中圖分類號(hào) R965 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號(hào) 1001-0408（2025）02-0154-06

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2025.02.04

摘要 目的 觀察加味芍藥甘草湯對(duì)慢傳輸型便秘（STC）大鼠腸道傳輸功能、腸道菌群及共代謝產(chǎn)物γ氨基丁酸（GABA）和5-羥色胺（5-HT）含量的影響。方法 將SD大鼠隨機(jī)分為空白組（10只）和造模組（30只），雌雄各半。造模組大鼠以復(fù)方地芬諾酯灌胃法構(gòu)建STC模型。將造模成功的大鼠隨機(jī)分為模型組、加味芍藥甘草湯組[56 g/（kg·d），以生藥量計(jì)]、陽性對(duì)照藥組[乳果糖2.09g/（kg·d）]，每組10 只。各藥物組大鼠灌胃相應(yīng)藥液，空白組和模型組大鼠灌胃等體積生理鹽水，每天1 次，連續(xù)14 d。實(shí)驗(yàn)期間，觀察各組大鼠的一般情況；末次給藥后，稱定其體重并對(duì)糞便性狀進(jìn)行Bristol 評(píng)分，檢測(cè)糞便含水率、腸道推進(jìn)率和腸內(nèi)容物中GABA、5-HT含量，考察腸內(nèi)容物中腸道菌群的多樣性，并分析GABA、5-HT含量與菌群相對(duì)豐度的關(guān)聯(lián)性。結(jié)果 與模型組比較，加味芍藥甘草湯組大鼠體形瘦小、皮毛稀疏粗糙、行動(dòng)遲緩等一般情況均有所改善，體重、Bristol 評(píng)分、糞便含水率、腸道推進(jìn)率、5-HT含量、Chao1 和Shannon 指數(shù)均顯著升高，GABA含量、Simpson 指數(shù)均顯著降低（P＜0.05）。該組大鼠的腸道菌群可與空白組歸為一類，但與模型組相距較遠(yuǎn)；該組脫硫桿菌門、厚壁菌門、擬桿菌門的相對(duì)豐度雖有回調(diào)，但與模型組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；脫硫桿菌門是組間差異因素（P＜0.05）。GABA含量與擬桿菌門、藍(lán)菌門、髕骨菌門、放線菌門的相對(duì)豐度呈負(fù)相關(guān)（P＜0.01 或P＜0.05），5-HT含量與彎曲桿菌門的相對(duì)豐度呈正相關(guān)（P＜0.05）。結(jié)論 加味芍藥甘草湯可改善STC模型大鼠糞便性狀和腸道動(dòng)力，上述作用可能與改善腸道菌群，進(jìn)而影響腸內(nèi)容物中GABA、5-HT含量有關(guān)；此外，GABA、5-HT含量可能與擬桿菌門、彎曲桿菌門等特定菌門的相對(duì)豐度顯著相關(guān)。

關(guān)鍵詞 加味芍藥甘草湯；慢傳輸型便秘；腸道菌群；γ氨基丁酸；5-羥色胺

功能性便秘是臨床多發(fā)病之一，根據(jù)病理生理改變分為正常傳輸型、慢傳輸型、排便障礙型和混合型。其中，慢傳輸型便秘（slow transit constipation，STC）是一類以結(jié)腸傳輸減慢為特點(diǎn)的頑固性便秘，約占功能性便秘的45.5%，是功能性便秘的常見類型[1―2]。目前，STC 發(fā)病機(jī)制尚不明確，學(xué)界普遍認(rèn)為與腸動(dòng)力障礙、腸道菌群失調(diào)、腸神經(jīng)系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)異常、神經(jīng)遞質(zhì)改變等密切相關(guān)[3]。研究表明，STC 的發(fā)生與腸道菌群及其與宿主的共代謝產(chǎn)物[如γ氨基丁酸（γ aminobutyricacid，GABA）、5-羥色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）等]有關(guān)[4]。同時(shí)，有研究顯示，STC患者存在明顯的腸道菌群失調(diào)，其體內(nèi)有害菌種（如大腸埃希菌等）明顯增多，腸道益生菌（如雙歧桿菌等）大幅減少[5―6]。多項(xiàng)研究報(bào)道指出，雙歧桿菌屬和乳酸桿菌屬成員均能通過生成GABA來影響腸道5-HT 的含量，進(jìn)而改善STC 患者的腸道動(dòng)力[7―9]。

