趙杰 倪秀紅 顧振芳

（1.上海市南匯區(qū)種植業(yè)技術(shù)推廣中心，201300；2.上海交通大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物學(xué)院）

內(nèi)吸性殺菌劑對甜瓜枯萎病菌的室內(nèi)毒力測定

趙杰1倪秀紅1顧振芳2

（1.上海市南匯區(qū)種植業(yè)技術(shù)推廣中心，201300；2.上海交通大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物學(xué)院）

采用生長速率法測定了幾種內(nèi)吸性殺菌劑對甜瓜枯萎病菌的毒力。試驗(yàn)結(jié)果表明，多菌靈和氟硅唑的毒力最高，其EC50分別為2.267 1 mg/L和13.341 8 mg/L；而且枯萎病菌對多菌靈和氟硅唑的敏感性也較高；多菌靈和氟硅唑?qū)菸【穆?lián)合毒力測定結(jié)果表明，兩種藥以6∶1和1∶6混配，具有增效作用。

內(nèi)吸性殺菌劑 甜瓜枯萎病菌 毒力測定

甜瓜枯萎病 （Fusarium oxysporumf.sp.melonis）是甜瓜生產(chǎn)中的主要病害之一，對甜瓜、香瓜致病性強(qiáng)，對黃瓜致病性弱，對西瓜、冬瓜、絲瓜、南瓜等無致病性[1]。近年來隨著溫室、大棚等設(shè)施蔬菜的發(fā)展，尤其在多年連茬的保護(hù)地，該病的發(fā)生日益嚴(yán)重。由于長期不合理使用化學(xué)藥劑，病菌逐漸產(chǎn)生抗藥性，防治效果也日益降低[2～3]；與此同時(shí)，有關(guān)該病的生物防治研究得到人們的日益重視[4～7]，但在目前尚無高效的生物農(nóng)藥和優(yōu)良抗病品種的情況下，化學(xué)防治仍然是控制該病害流行的主要措施。為此我們對8種內(nèi)吸性殺菌劑進(jìn)行了毒力測定，從中篩選出2種毒力較高的殺菌劑，同時(shí)為了延緩病菌抗藥性的產(chǎn)生，又進(jìn)行了聯(lián)合毒力的測定，旨在為該2種藥劑及其混配制劑的實(shí)際應(yīng)用提供理論依據(jù)。

表1 8種殺菌劑對甜瓜枯萎病菌的毒力測定

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試甜瓜枯萎病菌 （Fusarium oxysporumf.sp. melonis）從發(fā)病的上海南匯區(qū)惠南鎮(zhèn)甜瓜地采集，經(jīng)室內(nèi)組織分離、純化[8～9]，回接試驗(yàn)[8，10～12]證明具有致病性。病原菌于PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)7 d用于生長速率法測定。

供試藥劑為50%多菌靈可濕性粉劑（上海升聯(lián)華工有限公司生產(chǎn)），70%甲基硫菌靈可濕性粉劑（日本曹達(dá)株式會社生產(chǎn)），4%嘧啶核苷類抗菌素水劑（武漢科諾生物農(nóng)藥有限公司生產(chǎn)），40%氟硅唑乳油（美國杜邦公司生產(chǎn)），20%嘧霉胺可濕性粉劑（青島翰生生物科技股份有限公司生產(chǎn)），50%異菌脲懸浮劑 （拜耳杭州作物科學(xué)有限公司生產(chǎn)），10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑（先正達(dá)蘇州作物保護(hù)有限公司生產(chǎn)），5%井崗霉素水劑 （江蘇綠豐生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)）。

1.2 試驗(yàn)方法

①單劑毒力測定 根據(jù)試驗(yàn)需要，先將各供試藥劑配制成5～7個(gè)有效成分濃度梯度的藥液。采用生長速率法[13～17]進(jìn)行生物測定：于滅好菌的49 mL PDA培養(yǎng)基內(nèi)，加入1 mL藥液，充分搖勻，分裝到3個(gè)直徑為9 cm的培養(yǎng)皿中，冷卻凝固；將直徑為1 cm的菌絲塊放在含藥培養(yǎng)基中央，每皿1塊，于24～25℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)7 d，測量菌落直徑、計(jì)算抑制率、以各藥劑有效成分在培養(yǎng)基中的濃度為測試濃度計(jì)算回歸方程和抑制中濃度EC50。

