胱氨酸水平與預(yù)后的關(guān)系研究［J］.中國(guó)醫(yī)學(xué)裝備，2018，15（1）：81-84.

WEI Q M，CHENG M J，CHENG M J，et al.A study on the relationships between each levels of MPO and HCY and the prognosis of patients with acute coronary syndrome［J］.China Medical Equipment，2018，15（1）：81-84.（in Chinese）

［54］" 蘇" 暢.冠心病患者血清同型半胱氨酸水平與冠脈病變程度的相關(guān)性分析［D］濟(jì)南：山東大學(xué)，2020.

SU C.Correlation analysis of serum homocysteine level and coronary lesions in patients with coronary heart disease［D］.Jinan：Shandong University，2020.（in Chinese）

［55］" 谷尚武，馮" 紅，陳" 瑤，等.冠心病合并糖尿病患者血清同型半胱氨酸、尿酸水平及與冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重程度的相關(guān)性分析［J］.中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥，2021，28（27）：61-64.

GU S W，F(xiàn)ENG H，CHEN Y，et al.Correlation analysis of serum homocysteine， uric acid levels and severity degree of coronary artery disease in patients with coronary heart disease and diabetes mellitus［J］.China Modern Medicine， 2021，28（27）：61-64.（in Chinese）

［56］" 張成哲，蔡甜甜，潘華峰，等.益氣健脾方加減治療巴馬小型豬脾虛型冠心病的作用機(jī)制［J］.中華中醫(yī)藥雜志，2018，33（6）：2300-2304.

ZHANG C Z，CAI T T，PAN H F，et al.Therapeutic mechanism of BA-MA mini-pig with spleen deficiency type coronary heart disease by modified Yiqi Jianpi Formula［J］.China Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy，2018， 33（6）：2300-2304.（in Chinese）

［57］" 朱凱瑞.Egr3基因、炎癥因子IL-1β、IL-6與冠心病的相關(guān)性研究［D］.烏魯木齊：新疆醫(yī)科大學(xué)，2022.

ZHU K R. Research on the correlation of Egr3 gene， inflammatory factors IL-1β， and IL-6 with coronary heart disease［D］.Urumqi：Xinjiang Medical University，2022.（in Chinese）

［58］" 楊" 帆，孫" 君，楊棟博.血清PC、hs-CRP及NT-proBNP在冠心病不同冠脈病變中的表達(dá)及臨床意義［J］.哈爾濱醫(yī)藥，2024，44（2）：18-21.

YANG F，SUN J，YANG D B.The expression and clinical significance of serum PC，hs-CRP and NT-proBNP in different coronary artery diseases of coronary heart disease［J］.Harbin Medical Journal，2024，44（2）：18-21.（in Chinese）

［59］" 段亞妮，張" 軍，解建毅.早發(fā)冠心病患者心臟標(biāo)志物四項(xiàng)、PCT、BNP水平的變化及臨床意義［J］.海南醫(yī)學(xué)，2021， 32（20）：2626-2630.

DUAN Y N，ZHANG J，XIE J Y.Changes and clinical significance of four cardiac markers， procalcitonin， and B-type brain natriuretic peptide levels in patients with premature coronary heart disease［J］.Hainan Medical Journal，2021，32（20）： 2626-2630.（in Chinese）

［60］" 孫春喜，任小鵬，李建成，等.冠心病患者h(yuǎn)s-CRP、DPP-4水平及其與冠狀動(dòng)脈病變程度的相關(guān)性［J］.海南醫(yī)學(xué)，2020，31（11）：1397-1400.

SUN C X，REN X P，LI J C，et al.Relationship between the levels of hs-CRP，DPP-4 and the degree of coronary artery disease［J］.Hainan Medical Journal，2020，31（11）：1397-1400.（in Chinese）

［61］" 張新紅，陳興無(wú)，孫海燕.老年急性加重期慢阻肺患者血清TNF-α、HDAC2及PTX3的動(dòng)態(tài)變化［J］.臨床肺科雜志，2022，27（9）：1367-1370.