加味芍藥甘草湯由白芍、麥冬、玄參、火麻仁、枳實(shí)、厚樸、太子參、生白術(shù)、甘草組成，是成都中醫(yī)藥大學(xué)趙瓊教授根據(jù)酸甘化陰名方“芍藥甘草湯”并結(jié)合長(zhǎng)期臨床實(shí)踐化裁而來，具酸甘化陰、養(yǎng)陰增液、益氣通便之功效。本課題組前期研究證實(shí)了加味芍藥甘草湯改善小兒便秘的療效，并對(duì)其理法方藥及主要成分的通便活性進(jìn)行了初步探索[10]。近期藥理學(xué)研究報(bào)道，加味芍藥甘草湯活性成分可提高便秘模型動(dòng)物的結(jié)腸推進(jìn)率、糞便含水率及排便量，并可改善其便秘癥狀，上述作用可能是通過正向調(diào)節(jié)腸道菌群的方式來實(shí)現(xiàn)的[11―12]。基于此，本研究擬采用復(fù)方地芬諾酯灌胃構(gòu)建STC大鼠模型，從腸道菌群及產(chǎn)物（GABA、5-HT）含量角度出發(fā)，進(jìn)一步探討加味芍藥甘草湯改善STC的潛在機(jī)制，以期為STC的臨床治療提供參考。

1 材料

1.1 主要儀器

本研究所用主要儀器包括QuantiFluorTM ST 型藍(lán)色熒光定量系統(tǒng)（美國(guó)Promega 公司），A200 型聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）儀（杭州朗基科學(xué)儀器有限公司），REPS300型電泳儀（上海天能科技有限公司），1290 Infinity Ⅱ型超高效液相色譜儀、6495 LC/TQ 型三重四極桿質(zhì)譜儀（美國(guó)Agilent公司）等。

1.2 藥品與試劑

白芍、麥冬、玄參、火麻仁、枳實(shí)、厚樸、太子參、生白術(shù)、甘草飲片（批號(hào)分別為D2209079、2210048、2206147、2206142、2207091、2210036、2111091、D2207058、2206076）均購(gòu)自四川新荷花中藥飲片股份有限公司，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)教研室黃勤挽副教授鑒定均為真品。

乳果糖口服溶液（批號(hào)366197，規(guī)格15 mL∶10 g）由Fresenius Kabi Austria GmbH生產(chǎn)；復(fù)方地芬諾酯片（批號(hào)220501，每片含鹽酸地諾酚酯2.5 mg、硫酸阿托品25μg）由廣西河豐藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)；活性炭、阿拉伯樹膠（批號(hào)分別為C14358027、C14362403）均購(gòu)自上海麥克林生化科技股份有限公司；AxyPrep DNA凝膠回收試劑盒購(gòu)自美國(guó)Axygen Biosciences 公司；SMRTbellTMTemplate 制備試劑盒購(gòu)自美國(guó)Pacific Biosciences 公司；GABA、5-HT對(duì)照品（批號(hào)分別為1ST7512、1ST157682，純度分別為99.6%、99.9%）均購(gòu)自天津阿爾塔科技有限公司；甲醇、乙腈、甲酸為色譜純，其余試劑為分析純或?qū)嶒?yàn)室常用規(guī)格，水為超純水。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF級(jí)健康SD大鼠40 只，雌雄各半，4 周齡，購(gòu)自斯貝福（北京）生物技術(shù)有限公司，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證號(hào)為SCXK（京）2019-0010。所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均飼養(yǎng)于成都中醫(yī)藥大學(xué)溫江校區(qū)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物飼養(yǎng)中心[相對(duì)濕度（55±10）%，溫度（25±2）℃，每12 h 明暗交替，定時(shí)通風(fēng)換氣]，以普通飼料喂養(yǎng)并自由飲水。所有實(shí)驗(yàn)程序均經(jīng)過四川省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)會(huì)福利倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（批準(zhǔn)文號(hào)P202303201）。