②聯(lián)合毒力測定 根據(jù)單劑毒力測定結(jié)果，對毒力最高的2種藥劑多菌靈和氟硅唑進(jìn)行混配，有效成分配比為：6∶1，3∶1，1∶1，1∶3，1∶6配制成6個(gè)濃度梯度。采用生長速率法對枯萎病菌進(jìn)行聯(lián)合毒力測定。以混劑有效成分在培養(yǎng)基中的濃度作為測試濃度計(jì)算回歸方程和抑制中濃度EC50，并計(jì)算出實(shí)測毒力指數(shù) （ATI）、理論毒力指數(shù)（TTI），求出不同配比的共毒系數(shù)（CTC），根據(jù)共毒系數(shù)作出聯(lián)合作用綜合評價(jià)[18]：CTC＜80，拮抗作用；CTC＞120，增效作用；80≤CTC≤120，相加作用。

2 結(jié)果與分析

2.1 單劑對甜瓜枯萎病菌的毒力測定

8種殺菌劑的毒力測定結(jié)果表明，多菌靈和氟硅唑?qū)μ鸸峡菸【亩玖ψ罡?，其EC50分別為2.267 1 mg/L和13.341 8 mg/L，其次為異菌脲、苯醚甲環(huán)唑、嘧霉胺、甲基硫菌靈、井岡霉素和嘧啶核苷類抗菌素。由于毒力回歸曲線的斜率與病原菌對殺菌劑的敏感性成正比，因此病原菌對多菌靈和氟硅唑的敏感也最高，其次為異菌脲、苯醚甲環(huán)唑、嘧霉胺、甲基硫菌靈和井岡霉素（表1）。

2.2 多菌靈和氟硅唑?qū)菸【穆?lián)合毒力測定

對2種毒力最高的藥劑多菌靈和氟硅唑進(jìn)行聯(lián)合毒力測定，結(jié)果表明多菌靈對甜瓜枯萎病菌的抑菌活性高于氟硅唑，兩藥以6∶1和1∶6配比混合，其共毒系數(shù)（CTC）＞120，表現(xiàn)為增效作用；以 3∶11∶1和1∶3配比混合，其80≤共毒系數(shù)（CTC）≤120，表現(xiàn)為相加作用（表2）。

表2 多菌靈與氟硅唑?qū)μ鸸峡菸【穆?lián)合毒力測定

3 小結(jié)與討論

采用生長速率法對8種內(nèi)吸性殺菌劑進(jìn)行室內(nèi)毒力測定，發(fā)現(xiàn)多菌靈和氟硅唑?qū)μ鸸峡菸【哂休^高毒力而且病原菌對多菌靈和氟硅唑的敏感也最高，其EC50分別為2.267 1 mg/L和13.341 8 mg/L；各試驗(yàn)藥劑對病菌的EC50值和毒力回歸方程斜率的大小在描述藥劑毒力時(shí)不一致，這可能與藥劑的作用機(jī)理有關(guān)。

聯(lián)合毒力測定結(jié)果表明：多菌靈和氟硅唑兩種藥以6∶1和1∶6配比混合，表現(xiàn)為增效作用，其EC50分別為2.081 0 mg/L和6.424 8 mg/L，其中6∶1為最佳配比。

另外，試驗(yàn)中只采用生長速率法進(jìn)行毒力測定，至于對孢子萌發(fā)的影響以及混劑的增效機(jī)理、作用方式還有待于進(jìn)一步研究。而且試驗(yàn)中所使用的供試藥劑多為制劑，并非原藥，其中的助劑及填充劑對病菌可能存在一定的影響，這方面有待于改善。

[1]呂佩珂，劉文珍，段半鎖，等．中國蔬菜病蟲原色圖譜續(xù)集[M]．內(nèi)蒙古：遠(yuǎn)方出版社，1996：83-85.

[2]于天祥，張明方．西瓜枯萎病研究進(jìn)展[J]．中國西瓜甜瓜，2004（1）：17-19.

[3]夏正俊，顧本康，霄慶璞，等．西瓜枯萎病綜合防治[J]．中國西瓜甜瓜，1995（3）：23-25.

