關(guān)鍵詞：牛肝菌目；大型真菌；物種多樣性

中圖分類(lèi)號(hào)：Q949.32 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

海南熱帶雨林國(guó)家公園鸚哥嶺片區(qū)位于海南島中南部，跨白沙、瓊中、五指山和樂(lè)東4 縣市，總面積882 km²，主要保護(hù)對(duì)象為海南熱帶雨林生態(tài)系統(tǒng)。鸚哥嶺片區(qū)屬中山山地地貌，所處黎母嶺山脈南段，呈東北—西南走向，最高峰為鸚哥嶺山峰，海拔1812 m，最低海拔為170 m，相對(duì)高差1642 m。該片區(qū)屬熱帶海洋性季風(fēng)氣候，年均氣溫20～24 ℃，年平均降水量為1800～2700 mm，雨量充沛，是海南的主要水源地。區(qū)域內(nèi)植被類(lèi)型豐富，包括了低地?zé)釒в炅帧釒Ъ居炅?、熱帶山地雨林、熱帶山地常綠闊葉林、熱帶針葉林和熱帶山頂矮林的完整植被譜帶[1]，為大型真菌的生存繁衍提供了充分條件。

海南熱帶雨林國(guó)家公園管理局鸚哥嶺分局是在原海南鸚哥嶺省級(jí)自然保護(hù)區(qū)管理站、原海南佳西省級(jí)自然保護(hù)區(qū)管理站和原海南省南高嶺林場(chǎng)的基礎(chǔ)上組建的。原海南鸚哥嶺省級(jí)自然保護(hù)區(qū)在其成立初期的生物資源本底調(diào)查中，僅記錄了大型真菌76 種[1]，包括牛肝菌目真菌2 科5 屬5 種。原佳西省級(jí)自然保護(hù)區(qū)記錄到大型真菌51屬117 個(gè)分類(lèi)單元[2]（包括變種），包括牛肝菌目真菌1科1屬2種。之后，隨著對(duì)鸚哥嶺片區(qū)牛肝菌目真菌資源野外調(diào)查的加強(qiáng)，同時(shí)利用大型真菌監(jiān)測(cè)平臺(tái)進(jìn)行常態(tài)化監(jiān)測(cè)，截至到2020年底，在鸚哥嶺片區(qū)共發(fā)現(xiàn)牛肝菌目真菌5 科31 屬62 種[3]。海南熱帶雨林國(guó)家公園正式成立后，通過(guò)對(duì)鸚哥嶺片區(qū)牛肝菌目真菌資源進(jìn)行專(zhuān)項(xiàng)深入研究，以鸚哥嶺為模式產(chǎn)地的16 個(gè)牛肝菌新種和1 個(gè)海南新記錄種又陸續(xù)被發(fā)現(xiàn)[4-14]。

牛肝菌目真菌中的大部分種類(lèi)能與殼斗科、龍腦香科、松科等植物形成共生關(guān)系[15-16]，對(duì)于森林生態(tài)系統(tǒng)平衡的維護(hù)、退化生態(tài)系統(tǒng)中的植被恢復(fù)以及植樹(shù)造林具有重要作用[17]。同時(shí)，牛肝菌目的多種真菌具有食用及藥用價(jià)值，少部分種類(lèi)還具有毒性[18-20]，因此，該目真菌是大型真菌中的熱點(diǎn)研究類(lèi)群。本研究通過(guò)對(duì)鸚哥嶺片區(qū)牛肝菌目真菌資源進(jìn)行較為全面的調(diào)查，以期進(jìn)一步了解該區(qū)域大型真菌資源的物種多樣性，發(fā)現(xiàn)該區(qū)域具有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值的真菌資源，為海南熱帶雨林國(guó)家公園大型真菌資源的保護(hù)、管理和利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料研究材料為2009—2023 年在鸚哥嶺片區(qū)內(nèi)通過(guò)野外采集得到的標(biāo)本。憑證標(biāo)本保存于海南醫(yī)科大學(xué)真菌標(biāo)本館（Fungal Herbarium of HainanMedical University， FHMU）。