ZHANG X H，CHEN X W，SUN H Y.Dynamic changes of serum TNF-α，HDAC2，and PTX3 in elderly patients with acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease［J］.Journal of Clinical Pulmonary Medicine，2022，27（9）： 1367-1370.（in Chinese）

［62］" 張" 翥，范修才，祁建成，等.右頸動(dòng)脈狹窄和不同冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)老年冠心病患者血清IP-10、LHP、TNF-α水平變化及臨床意義［J］.中國(guó)分子心臟病學(xué)雜志，2023，23（6）：5749-5753.

ZHANG Z，F(xiàn)AN X C，QI J C，et al. Changes and clinical significance of serum IP-10，LHP and TNF-α in elderly patients with CHD，right carotid stenosis and different number of diseased coronary vessels［J］.Molecular Cardiology of China，2023，23（6）：5749-5753.（in Chinese）

［63］" 崔" 翔.血清sVCAM-1、TNF-α、HDL-C水平變化與冠心病患者NF-κB的相關(guān)性研究［J］.標(biāo)記免疫分析與臨床，2018，25（11）：1611-1614.

CUI X.Study on the relationship between serum sVCAM-1，TNF-α，HDL-C and NF-κB in patients with coronary heart disease［J］.Labeled Immunoassays amp; Clinical Medicine，2018，25（11）：1611-1614.（in Chinese）

［64］" 劉曉霞，亢瑞娜.冠心病患者血漿纖維蛋白原、活化部分凝血酶時(shí)間、凝血酶原時(shí)間及血清Ca2+水平的臨床研究［J］.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2012，39（14）：3725-3727.

LIU X X，KANG R N.Investigation on the serum level of plasma fibrinogen，activated partial thromboplastin time，prothrombin time and calcium ion among patients with coronary artery disease［J］.Modern Preventive Medicine，2012， 39（14）：3725-3727.（in Chinese）

［65］" 耿倩雯，胡健強(qiáng)，張東偉，等.凝血酶原時(shí)間、活化部分凝血活酶時(shí)間、纖維蛋白原、凝血酶時(shí)間、心肌指標(biāo)檢測(cè)在冠心病診斷中的意義［J］.陜西醫(yī)學(xué)雜志，2022，51（10）：1309-1312.

GENG Q W，HU J Q，ZHANG D W，et al.Significance of detection of PT，APTT，TT，F(xiàn)ib and myocardial indexes in diagnosis of coronary heart disease［J］.Shaanxi Medical Journal，2022，51（10）：1309-1312.（in Chinese）

［66］" 閆" 玲.血清膽紅素檢測(cè)聯(lián)合尿酸檢驗(yàn)在冠心病臨床診斷中的應(yīng)用［J］.哈爾濱醫(yī)藥，2023，43（5）：63-64.

YAN L.Application of serum bilirubin detection combined with uric acid detection in clinical diagnosis of coronary heart disease［J］.Harbin Medical Journal，2023，43（5）：63-64.（in Chinese）

［67］ "王彩蕊，馬彩云，任鳳學(xué).尿微量白蛋白與尿肌酐比值與冠心病患者冠狀動(dòng)脈狹窄程度的關(guān)系分析［J］.實(shí)用心腦肺血管病雜志，2023，31（7）：62-65.

WANG C R，MA C Y，REN F X.Relationship between U-mAlb/Ucr and the degree of coronary artery stenosis in patients with coronary heart disease［J］.Practical Journal of Cardiac Cerebral Pneumal and Vascular Disease，2023，31（7）：62-65.（in Chinese）

［68］" 蔣銀芬，薛宏峰.冠心病患者血清心肌肌鈣蛋白Ⅰ、肌酸激酶、總膽固醇、同型半胱氨酸水平的變化與意義［J］.現(xiàn)代醫(yī)學(xué)與健康研究電子雜志，2021，5（19）：81-84.

JIANG Y F，XUE H F.Changes and significance of serum cardiac troponin I，creatine kinase，total cholesterol and homocysteine levels in patients with coronary heart disease［J］. Modern Medicine and Health Research Electronic Journal，2021，5（19）：81-84.（in Chinese）

［69］" YEH K H，HSU L A，JUANG J M J，et al.Circulating serum amyloid A levels but not SAA1 variants predict long-term outcomes of angiographically confirmed coronary artery disease［J］.Tzu Chi Med J，2022，34（4）：423-433.