2 方法

2.1 藥液和墨汁的制備

2.1.1 加味芍藥甘草湯

稱取飲片白芍15 g、麥冬10 g、玄參10 g、火麻仁10g、枳實(shí)8 g、厚樸8 g、太子參8 g、生白術(shù)8 g、甘草5 g（共82 g），混合，以10 倍量水浸泡30 min 后，武火煮沸，轉(zhuǎn)文火煎煮30 min，過濾；取藥渣，同法再煎煮1 次。合并2次水煎液，過濾，濃縮，得質(zhì)量濃度為5.6 g/mL（以生藥量計(jì)）的加味芍藥甘草湯煎液。

2.1.2 陽性對(duì)照藥

取乳果糖口服溶液適量，用生理鹽水制成質(zhì)量濃度為208.44 mg/mL的溶液，即配即用。

2.1.3 復(fù)方地芬諾酯

將復(fù)方地芬諾酯片研磨為細(xì)粉，用生理鹽水配制成質(zhì)量濃度為1.5 mg/mL的混懸液，即配即用。

2.1.4 墨汁

取阿拉伯膠50 g，加水400 mL，混合，煮沸至澄清透明，再加活性炭25 g，混勻并煮沸3 次，冷卻，用水定容至500 mL，于4 ℃下保存，使用前攪拌均勻。

2.2 分組、造模與給藥

大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d 后，按隨機(jī)數(shù)字表法分為空白組（10 只）和造模組（30 只），雌雄各半。造模組大鼠參考相關(guān)文獻(xiàn)[2，13―14]，采用復(fù)方地芬諾酯[15 mg/（kg·d），每天1 次，連續(xù)14 d]灌胃的方式構(gòu)建STC 模型；空白組大鼠灌胃等體積生理鹽水。造模后，若大鼠出現(xiàn)體形干癟瘦小、毛發(fā)豎立、拱背、活動(dòng)減少、糞便質(zhì)量減輕及顆粒變細(xì)等癥狀，大便Bristol 評(píng)分較空白組顯著降低，且首粒黑便排出時(shí)間（造模結(jié)束后立即禁食24 h，經(jīng)口灌入墨汁10 mL/kg。從灌胃完畢開始計(jì)時(shí)，記錄首粒黑便排出時(shí)間）較空白組顯著延長(zhǎng)，則視為STC模型復(fù)制成功。

造模期間大鼠無死亡，全部存活。將造模成功的大鼠隨機(jī)分為模型組（10 只），加味芍藥甘草湯組（10 只），陽性對(duì)照藥組（10 只），雌雄各半。本課題組前期臨床研究表明，加味芍藥甘草湯常規(guī)劑量治療STC 的療效顯著，故參考此劑量，予加味芍藥甘草湯組大鼠相應(yīng)藥液56 g/（kg·d）（以生藥量計(jì)）；同法予陽性對(duì)照藥組大鼠相應(yīng)藥液2.09 g/（kg·d），空白組和模型組大鼠灌胃等體積生理鹽水；每天1 次，連續(xù)14 d。

2.3 大鼠一般情況觀察及體重、Bristol 評(píng)分、糞便含水率檢測(cè)

2.3.1 一般情況觀察

實(shí)驗(yàn)期間，觀察各組大鼠的精神、活動(dòng)、毛發(fā)、攝食、飲水等一般情況。

2.3.2 體重、Bristol評(píng)分、糞便含水率檢測(cè)