1.2 方法

1.2.1 調(diào)查方法 野外調(diào)查采用踏查法。調(diào)查區(qū)域?yàn)楹Ｄ蠠釒в炅謬?guó)家公園鸚哥嶺片區(qū)全域。在野外調(diào)查過(guò)程中，對(duì)大型真菌的生境、子實(shí)體等進(jìn)行拍照，記錄標(biāo)本采集地點(diǎn)的經(jīng)緯度及海拔，采集標(biāo)本并現(xiàn)場(chǎng)編號(hào)；填寫(xiě)野外蘑菇采集記錄表格，詳細(xì)記錄每號(hào)標(biāo)本新鮮子實(shí)體各部位特征信息。制作用于提取總DNA 的硅膠干燥材料；后將子實(shí)體在烘干機(jī)內(nèi)于50 ℃烘干過(guò)夜，待標(biāo)本完全干透后用自封袋裝好標(biāo)本。

1.2.2 形態(tài)學(xué)研究 包括宏觀(guān)形態(tài)特征和顯微結(jié)構(gòu)特征的觀(guān)察和測(cè)量。標(biāo)本的宏觀(guān)形態(tài)觀(guān)察包括子實(shí)體大小、顏色、菌蓋及菌柄特征、菌肉厚度、菌管顏色及長(zhǎng)度（或菌褶顏色及寬度）、菌孔直徑（或每厘米所含菌褶數(shù)量）、菌管（或菌褶）著生方式、菌柄基部菌絲顏色、子實(shí)層體和菌肉受傷后顏色變化等。對(duì)干燥標(biāo)本的顯微特征進(jìn)行觀(guān)察包括在光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察擔(dān)孢子大小、形狀、表面特征，擔(dān)子形狀、大小、擔(dān)子小梗數(shù)量和長(zhǎng)度，囊狀體大小、形狀，菌蓋表皮及菌柄表皮等特征。顯微結(jié)構(gòu)觀(guān)察以5%的KOH 作為浮載劑，用1%的剛果紅進(jìn)行染色，測(cè)量數(shù)據(jù)并繪圖。擔(dān)孢子大小在100倍物鏡下，測(cè)量其側(cè)面觀(guān)（臍突位于孢子一側(cè)時(shí)）的長(zhǎng)度和寬度，每個(gè)標(biāo)本測(cè)量20個(gè)以上的成熟擔(dān)孢子。根據(jù)實(shí)際需要，利用掃描電鏡觀(guān)察擔(dān)孢子紋飾，并與國(guó)內(nèi)外相關(guān)的標(biāo)本進(jìn)行對(duì)比研究。

1.2.3 分子系統(tǒng)發(fā)育研究 采用改良的CTAB 法提取標(biāo)本的總DNA，針對(duì)不同目的片段選擇對(duì)應(yīng)的擴(kuò)增引物和反應(yīng)體系進(jìn)行PCR 擴(kuò)增及純化，之后選擇核糖體大亞基（nrLSU）、編碼核糖體RNA的內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)（ ITS ）、翻譯延長(zhǎng)因子1-α（tef1-α）、編碼RNA 聚合酶第一大亞基（rpb1）、編碼RNA 聚合酶II 第二大亞基（rpb2）等基因片段進(jìn)行多基因測(cè)序，PCR 產(chǎn)物直接測(cè)序失敗的樣品，采用克隆測(cè)序法獲得序列。得到的序列用軟件SeqMan 進(jìn)行拼接，后用軟件MUSCLE v3.6進(jìn)行序列對(duì)齊，在Bioedit 上進(jìn)行調(diào)整，確定序列邊界，比對(duì)后采用MrBayes 和RAxML 等軟件進(jìn)行單獨(dú)分析和聯(lián)合分析，構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)。物種名稱(chēng)參照真菌索引網(wǎng)站（http：//www.indexfungorum.org）中最新的研究成果和李玉等[21]所著的《中國(guó)大型菌物資源圖鑒》一書(shū)。

