【摘要】 目的 分析景德鎮(zhèn)地區(qū)孕婦地中海貧血基因型分布特征和臨床表型。方法 選取2023年4月—2024年1月景德鎮(zhèn)市5 539名妊娠9～13+6周的孕婦為研究對象，檢出（α、β）地中海貧血基因攜帶者共253例，同時選取景德鎮(zhèn)市婦幼保健院就診的相同孕周的100名非（α、β）地中海貧血基因攜帶者孕婦，所有入選者均進行（α、β）地中海貧血基因檢測，記錄（α、β）地中海貧血基因檢測結(jié)果，分析基因類型、分布特征。另外，對比景德鎮(zhèn)市婦幼保健院就診的80例（α、β）地中海貧血基因攜帶者和100名相同孕周的非（α、β）地中海貧血基因攜帶者的血紅蛋白（hemoglobin，Hb）、平均紅細胞體積（mean corpuscular volume，MCV）、平均紅細胞血紅蛋白量（mean corpuscular hemoglobin，MCH）水平。結(jié)果 5 539名孕婦進行地中海貧血基因檢測，共檢出253例攜帶者，其中181例為α-地中海貧血，72例為β-地中海貧血。α-地中海貧血以αα/-α3.7基因型最為常見，占比為59.91%（103/181），αα/--SEA基因型（31.49%）次之;β-地中海貧血中以IVS-II-654雜合基因型最為常見，占比為55.56%（40/72），CD41-42雜合基因型（15.28%）次之。非（α、β）地中海貧血基因攜帶者Hb（126.31±12.63）g/L、MCV（94.73±5.19）fL、MCH（30.26±1.52）pg，均高于（α、β）地中海貧血基因攜帶者的（95.45±8.67）g/L、（68.56±4.35）fL、（22.65±1.43）pg，差異有統(tǒng)計學意義（Plt;0.05）。結(jié)論 景德鎮(zhèn)為（α、β）地中海貧血高發(fā)地區(qū)，應重視產(chǎn)前篩查工作，對孕婦及其家屬進行優(yōu)生優(yōu)育指導，以降低重癥地中海貧血患兒出生率，改善母嬰結(jié)局，提高人口素質(zhì)。

【關(guān)鍵詞】 地中海貧血;產(chǎn)前診斷;基因型分布特征;臨床表型

文章編號：1672-1721（2024）33-0001-03" " "文獻標志碼：A" " "中國圖書分類號：R556;R446.11

地中海貧血（簡稱“地貧”）是一種慢性溶血性疾病，主要由珠蛋白合成障礙導致，根據(jù)合成障礙的類型可分為α-地貧、β-地貧。地貧已成為最常見的單基因遺傳病之一[1]。截至目前，臨床尚無治療地貧的特效方法，應積極開展產(chǎn)前篩查工作，盡可能避免或減少重癥地貧兒出生，以降低地貧發(fā)生率，減輕家庭和社會負擔，提高整體人口素質(zhì)[2-3]。我國地貧發(fā)生呈現(xiàn)出明顯的地域特征，江西亦是地貧高發(fā)地區(qū)，但目前尚未見關(guān)于景德鎮(zhèn)市孕婦地貧基因型分布特征、檢出率和血液學臨床表型分析的報道[4]。了解景德鎮(zhèn)市地貧基因型分布特征和臨床表型，對完善三級預防體系、助力地貧防控有著深遠的意義，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2023年4月—2024年1月景德鎮(zhèn)市5 539名妊娠9～13+6周的孕婦為研究對象，檢出（α、β）地貧基因攜帶者共253例，同時選取景德鎮(zhèn)市婦幼保健院就診的相同孕周的100名非（α、β）地貧基因攜帶者孕婦，均為景德鎮(zhèn)常住居民，居住時間gt;6個月。孕婦年齡22～41歲，平均（29.05±3.16）歲;體質(zhì)量42～78 kg，平均（60.23±4.31）kg。