（1）體重：觀察各組大鼠實(shí)驗(yàn)期間的體重變化情況，并記錄末次給藥后各組大鼠的體重。

（2）糞便Bristol 評(píng)分：末次給藥后，將大鼠單籠飼養(yǎng)，收集其24 h 糞便，并按Bristol 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)評(píng)估其糞便性狀，具體標(biāo)準(zhǔn)如下：糞便存在分散的硬塊，似堅(jiān)果，記1分；糞便呈臘腸狀，且成塊，記2 分；糞便呈臘腸狀，但表面有裂縫，記3 分；糞便似臘腸或蛇狀，光滑柔軟，記4分；糞便為軟團(tuán)，邊緣清楚，記5 分；糞便似糊狀、絨狀物，邊緣不清，記6 分；糞便為水樣，無固狀物，記7 分[13]。

（3）糞便含水率：取各組大鼠上述24 h 糞便，稱定糞便濕重；于60 ℃下恒溫烘干12 h 后，稱定其干重，按下式計(jì)算糞便含水率：糞便含水率＝（糞便濕重－糞便干重）/糞便濕重×100%[13]。

2.4 大鼠腸道推進(jìn)功能檢測(cè)

采用墨汁灌胃法檢測(cè)。結(jié)束上述指標(biāo)檢測(cè)后，隨機(jī)選取每組4 只大鼠，禁食、不禁水24 h，以墨汁10 mL/kg灌胃，30 min 后以戊巴比妥鈉30 mg/kg 腹腔注射麻醉，再以頸椎脫臼法處死，隨后立即剖開腹部，快速取出其腸道，在無張力的狀態(tài)下測(cè)量大鼠的腸道全長(zhǎng)及墨汁在腸道內(nèi)的推進(jìn)長(zhǎng)度，按下式計(jì)算腸道推進(jìn)率：腸道推進(jìn)率＝墨染腸管長(zhǎng)度/腸道全長(zhǎng)×100%[13]。

2.5 大鼠腸內(nèi)容物中GABA、5-HT含量的檢測(cè)

取每組剩余6 只大鼠，按“2.4”項(xiàng)下方法麻醉、處死、解剖，快速取出其腸內(nèi)容物，采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)其中GABA、5-HT含量。

（1）色譜與質(zhì)譜條件：色譜柱為Agilent Eclipse PlusC18（3.0 mm×150 mm，1.8 μm），以0.6% 甲酸溶液（A）-乙腈（B）為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫（0～0.3 min，98%A；0.3～5 min，98%A→90%A；5～10 min，90%A→10%A；10～14.5 min，10%A→98%A），柱溫為35 ℃，進(jìn)樣量為5 μL。采用電噴霧離子源以多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式進(jìn)行正離子掃描，用于定量分析的離子對(duì)分別為m/z 104.1→87.1（GABA）、m/z 177.4→160.0（5-HT）。

（2）樣品檢測(cè)：精密稱取各組大鼠的腸內(nèi)容物50mg，置于2 mL EP 管中，加入－20 ℃預(yù)冷的80% 乙腈400 μL 沉淀蛋白，渦旋提取20 min，于4 ℃下以12 000r/min 離心10 min；取上清液，以氮?dú)饬鞔蹈?，殘?jiān)猿跏剂鲃?dòng)相100 μL 復(fù)溶，于4 ℃下以12 000 r/min 離心10min；取上清液，按上述色譜與質(zhì)譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積，以外標(biāo)法計(jì)算腸內(nèi)容物中GABA、5-HT 含量。方法學(xué)考察結(jié)果顯示，GABA、5-HT檢測(cè)質(zhì)量濃度的線性范圍分別為1.00～50.0、2.00～100 ng/mL（r＞0.999）；精密度、重復(fù)性等結(jié)果均符合2020 年版《中國(guó)藥典》（四部）的相關(guān)要求。

2.6 大鼠腸道菌群檢測(cè)

