摘" 要: 旨在研究廣明2號(hào)肉雞必需氨基酸的維持需要量,為建立氨基酸需要量預(yù)測(cè)模型提供基礎(chǔ)。本研究由2個(gè)部分試驗(yàn)組成。試驗(yàn)1在12~15日齡和31~34日齡2個(gè)階段,分別選擇廣明2號(hào)公雞、母雞各12只,以性別為處理,每個(gè)處理6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)2只雞,每個(gè)重復(fù)飼養(yǎng)于1個(gè)代謝籠中。飼喂無(wú)氮日糧,分別收集肉雞的排泄物和脫落的羽毛皮屑,計(jì)算肉雞內(nèi)源氮和毛屑脫落氮的比例。試驗(yàn)2在上述2個(gè)階段分別選擇體重(BW)接近的公、母雞各48只,隨機(jī)分為4個(gè)處理組,每個(gè)處理組12只,公母分開(kāi)飼養(yǎng)于6個(gè)代謝籠中。4個(gè)處理組分別強(qiáng)飼粗蛋白質(zhì)含量不同的代謝日糧,收集肉雞的排泄物(包括脫落的毛屑),計(jì)算肉雞的氮沉積量(氮攝入量減去氮排出量);通過(guò)建立氮攝入量和氮沉積量的線性回歸方程,計(jì)算出肉雞蛋白質(zhì)的維持需要量;根據(jù)內(nèi)源氮和毛屑氮的比例,計(jì)算出肉雞內(nèi)源蛋白質(zhì)和毛屑蛋白質(zhì)的維持需要量;再根據(jù)成年雞內(nèi)源氮中必需氨基酸的含量(參考前人數(shù)據(jù))和脫落毛屑中氨基酸的含量(實(shí)際測(cè)定),計(jì)算出內(nèi)源氨基酸和毛屑氨基酸的維持需要量,兩者之和為廣明2號(hào)肉雞必需氨基酸的維持需要量。試驗(yàn)1發(fā)現(xiàn),廣明2號(hào)肉雞每日氮損失主要源于毛屑脫落,毛屑脫落氮占氮損失量的55.9%~65.1%,日齡和性別對(duì)毛屑脫落氮的占比存在顯著的交互作用(Plt;0.001),前期公雞毛屑脫落氮的占比顯著低于母雞,后期顯著高于母雞(Plt;0.05)。試驗(yàn)2發(fā)現(xiàn),隨著代謝日糧中蛋白含量的增加,氮的攝入量、排泄量和沉積量均顯著增加(Plt;0.001)。分別建立不同階段公、母雞氮攝入量和沉積量的線性回歸方程,回歸模型均達(dá)到顯著水平(Plt;0.001),決定系數(shù)大于0.96。根據(jù)回歸方程計(jì)算出廣明2號(hào)肉雞蛋白質(zhì)的維持需要量,12~15日齡公雞和母雞分別為每日2.36和3.16 g/kg BW0.75,日糧蛋白質(zhì)的沉積效率為65.55%和58.73%;31~34日齡公雞和母雞分別為每日2.96和2.56 g/kg BW0.75,日糧蛋白的沉積效率為79.42%和73.95%。最終根據(jù)肉雞內(nèi)源氮和毛屑脫落氮的比例,以及內(nèi)源必需氨基酸和毛屑氨基酸的組成模式,計(jì)算出廣明2號(hào)肉雞內(nèi)源氨基酸和毛屑氨基酸的維持需要量。本研究采用改進(jìn)的方法測(cè)定了廣明2號(hào)肉雞內(nèi)源必需氨基酸和毛屑氨基酸的維持需要量,為建立氨基 酸需要量預(yù)測(cè)模型提供了基礎(chǔ)。本研究測(cè)定的結(jié)果與比較屠宰法測(cè)定的成年雞氨基酸維持需要量接近,表明本方法相較原有方法更為合理。
關(guān)鍵詞: 廣明2號(hào)肉雞;生長(zhǎng)階段;性別;必需氨基酸維持需要量
中圖分類號(hào):S831.41
文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A
文章編號(hào):0366-6964(2024)12-5590-12
doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2024.12.023
開(kāi)放科學(xué)(資源服務(wù))標(biāo)識(shí)碼(OSID):
收稿日期:2024-02-27
基金項(xiàng)目:國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(2021YFD1300404);現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金(CARS-41);中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技創(chuàng)新工程(ASTIP-IAS07)
作者簡(jiǎn)介:趙少猛(1999-),男,河北衡水人,碩士生,主要從事動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究,E-mail:zhaoshaomeng1023@163.com
*通信作者:文" 杰,主要從事家禽遺傳育種和肌肉品質(zhì)性狀形成機(jī)理及相關(guān)分子營(yíng)養(yǎng)研究,E-mail:wenjie@cass.cn;馮京海,主要從事動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究,E-mail:fengjinghai@caas.cn
The Maintenance Requirements for Essential Amino Acids of Guangming No.2 Broilers
ZHAO" Shaomeng1, DONG" Ruiling2, LIU" Dawei3, YING" Fan3, LI" Sen3, ZHAO" Guiping1, ZHANG" Minhong1, WEN Jie1* , FENG" Jinghai1*
(1.Institute of Animal Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences/ State Key Laboratory of Animal Nutrition and Feeding, Beijing 100193," China;
2.College of Animal Science, Shanxi Agricultural University, Taigu 030801, China;
3.Foshan Gaoming District Xinguang Agriculture and Animal Husbandry Co., Ltd, Foshan 528000," China)
Abstract:" The study aimed to estimate the maintenance requirement for essential amino acids of Guangming No. 2 broilers, and to provide a basis for the establishment of a prediction model of amino acid requirement. In trial 1, 12 Guangming No. 2 male and female were selected at 12 to 15 days of age and 31 to 34 days of age, respectively, with 6 replicates per treatment and 2 chickens per replicate. Each replicate was fed in a metabolic cage. The broilers were fed a nitrogen-free diet, and the excreta and shed feather dander of broilers were collected separately, and the ratio of endogenous nitrogen to shed