納入標準：均為已婚、單胎、自然受孕者;孕婦及其家屬具備基本的溝通理解能力;知情本研究，自愿進行地貧篩查。

排除標準：其他原因不得不終止妊娠;伴有精神疾病或認知障礙;伴有其他干擾血液學結(jié)果的疾病;依從性較差或拒絕參與本研究。

1.2 方法

所有入選者進行（α、β）地貧基因檢測。（1）采集入選者2 mL外周血送檢，標本采集后立即送檢，標本送檢時需采取低溫保存。血液標本在4 ℃時保存不超過3 d，-20 ℃時保存不超過3個月。（2）檢測方法

為聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）+導流雜交技術(shù)，同時檢測3種缺失型基因突變（--SEA、-α3.7、-α4.2），3種非缺失型基因突變（αCSα、αQSα和αWSα），以及CD41-42、CD43、IVS-II-654、CD17、CD14-15、-28、-29、CD71-72、βE、IVS-I-1、CD27-28、IVS-I-5、CAP、int、CD31、-30、-32常見β-地貧基因突變。試劑盒購自廣東凱普醫(yī)藥科技有限公司。（3）樣本提取。采取磁珠法自動提取，核酸在裂解液作用下被釋放出來，在結(jié)合液的作用下結(jié)合在磁珠上，結(jié)合了核酸的磁珠被磁性材料捕獲，通過洗滌過程將雜質(zhì)去除，最后在洗脫液的作用下將核酸從磁珠上洗脫下來并收集保存。PCR擴增流程為分裝試劑、加樣、上機擴增，35個循環(huán)。（4）隨后進行特異性擴增，將擴增產(chǎn)物與標記不同缺失或突變類型地貧探針的尼龍膜在導流雜交儀上進行導流雜交（flow-through hybridization），然后通過化學顯色判讀結(jié)果。（5）結(jié)果判讀。觀察整張膜上出現(xiàn)的藍紫色斑點，無藍紫色斑點出現(xiàn)為陰性;若出現(xiàn)藍紫色斑點則該位點為地貧突變或缺失的雜合子;若在突變或缺失檢測探針處出現(xiàn)紫色斑點，相應的正常對照探針處無藍紫色斑點，則該位點為地貧突變或缺失的純合子。（6）對地貧攜帶者進行優(yōu)生優(yōu)育指導、規(guī)范管理，同時對攜帶者配偶進行地貧基因檢測，若夫妻雙方均為同型地貧基因攜帶者，需評估子代患重型地貧的風險，防止重癥地貧患兒的出生。

1.3 觀察指標

記錄（α、β）地貧基因檢測結(jié)果，分析基因類型、分布特征。對景德鎮(zhèn)市婦幼保健院就診的80例（α、β）地貧基因攜帶者孕婦和相同孕周的100名非（α、β）地貧基因攜帶者孕婦的MCV、Hb、MCH進行比對分析。這些指標的正常范圍參考值為Hb 115～150 g/L，MCV 82～100 fL，MCH 27～34 pg。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計學軟件分析數(shù)據(jù)，計量資料以x±s表示，采用t檢驗，計數(shù)資料以百分比表示，采用χ2檢驗，Plt;0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 （α、β）地貧基因攜帶者的檢出率

實驗室2023年4月—2024年1月為5 539名孕婦進行地貧基因檢測，共檢出253例（α、β）地貧基因攜帶者，其中，1例αα/αws純合突變，1例IVS-II-654和--SEA復合雜合，1例βE純合復合αα/-α3.7，5例外籍孕婦。夫妻雙方共同攜帶地貧基因7對，高風險夫妻對2對。產(chǎn)前診斷阻斷重癥地貧胎兒1例。

2.2 （α、β）地貧基因類型、分布特征

253例攜帶者中，181例為α-地貧，72例為β-地貧。α-地貧以αα/-α3.7基因型最為常見，占比為59.91%（103/181），αα/--SEA基因型（31.49%）次之;β-地貧中以IVS-II-654雜合基因型最為常見，占比為55.56%（40/72），CD41-42雜合基因型（15.28%）次之，見表1。