［70］" 劉蘭椿，何慶勇，陳恒文，等.冠心病血瘀證基因組學(xué)研究進(jìn)展［J］.世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2020，22（11）：3810-3818.

LIU L C，HE Q Y，CHEN H W，et al.A systematic review of research progress in genomics of coronary heart diseasewith blood stasis syndrome［J］.Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica-World Science and Technology，2020，22（11）：3810-3818.（in Chinese）

［71］" LI Y，WANG D W，CHEN Y D，et al.Genome-wide association and functional studies identify SCML4 and THSD7A as novel susceptibility genes for coronary artery disease［J］.Arterioscler Thromb Vasc Biol，2018，38（4）：964-975.

［72］" 許偉明.冠心病痰瘀互結(jié)證分子網(wǎng)絡(luò)機(jī)制探究［D］.北京：中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院，2018.

XU W M.Network biological mechanisms for phlegm-stasis cementation syndrome with ischemic heart disease［D］.Beijing： China Academy of Chinese Medical Sciences，2018.（in Chinese）

［73］" RD T，UNAP K，STOLZE L K，et al.Single-cell epigenomics and functional fine-mapping of atherosclerosis GWAS loci［J］.Circ Res，2021，129（2）：240-258.

［74］" STAKHNEVA E M，STRIUKOVA E V，RAGINO Y I.Proteomic studies of blood and vascular wall in atherosclerosis［J］.Int J Mol Sci，2021，22（24）：13267.

［75］" PAVLOVICH P V，CAUCHY P.Sequences to differences in gene expression：analysis of RNA-Seq data［J］.Methods Mol Biol，2022，2508：279-318.

［76］" GHOLIPOUR A，SHAKERIAN F，ZAHEDMEHR A，et al.Bioinformatics analysis to find novel biomarkers for coronary heart disease［J］.Iran J Public Health，2022，51（5）：1152-1160.

［77］" 韓昕月，王甲莉，呂嘉麗，等.代謝組學(xué)在心血管疾病預(yù)后研究中的應(yīng)用［J］.中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2024，25（2）：158-165.

HAN X Y，WANG J L，LV J L，et al.Application of metabolomics in prognostic research of cardiovascular diseases［J］.Chinese Preventive Medicine，2024，25（2）：158-165.（in Chinese）

［78］" 張國(guó)瑗，李" 磊，孟紅旭，等.冠心病痰瘀互結(jié)證小型豬血漿代謝組學(xué)研究［J］.中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2023，30（6）：117-122.

ZHANG G Y，LI L，MENG H X，et al.Metabolomics study on plasma of miniature pigs with phlegm-stasis syndrome of coronary heart disease［J］.Chinese Journal of Information on Traditional Chinese Medicine，2023，30（6）：117-122.（in Chinese）

［79］" BERIS A N，HORNER J S，JARIWALA S，et al.Recent advances in blood rheology：a review［J］.Soft Matter，2021，17（47）： 10591-10613.

［80］" 梁秀琴，李便榮，史小峰，等.老年冠心病并發(fā)巨細(xì)胞病毒感染與血液流變學(xué)和內(nèi)皮素水平及預(yù)后的關(guān)系［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2022，32（17）：2579-2582.

LIANG X Q，LI B R，SHI X F，et al.Association of cytomegalovirus infection with hemorheology，endothelin level and prognosis of elderly patients with coronary heart disease［J］.Chinese Journal of nosocomiology，2022，32（17）：2579-2582.（in Chinese）

［81］" 楊" 帆，郭元?jiǎng)?，郭小青，?老年冠心病患者頸動(dòng)脈超聲特征、血液流變學(xué)指標(biāo)與冠狀動(dòng)脈狹窄程度的相關(guān)性［J］.河南醫(yī)學(xué)研究，2023，32（23）：4254-4258.