1.2.4 資源評(píng)價(jià) 根據(jù)物種分類(lèi)鑒定結(jié)果，對(duì)鸚哥嶺片區(qū)牛肝菌目真菌科、屬、種的數(shù)量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，并參考相關(guān)文獻(xiàn)[22]，將物種數(shù)≥10 種的科定為優(yōu)勢(shì)科，物種數(shù)≥5 種的屬定為優(yōu)勢(shì)屬。牛肝菌目真菌的食、藥用價(jià)值及有毒物種的分析參考相關(guān)文獻(xiàn)[23-27]中所報(bào)道的食用菌、藥用菌以及毒菌的物種名錄。

2 結(jié)果與分析

根據(jù)對(duì)鸚哥嶺片區(qū)野外采集的大型真菌標(biāo)本進(jìn)行整理和鑒定，區(qū)內(nèi)生長(zhǎng)分布的牛肝菌目真菌共82 種（表1），隸屬于5科37屬。其中包括了以鸚哥嶺片區(qū)為模式產(chǎn)地的2個(gè)屬和26個(gè)物種（圖1、圖2），2個(gè)中國(guó)新記錄種和20個(gè)海南新記錄種。此外，該牛肝菌目真菌名錄中還包括海南熱帶雨林國(guó)家公園優(yōu)先保護(hù)物種21個(gè)（表1），較為全面地反映了鸚哥嶺片區(qū)牛肝菌目真菌的物種多樣性。

2.1 牛肝菌目真菌優(yōu)勢(shì)科屬組成

2.1.1 優(yōu)勢(shì)科組成 根據(jù)表2 的統(tǒng)計(jì)結(jié)果，種類(lèi)最多的優(yōu)勢(shì)科為牛肝菌科，共包含32屬75 種，占總種數(shù)的91.46%。

2.1.2 優(yōu)勢(shì)屬組成 鸚哥嶺片區(qū)牛肝菌目真菌優(yōu)勢(shì)屬分析結(jié)果顯示（表3），含5 種以上的優(yōu)勢(shì)屬有6個(gè)，合計(jì)40種，占總種數(shù)的48.78%。種類(lèi)最多的優(yōu)勢(shì)屬為褶孔牛肝菌屬，包含9 種，占總種數(shù)的10.98%；第二大屬是金牛肝菌屬，包含7種，占總種數(shù)的8.54%；其次是條孢牛肝菌屬、新牛肝菌屬、松塔牛肝菌屬和粉孢牛肝菌屬，均包含6 種，均占總種數(shù)的7.32%。

2.2 鸚哥嶺片區(qū)牛肝菌目真菌資源評(píng)價(jià)

根據(jù)統(tǒng)計(jì)，鸚哥嶺片區(qū)牛肝菌目真菌中，具有食用價(jià)值的有20 種，具有藥用價(jià)值的有4 種（其中食藥兼用菌2 種），有毒的種類(lèi)8 種。

2.2.1 食用菌資源 鸚哥嶺片區(qū)牛肝菌目中的可食用種類(lèi)占總數(shù)的24.39%，其中較常食用的種類(lèi)包括華麗新牛肝菌（Neoboletus magnificus）、暗褐新牛肝菌（N. obscureumbrinus）、皺蓋牛肝菌（Rugiboletus extremiorientalis）、暗褐脈柄牛肝菌（ Phlebopus portentosus ） 和中華腐生牛肝菌（Buchwaldoboletus xylophilus）等。華麗新牛肝菌最早描述于云南，是當(dāng)?shù)刂匾囊吧秤镁蚱渥訉?shí)體各部位受傷后變?yōu)樗{(lán)色，故稱(chēng)其為“見(jiàn)手青”，需要注意的是，該種牛肝菌生食會(huì)出現(xiàn)幻覺(jué)，要完全煮熟后方可食用。暗褐新牛肝菌不僅子實(shí)體很大，而且非常美味。皺蓋牛肝菌在我國(guó)云南地區(qū)被稱(chēng)為“黃癩頭”，在各地的農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)有銷(xiāo)售，頗受人們歡迎。暗褐脈柄牛肝菌又名“黑牛肝”，個(gè)體非常大，菌蓋直徑有時(shí)可超過(guò)20 cm，是牛肝菌目中第一種可以人工栽培的種類(lèi)，在我國(guó)已成功實(shí)現(xiàn)大規(guī)模人工栽培。中華腐生牛肝菌已于2021 年在云南成功實(shí)現(xiàn)小規(guī)模人工栽培[28]，成為世界上第二種可人工栽培的牛肝菌。本研究調(diào)查到的褶孔牛肝菌屬（Phylloporus）物種均可食用。此外，通過(guò)訪(fǎng)談了解到，海南當(dāng)?shù)乩枳灏傩找矔?huì)采食豆馬勃（Pisolithus arhizus）幼嫩的子實(shí)體。

