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(吉林省食品藥品檢驗(yàn)所，吉林 長(zhǎng)春 130033)

益髓顆粒為熟地黃、枸杞子、丹參、馬錢(qián)子粉等18味中藥組成的復(fù)方中藥制劑。為了更好的控制其質(zhì)量，保障用藥安全有效，本文采用HPLC法測(cè)定制劑中主要活性成分之一士的寧的含量，該方法簡(jiǎn)便、專(zhuān)屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好[1-2]。

1 實(shí)驗(yàn)材料

Agilent 1100 series型高效液相色譜儀，士的寧對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：110705-200306；純度97%)；乙腈為色譜純，水為純化水，其他試劑均為分析純。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 色譜條件[3]色譜柱Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)；流動(dòng)相：乙腈-0.01 mol/L庚烷磺酸鈉與0.02 mol/L磷酸二氫鉀等量混合溶液(用10%磷酸調(diào)節(jié)pH值2.8)(21∶79)；流速：1.0 mL/min；柱溫35℃；檢測(cè)波長(zhǎng)260 nm，理論板數(shù)按士的寧峰計(jì)算>4 000。

2.2 供試品溶液 取裝量差異項(xiàng)下的本品內(nèi)容物，研細(xì)，取2.0 g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，加氫氧化鈉試液3 mL，混勻，放置1 h，精密加三氯甲烷25 mL，密塞，稱(chēng)定重量，置水浴中回流提取2 h，放冷，再稱(chēng)定重量，用三氯甲烷補(bǔ)足減失的重量，搖勻,用鋪有少量無(wú)水硫酸鈉的濾紙濾過(guò)，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液15 mL，蒸至約2 mL，置5 mL量瓶中,加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3 陰性對(duì)照溶液 取不含馬錢(qián)子粉的處方，按制備工藝制成陰性樣品，陰性對(duì)照溶液。

2.4 對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取士的寧對(duì)照品6 mg,置10 mL量瓶中，加三氯甲烷適量使溶解，并稀釋至刻度，搖勻。精密量取1.5 mL，置5 mL量瓶中,用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.5 線(xiàn)性關(guān)系的考察 精密稱(chēng)取士的寧對(duì)照品6 mg,置10 mL量瓶中，加三氯甲烷適量使溶解，并稀釋至刻度，搖勻。精密量取1.5 mL,置5 mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度。分別精密吸取2，6，10，14，18 μL測(cè)定，以對(duì)照品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，得回歸方程：Y=2 055.564X-18.940(r=0.999 97)，士的寧在0.077～0.695 μg范圍內(nèi)呈良好的線(xiàn)性關(guān)系。

2.6 精密度試驗(yàn) 精密吸取供試品溶液10 μL,注入液相色譜儀，重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定其色譜峰面積值，結(jié)果RSD=0.8%，表明所用儀器具良好的精密性。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一供試品溶液，分別于0，2，4，8，24 h測(cè)定，結(jié)果士的寧峰面積RSD為1.1%，表明24 h內(nèi)供試品溶液中士的寧的含量基本穩(wěn)定。

2.8 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批樣品，依法獨(dú)立測(cè)定6次，結(jié)果RSD=1.4%，表明本法具良好的重復(fù)性。

2.9 回收率試驗(yàn) 精密稱(chēng)取已知含量的供試品(含量為0.161 8 mg/g)6份,分別精密加入對(duì)照品溶液(0.006 36 m/mL)25 mL,依法測(cè)定，按含量測(cè)定方法操作，計(jì)算回收率，結(jié)果士的寧平均回收率為97.09%，RSD為0.8%，表明本法回收率較好。

2.10 樣品測(cè)定 取3批樣品,依法制備供試品溶液，分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液，注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積，計(jì)算含量。結(jié)果3批樣品中士的寧分別含量為0.161，0.141，0.080 mg/g。

3 小結(jié)

3.1 提取方法選擇 參照《中國(guó)藥典》2005版藥典一部馬錢(qián)子粉的提取方法，選擇以三氯甲烷為溶劑進(jìn)行提取，方法合理，提取較為完全。

3.2 流動(dòng)相選擇 采用乙腈-0.01 mol/L庚烷磺酸鈉與0.02 mol/L磷酸二氫鉀等量混合溶液(21∶79)為流動(dòng)相，分離效果較好，保留時(shí)間適度。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:34-35.

[2]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.中藥大辭典[S].上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,291-293.

[3]苗明三,李振國(guó).現(xiàn)代實(shí)用中藥質(zhì)量控制技術(shù)[S].北京:人民衛(wèi)生出版社,2000:156-167.