姚志剛 劉尚前
(河北北方學院農林科技學院,河北宣化,075131)
馬鈴薯試管苗快繁方法改進試驗
姚志剛 劉尚前
(河北北方學院農林科技學院,河北宣化,075131)
以馬鈴薯品種大西洋、無花的試管苗為材料,將剪去根部和頂芽的多莖節(jié)切段,直接橫放,接種于含有不同激素及配比的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。研究結果表明,MS培養(yǎng)基附加1.0 mg/L 6-BA和1.0 mg/L NAA,可使得每個腋芽快速萌發(fā)并生根、成苗,大大提高效率。
馬鈴薯 多莖節(jié)切段 不同激素 快速成苗
馬鈴薯是重要的糧食兼蔬菜作物,由于病毒感染而引起的退化導致其產量大幅度下降和品質變劣,曾一度成為世界性難題。利用馬鈴薯莖尖脫毒技術生產無病毒種薯,成為防治馬鈴薯退化的主要措施[1]。脫毒苗的繼代擴繁是生產脫毒種薯的重要環(huán)節(jié)[2~3],品種本身的特性、環(huán)境條件、培養(yǎng)基的成分、切繁方法[4]等因子影響馬鈴薯脫毒苗切繁數(shù)量和質量。常用的切繁方法是將帶有一個葉片的單莖段接種于培養(yǎng)基中培養(yǎng)成苗,不僅切繁速度慢,而且腋芽暴露時間長、容易污染,效率低。本研究用價格低廉的罐頭瓶和自來水,將剪去根部和頂芽的多莖節(jié)切段直接橫放,接種于含有不同濃度激素及不同配比的培養(yǎng)基中培養(yǎng),找到一種最適宜的培養(yǎng)基配方,使得每個腋芽快速萌發(fā)并生根、成苗,從而大大降低了成本,提高了效率,以期為工廠化生產優(yōu)質、低成本的馬鈴薯試管苗提供科學依據。
1.1 試驗材料
馬鈴薯品種大西洋、無花的試管苗,培養(yǎng)基、激素均購自市場。
1.2 試驗方法
①培養(yǎng)基種類 A:MS;B:MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L;C:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L; D:MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L;E:MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L。
②剪切方法 為了保證試驗的一致性,試驗材料均采用含有5個葉片的試管苗作為基礎苗,剪去根部和頂芽。分別按以下方式剪切:a.按照傳統(tǒng)方法,即剪成單莖節(jié)切段,然后接種于培養(yǎng)基中。b.將此多莖節(jié)切段直接橫放于培養(yǎng)基中。每個處理重復3次,每瓶5根苗。
③培養(yǎng)條件 自來水配置培養(yǎng)基,調節(jié)pH值為5.8,然后高壓滅菌,培養(yǎng)室內溫度為22~25℃,每天光照12 h,光照強度為2 500~3 000 lx。按照同樣的方法繼代擴繁2次,調查切繁后最早生根時間,以及切繁20 d以后平均每節(jié)的條數(shù)、每瓶萌發(fā)的腋芽數(shù)以及平均株高等,并進行兩種切繁方法的效率比較。
2.1 不同剪切方式、不同培養(yǎng)基對馬鈴薯試管苗生長發(fā)育的影響
從試驗結果(表1)可以看出,培養(yǎng)基中激素的種類和濃度不同,馬鈴薯試管苗的長勢、長相不同。不加任何激素即MS培養(yǎng)基,馬鈴薯試管苗未萌發(fā);加了激素的培養(yǎng)基,馬鈴薯試管苗株高較高,葉片數(shù)多,生根快、根的條數(shù)多,苗的長勢較好;馬鈴薯腋芽的萌發(fā)與6-BA和NAA的濃度有關,隨著二者濃度的增加,萌發(fā)的腋芽數(shù)也越多,但是濃度超過一定的界限,則萌發(fā)腋芽數(shù)目減少。試驗結果表明,6-BA和NAA的濃度都為1.0 mg/L時,多莖段每個腋芽都能萌發(fā),生根快、植株長得快、苗長勢好。
表1 不同剪切方式不同培養(yǎng)基對馬鈴薯試管苗生長發(fā)育的影響
表2 不同剪切方式的剪切次數(shù)及成苗數(shù)
2.2 不同剪切方式效率比較