[4]高增貴，李天來，趙玥．甜瓜枯萎病拮抗內(nèi)生細(xì)菌篩選[J]．西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2005，33（8）：85-87.

[5]Benhamou N,Gagne S,Quere D L,et al.Bacteria-mediated induced resistance in cucumber:beneficial effect of the endophytic bacterium Serratia plymuthicaon the infection against infection by Phythium ultimum[J].Phytopasthology, 2000,90:45-56.

[6]Chen C,Bauske E M,Musson G.Biological control of Fusarium wilt on cotton by use of endophytic bacteria[J]. Biological Control,1995(5):83-91.

[7]楊海蓮，孫曉璐，宋未．植物根際促生細(xì)菌和內(nèi)生細(xì)菌的誘導(dǎo)抗病性的研究進(jìn)展[J]．植物病理學(xué)報(bào)，2000，30（2）：106-110.

[8]李明遠(yuǎn)，張濤濤，李興紅，等．十字花科蔬菜枯萎病及其病原菌鑒定[J]．植物保護(hù)，2003，29（3）：44-45.

[9]方中達(dá)．植病研究方法[M]．北京：農(nóng)業(yè)出版社，1979：116.

[10]顧衛(wèi)紅，王燕華，宋榮浩．上海地區(qū)西瓜枯萎病病原菌生理小種初探[J]．上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，1994（10）：63-67.

[11]王燕華．上海地區(qū)西瓜枯萎病病原菌鑒定[J]．上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，1988，4（4）：25-29.

[12]馬平，Huang H C，李社增，等．一種新的棉花黃萎病快速接種技術(shù)及其在病原菌致病力和寄主抗病性鑒定上的應(yīng)用[J]．植物病理學(xué)報(bào)，2004，34（6）：536-541.

[13]陸佩，顧振芳，代光輝，等．黃瓜蔓枯病生物學(xué)特性及室內(nèi)藥劑篩選[J]．上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)：農(nóng)業(yè)科學(xué)版，2003，21（3）：226-231.

[14]康天芳．幾種殺菌劑對甜瓜蔓枯病的室內(nèi)毒力測定[J]．甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，37（1）：78-81.

[15]陳秀蓉，魏勇良．幾種新型殺菌劑對瓜類蔓枯病菌的毒力測定[J]．甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1998，32（3）：413-416.

[16]黃彰欣，黃端平，鄭仲，等．植物化學(xué)保護(hù)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M]．北京：農(nóng)業(yè)出版社，1993：52-61.

[17]趙杰，周超英，顧振芳．幾種殺菌劑對甜瓜枯萎病菌的室內(nèi)毒力測定[J]．上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)：農(nóng)業(yè)科學(xué)版，2006，24（4）：386-388，393.

[18]吳世昌．新農(nóng)藥薈萃[M]．北京：農(nóng)業(yè)出版社，1992：316-317，354-356.

Toxicity Test of the Systemic Fungicides toFusarium oxysporumf.sp.melonis

ZHAO Jie1,NI Xiuhong1,GU Zhenfang2
(1.Nanhui District Planting Technology Extension Center,Shanghai 201300; 2.College of Agriculture and Biology,Shanghai Jiaotong University)

Based on the mycelium growth rate,the toxicity of several systemic fungicides were tested againstFusarium oxysporumf.sp.melonis.The results showed that carbendazim and flusilazole had the best toxicity againstFusarium oxysporumf.sp.melonis,and theirEC50were 2.267 1 mg/L and 13.341 8 mg/L,respectively.F.oxysporumf.sp.melonis was highly sensitive to carbendazim and flusilazole.The synergic toxicity tests showed that the mixed preparation of carbendazim and flusilazole had synergistic effect at the ratio of 6∶1 and 1∶6.

Systemic fungicides;Fusarium oxysporumf.sp.melonis;Toxicity test

10.3865/j.issn.1001-3547.2009.12.023

上海市南匯區(qū)科學(xué)技術(shù)發(fā)展基金項(xiàng)目（NKNF0804）

趙杰（1979-），碩士，農(nóng)藝師，主要研究方向?yàn)樽魑镌耘嗪筒∠x害防治，電話：021-58022376。E-mail：zhaocaoyou@163.com

2008-12-24