●趙喜新　王和平　田開宇　黃喜梅

(河南中醫(yī)學(xué)院針推系,鄭州450003;1河南省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究所)

摘要為了分析針灸對抗化療藥物所致骨髓抑制,用環(huán)磷酰胺(CY)建造小鼠骨髓抑制模型,隨機分為CY加艾灸組、CY對照組、CY加針刺組,并與正常小鼠對照。每隔48小時檢測股骨髓有核細(xì)胞總數(shù)、骨髓細(xì)胞分類計數(shù)。結(jié)果顯示:灸、刺可加快造血細(xì)胞分裂增殖,促進(jìn)白細(xì)胞向外周血釋放,尤其對粒系作用明顯。

主題詞骨髓/針灸效應(yīng)骨髓細(xì)胞/針灸效應(yīng)粒細(xì)胞/針灸效應(yīng)

針灸能夠升高化療藥物環(huán)磷酰胺(CY)所致小鼠外周血降低的白細(xì)胞。筆者曾觀察了白細(xì)胞的動態(tài)變化并做了報道^[1]。為了進(jìn)一步闡明針灸升高白細(xì)胞的機制,我們觀察了針灸對CY化療小鼠骨髓造血細(xì)胞及粒系細(xì)胞動態(tài)變化的過程,現(xiàn)報告如下。

1材料及方法

1.1實驗動物及化療藥物

健康雄性昆明種小鼠,7周齡,體重20～30g(河南醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供)。CY(上海第十二制藥廠產(chǎn)品)。

1.3動物分組及造模

64只小鼠隨機分為4組:A組19只為CY加艾灸治療組(艾灸組);B組19只為CY對照組(對照組);C組19只為CY加針刺治療組(針刺組);D組7只為正常對照組(正常組)。A、B、C組小鼠按200 mg/kg腹腔一次性注射CY,CY用生理鹽水配制成10 mg/ml;D組則腹腔注射同體積生理鹽水。

1.4針灸治療

各組小鼠于腹腔注射后立即開始針灸治療或?qū)φ仗幚?每日1次,連續(xù)6天,各組配對同時進(jìn)行。將A組小鼠伏臥固定于木板上,在"大椎"、"膈俞"穴(模擬大鼠穴位定位法^[2])上涂醫(yī)用凡士林少許,制小艾炷(稍大于綠豆,重約1.5 mg),直接放在"大椎"、"膈俞"穴上,用線香點燃,待艾炷燃至小鼠掙扎時,即用鑷子夾去,每穴4壯。同法固定C組小鼠,取雙側(cè)"足三里"、"三陰交"穴,用直徑為0.22 mm,長13 mm毫針,刺入3 mm左右,留針5 min。B、D組小鼠僅陪同固定,不治療。

1.5檢測

從對小鼠注射時算起的第3,5天,A、B、C組各頸椎脫位處死6只,第7天將4組全部脫頸處死,查股骨髓有核細(xì)胞總數(shù),骨髓細(xì)胞分類計數(shù),方法參照文獻(xiàn)^[3]。

2結(jié)果

2.1骨髓有核細(xì)胞

各組小鼠骨髓有核細(xì)胞數(shù)見表1。

從表1可見,小鼠用CY后的第3天,各組間股骨髓有核細(xì)胞總數(shù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義,但較正常動物明顯減少(正常組第7天數(shù)據(jù)作為正常對照指標(biāo),后同)。第5天,有核細(xì)胞呈現(xiàn)A>C>B,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,說明針灸刺激了造血細(xì)胞增殖,艾灸效果最好。第7天,A、B、C組骨髓有核細(xì)胞又較第5天明顯增加,灸、刺組仍優(yōu)于對照組,但數(shù)量少于正常組。

2.2骨髓細(xì)胞分類

各組小鼠骨髓細(xì)胞分類計數(shù)見表2(僅列出粒系)。

3討論

小鼠注CY的第3天,各組有核細(xì)胞總數(shù)相近,但粒系百分?jǐn)?shù)合計呈現(xiàn)B>C>A,差異具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義。進(jìn)一步觀察可見成熟池(晚幼、桿狀、分葉)細(xì)胞所占百分比均呈現(xiàn)B>C>A,似可說明,在骨髓有核細(xì)胞相近的前提下,灸、刺使成熟池百分比減少,是由于向外周血中釋放的原故,實際上第3天灸、刺已經(jīng)顯示出了促進(jìn)造血細(xì)胞增殖的效果。