dander nitrogen was calculated. In trial 2, 48 male and 48 female broilers with similar body weight (BW) were randomly divided into 4 treatment groups (12 broilers in each treatment group), and male and female broilers were fed separately in 6 metabolic cages. The four treatment groups were fed metabolic diets with different protein contents, and the excreta (including shed dander) of broilers were collected. Nitrogen deposition (nitrogen intake minus nitrogen expulsion) was calculated, a linear regression equation of nitrogen intake and nitrogen deposition was established to calculate the protein maintenance requirement of broilers. The maintenance requirement of endogenous protein and dander protein was calculated according to the ratio of endogenous nitrogen and shed dander nitrogen, and multiplied respectively by the composition of essential amino acids in endogenous protein (referring to previous data) and in shed dander protein (actual measurement) to calculate the maintenance requirements of endogenous amino acids and dander amino acids, and the sum of the two was the maintenance requirement of essential amino acids of Guangming No. 2 broilers. Experimental 1 showed that the daily nitrogen loss of Guangming No. 2 broiler was mainly due to dander shedding, which accounted for 55.9%~65.1%. There was a significant interaction between age and sex on the proportion of shed dander nitrogen to total nitrogen loss (Plt;0.001), the proportion of shed dander nitrogen of male broiler was significantly lower than that of females in the early stage, but significantly higher than that of females in the later stage (Plt;0.05). The second experiment showed that the intake, excretion and deposition of nitrogen increased significantly with the increase of protein content in metabolic diets (Plt;0.001). The linear regression equations of nitrogen intake and deposition of male and female broilers were established in the two stages. The regression models were significant (Plt;0.001), and the coefficient of determination were greater than 0.96. According to the regression equation, the protein maintenance requirements of Guangming No. 2 broilers were calculated, 2.36 and 3.16 g/kg BW0.75 for male and female broilers at 12~15 days old per day, 2.96 and 2.56 g/kg BW0.75 for male and female broilers at 31~34 days old per day. The utilization efficiency of dietary protein was 65.55% and 58.73% for 12~15 days old male and female broilers, 79.42% and 73.95% for 31~34 days old male and female broilers. According to the ratio of endogenous nitrogen and shed dander nitrogen obtained from experiment 1, the maintenance requirements of endogenous protein and dander protein in Guangming No. 2 broilers at different stages were calculated. Then, according to the composition of essential amino acids in endogenous protein and dander protein, the maintenance requirements of endogenous amino acids and dander amino acids were calculated. In this study, an improved method was used to estimate the maintenance requirements of endogenous essential amino acids and dander amino acids in Guangming No. 2 broilers, which provided a basis for the establishment of a prediction model of amino acid requirements. The estimated results of this study were close to those of adult chickens measured by the comparative slaughtering method, indicating that the proposed method was more reasonable than the original method.