2.2.2 藥用菌資源 鸚哥嶺片區(qū)牛肝菌目中可藥用的種類(lèi)占總數(shù)的4.88%， 它們是橙牛肝菌（Crocinoboletus rufoaureus）、暗褐脈柄牛肝菌、豆馬勃和多根硬皮馬勃（Scleroderma polyrhizum）。有研究表明，橙牛肝菌粗多糖的抗氧化活性較顯著，具有開(kāi)發(fā)為天然抗氧化劑的潛力[29]。暗褐脈柄牛肝菌具有對(duì)急性肝損傷及神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用，同時(shí)還具有抗氧化、抗高血壓、抗菌、抗癌等活性[30]。豆馬勃具有止血、消腫的功效，并具有殺菌、抗氧化及抗腫瘤的活性。多根硬皮馬勃具有消腫止血的功效，可用于治療外傷出血、凍瘡流水，此外其液體發(fā)酵液還具有抗炎鎮(zhèn)痛作用。

2.2.3 毒菌資源 鸚哥嶺片區(qū)牛肝菌目中有毒的種類(lèi)占總數(shù)的9.76%。其中黑紫變黑牛肝菌毒性較大，中毒后潛伏期及持續(xù)時(shí)間相對(duì)較短，可引起頭暈、頭痛、視力模糊、四肢無(wú)力、紅眼、肌肉抽筋甚至顫抖等癥狀，可能屬于神經(jīng)型毒蘑菇種類(lèi)[31]；誤食隱紋條孢牛肝菌、日本網(wǎng)孢牛肝菌、芝麻厚瓤牛肝菌、褐點(diǎn)粉末牛肝菌、褐糙粉末牛肝菌和淡紅粉末牛肝菌則會(huì)引起胃腸炎癥狀，應(yīng)避免采食。

2.3 鸚哥嶺片區(qū)牛肝菌目真菌資源保護(hù)和可持續(xù)利用

2.3.1 鸚哥嶺片區(qū)牛肝菌目真菌資源的保護(hù) 團(tuán)隊(duì)在對(duì)鸚哥嶺牛肝菌目真菌資源進(jìn)行研究的同時(shí)，發(fā)現(xiàn)有些物種的野外分布區(qū)域較為狹窄，一旦受到人為干擾很容易致危，如果不加以有效保護(hù)，其野外生存狀況堪憂(yōu)。為此，應(yīng)對(duì)這些物種進(jìn)行長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)并開(kāi)展就地保護(hù)。

2022年《海南熱帶雨林國(guó)家公園優(yōu)先保護(hù)物種名錄》[32]正式向社會(huì)公開(kāi)發(fā)布，保護(hù)物種包括海南熱帶雨林國(guó)家公園范圍內(nèi)分布的脊椎動(dòng)物、植物、大型真菌3個(gè)類(lèi)群。鸚哥嶺片區(qū)牛肝菌目真菌中有21個(gè)物種列于該名錄中。因此，鸚哥嶺片區(qū)的牛肝菌目真菌資源亟待保護(hù)。建議從以下兩個(gè)方面著手：第一，加強(qiáng)宣傳。通過(guò)深入村委會(huì)、學(xué)校進(jìn)行大型真菌科普教育等方式來(lái)提高海南熱帶雨林國(guó)家公園周邊社區(qū)百姓對(duì)大型真菌資源的保護(hù)意識(shí)。第二，加強(qiáng)科學(xué)研究。開(kāi)展牛肝菌目真菌資源常態(tài)化監(jiān)測(cè)，同時(shí)加強(qiáng)對(duì)受威脅物種的研究；對(duì)于可培養(yǎng)的種類(lèi)，可通過(guò)菌種分離，保存其種質(zhì)資源，并加強(qiáng)人工栽培技術(shù)的研究，以期緩解其野外生存壓力。