YANG F，GUO Y X，GUO X Q，et al.Correlation among the carotid ultrasound characteristics，the hemorheology indexes and the degree of coronary artery stenosis in elderly patients with coronary heart disease［J］.Henan Medical Research， 2023，32（23）：4254-4258.（in Chinese）

［82］" 任" 磊，寧" 彬，李文俊，等.地奧心血康軟膠囊在經(jīng)心臟核磁共振檢查的冠心病微循環(huán)障礙中的應(yīng)用分析［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2023，41（7）：239-242.

REN L，NING B，LI W J，et al.Application analysis of Di’ao Xinxuekang Soft Capsule in patients with coronary heart disease and microcirculation dysfunction by cardiac MRI［J］.Chinese Archives of Traditional Chinese Medicine，2023， 41（7）：239-242.（in Chinese）

［83］" 梁" 潔，李葆青.心血管核磁共振在冠心病診療中的應(yīng)用價(jià)值分析［J］.影像研究與醫(yī)學(xué)應(yīng)用，2019，3（13）：200-201.

LIANG J，LI B Q.Application value of cardiovascular MRI in the diagnosis and treatment of coronary heart disease［J］.Journal of Imaging Research and Medical Applications，2019，3（13）：200-201.（in Chinese）

［84］" 許丹丹，焦敬美，張曉晨，等.12導(dǎo)聯(lián)動(dòng)態(tài)心電圖、常規(guī)心電圖在冠心病無(wú)癥狀性心肌缺血伴發(fā)心律失常診斷中的應(yīng)用效果對(duì)比［J］.四川解剖學(xué)雜志，2021，29（1）：138-139.

XU D D，JIAO J M，ZHANG X C，et al.Comparison of 12-lead holter electrocardiogram and conventional electrocardiogram in the diagnosis of asymptomatic myocardial ischemia with arrhythmia in coronary heart disease［J］.Sichuan Journal of Anatomy，2021，29（1）：138-139.（in Chinese）

［85］" 鄭" 帆，白一蘋(píng).常規(guī)心電圖與動(dòng)態(tài)心電圖對(duì)冠心病心律失常的診斷價(jià)值比較［J］.山西醫(yī)藥雜志，2020，49（16）：2201-2202.

ZHENG F，BAI Y P.Comparison of diagnostic value of routine electrocardiogram and holter electrocardiogram for arrhythmia in coronary heart disease［J］.Shanxi Medical Journal，2020，49（16）：2201-2202.（in Chinese）

［86］" 艾" 瑛，張學(xué)強(qiáng)，雷羅春.動(dòng)態(tài)心電圖與常規(guī)心電圖診斷冠心病的應(yīng)用對(duì)比分析［J］.智慧健康，2024，10（3）：9-12.

AI Y，ZHANG X Q，LEI L C.Application comparative analysis of dynamic electrocardiogram and routine electrocardiogram in diagnosis of coronary heart disease［J］.Smart Healthcare，2024，10（3）：9-12.（in Chinese）

［87］" 趙童童，李" 濤，尚進(jìn)偉，等.多層螺旋CT和冠狀動(dòng)脈造影評(píng)估冠心病診斷及經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療術(shù)后評(píng)估支架內(nèi)再狹窄研究［J］.中國(guó)醫(yī)學(xué)裝備，2022，19（1）：77-81.

ZHAO T T，LI T，SHANG J W，et al.Application values of MSCT and coronary angiography in the CHD diagnosis and postoperative assessment of PCI treatment on in-stent restenosis［J］.China Medical Equipment，2022，19（1）：77-81.（in Chinese）

［88］" 張菲斐.CTA和冠狀動(dòng)脈造影對(duì)冠心病支架置入術(shù)后再狹窄的評(píng)估價(jià)值對(duì)比分析［J］.中國(guó)CT和MRI雜志，2022， 20（9）：84-85，114.

ZHANG F F.Comparative analysis of evaluated value of CTA and coronary angiography on restenosis after coronaryheart disease stent implantation［J］.Chinese Journal of CT and MRI，2022，20（9）：84-85，114.（in Chinese）

［89］" HOGEN T，LI J，BALMACEDA P，et al.Echocardiography recording in awake miniature pigs［J］.J Vis Exp，2023，（195）.doi：10.3791/64943.

