摘要：為探究不同添加劑對(duì)辣椒（Capsicum annuum L.）秸稈青貯品質(zhì)和細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響，試驗(yàn)以新鮮辣椒秸稈為原料，設(shè)置對(duì)照組（W0，添加等量無菌去離子水）、植物乳桿菌（Lactiplantibacillus plantarum）組（W1）、植物乳桿菌+纖維素酶（Lactiplantibacillus plantarum+cellulase）組（W2）、植物乳桿菌+枯草芽孢桿菌（Lactiplantibacillus plantarum+Bacillus subtilis）組（W3）、植物乳桿菌+糖蜜（Lactiplantibacillus plantarum+molasses）組（W4）和纖維素酶（cellulase）組（W5），室溫條件青貯60 d后測(cè)定其營(yíng)養(yǎng)成分、發(fā)酵品質(zhì)和細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明：與W0組相比，添加劑處理組pH值、中性洗滌纖維（Neutral detergent fiber，NDF）和酸性洗滌纖維（Acid detergent lignin，ADF）均降低，乳酸（Lactic acid，LA）顯著增加（Plt;0.05）；各添加劑處理組之間相比，W3組粗蛋白（Crude protein，CP）和LA高于其他組，pH值、NDF、ADF和氨態(tài)氮/總氮（NH3-N/TN）低于其他組。辣椒秸稈原料（WY）和W0組優(yōu)勢(shì)菌為藍(lán)藻門（Cyanobacteriota）顫藻屬（Oscillatoria），其他處理組優(yōu)勢(shì)菌為芽孢桿菌門（Bacillota）乳植物桿菌屬（Lactiplantibacillus）。綜上，添加劑能改善辣椒秸稈青貯品質(zhì)，添加植物乳桿菌+枯草芽孢桿菌的辣椒秸稈青貯品質(zhì)最好。

關(guān)鍵詞：辣椒秸稈；發(fā)酵品質(zhì)；細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)；藍(lán)藻門；芽孢桿菌門

中圖分類號(hào)：S816.6""" 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A""""" 文章編號(hào)：1007-0435（2024）07-2330-07

doi：10.11733/j.issn.1007-0435.2024.07.035

引用格式：

程志澤， 伊斯拉依·達(dá)吾提， 萬江春，等.不同添加劑對(duì)辣椒秸稈青貯品質(zhì)及細(xì)菌多樣性的影響［J］.草地學(xué)報(bào)，2024，32（7）：2230-2336

CHENG Zhi-ze， YISILAYI-Dawuti， WAN Jiang-chun，et al.Effects of Different Additives on the Quality and Bacterial Diversity of Pepper Straw Silage［J］.Acta Agrestia Sinica，2024，32（7）：2230-2336

Effects of Different Additives on the Quality and Bacterial

Diversity of Pepper Straw Silage

CHENG Zhi-ze， YISILAYI-Dawuti， WAN Jiang-chun， NAIBI-Abulaiti， AIBIBULA-Yimamu*

（College of Prataculture， Xinjiang Agricultural University， Urumqi， Xinjiang 830000， China）

Abstract：In order to explore the effects of different additives on the quality and bacterial community structure of pepper （Capsicum annuum L.） straw silage，fresh pepper straw was used as raw material. The control group （W0，adding the same amount of sterile deionized water），Lactobacillus plantarum group （W1），Lactobacillus plantarum+cellulase group （W2），Lactobacillus plantarum+Bacillus subtilis group （W3），Lactobacillus plantarum+molasses group （W4） and cellulase group （W5） were set up. The nutritional composition，fermentation quality and bacterial community structure were determined after 60 days of silage at room temperature. The results showed that compared with the W0 group，the pH value，neutral detergent fiber （NDF） and acid detergent fiber （ADF） of the additive treatment group decreased，and lactic acid （LA） increased significantly （Plt;0.05）. Compared with other groups，crude protein （CP） and LA in W3 group were higher，and pH，NDF，ADF and NH3-N/TN were lower. The dominant bacteria in the pepper straw raw material （WY） and W0 group were Cyanobacteriota and Oscillatoria，and the dominant bacteria in other treatment groups were Bacillota and Lactiplantibacillus. In summary，additives could improve the quality of pepper straw silage，and the quality of pepper straw silage treated with Lactobacillus plantarum+Bacillus subtilis was the best.