Key words: Guangming No. 2 broiler; growth stage; gender; maintenance requirements for essential amino acid
*Corresponding authors: WEN Jie,E-mail:wenjie@caas.cn; FENG Jinghai,E-mail:fengjinghai@caas.cn
利用析因法測(cè)定肉雞氨基酸的維持和生長(zhǎng)需要量,可以建立氨基酸需要量的預(yù)測(cè)模型,根據(jù)肉雞的體重和日增重,動(dòng)態(tài)預(yù)測(cè)肉雞氨基酸的每日需要量[1-4]。目前測(cè)定家禽氨基酸維持需要量有多種方法,但缺乏公認(rèn)準(zhǔn)確且簡(jiǎn)便的方法[5]。家禽氨基酸的維持需要主要用于維持內(nèi)源氨基酸和毛屑脫落氨基酸的損失[6],通常定義為:當(dāng)家禽氮平衡為零或氮沉積為零時(shí)氨基酸的攝入量[5]。研究人員一般利用氮平衡試驗(yàn)[3,7-10]或比較屠宰法[5,11-13]測(cè)定家禽氨基酸的維持需要量。研究發(fā)現(xiàn),氮平衡法測(cè)定的結(jié)果一般低于比較屠宰法[5,14-15]。Laflamme和Hannah[16]認(rèn)為,氮平衡法可能低估了氨基酸維持需要量。氮平衡試驗(yàn)在收集排泄物時(shí)一般剔除羽毛和皮屑的污染,氮平衡為零時(shí),攝入的氮僅用于維持排泄物中氮(即內(nèi)源氮)的損失,實(shí)際上測(cè)定的是內(nèi)源氨基酸的維持需要量;而比較屠宰法測(cè)定的是內(nèi)源氨基酸和毛屑脫落氨基酸維持需要量的總和,因此比較屠宰法測(cè)定的結(jié)果更為合理。由于蛋白質(zhì)的合成受第一限制氨基酸的影響,采用氮平衡法或比較屠宰法,需要通過(guò)獨(dú)立的試驗(yàn),分別測(cè)定每一種氨基酸的維持需要量。一般采用稀釋技術(shù)[17],配制待測(cè)氨基酸始終為第一限制氨基酸的日糧,這就導(dǎo)致試驗(yàn)測(cè)試工作量巨大。
Hurwitz等[18]提出了一種簡(jiǎn)便方法,通過(guò)兩個(gè)試驗(yàn)即可得出所有氨基酸的維持需要量。其原理是測(cè)定內(nèi)源蛋白和毛屑脫落蛋白的平均損失量,分別乘以內(nèi)源蛋白和毛屑蛋白中各個(gè)氨基酸的含量,得到內(nèi)源氨基酸和毛屑氨基酸的損失量,兩者之和即為氨基酸的維持需要量。Hurwitz等[18]通過(guò)飼喂無(wú)氮日糧,測(cè)定火雞排泄物內(nèi)源氮的損失量以及氨基酸組成,再測(cè)定排泄物中的肌酐含量,等摩爾換算為尿中蛋氨酸、精氨酸和甘氨酸的損失量,兩部分相加即為內(nèi)源氨基酸的損失量;通過(guò)飼喂低氮日糧,維持火雞體重和體組成不變,多攝入的氮即為毛屑脫落氮的損失量,再乘以羽毛中各個(gè)氨基酸的含量,計(jì)算脫落毛屑氨基酸的損失量。研究人員采用這種方法測(cè)定了肉雞[19]、烏骨雞[2]、肉鴨[20]和火雞[18,21]的氨基酸維持需要量。這種方法雖然簡(jiǎn)便快捷,但存在兩個(gè)難點(diǎn)。首先,飼喂低氮日糧很難保證家禽體重和體組成不變,測(cè)定的毛屑脫落氮損失量可能會(huì)存在較大誤差,而且脫落毛屑氨基酸的組成可能與羽毛氨基酸的組成存在差異。第二,家禽排泄物中的內(nèi)源氮大部分為非蛋白氮,蛋白形態(tài)的氮僅占小部分[2,19],將內(nèi)源氮全部按照蛋白氮中氨基酸的含量進(jìn)行計(jì)算,即使通過(guò)肌酐校正蛋氨酸、精氨酸和甘氨酸的損失量,估測(cè)出的家禽內(nèi)源氨基酸損失量依然會(huì)出現(xiàn)較大誤差。
廣明2號(hào)肉雞是我國(guó)自主培育的快大型白羽肉雞新品種[22],其準(zhǔn)確的氨基酸需要量尚不清楚。本研究擬改進(jìn)Hurwitz等[18]的方法,研究廣明2號(hào)肉雞必需氨基酸的維持需要量。針對(duì)原方法存在的兩個(gè)難點(diǎn),本研究擬分別收集肉雞的排泄物和脫落毛屑,測(cè)定內(nèi)源蛋白和毛屑脫落蛋白的維持需要量;采用成年雞[7]內(nèi)源氮中必需氨基酸的含量,并實(shí)際測(cè)定脫落毛屑中氨基酸的含量。最終計(jì)算出廣明2號(hào)肉雞必需氨基酸的維持需要量,為進(jìn)一步建立氨基酸需要量預(yù)測(cè)模型提供基礎(chǔ),同時(shí)也為研究其他家禽氨基酸的維持需要量提供參考。