采用第三代16S rRNA 高通量測(cè)序技術(shù)檢測(cè)。取“2.5”項(xiàng)下各組大鼠的腸內(nèi)容物樣本適量，使用相應(yīng)試劑盒對(duì)樣本進(jìn)行基因提取和定量后，使用特定引物（515 正向引物為5′-AGRGTTYGATYMTGGCTCAG-3′，806 反向引物為5′-RGYTACCTTGTTACGACTT-3′，由杭州聯(lián)川生物技術(shù)股份有限公司設(shè)計(jì)、合成）擴(kuò)增16S rRNA的V1～V9 區(qū)域。所得產(chǎn)物經(jīng)回收、純化后，使用藍(lán)色熒光定量系統(tǒng)定量；以SMRTbellTM Template 制備試劑盒構(gòu)建測(cè)序文庫(kù)，并進(jìn)行測(cè)序分析。采用DADA 2 軟件對(duì)測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行去噪處理，得到擴(kuò)增子序列變體（amplicon sequencevariants，ASV）特征序列和豐度表格，使用SILVA數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//www.arb-silva.de）進(jìn)行分類學(xué)注釋，通過Chao1、Goods_coverage、Shannon、Simpson 指數(shù)（ 以Chao1 指數(shù)表征群落豐度，Shannon、Simpson 指數(shù)表征群落多樣性，Goods_coverage 指數(shù)反映測(cè)序深度）進(jìn)行腸道菌群的α 多樣性分析，通過計(jì)算4 種距離（weighted_unifrac、unweighted_unifrac、jaccard、bray_curtis）以主成分分析（principal component analysis，PCA）法進(jìn)行腸道菌群的β多樣性評(píng)價(jià)；同時(shí)，從門水平分析腸道菌群的物種組成，并通過方差分析進(jìn)行組間比較。

2.7 GABA、5-HT含量與腸道菌群相對(duì)豐度的相關(guān)性分析

對(duì)各組大鼠腸內(nèi)容物中GABA、5-HT含量與腸道菌群相對(duì)豐度進(jìn)行Pearson 相關(guān)性分析，并繪制熱圖。

2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以x±s 表示，兩組間比較采用t 檢驗(yàn)（方差齊）或校正t 檢驗(yàn)（方差不齊）；多組間比較采用單因素方差分析，事后多重比較采用LSD-t 檢驗(yàn)（方差齊）或Tamhane’s T 2檢驗(yàn)（方差不齊）。不符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以M（P25，P75）表示，組間比較采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05。

3 結(jié)果

3.1 加味芍藥甘草湯對(duì)大鼠一般情況、體重、Bristol 評(píng)分、糞便含水率的影響

與空白組比較，模型組大鼠形體瘦小，皮毛稀疏粗糙，行動(dòng)變遲緩，其體重、Bristol 評(píng)分、糞便含水率均顯著降低（P＜0.05）；與模型組比較，各藥物組大鼠上述一般情況均有所改善，其體重、Bristol 評(píng)分、糞便含水率均顯著升高（P＜0.05）。結(jié)果見表1。

3.2 加味芍藥甘草湯對(duì)大鼠腸道推進(jìn)率的影響

與空白組[（81.34±11.19）%]比較，模型組大鼠的腸道墨汁推進(jìn)長(zhǎng)度明顯縮短，腸道推進(jìn)率[（33.51±9.52）%]顯著降低（P＜0.01）；與模型組比較，加味芍藥甘草湯組和陽性對(duì)照藥組大鼠的腸道墨汁推進(jìn)長(zhǎng)度均有所延長(zhǎng)，其推進(jìn)率[（75.57%±12.44）% 、（52.64±15.38）%]均顯著升高（P＜0.05）。結(jié)果見圖1。

3.3 加味芍藥甘草湯對(duì)大鼠腸內(nèi)容物中GABA、5-HT含量的影響

與空白組比較，模型組大鼠腸內(nèi)容物中GABA含量顯著升高，5-HT 含量顯著降低（P＜0.05）；與模型組比較，加味芍藥甘草湯組大鼠腸內(nèi)容物中GABA含量顯著降低，5-HT含量顯著升高（P＜0.05），而陽性對(duì)照藥組大鼠腸內(nèi)容物中上述指標(biāo)含量的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)果見圖2。