［90］" 許" 穎，牛銀鈴，李" 霞.頸動(dòng)脈超聲相關(guān)參數(shù)與冠脈粥樣硬化病變程度的相關(guān)性［J］.心血管康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志，2024， 33（1）：75-99.

XU Y，NIU Y L，LI X.Correlation between related carotid ultrasound parameters and severity of coronary atherosclerosis［J］. Chinese Journal of Cardiovascular Rehabilitation Medicine，2024，33（1）：75-79.（in Chinese）

［91］" BADIN J K，EGGENBERGER C，RODENBECK S D，et al.Intracellular Ca2+ dysregulation in coronary smooth muscle is similar in coronary disease of humans and Ossabaw miniature swine［J］.J Cardiovasc Trans Res，2022，15（1）：167-178.

［92］" 劉貴蓮，楊為敏，孟玉學(xué).高脂高糖飼料對(duì)巴馬小型豬脂肪分布及血液生化指標(biāo)的影響［J］.中國(guó)飼料，2022（18）：27-30.

LIU G L，YANG W M，MENG Y X.Effects of high-fat and high-sugar feed on fat distribution and blood biochemical indexes of Bama miniature pigs［J］.China Feed，2022（18）：27-30.（in Chinese）

［93］" BURKE A C，TELFORD D E，SUTHERLAND B G，et al.Bempedoic acid lowers low-density lipoprotein cholesterol and attenuates atherosclerosis in low-density lipoprotein receptor-deficient （LDLR+/- and LDLR-/-） Yucatan miniature pigs［J］.Arterioscler Thromb Vasc Biol，2018，38（5）：1178-1190.

［94］" BAEHR A，KLYMIUK N，KUPATT C.Evaluating novel targets of ischemia reperfusion injury in pig models［J］.Int J Mol Sci，2019，20（19）：4749.

［95］" SILVIS M J M，VAN HOUT G P J，F(xiàn)IOLET A T L，et al.Experimental parameters and infarct size in closed chest pig LAD ischemia reperfusion models;lessons learned［J］.BMC Cardiovasc Disord，2021，21（1）：171.

［96］" 洪名揚(yáng)，富" 路.冠心病心肌缺血再灌注損傷機(jī)制研究的進(jìn)展［J］.心血管康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志，2022，31（2）：241-245.

HONG M Y，F(xiàn)U L.Research progress on mechanism of myocardial ischemia-reperfusion injury in coronary heart disease［J］.Chinese Journal of Cardiovascular Rehabilitation Medicine，2022，31（2）：241-245.（in Chinese）

［97］" BRENNER G B，GIRICZ Z，GARAMVLGYI R，et al.Post-myocardial infarction heart failure in closed-chest coronary occlusion/reperfusion model in Gttingen minipigs and landrace pigs［J］.J Vis Exp，2021（170）.doi：10.3791/61901.

［98］" JOHNSON K A，JEFFERY E，BRAY J F，et al.Exercise training rescues impaired H2O2-mediated vasodilation in porcine collateral-dependent coronary arterioles through enhanced K+ channel activation［J］.Am J Physiol Heart Circ Physiol，2023， 324（5）： H637-H653.

［99］" HEAPS C L，BRAY J F，PARKER J L.Enhanced KCl-mediated contractility and Ca2+ sensitization in porcine collateral-dependent coronary arteries persist after exercise training［J］.Am J Physiol Heart Circ Physiol，2020，319（4）： H915-H926.

［100］" 李子祥，邱華明，吳延軍，等.小型豬在中醫(yī)動(dòng)物模型中的應(yīng)用研究進(jìn)展［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào)，2023，31（9）：1186-1193.

LI Z X，QIU H M，WU Y J，et al.Progress in the application of minipigs as animal models of Chinese medicine［J］.Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica，2023，31（9）：1186-1193.（in Chinese）

［101］" KIM M，KIM H B，PARK D S，et al.A model of atherosclerosis using nicotine with balloon overdilation in a porcine［J］.Sci Rep，2021，11（1）：13695.