1" 材料與方法
1.1" 試驗(yàn)日糧的配制
參照《雞營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 33—2004)配制玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧,參照Ekmay等[13]的方法配制無(wú)氮日糧?;A(chǔ)日糧和無(wú)氮日糧的原料組成及營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。將基礎(chǔ)日糧和無(wú)氮日糧分別按10∶0(100%處理組)、8∶2(80%處理組)、6∶4(60%處理組)和4∶6(40%處理組)的比例混合,配制成蛋白含量不同的4種代謝日糧。
1.2" 試驗(yàn)動(dòng)物及試驗(yàn)程序
試驗(yàn)一分2個(gè)階段測(cè)定廣明2號(hào)肉雞內(nèi)源氮和毛屑脫落氮的損失比例。分別在10日齡和29日齡時(shí),選出體重接近的肉雞24只,按性別分為2個(gè)處理組,每個(gè)處理組6個(gè)重復(fù),每重復(fù)2只雞,公、母雞分開(kāi)飼養(yǎng)于6個(gè)代謝籠內(nèi),自由采食無(wú)氮日糧。適應(yīng)2 d后,在12~15日齡和31~34日齡兩個(gè)階段,分別收集肉雞的排泄物和脫落的羽毛皮屑。每天收集4次,每次先用刷子和鑷子將脫落的羽毛、皮屑收集起來(lái),再收集排泄物,將收集到樣品立即放置于-20℃冰箱保存。
試驗(yàn)二分兩個(gè)階段測(cè)定廣明2號(hào)肉雞蛋白質(zhì)的維持需要量。采用完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì),分別在10日齡和29日齡時(shí),每個(gè)性別選出體重接近的肉雞48只,隨機(jī)分為4個(gè)處理組,每個(gè)處理組6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)2只,公、母雞分開(kāi),分別飼養(yǎng)于24個(gè)代謝籠中。每個(gè)階段代謝試驗(yàn)持續(xù)6 d,前2 d為適應(yīng)期,4個(gè)處理組全部自由采食無(wú)氮日糧;隨后3 d中,4個(gè)處理組分別強(qiáng)飼粗蛋白質(zhì)含量不同的代謝日糧,兩個(gè)階段每天強(qiáng)飼的數(shù)量分別為15 g和40 g,每天分2次強(qiáng)飼,同時(shí)自由采食無(wú)氮日糧;第6天停止強(qiáng)飼代謝日糧,繼續(xù)飼喂無(wú)氮日糧。根據(jù)糞便顏色確定收集排泄物的開(kāi)始和停止時(shí)間,收集時(shí)小心剔除遺撒的飼料,將排泄物和脫落的羽毛、皮屑一同收集。每天收集3次排泄物,每次收集后立即放置于-20℃冰箱保存。強(qiáng)飼期間,每天采集50 g左右的代謝日糧樣品,-20℃保存。每個(gè)階段代謝試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí),以重復(fù)為單位稱取肉雞體重。上述兩個(gè)試驗(yàn)于2023年3月在彌勒新廣農(nóng)牧科技有限公司肉雞舍中進(jìn)行,按照新廣農(nóng)牧公司的養(yǎng)殖規(guī)范進(jìn)行常規(guī)免疫及日常管理,12~15日齡期間雞舍溫度維持在28.5℃左右,相對(duì)濕度維持在60%左右;31~34日齡期間雞舍溫度維持在23℃左右,相對(duì)濕度維持在40%左右。
1.3" 樣品的分析測(cè)定