小鼠注CY的第5天,粒系百分?jǐn)?shù)合計由第3天的B>C>A而變?yōu)锳>C>B,盡管〖WTBX〗P>0.05,由于①對比發(fā)生逆轉(zhuǎn),②骨髓有核細(xì)胞總數(shù)此時呈現(xiàn)A>C>B,所以具有醫(yī)學(xué)意義,進(jìn)一步說明艾灸和針刺加速了骨髓粒細(xì)胞的分裂增殖和成熟。另外從造血細(xì)胞分裂增殖的時相分析:由于第3天灸、刺組骨髓成熟池細(xì)胞百分比少于對照組,反饋性調(diào)節(jié)增殖池(原始、早幼、中幼)細(xì)胞加速分裂成熟,相隔48h的第5天,這個效應(yīng)通過中幼百分比印證,呈現(xiàn)A>C>B,并且A>B有極顯著統(tǒng)計學(xué)意義。相隔早幼時相,原始粒細(xì)胞的百分比呈現(xiàn)B>C>A,這可能是處理方法造成的假象,如將各組原始粒細(xì)胞參照表1換算為絕對數(shù):艾灸組=1246.7萬×17.5%=218萬;針刺組=816.7萬×26.8%=219萬;對照組=616.7萬×28.0%=173萬。結(jié)果仍是刺、灸組多。

小鼠注CY的第7天,粒系百分?jǐn)?shù)合計A>C>B,A>B差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義,C>B差異不顯著。由于骨髓有核細(xì)胞針刺組同樣高于對照組,參照表1換算成絕對數(shù),仍具有醫(yī)學(xué)意義。第7天,3組注CY小鼠各類粒細(xì)胞百分比均高于正常組(有類白血病反應(yīng),此處不討論),提示小鼠注CY后,粒系細(xì)胞立即被殺滅,百分比減少,以后迅速的反饋性調(diào)節(jié),使粒系增高并超越正常小鼠。借助文獻(xiàn)^[1]數(shù)據(jù),當(dāng)外周血白細(xì)胞低于正常水平時,艾灸和針刺加強這種負(fù)反饋,可使外周血白細(xì)胞較快的回升。當(dāng)?shù)?天外周血白細(xì)胞已接近或超越正常水平時,從骨髓粒系增殖池和成熟池的百分比分析,艾灸和針刺仍起到較好的負(fù)反饋調(diào)節(jié)作用,使增殖池百分比低于對照組,從而抑制外周血白細(xì)胞過高的反跳,因此說明,針灸還可治療外周血白細(xì)胞增高癥。從我們的預(yù)實驗看到^[4],單純造模,可使外周血白細(xì)胞的反跳(高于正常小鼠)持續(xù)相當(dāng)長一段時間。第7天的數(shù)據(jù)提示,灸刺可減輕反跳。

4結(jié)論

臨床上用針灸治療化療所致白細(xì)胞減少癥,通過本實驗可以證明3點作用機制:第1,灸、刺提高骨髓有核細(xì)胞的絕對數(shù),并在第5天開始提高中性粒系的相對數(shù),即是促進(jìn)了骨髓造血細(xì)胞的分裂增殖,尤其對粒系作用明顯。第2,在骨髓有核細(xì)胞絕對數(shù)相近的條件下,灸、刺組成熟池細(xì)胞百分比下降,似說明是灸、刺促使其向外周血中釋放所致。第3,提示灸、刺可以調(diào)整白細(xì)胞生成過程中負(fù)反饋調(diào)節(jié)的力度,從而可防止因化療藥物所致白細(xì)胞過高的反跳,推測灸、刺還有可能治療白細(xì)胞增多癥。

5參考文獻(xiàn)

1趙喜新.針灸對化療小鼠白細(xì)胞動態(tài)變化的影響.河南中醫(yī),1996;16(4):216

2華興邦,等.大鼠穴位圖譜的研制.實驗動物與動物實驗,1991;(1):2

3施新猷,等.醫(yī)學(xué)動物實驗方法.北京:人民衛(wèi)生出版社,1980:279

4趙喜新,等.環(huán)磷酰胺引致的小鼠白細(xì)胞減少模型及動力學(xué)分析.上海實驗動物科學(xué).1998;18(1):12

(收稿日期:19990320,齊淑蘭發(fā)稿)