［102］" GLOVACI D，F(xiàn)AN W J，WONG N D.Epidemiology of diabetes mellitus and cardiovascular disease［J］.Curr Cardiol Rep，2019，21（4）：21.

［103］" FRK W，WOJTASIN′SKA A，LISIN′SKA W，et al.Pathophysiology of cardiovascular diseases：new insights into molecular mechanisms of atherosclerosis，arterial hypertension，and coronary artery disease［J］.Biomedicines，2022，10（8）：1938.

［104］" MILUTINOVIC′ A，UPUT D，ZORC-PLESKOVIACˇG R.Pathogenesis of atherosclerosis in the tunica intima，media，and adventitia of coronary arteries：an updated review［J］.Bosn J Basic Med Sci，2020，20（1）：21-30.

［105］" OLVER T D，GRUNEWALD Z I，GHIARONE T，et al.Persistent insulin signaling coupled with restricted PI3K activation causes insulin-induced vasoconstriction［J］.Am J Physiol Heart Circ Physiol，2019，317（5）：H1166-H1172.

［106］" LU Z Y，ZHANG H Y，YANG Y H，et al.Sex differences of the shared genetic landscapes between type 2 diabetes and peripheral artery disease in East Asians and Europeans［J］.Hum Genet，2023，142（7）：965-980.

［107］" FISCHELL T A，PAYNE J，WEHDE K，et al.A next-generation guide extension system for percutaneous coronary intervention［J］.Cardiovasc Revasc Med，2021，32：50-55.

［108］" DIAO H T，CHENG J W，HUANG X Y，et al.The Chinese medicine Fufang Zhenzhu Tiaozhi capsule protects against atherosclerosis by suppressing EndMT via modulating Akt1/β-catenin signaling pathway［J］.J Ethnopharmacol，2022，293： 115261.

［109］" SABE S A，XU C M，SABRA M，et al.Canagliflozin improves myocardial perfusion，fibrosis，and function in a swine model of chronic myocardial ischemia［J］.J Am Heart Assoc，2023，12（1）：e028623.

［110］" FAN S Y，LI K F，ZHANG D Y，et al.JNK and NF-κB signaling pathways are involved in cytokine changes in patients with congenital heart disease prior to and after transcatheter closure［J］.Exp Ther Med，2018，15（2）：1525-1531.

［111］" YANG B，XU B，ZHAO H，et al.Dioscin protects against coronary heart disease by reducing oxidative stress and inflammation via Sirt1/Nrf2 and p38 MAPK pathways［J］.Mol Med Rep，2018，18（1）：973-980.

［112］" DONG Y，CHEN H W，GAO J L，et al.Molecular machinery and interplay of apoptosis and autophagy in coronary heart disease［J］.J Mol Cell Cardiol，2019，136：27-41.

［113］" ZHAO M，NAKADA Y，WEI Y H，et al.Cyclin D2 overexpression enhances the efficacy of human induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes for myocardial repair in a swine model of myocardial infarction［J］.Circulation，2021，144（3）： 210-228.

［114］" SUKHANOV S，HIGASHI Y，YOSHIDA T，et al.Insulin-like growth factor 1 reduces coronary atherosclerosis in pigs with familial hyper-cholesterolemia［J］.JCI Insight，2023，8（4）：e165713.

［115］" BADIN J K，KOLE A，STIVERS B，et al.Alloxan-induced diabetes exacerbates coronary atherosclerosis and calcification in Ossabaw miniature swine with metabolic syndrome［J］.J Transl Med，2018，16（1）：58.

［116］" LI S M，F(xiàn)ANG J，CHEN L L.Pyrrolidine dithiocarbamate attenuates cardiocyte apoptosis and ameliorates heart failure following coronary microembolization in rats［J］.Balkan Med J，2019，36（4）：245-250.

［117］" COPS J，HAESEN S，DE MOOR B，et al.Current animal models for the study of congestion in heart failure：an overview［J］.Heart Fail Rev，2019，24（3）：387-397.

［118］nbsp; BECK L，PINILLA E，ARCANJO D D R，et al.Pirfenidone is a vasodilator：involvement of KV7 channels in the effect on endothelium-dependent vasodilatation in type-2 diabetic mice［J］.Front Pharmacol，2020，11：619152.