飼料、毛屑脫落物和排泄物樣品室溫解凍后,將每個(gè)重復(fù)收集的樣品混合均勻,65℃烘干72 h至恒重,而后準(zhǔn)確稱重,飼料和排泄物粉碎過(guò)60目篩后待測(cè),毛屑脫落物剪碎待測(cè)。參照國(guó)標(biāo)GB/T 6432—2018《飼料中粗蛋白的測(cè)定 凱氏定氮法》的方法,使用K-9840自動(dòng)凱氏定氮儀,測(cè)定飼料、毛屑和排泄物樣品中粗蛋白質(zhì)含量。參照國(guó)標(biāo)GB/T 18246—2019《飼料中氨基酸的測(cè)定》的方法,使用日立L-8900全自動(dòng)氨基酸分析儀測(cè)定試驗(yàn)1收集的毛屑樣品中17種氨基酸的含量。以檸檬酸鈉緩沖溶液作為流動(dòng)相,緩沖液的流速為0.4mL·min-1;以茚三酮溶液為衍生劑,衍生溫度為135℃;檢測(cè)波長(zhǎng)為570nm(16種氨基酸)和440nm(脯氨酸)。
1.4" 蛋白質(zhì)維持需要量的計(jì)算
試驗(yàn)2收集的排泄物樣品包括脫落的毛屑在內(nèi),因此排出氮(Nex)包括內(nèi)源氮和毛屑脫落氮。肉雞氮的攝入量(Ni)減去Nex相當(dāng)于氮的沉積量(Nd),即Nd=Ni-Nex。建立Nd和Ni之間的線性回歸方程:Nd=a+b×Ni,得到常數(shù)a和b。將Nd=0時(shí)的Ni定義為氮的維持需要量(Nm),即Nm=-a/b,乘以6.25即為蛋白質(zhì)的維持需要量(CPm),單位為g/kg BW0.75/d,常數(shù)b為日糧蛋白質(zhì)的利用效率。
試驗(yàn)1測(cè)定了肉雞每天內(nèi)源氮和毛屑脫落氮的損失量,計(jì)算出內(nèi)源氮(eNL)和毛屑脫落氮(sdNL)占總氮(TNL)損失量的比例,分別乘以試驗(yàn)2得出的蛋白質(zhì)維持需要量(CPm),得到內(nèi)源蛋白維持需要量(eCPm)和毛屑脫落蛋白的維持需要量(sdCPm):eCPm=CPm×(eNL/TNL);sdCPm=CPm×(sdNL/TNL)。單位為mg/kg BW0.75/d。
1.5" 氨基酸維持需要量的計(jì)算
試驗(yàn)1測(cè)定了毛屑脫落蛋白中氨基酸的組成模式(sdAA),乘以毛屑脫落蛋白的維持需要量(sdCPm),即可計(jì)算出毛屑脫落氨基酸的維持需要量(sdAAm):sdAAm=sdCPm×sdAA。采用Dorigam[7]計(jì)算出的成年雞內(nèi)源氮中必需氨基酸的組成模式(eAA),乘以內(nèi)源蛋白的維持需要量(eCPm),即可計(jì)算出內(nèi)源必需氨基酸的維持需要量(eAAm):eAAm=eCPm×eAA。兩者之和即為肉雞必需氨基酸的維持需要量(AAm):AAm=eAAm+sdAA。單位為mg/kg BW0.75/d。
1.6" 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
使用 SPSS 26.0 統(tǒng)計(jì)軟件中單因素方差分析,分析不同代謝日糧對(duì)廣明2號(hào)肉雞氮排泄量和氮沉積量的影響;使用雙因素方差分析性別與階段對(duì)內(nèi)源氮損失量、脫落氮損失量以及總氮損失量的影響;對(duì)方差分析顯著的指標(biāo)再進(jìn)行Duncan氏多重比較,Plt;0.05為顯著標(biāo)準(zhǔn)。使用SPSS 26.0 統(tǒng)計(jì)軟件中的線性回歸模塊,分析回歸模型的顯著性,因變量和自變量之間的相關(guān)性用R2表示,Plt;0.05說(shuō)明回歸模型具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。使用GraphPad Prism 9軟件繪圖。
2" 結(jié)" 果
2.1" 廣明2號(hào)肉雞每日氮的損失量
試驗(yàn)1結(jié)果由表2可見(jiàn),廣明2號(hào)肉雞每天氮的損失量在0.138~0.228 g/kg BW0.75。肉雞后期(31~34日齡)的氮損失量顯著高于前期(12~15日齡,Plt;0.001);日齡和性別對(duì)氮損失量存在顯著的交互作用(Plt;0.001),前期公雞的氮損失量低于母雞,而后期高于母雞(Plt;0.05)。廣明2號(hào)肉雞氮損失主要源于毛屑脫落,毛屑脫落氮占總氮損失量的55.9%~65.1%,日齡和性別對(duì)毛屑脫落氮的占比存在顯著的交互作用(Plt;0.001),其中前期公雞毛屑脫落氮的占比顯著低于母雞,而后期顯著高于母雞(Plt;0.05)。