Key words：Pepper straw;Fermentation quality;Bacterial community structure;Cyanobacteriota;Bacillota

收稿日期：2024-02-19；修回日期：2024-03-24

基金項(xiàng)目：新疆重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目“新疆地源性生物發(fā)酵飼料調(diào)配關(guān)鍵技術(shù)研究”（2022B02042-2）資助

作者簡(jiǎn)介：

程志澤（1984-），男，漢族，甘肅莊浪人，博士研究生，主要從事飼草料加工與反芻動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究，E-mail：627840293@qq.com；*通信作者Author for correspondence，E-mail：aibibula@hotmail.com

近年來，由于我國(guó)畜牧業(yè)規(guī)?；⒓s化發(fā)展，以及人們對(duì)畜產(chǎn)品質(zhì)量需求不斷增加，優(yōu)質(zhì)飼草料不足缺口越顯凸出，已成為制約畜牧業(yè)發(fā)展的瓶頸因素［1］。而我國(guó)非常規(guī)飼料資源豐富，具有很高的潛在飼用價(jià)值［2］。辣椒秸稈是非常規(guī)飼料資源，粗蛋白含量14.79%～16.72%，營(yíng)養(yǎng)成分優(yōu)于羊草（Leymus chinensis（Trin.）Tzvel.）和玉米（Zea mays L.）秸稈，與苜蓿（Medicago sativa L.）接近［3］，同時(shí)我國(guó)每年辣椒種植面積超過2.1×106hm2，秸稈年產(chǎn)量達(dá)6.9×107 t［4］，資源極豐富。嘗試將辣椒秸稈青貯處理，開發(fā)為反芻動(dòng)物飼料，可同時(shí)緩解飼草料不足和季節(jié)供應(yīng)不平衡問題。

在制作青貯飼料時(shí)，使用添加劑能改善原料自身的不足，提升青貯品質(zhì)。如植物乳桿菌可補(bǔ)充原料同型發(fā)酵乳酸菌數(shù)量不足［5］；枯草芽孢桿菌能分泌纖維素酶［6］、淀粉酶等系列酶［7-8］；糖蜜富含碳水化合物，可為乳酸菌的生長(zhǎng)和繁殖提供額外的單糖來源［9］；纖維素酶可降解植物細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)性糖類，為乳酸菌快速繁殖提供更多的可溶性碳水化合物（Water soluble carbohydrates，WSC）［10］。另外對(duì)一些本身符合青貯條件的原料，使用添加劑仍可提高青貯品質(zhì)，如WSC含量較高的鮮食玉米秸稈或中性洗滌纖維（Neutral detergent fiber，NDF）和酸性洗滌纖維（Acid detergent lignin，ADF）較低的構(gòu)樹，在青貯時(shí)使用糖蜜或纖維素酶處理后，其青貯品質(zhì)優(yōu)于未加添加劑處理組［11-12］。同時(shí)，青貯的過程也是微生物演替主導(dǎo)發(fā)酵的過程［13］，微生物群落結(jié)構(gòu)與青貯的品質(zhì)密切相關(guān)［14］。因此，研究青貯前后微生物群落結(jié)構(gòu)對(duì)了解其品質(zhì)極其重要。

近年來，辣椒秸稈在飼料開發(fā)利用方面逐漸被重視。已有研究證明，飼料中加入10%辣椒秸稈粉飼喂獺兔，能提升其日增重、主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率和健康水平［15］。在青貯辣椒秸稈試驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)添加阿魏酸酯酶與復(fù)合菌液青貯處理后能提高辣椒秸稈的體外產(chǎn)氣量、可消化有機(jī)物和代謝能，也能提升瘤胃對(duì)于氮的利用效率［16］。另外用辣椒秸稈青貯完全代替日糧中的玉米青貯飼喂肉羊，可提高肉羊?qū)︼暳蠣I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化利用率［17］。但目前，辣椒秸稈的飼料開發(fā)研究仍處于初期階段，系統(tǒng)、深入的研究報(bào)道較少。因此，本試驗(yàn)以含水量為65%的辣椒秸稈為原料，研究不同添加劑對(duì)其青貯營(yíng)養(yǎng)成分、發(fā)酵品質(zhì)和微生物群落結(jié)構(gòu)的影響，為調(diào)制品質(zhì)優(yōu)良辣椒秸稈青貯提供理論依據(jù)和技術(shù)參考。