2.3 Hb、MCV、MCH水平

非（α、β）地貧基因攜帶者Hb、MCV、MCH水平均高于（α、β）地貧基因攜帶者，差異有統(tǒng)計學意義（Plt;0.05），見表2。

3 討論

全世界每年有超過5萬例地貧患兒出生，根據(jù)其不同的遺傳組合可分為重型、中間型、輕型、靜止型，靜止型、輕型患兒不會出現(xiàn)明顯不良反應，而中間型患兒可能會出現(xiàn)肝脾腫大、乏力等貧血癥狀，隨著年齡增加上述癥狀會持續(xù)加重[5]。重型β-地貧以及中間型α-地貧患兒多在出生6個月內(nèi)出現(xiàn)進行性貧血，癥狀嚴重，需靠輸血維持生命，加之高昂的治療費用，夭折率較高，而重型α-地貧患兒多于出生后48 h死亡，給患兒家庭和社會帶來沉重負擔[6-7]。我國地貧多發(fā)于長江以南各省區(qū)，尤其是廣東、廣西、海南等，但受人口遷徙及南北通婚影響，呈現(xiàn)向北蔓延趨勢，地貧防控、產(chǎn)前篩查已成為全社會關(guān)注的重點[8-9]。

近些年，隨著人們生活水平的不斷提高，人們越發(fā)重視出生人口質(zhì)量，加之產(chǎn)科醫(yī)學的快速發(fā)展，產(chǎn)前檢查內(nèi)容越發(fā)全面，越來越多的遺傳疾病被及時檢出[10]。（α、β）地貧基因攜帶者非孕期會呈現(xiàn)不同程度的貧血，妊娠后不僅會加重貧血程度，還會導致與貧血相關(guān)的產(chǎn)科合并癥和并發(fā)癥的發(fā)生風險增加。（α、β）地貧是一種危害性較大的遺傳疾病。隨著學者不斷深入研究，人們逐漸認識并重視疾病防治工作，地貧檢出率呈現(xiàn)明顯升高趨勢，大大降低了重癥地貧患兒出生率，減輕了社會和家庭的負擔[11]。若夫妻雙方均為同型地貧基因攜帶者，將大大增加生育重型地貧患兒的風險[12]。開展孕婦地貧基因的規(guī)范檢測，并對攜帶者孕婦進行臨床表型分析和規(guī)范管理，是控制重型地貧患兒出生和改善母嬰結(jié)局的重要舉措[13]。本研究結(jié)果顯示，5 539名孕婦進行地貧基因檢測，共檢出253例攜帶者，其中181例為α-地貧、72例為β-地貧。α-地貧以αα/-α3.7基因型最為常見，占比為59.91%（103/181），αα/--SEA基因型（31.49%）次之;β-地貧中以IVS-II-654雜合基因型最為常見，占比為55.56%（40/72），CD41-42雜合基因型（15.28%）次之。非（α、β）地貧基因攜帶者Hb、MCV、MCH水平均高于（α、β）地貧基因攜帶者。上述結(jié)果表明景德鎮(zhèn)為（α、β）地貧高發(fā)地區(qū)。應重視產(chǎn)前篩查工作，對孕婦及其家屬進行優(yōu)生優(yōu)育指導，以降低重癥地貧患兒出生率，改善母嬰結(jié)局，提高人口素質(zhì)。不同基因型別的（α、β）地貧在臨床診斷時極易出現(xiàn)漏診、誤診。由于靜止型和輕度型地貧缺乏明顯癥狀表現(xiàn)，二者易被混淆，影響后續(xù)干預方案的制定。鑒于此，臨床應加強對不同基因型別的篩查，必要時可通過基因檢測手段進行區(qū)分，以提高檢出率和準確率[14]。隨著生育政策的改變，地貧防控問題日趨嚴重，尤其針對高發(fā)地區(qū)，應加大宣傳力度，普及疾病知識和危害性，增強人們產(chǎn)前篩查意識，盡可能避免或減少地貧患兒出生[15]。