2.2" 廣明2號(hào)肉雞的氮平衡
由表3可知,隨著代謝日糧中蛋白含量的增加,氮的攝入量、排泄量和沉積量均顯著增加(Plt;0.001),肉雞的平均體重也顯著增加(P = 0.008)。飼喂低蛋白日糧(含有40%基礎(chǔ)日糧)使肉雞的氮沉積量接近于0或?yàn)樨?fù)值。
2.3" 廣明2號(hào)肉雞蛋白質(zhì)的維持需要量
廣明2號(hào)肉雞氮的攝入量與沉積量之間呈線性關(guān)系(圖1)。分別建立不同階段肉雞氮攝入量和沉積量之間的線性回歸方程,經(jīng)F檢驗(yàn),4個(gè)線性回歸模型均達(dá)到顯著水平(Plt;0.001),前期(12~15日齡)線性回歸方程的決定系數(shù)大于0.96,后期(31~34日齡)決定系數(shù)大于0.99。根據(jù)線性回歸方程可以計(jì)算出,12~15日齡公雞和母雞蛋白質(zhì)的維持需要量分別為2.36和3.16 g/kg BW0.75/d,日糧蛋白質(zhì)的利用效率為65.55%和58.73%;31~34日齡公雞和母雞蛋白質(zhì)的維持需要量分別為2.96和2.56 g/kg BW0.75/d,日糧蛋白的利用效率為79.42%和73.95%(表4)。根據(jù)內(nèi)源氮和毛屑脫落氮占總氮損失量的比例,可以計(jì)算出不同階段廣明2號(hào)肉雞內(nèi)源蛋白質(zhì)和毛屑脫落蛋白質(zhì)的維持需要量(表4)。
2.4" 廣明2號(hào)肉雞氨基酸的維持需要量
本研究收集了廣明2號(hào)肉雞的體表脫落物,測(cè)定了其中17種氨基酸的含量(表5)。將其中必需氨基酸的含量分別乘以毛屑蛋白質(zhì)的維持需要量,即可得出毛屑必需氨基酸的維持需要量。
內(nèi)源蛋白中氨基酸的組成無(wú)法直接測(cè)定。根據(jù)Dorigam等[7]測(cè)定的11種必需氨基酸的內(nèi)源維持需要量,可以計(jì)算出成年公雞內(nèi)源氮必需氨基酸的組成(表6),乘以內(nèi)源蛋白的維持需要量,即可計(jì)算出內(nèi)源必需氨基酸的維持需要量,與毛屑必需氨基酸的維持需要量相加,即可得出肉雞必需氨基酸的維持需要量(表7)。
不同方法測(cè)定的肉雞氨基酸維持需要量差異很大。Sakomura等[5]采用比較屠宰法測(cè)定了種母雞8種必需氨基酸的維持需要量(表8)。本研究根據(jù)成年雞[7]內(nèi)源必需氨基酸的組成模式,計(jì)算得出了廣明2號(hào)母雞的必需氨基酸維持需要量。如果采用楊志剛[19]測(cè)定的肉雞排泄物氨基酸組成模式,同樣可以計(jì)算出廣明2號(hào)母雞的必需氨基酸維持需要量(表8)。楊志剛[19]通過(guò)測(cè)定了AA肉雞羽毛氨基酸和排泄物中氨基酸的含量,計(jì)算出AA肉雞氨基酸的維持需要量(表8)。
3" 討" 論
3.1" 肉雞蛋白質(zhì)的維持需要量
研究人員通常采用氮平衡法測(cè)定家禽的蛋白質(zhì)維持需要量[14,23-26]。研究發(fā)現(xiàn),產(chǎn)蛋雞的蛋白質(zhì)維持需要量為每日1.94 g/kg BW0.75[23],肉種雞為每日2.28 g/kg BW0.75[26],49日齡公、母肉雞分別為每日1.32和1.75 g/kg BW0.75[24]。本研究發(fā)現(xiàn),
40% G、60% G、80% G、100% G.分別表示日糧蛋白含量為基礎(chǔ)日糧蛋白含量的40%、60%、80%、100%,即為40%處理組、60%處理組、80%處理組、100%處理組
40% G, 60% G, 80% G, 100% G. Represent the protein content of the diet is 40%, 60%, 80%, 100% of the protein content of the base diet respectively, that is, 40% treatment group, 60% treatment group, 80% treatment group, 100% treatment group, respectively