1" 材料與方法

1.1" 試驗(yàn)材料

參試?yán)苯方斩捜∽孕陆莠敿{斯縣境內(nèi)辣椒種植大田，品種為改良‘陜?cè)缂t’，末次辣椒采摘后收割秸稈，刈割時(shí)留茬2～3 cm，秸稈清潔、無泥土夾雜。經(jīng)測(cè)定其干物質(zhì)（Dry matter，DM）、NDF、粗蛋白質(zhì)（Crude Protein，CP）、ADF、粗脂肪（Ether extraction，EE）和WSC含量分別為26.32%FM、15.90%DM、34.97%DM、29.30%DM、2.90%DM和9.57%DM，辣椒素（Capsaicin）含量為82.29±0.14 μg·g-1。植物乳桿菌（1×1011cfu·g-1）、枯草芽孢桿菌（1×1011cfu·g-1）購于濰坊某生物科技有限公司，纖維素酶（2×104 U·g-1）購于上海某生物科技有限公司，糖蜜購于柳州某糖蜜有限公司。

1.2" 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì)。辣椒秸稈收割后在干凈的水泥地晾曬并適時(shí)翻曬，期間多點(diǎn)取樣，采用感官評(píng)定和微波爐法［18］相結(jié)合的方式測(cè)定含水量，待含水量65%時(shí)，用粉碎機(jī)粉碎至1～3 cm長(zhǎng)度，分別將植物乳桿菌（W1）、植物乳桿菌+纖維素酶（W2）、植物乳桿菌+枯草芽孢桿菌（W3）、植物乳桿菌+糖蜜（W4）和纖維素酶（W5）溶于無菌去離子水中，均勻噴灑在粉碎的辣椒秸稈上，對(duì)照組（W0）噴灑等量無菌去離子水，共6個(gè)處理，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)，攪拌均勻后裝入聚乙烯袋中真空包裝并置于室內(nèi)環(huán)境下自然發(fā)酵，60 d后取樣測(cè)定相關(guān)指標(biāo)。各處理添加劑及添加量如表1所列。

1.3" 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.3.1" 辣椒秸稈青貯營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定" DM，CP，EE，NDF，ADF含量的測(cè)定參照朱進(jìn)忠［19］的方法；WSC采用硫酸－蒽酮比色法測(cè)定［20］；辣椒素含量測(cè)定采用高效液相色譜（HPLC）法測(cè)量［21］。

1.3.2" 辣椒秸稈青貯發(fā)酵品質(zhì)測(cè)定" 取青貯辣椒秸稈鮮樣20 g放入250 mL錐形瓶中，加入180 mL滅菌蒸餾水浸泡30 min，用攪拌機(jī)充分?jǐn)嚢?0 s，再用4層紗布和定量濾紙先后過濾，得浸提液。用25型酸度計(jì)（上海雷磁分析儀器廠，玻璃電極電極）測(cè)量浸提液的pH值。取部分浸提液經(jīng)高速冷凍離心機(jī)離心5 min，再經(jīng)0.22 μm濾膜過濾。參照Cao等［22］的方法，采用高效液相色譜儀測(cè)定乳酸（Lactic acid，LA）、乙酸（Acetic acid，AA）、丙酸（Propionic acid，PA）及丁酸（Butyric acid，BA）含量。NH3-N測(cè)量采用苯酚-次氯酸鈉比色法［23］?？偟═N）含量計(jì)算公式為TN＝CP÷6.25。