3.4 加味芍藥甘草湯對(duì)大鼠腸道菌群的影響

3.4.1 α多樣性

與空白組比較，模型組大鼠的Chao1、Shannon 指數(shù)均顯著降低（P＜0.05）；與模型組比較，加味芍藥甘草湯組大鼠的Chao1、Shannon 指數(shù)均顯著升高（P＜0.05），而陽性對(duì)照藥組大鼠的Chao1、Shannon 指數(shù)和加味芍藥甘草湯大鼠的Simpson 指數(shù)均顯著降低（P＜0.05）；各組大鼠的Goods_coverage 指數(shù)比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)果見表2。

3.4.2 β多樣性

PCA結(jié)果提示，空白組與加味芍藥甘草湯組腸道菌群可歸為一類，與模型組距離較遠(yuǎn)；而陽性對(duì)照藥組大鼠腸道菌群與模型組距離較近。結(jié)果見圖3。

3.4.3 物種組成

門水平上，與空白組比較，模型組大鼠腸內(nèi)容物中脫硫桿菌門Desulfobacterota 的相對(duì)豐度顯著升高（P＜0.05）；厚壁菌門Firmicutes 的相對(duì)豐度雖有所降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。與模型組比較，加味芍藥甘草湯組大鼠腸內(nèi)容物中脫硫桿菌門、厚壁菌門、擬桿菌門Bacteroidota 的相對(duì)豐度雖有回調(diào)，但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。方差分析結(jié)果顯示，脫硫桿菌門是組間差異因素（P＜0.05）。結(jié)果見圖4。

3.5 GABA、5-HT含量與腸道菌群相對(duì)豐度的相關(guān)性

Pearson 分析結(jié)果提示，GABA的含量與擬桿菌門、藍(lán)菌門Cyanobacteria、髕骨菌門Patescibacteria、放線菌門Actinobacteriota 的相對(duì)豐度呈負(fù)相關(guān)（r＜0，P＜0.01或P＜0.05）；5-HT 的含量與彎曲桿菌門Campilobacterota的相對(duì)豐度呈正相關(guān)（r＞0，P＜0.05）。結(jié)果見圖5。

4 討論

STC是一類以結(jié)腸傳輸減慢為特點(diǎn)的頑固性便秘，病情易反復(fù)且病程持久，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量[1―2]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療STC一般以基礎(chǔ)治療為主，手段有限且遠(yuǎn)期效果不佳[15―16]。我國(guó)中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，STC的病位在大腸，病機(jī)為大腸傳輸功能失常。研究證實(shí)，中醫(yī)藥治療STC具有療效確切、安全可靠、作用持久等優(yōu)勢(shì)[5，17]。加味芍藥甘草湯由經(jīng)典名方“芍藥甘草湯”化裁而得，用于小兒STC的療效確切[10]。本方重用白芍化陰降下為君，與甘草配伍酸甘化陰、養(yǎng)陰增液，且《本經(jīng)疏證》記載“芍藥合甘草以破腸胃之結(jié)”，因此白芍、甘草合用既能滋陰潤(rùn)燥，也能破腸胃之結(jié)以通下；輔以玄參、麥冬，可滋陰潤(rùn)燥、清熱生津；枳實(shí)清脾熱且理脾氣，使氣機(jī)得以通暢；厚樸一則增強(qiáng)枳實(shí)理氣下行之功，二則制約玄參、枳實(shí)寒性太過，使脾氣既不為熱約、又不為寒凝；火麻仁潤(rùn)腸通便；生白術(shù)、太子參益脾氣，降陰濁，升清陽，消水谷；全方共奏酸甘化陰、養(yǎng)陰增液、益氣通便之功[10]。