31~34日齡廣明2號(hào)公雞和母雞蛋白質(zhì)維持需要量分別為2.96和2.56 g/kg BW0.75/d,明顯高于Longo等[24]的研究結(jié)果,也高于產(chǎn)蛋雞和肉種雞的結(jié)果。一般氮平衡試驗(yàn)收集排泄物時(shí),需要去除羽毛、皮屑等脫落物。當(dāng)?shù)胶鉃榱銜r(shí),攝入的氮僅用于維持內(nèi)源氮的損失,測(cè)定結(jié)果為內(nèi)源蛋白的維持需要量。本研究雖然也采用氮平衡法,但收集排泄物時(shí)連同羽毛、皮屑脫落物一同收集。氮平衡為零時(shí),攝入的氮用于維持內(nèi)源氮和皮屑氮的損失,類似于比較屠宰法,測(cè)定結(jié)果為包括內(nèi)源蛋白和皮屑蛋白在內(nèi)的維持需要量,因此高于常規(guī)氮平衡法。Nogueira等[14]分別用比較屠宰法和常規(guī)氮平衡法測(cè)定鵪鶉蛋白質(zhì)的維持需要量,證明比較屠宰法的測(cè)定結(jié)果高于氮平衡法;Basaglia等[15]在產(chǎn)蛋雞上也得到了相同結(jié)論。
根據(jù)內(nèi)源氮和皮屑氮的比例,計(jì)算出廣明2號(hào)公、母雞內(nèi)源蛋白質(zhì)的維持需要量為每日1.04和1.24 g/kg BW0.75,與Longo等[24]采用氮平衡法測(cè)定的結(jié)果較為接近。楊志剛[19]采用無(wú)氮日糧測(cè)定6周齡肉雞內(nèi)源蛋白的維持需要量為每日0.83 g/kg BW0.75 ;Li等[2]采用相同方法測(cè)定成年烏骨公雞的內(nèi)源蛋白需要量為每日1.07 g/kg BW0.75。這些結(jié)果也與本研究的結(jié)果較為接近。
脫落蛋白需要量為每日1.02 g/kg BW0.75,采用相同方法,Li等[2]和賀建華等[20]測(cè)定成年泰和烏骨雞和肉鴨的毛屑蛋白需要量,分別為每日0.93和1.35 g/kg BW0.75。本研究根據(jù)毛屑脫落氮的比例,計(jì)算出廣明2號(hào)肉雞31~34日齡公、母雞毛屑蛋白的維持需要量分別為每日1.93和1.53 g/kg BW0.75,高于上述研究結(jié)果。采用低氮日糧測(cè)定毛屑蛋白損失量的基礎(chǔ)是維持家禽體重和體組成不變,但實(shí)測(cè)時(shí)很難保證這一點(diǎn)??赡苡捎陲曃沟偷占Z時(shí)家禽體蛋白沉積出現(xiàn)正增長(zhǎng),導(dǎo)致測(cè)定的毛屑損失量偏低。
3.2" 肉雞脫落毛屑蛋白質(zhì)中氨基酸的組成
肉雞體表脫落物包括羽毛和皮屑。研究人員一般按照羽毛氨基酸的組成模式,計(jì)算毛屑氨基酸的維持需要量[2,18-20]。本研究測(cè)定了肉雞毛屑氨基酸的組成。與肉雞羽毛氨基酸組[19]相比,毛屑中蛋氨酸的含量高了32%,脯氨酸和丙氨酸含量高了28%和25%,而酪氨酸低了32%,其他氨基酸的含量與羽毛氨基酸組成接近。Essary等[27]測(cè)定了家禽皮膚氨基酸的組成,與羽毛氨基酸組成相比,皮膚中蛋氨酸的含量高了59%,脯氨酸和丙氨酸含量高了42%和47%,而酪氨酸低了91%??梢?jiàn),由于摻雜了部分皮膚脫落物,毛屑氨基酸組成模式與羽毛氨基酸組成模式存在較大差異。如果使用羽毛氨基酸組成計(jì)算毛屑氨基酸的維持需要量,可能會(huì)低估蛋氨酸的維持需要量。
3.3" 肉雞內(nèi)源蛋白質(zhì)氨基酸的組成
家禽排泄物中的內(nèi)源氮包括來(lái)源于腸道脫落或分泌的蛋白形態(tài)的氮,以及來(lái)源于尿液的非蛋白形態(tài)的氮,這部分氮主要是家禽體蛋白周轉(zhuǎn)過(guò)程中氨基酸氧化代謝形成的[5]。蛋白氮可以直接測(cè)定氨基酸的組成,而非蛋白氮的氨基酸組成無(wú)法測(cè)定。研究發(fā)現(xiàn),內(nèi)源氮中大部分為非蛋白氮[2,19]。Hurwitz等[18]提出的方法是將所有內(nèi)源氮按照蛋白氮的氨基酸組成,計(jì)算內(nèi)源氨基酸的損失量,再用排泄物中的肌酸含量來(lái)校正蛋氨酸、精氨酸和甘氨酸的損失量,由于肌酸的含量相較內(nèi)源氮而言很低,因此這種估測(cè)內(nèi)源氨基酸損失量的方法可能存在較大誤差。Dorigam等[7]采用氮平衡法測(cè)定了成年公雞11種必需氨基酸的維持需要量,可以計(jì)算出成年肉雞內(nèi)源氮中必需氨基酸的組成模式。如果成年肉雞和生長(zhǎng)期肉雞內(nèi)源氨基酸的組成相似,那么采用Dorigam等[7]的結(jié)果相較直接使用排泄物中氨基酸的組成更為合理。