1.3.3" 辣椒秸稈原料及其青貯細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)分析" 將辣椒秸稈原料及不同添加劑處理的青貯辣椒秸稈送至派森諾生物科技公司（南京），用于細(xì)菌多樣性測(cè)序分析。采用PowerSoilDNA Isolation Kit試劑盒提取樣品總DNA。選擇帶有Barcode的338F（5′-ACTCCTACGGGAGGCAGCA-3′）和806R（5′-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3′）為引物，對(duì)獲取細(xì)菌的16s rRNA的V3～V4可變區(qū)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并且每個(gè)樣本做3個(gè)重復(fù)。使用Illumina TruSeq DNA構(gòu)建測(cè)序文庫。最后采用Pacbio Sequel三代測(cè)序平臺(tái)對(duì)群落DNA片段進(jìn)行SMRT（Single Molecule Real-Time）測(cè)序。

1.4" 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2010進(jìn)行匯總和整理后，使用SPSS 20.0一般線性模型（General Linear Model，GLM）對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，采用Duncan法進(jìn)行多重比較檢驗(yàn)。優(yōu)勢(shì)菌群相對(duì)豐度柱狀圖通過QIIME2軟件進(jìn)行計(jì)算。

2" 結(jié)果與分析

2.1" 不同添加劑對(duì)辣椒秸稈青貯營(yíng)養(yǎng)成分的影響

由表2可知，W1組DM含量最高，顯著高于W0，W2，W4和W5組（Plt;0.05），與W3組之間差異不顯著；W3組CP含量顯著高于W0，W1，W2和W5組（Plt;0.05），與W4組之間差異不顯著，W0與W5組之間CP含量差異不顯著，卻顯著低于其余各組（Plt;0.05）；W1，W2，W3和W5組EE含量顯著高于W0組（Plt;0.05），W4與W0組之間EE含量差異不顯著；6組辣椒秸稈青貯之間WSC含量差異不顯著；W3與W4組之間NDF和ADF含量顯著低于其余各組（Plt;0.05），且W3組NDF含量顯著低于W4組（Plt;0.05）；W3組辣椒素含量最高，顯著高于其余各組（Plt;0.05），W4和W5組辣椒素含量最低，且他們之間差異不顯著。

2.2" 不同添加劑對(duì)辣椒秸稈發(fā)酵品質(zhì)的影響

由表3可知，W3組LA含量最高，顯著高于其他各組（Plt;0.05），W4與W2組LA含量差異不顯著，卻顯著高于W1，W5和W0組（Plt;0.05）；W0組pH值和PA含量顯著高于其他各組（Plt;0.05），W3組pH值和PA含量最低，與W1，W2和W4組之間的pH和PA含量差異不顯著，但顯著低于W5組（Plt;0.05）；W3和W4組的NH3-N/TN顯著低于其他4組（Plt;0.05），且W3組的NH3-N/TN顯著低于W4組（Plt;0.05），W0與W5之間NH3-N/TN差異不顯著，顯著高于W1和W2組（Plt;0.05）；6組青貯均未檢測(cè)到BA。

2.3" 不同添加劑對(duì)辣椒秸稈青貯細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響

2.3.1" 辣椒秸稈原料及不同添加劑處理青貯的稀釋曲線" 由圖1可知樣本測(cè)序數(shù)據(jù)量為5 600個(gè)，隨著測(cè)序數(shù)據(jù)量的增加，稀釋曲線趨于平緩，說明本次測(cè)序結(jié)果合理，繼續(xù)增加測(cè)序深度無法發(fā)現(xiàn)新的擴(kuò)增子序列變異（Amplicon Sequence Variant，ASV）。WY為辣椒秸稈原料，W0，W1，W2，W3，W4和W5分別是不同添加劑處理的辣椒秸稈青貯。從圖可知隨著稀釋曲線趨于平坦時(shí)，W1組曲線最高，其次是W5組，WY組最低，說明添加劑處理組辣椒秸稈青貯細(xì)菌豐度均高于辣椒秸稈原料，且W1組細(xì)菌豐度最高，其次是W5組。