GABA、5-HT 是反映腸道功能的重要介質(zhì)，在STC發(fā)生發(fā)展中具有特殊的作用。近期研究表明，GABA能系統(tǒng)在腸神經(jīng)系統(tǒng)中廣泛表達(dá)，可與其他神經(jīng)遞質(zhì)協(xié)同作用以維持腸道穩(wěn)態(tài)，并可參與調(diào)節(jié)腸神經(jīng)系統(tǒng)功能及腸激素分泌[11―12]。研究表明，GABA能激活腸道組織中的GABA A型受體（type A γ aminobutyric acid receptor，GABAAR），引起上皮細(xì)胞氯離子（Cl－）外流，從而使腸道基底側(cè)水、電解質(zhì)向腸腔內(nèi)流動(dòng)，從而調(diào)節(jié)腸道的水液代謝；同時(shí)，GABAAR激活后，可刺激腸嗜鉻細(xì)胞分泌5-HT，5-HT分泌的增加可有助于改善機(jī)體的腸道傳導(dǎo)功能[15―16]。此外，有研究指出，GABA具有一定的腸道動(dòng)力促進(jìn)作用，但高濃度GABA的作用可能與之相反；同時(shí)，GABA也是腸道菌群的營(yíng)養(yǎng)來源之一，其在腸道菌群中的穩(wěn)態(tài)是維持腸道動(dòng)力正常的關(guān)鍵[5]。本研究結(jié)果顯示，經(jīng)加味芍藥甘草湯干預(yù)后，大鼠腸內(nèi)容物中GABA含量較模型組顯著降低，5-HT含量較模型組顯著升高，提示加味芍藥甘草湯可能通過調(diào)節(jié)腸內(nèi)容物中GABA 和5-HT 含量，進(jìn)而改善模型大鼠的糞便Bristol評(píng)分、糞便含水率、腸道推進(jìn)率等STC相關(guān)指標(biāo)。

研究指出，腸道菌群失調(diào)是STC 等疾病的重要病因，而GABA和5-HT 作為腸道菌群與宿主的共代謝產(chǎn)物，在胃腸道疾病的發(fā)生發(fā)展中具有關(guān)鍵作用[18―20]。本研究結(jié)果表明，加味芍藥甘草湯能夠改善模型大鼠腸道菌群的多樣性，使其接近空白組水平，且效果優(yōu)于陽性對(duì)照藥；同時(shí)，加味芍藥甘草湯組擬桿菌門、厚壁菌門相對(duì)豐度均有增加趨勢(shì)，且兩者比例相較模型組更接近空白組；Pearson 分析結(jié)果顯示，GABA的含量與擬桿菌門、藍(lán)菌門、髕骨菌門、放線菌門的相對(duì)豐度呈負(fù)相關(guān)，5-HT的含量與彎曲桿菌門的相對(duì)豐度呈正相關(guān)，提示腸道菌群與宿主共代謝產(chǎn)物GABA、5-HT的含量與特定菌門顯著相關(guān)。以上結(jié)果表明，各組大鼠腸道菌群組成具有高度的特異性，STC大鼠腸道菌群中有害菌（厚壁菌門、脫硫桿菌門等）的相對(duì)豐度增加，而加味芍藥甘草湯可改善大鼠的腸道菌群結(jié)構(gòu)，并可一定程度地下調(diào)有害菌的相對(duì)豐度，進(jìn)而影響大鼠腸道菌群中GABA、5-HT的含量[21]。但本研究并未具體到菌屬、菌種，這可能是藥物組與模型組菌群豐度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的原因，尚需后續(xù)實(shí)驗(yàn)予以完善。

綜上所述，加味芍藥甘草湯可改善STC模型大鼠糞便性狀和腸道動(dòng)力，上述作用可能與改善腸道菌群，進(jìn)而影響腸內(nèi)容物中GABA、5-HT含量有關(guān)；GABA、5-HT含量可能與擬桿菌門、彎曲桿菌門等特定菌門的相對(duì)豐度顯著相關(guān)。

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（收稿日期：2024-05-29 修回日期：2024-12-01）

（編輯：張?jiān)拢?/p>