2.3.2 牛肝菌目真菌資源的可持續(xù)性利用 牛肝菌目中的大多種類(lèi)能夠與殼斗科、松科、龍腦香科等植物形成互共生關(guān)系，因此較難實(shí)現(xiàn)人工栽培。暗褐脈柄牛肝菌在云南地區(qū)已經(jīng)成功實(shí)現(xiàn)仿野生栽培。在鸚哥嶺片區(qū)的低海拔闊葉林及村子周邊的榕樹(shù)林，均發(fā)現(xiàn)有該牛肝菌生長(zhǎng)。因此，可以嘗試在海南仿野生栽培暗褐脈柄牛肝菌，發(fā)展林下經(jīng)濟(jì)，努力探索將綠水青山轉(zhuǎn)化為金山銀山的轉(zhuǎn)化路徑，助力海南熱帶雨林國(guó)家公園建設(shè)。此外，針對(duì)鸚哥嶺片區(qū)牛肝菌目真菌中的大部分物種，尤其是新發(fā)現(xiàn)的物種，人們目前對(duì)它們的潛在價(jià)值尚不清楚，后續(xù)有必要對(duì)其子實(shí)體化學(xué)成分、藥理活性等進(jìn)行研究，為熱帶真菌資源的開(kāi)發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

3 討論

本研究對(duì)鸚哥嶺片區(qū)牛肝菌目真菌資源進(jìn)行調(diào)查、分類(lèi)和鑒定，共發(fā)現(xiàn)該目真菌5 科37 屬82 種。大多數(shù)牛肝菌是外生菌根真菌，鸚哥嶺片區(qū)豐富的牛肝菌資源與區(qū)域內(nèi)豐富的宿主植物資源關(guān)系密切， 該片區(qū)分布有殼斗科青岡屬（Cyclobalanopsis）、錐屬（Castanopsis）、柯屬（Lithocarpus）、櫟屬（Quercus），松科植物海南五針?biāo)桑?Pinus fenzeliana ） 和廣東松（ P.kwangtungensis）等植物，這些植物為牛肝菌的生長(zhǎng)提供了必要條件。同時(shí)，豐富的牛肝菌目真菌資源也可作為海南熱帶雨林生態(tài)系統(tǒng)平衡的一項(xiàng)生物指征，從一定程度上反映生態(tài)系統(tǒng)的狀況。除了該類(lèi)真菌，鸚哥嶺片區(qū)還分布著很多其他種類(lèi)的大型真菌，這些類(lèi)群與牛肝菌目真菌均是海南熱帶雨林國(guó)家公園生物多樣性的重要組成部分?；谇捌诘难芯浚茰y(cè)該區(qū)域還蘊(yùn)藏著大量有待發(fā)現(xiàn)的新種或新記錄種。因此，建議海南熱帶雨林國(guó)家公園管理部門(mén)持續(xù)關(guān)注大型真菌資源研究，進(jìn)一步加強(qiáng)布局和統(tǒng)籌，增加研究經(jīng)費(fèi)的投入，組織相關(guān)領(lǐng)域的專(zhuān)家學(xué)者對(duì)包括鸚哥嶺片區(qū)在內(nèi)的海南熱帶雨林國(guó)家公園的大型真菌資源進(jìn)行長(zhǎng)期、持續(xù)、深入的調(diào)查研究，同時(shí)對(duì)各片區(qū)的科研及管護(hù)人員進(jìn)行業(yè)務(wù)知識(shí)培訓(xùn)，培養(yǎng)更多大型真菌分類(lèi)人才和“鄉(xiāng)土專(zhuān)家”。在此基礎(chǔ)上，深入了解海南熱帶雨林國(guó)家公園大型真菌多樣性情況，這對(duì)公園生物多樣性的保護(hù)以及可持續(xù)利用等均具有重要意義。