2.3.2" 辣椒秸稈原料及不同添加劑處理青貯細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)分析

（1）門水平的細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)分析

由圖2可知WY和W0組優(yōu)勢(shì)菌為藍(lán)藻門（Cyanobacteriota），占比分別為96.00%和88.78%，另外WY組還有3.83%的假單胞菌門（Pseudomonadota），W0組有10.08%的芽孢桿菌門（Bacillota）；W1，W2，W3，W4和W5組的優(yōu)勢(shì)菌為芽孢桿菌門（Bacillota），占比分別為86.36%，88.51%，99.74%，98.15%和93.48%，同時(shí)部分組還含有少量的藍(lán)藻門（Cyanobacteriota）、假單胞菌門（Pseudomonadota）、放線菌門（Actinomytota）、擬桿菌門（Bacteroidota）、支原體門（Mycoplasmatota）和彎曲菌門（Campylobacterota）等。

（2） 屬水平細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)分析

由圖3可知WY和W0優(yōu)勢(shì)菌為顫藻屬（Oscillatoria），分別占95.88%和88.42%，另外WY組還有3.74%鞘氨醇單胞菌屬（Sphingomonas），W0組有9.27%的乳植物桿菌屬（Lactiplantibacillus）；W1、W2、W3、W4和W5組優(yōu)勢(shì)菌為乳植物桿菌屬（Lactiplantibacillus），占比分別為65.50%，82.33%，70.40%，77.48%和90.48%，同時(shí)部分處理組還含有少量的芽孢桿菌屬（Bacillus）、顫藻屬（Oscillatoria）、促生乳桿菌屬（Levilactobacillus）、遲緩乳桿菌屬（Lentilactobacillus）和乳桿菌屬（Lactobacillus）等，另外W3和W4組含芽孢桿菌屬（Bacillus）較高，分別為29.32%和20.59%。

3" 討論

3.1" 不同添加劑對(duì)辣椒秸稈青貯養(yǎng)分含量的影響

青貯的作用是原料在密閉缺氧條件下，通過厭氧乳酸菌發(fā)酵作用抑制各種雜菌繁殖，減少養(yǎng)分損失，從而改善原料品質(zhì)。但有些原料因自身?xiàng)l件不足或?yàn)楸M可能的改善原料質(zhì)量，會(huì)選擇合適的添加劑為乳酸菌創(chuàng)造理想的發(fā)酵環(huán)境。本研究結(jié)果表明，添加劑對(duì)辣椒秸稈青貯營(yíng)養(yǎng)成分有一定影響作用。各添加劑組與W0組相比，除W5組CP，NDF和ADF與W0組差異不顯著外，其余各添加劑組CP均高于W0組，NDF和ADF顯著低于W0組，說明使用W1，W2，W3和W4添加劑能改善辣椒秸稈青貯營(yíng)養(yǎng)成分，這與包健［24］、詹佳琦［25］和王鳳林［26］等人在不同原料中使用相同添加劑青貯結(jié)果相似。而W5相關(guān)指標(biāo)與W0差異不顯著，說明纖維素酶單獨(dú)添加對(duì)辣椒秸稈青貯養(yǎng)分改善效果不明顯，這與萬榮［27］等人研究結(jié)果相反，可能主要原因是原料及其處理?xiàng)l件不同所造成；各添加劑組之間相比較，W3組CP，EE，WSC和辣椒素最高，NDF和ADF最低，說明植物乳桿菌和枯草芽孢桿菌一起添加效果最好，這與穆勝龍等［28］研究結(jié)果相同，原因是W3組中植物乳桿菌增加了辣椒秸稈青貯初期乳酸菌的數(shù)量，快速產(chǎn)生大量乳酸抑制梭菌等不良微生物增殖，從而減少CP等營(yíng)養(yǎng)成分和辣椒素的分解，同時(shí)大量乳酸等有機(jī)酸會(huì)酸解辣椒秸稈細(xì)胞壁，使NDF含量降低［29］；另外，枯草芽孢桿菌能夠分泌纖維素酶、淀粉酶等多種酶系［28］，可分解辣椒秸稈中纖維素和淀粉等成分為可溶性糖，既達(dá)到分解細(xì)胞壁NDF和ADF作用，還為乳酸菌發(fā)酵補(bǔ)充了底物。相比W1組，W4組青貯的CP，WSC和LA含量較高，而NDF，ADF含量和NH3-N/TN降低，青貯效果更好，說明同時(shí)添加植物乳桿菌和糖蜜效果優(yōu)于單獨(dú)添加植物乳桿菌，可能是在辣椒秸稈原料中同時(shí)使用植物乳桿菌和糖蜜，既迅速增加了乳酸菌數(shù)量，又為其快速增殖和發(fā)酵提供充足的底物，這與劉輝等的研究結(jié)果一致［30］。本研究中，W2組青貯的LA含量顯著高于W1和W5組，NH3-N/TN低于W1和W5組，因此W2處理組的發(fā)酵品質(zhì)優(yōu)于W1和W5組，說明在辣椒秸稈青貯時(shí)，植物乳桿菌和纖維素酶協(xié)同作用效果優(yōu)于兩者單獨(dú)使用，原因可能是通過協(xié)同作用，纖維素酶能進(jìn)一步將辣椒秸稈細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)性多糖降解為單糖，為乳酸發(fā)酵提供更多的可溶性糖，通過乳酸菌發(fā)酵改善了青貯品質(zhì)，同時(shí)還可能因添加的纖維素酶抑制了腐敗菌的增殖所致［31］。另外，W3處理辣椒秸稈青貯含有79.23 μg·g-1辣椒素，顯著高于其他各添加劑處理組，但該辣椒素含量在辣度評(píng)價(jià)分級(jí)中與其他處理辣椒秸稈青貯組結(jié)果相同，均屬3級(jí)［32］。