［119］" WANG Y L，JU C H，HU J，et al.PRMT4 overexpression aggravates cardiac remodeling following myocardial infarction by promoting cardiomyocyte apoptosis［J］.Biochem Biophys Res Commun，2019，520（3）：645-650.

［120］" ROUBILLE F，MERLET N，BUSSEUIL D，et al.Colchicine reduces atherosclerotic plaque vulnerability in rabbits［J］. Atheroscler Plus，2021，45：1-9.

［121］" LIU H D，XIONG W，LIU F，et al.Significant role and mechanism of microRNA-143-3p/KLLN axis in the development of coronary heart disease［J］.Am J Transl Res，2019，11（6）：3610-3619.

［122］" YADAVA M，LE D E，DYKAN I V，et al.Therapeutic ultrasound improves myocardial blood flow and reduces infarct size in a canine model of coronary microthromboembolism［J］.J Am Soc Echocardiogr，2020，33（2）：234-246.

［123］" GUO Y，YANG Q，WENG X G，et al.Shenlian extract against myocardial injury induced by ischemia through the regulation of NF-κB/IκB signaling axis［J］.Front Pharmacol，2020，11：134.

［124］" BRETON C，F(xiàn)URMANAK T，AVITTO A N，et al.Increasing the specificity of AAV-based gene editing through self-targeting and short-promoter strategies［J］.Mol Ther，2021，29（3）：1047-1056.

［125］" 曾華沙，姚" 俊，王紅順，等.人/豬OSBPL2同源性比較及豬PFFs靶基因敲除細(xì)胞系的建立［J］.南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2018，38（2）：149-154.

ZENG H S，YAO J，WANG H S，et al.Homology comparison between human and pig OSBPL2 and establishment of pig PFFs with target gene knockout［J］.Acta Universitatis Medicinalis Nanjing：Natural Science，2018，38（2）：149-154.（in Chinese）

［126］" 王" 蒙，朱曉晗，劉曉蕊，等.人/豬SERPING1同源性比較及豬SERPING1敲除細(xì)胞系的建立［J］.安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2022，57（4）：505-509.

WANG M，ZHU X H，LIU X R，et al.Homology comparison between human and pig SERPING1 and establishment of pig PFFs with SERPING1 knockout［J］.Acta Universitatis Medicinalis Anhui，2022，57（4）：505-509.（in Chinese）

［127］" 朱曉晗，劉曉蕊，李" 琳，等.利用CRISPR/Cas9技術(shù)高效構(gòu)建巴馬小型豬F9基因敲除細(xì)胞系［J］.南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2022，42（1）：1-7.

ZHU X H，LIU X R，LI L，et al.Efficient construction of Bama minipig F9 gene knockout cell line using CRISPR/Cas9 technology［J］.Journal of Nanjing Medical University：Natural Sciences，2022，42（1）：1-7.（in Chinese）

［128］" 景志忠，房永祥，陳國(guó)華，等.高原型實(shí)驗(yàn)小型豬——合作小型豬的培育與應(yīng)用［J］.甘肅畜牧獸醫(yī)，2021，51（11）：5-14.

JING Z Z，F(xiàn)ANG Y X，CHEN G H，et al.Breeding and application of plateau experimental miniature pigs-cooperative miniature pig［J］.Gansu Animal Husbandry and Veterinary，2021，51（11）：5-14.（in Chinese）

［129］" MANGHWAR H，LINDSEY K，ZHANG X L，et al.CRISPR/Cas system：recent advances and future prospects for genome editing［J］.Trends Plant Sci，2019，24（12）：1102-1125.

［130］" COOPER D K C，PIERSON III R N.Milestones on the path to clinical pig organ xenotransplantation［J］.Am J Transplant， 2023，23（3）：326-335.

［131］" PIERSON III R N，ALLAN J S，COOPER D K C，et al.Expert opinion special feature：patient selection for initial clinical trials of pig organ transplantation［J］.Transplantation，2022，106（9）：1720-1723.

（編輯" 郭云雁）