王慶忠　潘智芳　石玉強(qiáng)

摘要：為了得到超量表達(dá)膠質(zhì)細(xì)胞源神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(glial cell line-derived neuotrophic factor，GDNF)的NIH-3T3細(xì)胞株，用于制作精原干細(xì)胞(spermatogonial stem cells，SSCs)培養(yǎng)的飼養(yǎng)層，通過RT-PCR方法成功地從幼年小鼠睪丸中克隆了gdnf基因，構(gòu)建了真核表達(dá)載體pcDNA3.1-gdnf，并用其轉(zhuǎn)染NIH-3T3細(xì)胞，對(duì)篩選出的陽性細(xì)胞克隆進(jìn)行的免疫熒光染色、RT－PCR和Western blottig的結(jié)果表明，獲得了超量表達(dá)gdnf基因的NIH－313細(xì)胞株，這為精原干細(xì)胞的培養(yǎng)奠定了基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：GDNF；RT－PCR；NIH－3T3；基因表達(dá)

中圖分類號(hào)：R742.5文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1007－7847(2009)01－0055－05