3.2" 不同添加劑對(duì)辣椒秸稈青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響

在青貯飼料中，pH、LA和NH3-N/TN是衡量發(fā)酵品質(zhì)的主要指標(biāo)，優(yōu)質(zhì)青貯飼料pH標(biāo)準(zhǔn)為3.80～4.20。NH3-N/TN低于10%［33］，LA含量越高，則發(fā)酵效果越好［34］。本研究中，各添加劑組與W0組相比較，pH和NH3-N/TN低于W0組，且各添加劑處理組均pH低于4.20，NH3-N/TN低于10%，達(dá)到優(yōu)質(zhì)青貯飼料的標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)各添加劑組LA含量均顯著高于W0組，所有處理組均未檢測(cè)到BA，說明辣椒秸稈經(jīng)添加劑處理后青貯能改善其發(fā)酵品質(zhì)，這與覃娟清［35］等在青貯筍殼上研究結(jié)果相一致；各添加劑組之間相比較，W3組pH和NH3-N/TN最低，LA最高，說明在辣椒秸稈青貯中添加劑使用植物乳桿菌+枯草芽孢桿菌時(shí)發(fā)酵品質(zhì)最好，這與王鳳林［26］等在玉米秸稈青貯中人研究結(jié)果相同，原因可能是添加劑中的植物乳桿菌能迅速增加乳酸菌數(shù)量，加快乳酸發(fā)酵速度，同時(shí)枯草芽孢桿菌通過產(chǎn)生抗菌肽類物質(zhì)等途徑，抑制不良菌生長(zhǎng)［36］，為乳酸菌增殖、發(fā)酵創(chuàng)造有利條件，從而減少辣椒秸稈粗蛋白等營(yíng)養(yǎng)成分的分解，使NH3-N/TN降低。

3.3" 不同添加劑對(duì)辣椒秸稈青貯細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響

青貯是一個(gè)復(fù)雜的微生物相互作用過程，在諸多復(fù)雜微生物體系中，細(xì)菌占據(jù)了主要位置，因此，通過分析青貯飼料中細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)，可在一定程度上能對(duì)青貯飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和發(fā)酵品質(zhì)作進(jìn)一步的了解。