3.4" 肉雞必需氨基酸的維持需要量
測(cè)定家禽氨基酸的維持需要量一般采用氮平衡試驗(yàn)[3,7-10]或比較屠宰法[5,11-13]測(cè)定。研究人員比較了這兩種方法,發(fā)現(xiàn)氮平衡法的測(cè)定結(jié)果低于比較屠宰法[14-15]。Laflamme 和 Hannah[16]認(rèn)為,氮平衡法低估了家禽氨基酸的維持需要量。主要由于氮平衡試驗(yàn)測(cè)定的僅為內(nèi)源氨基酸的維持需要量,而比較屠宰法測(cè)定的是包括內(nèi)源和毛屑脫落氨基酸在內(nèi)的總的維持需要量。因此,比較屠宰法更加合理,Sakomura等[5]采用比較屠宰法測(cè)定了成年母雞8種必需氨基酸的維持需要量(表8)。
比較屠宰法雖然合理,但需要通過(guò)獨(dú)立試驗(yàn),研究每一種氨基酸的維持需要量,測(cè)試工作量巨大。Hurwitz 等[18]提出的方法相對(duì)簡(jiǎn)便快捷,但測(cè)定毛屑脫落氮的損失量和內(nèi)源氨基酸組成模式很容易產(chǎn)生誤差。本研究實(shí)際測(cè)定了廣明2號(hào)肉雞毛屑脫落氮的損失量及氨基酸組成,并采用Dorigam等[7]得出的成年公雞內(nèi)源氨基酸組成模式,最終計(jì)算出的廣明2號(hào)肉雞必需氨基酸的維持需要量(表7)。與Sakomura等[5]測(cè)定的成年母雞必需氨基酸維持需要量(比較屠宰法)相比,本研究測(cè)定的結(jié)果非常接近(表8),其中廣明2號(hào)母雞纈氨酸(146 vs. 154 mg/kg BW0.75)和蘇氨酸(108 vs. 133 mg/kg BW0.75)的維持需要量略低于成年母雞,其他5種必需氨基酸的維持需要量略高于成年母雞。家禽氨基酸的維持量主要與體蛋白含量有關(guān)。雖然肉雞體蛋白的累積生長(zhǎng)符合Gompertz模型,后期增加較為緩慢[28-29],但體蛋白的含量基本維持穩(wěn)定。研究發(fā)現(xiàn),文昌母雞從4周齡到17周齡,體蛋白含量在20%~23%之間變化[30-31]。由此推測(cè)成年母雞氨基酸的維持需要量應(yīng)該與生長(zhǎng)期母雞相似。本研究測(cè)定的廣明2號(hào)母雞必需氨基酸的維持需要量與Sakomura等[5]采用比較屠宰法測(cè)定的成年母雞必需氨基酸維持需要量非常接近,表明本研究采用的方法較為合理。如果使用排泄物中氨基酸的含量(楊志剛[19] )計(jì)算,廣明2號(hào)母雞的蛋氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸和精氨酸維持需要量將明顯低于Sakomura等[5]的結(jié)果(表8),表明在計(jì)算內(nèi)源氨基酸維持需要量時(shí),采用成年公雞[7]內(nèi)源氨基酸的組成模式比采用排泄物中氨基酸的組成模式合理。采用Hurwitz等[18]的方法,楊志剛[19]測(cè)定了AA肉雞氨基酸的維持需要量(表8),每種必需氨基酸的維持需要量均低于本研究的測(cè)定結(jié)果,也明顯低于Sakomura等[5]測(cè)定的結(jié)果,推測(cè)可能由于該方法估測(cè)的毛屑氮損失量偏低所致。
4" 結(jié)" 論
本研究改進(jìn)了Hurwitz等[18]測(cè)定家禽氨基酸維持需要量的方法,測(cè)定出廣明2號(hào)肉雞必需氨基酸的維持需要量,為今后建立肉雞氨基酸需要量預(yù)測(cè)模型提供了基礎(chǔ)。本研究的測(cè)定結(jié)果與比較屠宰法的測(cè)定結(jié)果更為接近,表明本方法相較原方法更為合理,但還需進(jìn)一步驗(yàn)證改良方法的可靠性。
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(編輯" 范子娟)