基礎苗以5根計算,去掉根部和頂部莖芽,由表2可以看出,馬鈴薯多莖節(jié)切繁方法與傳統(tǒng)方式相比具有許多優(yōu)點,首先,剪切次數(shù)大大降低,馬鈴薯多莖節(jié)剪切次數(shù)是傳統(tǒng)的1/3,而所擴繁的苗數(shù)相同,苗的長勢也較好,在質量上優(yōu)于傳統(tǒng)方法,這樣就大大縮短了接種時間,減少了用工,提高了工作效率。其次,傳統(tǒng)剪切方法剪切時由于腋芽在操作臺上暴露時間長,增加了人為污染的機會,而多莖節(jié)剪切方法省去了剪切腋芽這道工序,大大降低了污染的機會。另外,本試驗用價格低廉的罐頭瓶和自來水,也大大降低了成本。因此,利用多莖節(jié)剪切技術可以為規(guī)?;a脫毒馬鈴薯提供廉價、健壯的試管苗,產生較好的經濟效益。
試管苗的繼代擴繁是生產優(yōu)質馬鈴薯脫毒苗的重要環(huán)節(jié),而培養(yǎng)基的成分[5]是決定這一環(huán)節(jié)的重要因素,關于馬鈴薯使用激素對產量和質量的影響也有些報道[6~7],本試驗結果表明,MS培養(yǎng)基附加1.0 mg/L 6-BA和1.0 mg/L的NAA,可使每個腋芽快速萌發(fā)并生根、成苗,大大降低了成本,提高效率。
試驗剪去了頂部腋芽,目的是去掉頂端優(yōu)勢,使莖段中的腋芽在激素的誘導下萌發(fā)并生根成苗,如果不剪去頂部腋芽,則多莖節(jié)切段腋芽萌發(fā)率下降,成苗率也下降。而剪去的頂部腋芽接種于培養(yǎng)基中,仍然能夠成苗,這樣既增加了成苗數(shù),又防止了材料的浪費。
本試驗是用2個品種的馬鈴薯試管苗進行的,多莖節(jié)剪切方法用于種薯生產后,是否影響種薯的產量和質量有待于進一步研究。
[1]劉衛(wèi)平.馬鈴薯試管苗新的繁殖方法研究[J].中國馬鈴薯,2000,13(3):141-142.
[2]祁彥豐,王萃蓮,魏固寧,等.用三種不同水配制培養(yǎng)基對馬鈴薯脫毒試管苗的影響[J].中國馬鈴薯,2000,13(3):173-174.
[3]溫啟錄,杜金友,秦恩來.馬鈴薯脫毒苗切繁技術[J].馬鈴薯雜志,1998,11(3):169-172.
[4]齊恩芳,仲乃琴,王一航.不同培養(yǎng)方式和成分對馬鈴薯脫毒試管苗生長的影響[J].中國馬鈴薯,2000(1):18-19.
[5]林長玉,李東明,張志龍.不同生長素在馬鈴薯上應用效果的研究[J].中國馬鈴薯,2000,13(3):137.
[6]郭洪云,宋新玲,陳濱波,等.NAA和2,4-D對脫毒馬鈴薯扦插苗生長及產量的影響[J].馬鈴薯雜志,1998,11(2):74-76.
[7]林從發(fā),魏澤平,羅仰奮,等.馬鈴薯脫毒試管苗繁育及脫毒種薯生產技術[J].中國馬鈴薯,2000,13(4):225-226.
Primary Study on Rapid Reproduction Method of Tube Test Plantlets in Potato
YAO Zhigang,LIU Shangqian
(Department of Agronomy,Hebei North University,Xuanhua,Hebei 075131)
The stem segments of in vitro plantlet were taken as explants to propagate in vitro rapidly in potato variety,Atlantic and Wuhua.The experiments were done using different hormones and proportion of culture medium.The result showed that"MS medium supplemented with 1.0 mg/L 6-BA and 1.0 mg/L NAA"was optimum for them,every axillary buds could sprout rapidly in this medium.They could root easily.The efficiency were improved,the cost were decreased.
Potato;Stem segments;Different hormones;Rapidly propagation
10.3865/j.issn.1001-3547.2009.12.004
2006-2008年張家口市科技攻關項目“馬鈴薯脫毒種薯快繁體系優(yōu)化及試管薯誘導技術研究”
姚志剛(1966-),男,副教授,在讀碩士,現(xiàn)從事作物栽培與遺傳育種工作與研究。電話:0313-8041600
2009-04-03