由稀釋性曲線可知，隨著樣品測(cè)序深度增加，稀釋曲線均逐漸趨于平緩，說明樣品測(cè)序結(jié)果合理，能全部反映出其細(xì)菌的多樣性［37］，繼續(xù)增加測(cè)序深度無法發(fā)現(xiàn)新的ASV。在門水平上，辣椒秸稈原料及其不同處理的青貯優(yōu)勢(shì)菌為芽孢桿菌門（Bacillota）和藍(lán)藻門（Cyanobacteriota），芽孢桿菌門即厚壁菌門（Firmicutes），研究證明其多數(shù)革蘭氏染色呈陽性，而且在缺水等極端環(huán)境之下，能產(chǎn)生芽孢保持生存，同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)，許多芽孢桿菌門中細(xì)菌通過對(duì)淀粉、纖維素和蛋白質(zhì)等大分子化合物進(jìn)行降解［38］，為微生物活動(dòng)提供更多底物［39］。乳桿菌屬是芽孢桿菌門一主要的菌屬，對(duì)青貯品質(zhì)有顯著影響［40］。通過比較發(fā)現(xiàn)，WY和W0中優(yōu)勢(shì)菌為藍(lán)藻門，這與張娟等［41］在圓葉決明子中添加蘋果酸和嗜酸桿菌后青貯結(jié)果相似，說明辣椒秸稈本身附著益生菌較少，直接青貯效果不佳。而其余各添加劑處理組的辣椒秸稈青貯優(yōu)勢(shì)菌為芽孢桿菌門，與劉蓓一［42］和陶蓮等［43］研究結(jié)果一致，說明在辣椒秸稈青貯時(shí)，使用添加劑能增加有益菌的豐度，從而抑制有害菌增殖。

在屬水平上，辣椒秸稈原料及不同處理青貯主要優(yōu)勢(shì)菌為乳植物桿菌屬（Lactiplantibacillus）和顫藻屬（Oscillatoria）。WY和W0的優(yōu)勢(shì)菌為顫藻屬（Oscillatoria），乳桿菌屬等有益菌較低，而顫藻屬屬藍(lán)藻門，能釋放藻毒素和異臭物質(zhì)［44］，不利于青貯，從而從微結(jié)構(gòu)層面說明辣椒秸稈原料不宜直接青貯。而W1，W2，W3，W4和W5組青貯的優(yōu)勢(shì)菌為乳植物桿菌屬（Lactiplantibacillus），另外還有少量遲緩乳桿菌屬（Lentilactobacillus）、乳桿菌屬（Lactobacillus）、促生乳桿菌屬（Levilactobacillus）和芽孢桿菌屬（Bacillus）等乳酸菌［45］，在青貯飼料中，乳酸菌能抑制其他有害菌增殖，對(duì)青貯飼料起防腐作用，是制作優(yōu)良青貯飼料的主要微生物［46］，這說明辣椒秸稈經(jīng)不同添加劑處理后青貯，可改變微生物群落結(jié)構(gòu)，增加乳酸菌的豐度，提升品質(zhì)，這與孫文濤等［47］在構(gòu)樹青貯中研究結(jié)果相似。另外W3和W4組除了乳植物桿菌屬為優(yōu)勢(shì)菌外，還含有較高比例（分別為29.32%和20.59%）的芽孢桿菌屬，加之W3和W4組營(yíng)養(yǎng)成分和發(fā)酵品質(zhì)較高，說明在青貯辣椒秸稈中，適宜的芽孢桿菌屬有利于提升青貯質(zhì)量。這與李鈺等［48］和孫宇等［49］在發(fā)酵飼料中添加枯草芽孢桿菌的研究結(jié)果相似。另外，W0處理的辣椒秸稈青貯pH值為4.23，雖然顯著高于其他添加劑處理組，但與優(yōu)質(zhì)青貯pH值范圍接近，主要原因可能與其含有10.08%的芽孢桿菌門、9.27%的乳植物桿菌屬有關(guān)。

4" 結(jié)論

辣椒秸稈經(jīng)添加劑處理后能改善青貯品質(zhì)，使用植物乳桿菌+枯草芽孢桿菌作添加劑青貯效果最佳。另外，辣椒秸稈經(jīng)青貯處理后辣椒素含量降低。

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