綜上所述，景德鎮(zhèn)為（α、β）地貧高發(fā)地區(qū)，應重視產(chǎn)前篩查工作，對孕婦及其家屬進行優(yōu)生優(yōu)育指導，以減少重癥地貧患兒的出生，改善母嬰結(jié)局，提高人口素質(zhì)。

參考文獻

[1] KHAMPHIKHAM P，SAKKHACHORNPHOP S，PONGSATHA S，et al.Strong positive dichlorophenolindophenol precipitation suggests Hb Dhonburi （or Hb Neapolis）（HBB：c.380Tgt;G） inheritance in a couple at risk for severe β-thalassemia[J].Hemoglobin，2022，46（3）：184-186.

[2] 莊建龍，張娜，王元白，等.中國福建泉州地區(qū)育齡夫婦地中海貧血基因分析及產(chǎn)前診斷[J].中國實驗血液學雜志，2022，30（1）：217-221.

[3] 陳曉俊，江帆，周劍英，等.中國廣東人群δ地中海貧血基因譜和血液學表型研究[J].中華檢驗醫(yī)學雜志，2024，47（1）：49-56.

[4] 岳林林，何穎，黃云，等.贛南地區(qū)α-地貧和β-地貧植入前胚胎遺傳學檢測技術(shù)平臺建立及臨床應用[J].中國計劃生育學雜志，2022，30（11）：2526-2530，2536.

[5] 劉靜，黃宏耀.湖北隨州地區(qū)孕婦α-地中海貧血產(chǎn)前篩查及基因型分布特點研究[J].陜西醫(yī)學雜志，2023，52（5）：541-544，557.

[6] 蒙秀堅，陳秀勤，覃煒玲，等.廣西梧州地區(qū)地中海貧血基因突變類型及血紅蛋白A2檢測結(jié)果分析[J].廣西醫(yī)科大學學報，2022，39（6）：970-974.

[7] 盧恒，覃茜，李金花，等.廣西百色地區(qū)地中海貧血的基因診斷回顧分析[J].中國實驗血液學雜志，2021，29（3）：865-868.

[8] CONSTANTINOU C G，KARITZI E，BYROU S，et al.Optimized droplet digital pcr assay on cell-free DNA samples for non-invasive prenatal diagnosis：application to beta-thalassemia[J].Clin Chem，2022，68（8）：1053-1063.

[9] 唐坤強，曾仲萍，賓成超，等.4 059例地中海貧血的產(chǎn)前篩查和基因診斷分析[J].中國婦幼健康研究，2023，34（5）：68-72.

[10] 施競超，毛曉婷.金華地區(qū)460例孕婦地中海貧血基因檢測及產(chǎn)前診斷結(jié)果分析[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2023，33（16）：1983-1985.

[11] 鞠愛萍，付曉彤，劉艷霞，等.廣州市花都地區(qū)罕見珠蛋白生成障礙性貧血基因型分布及血液學特征[J].檢驗醫(yī)學與臨床，2023，20" （11）：1522-1526，1531.

[12] 吳鵬，謝丹，吳江芬，等.貴州地區(qū)15例罕見β-地中海貧血攜帶者基因型及表型分析[J].中國醫(yī)藥導報，2023，20（20）：97-100，133.

[13] 李苗苗，鄭梓琳，柯君怡，等.廣州市39 928對育齡期夫婦地中海貧血基因診斷的篩查情況[J].國際遺傳學雜志，2022，45（5）：341-346.

[14] 梁偉達，莊錫偉，彭健橋，等.佛山市禪城地區(qū)地中海貧血基因分型流行病學分析[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志，2021，29（7）：1018-1020.

[15] 黃媛媛，黃俊，葉麗花，等.廣西來賓地區(qū)人群地中海貧血罕見基因型檢出情況分析[J].公共衛(wèi)生與預防醫(yī)學，2023，34（1）：131-135.