楊宏博，肖小河，趙艷玲#，李寶才（.解放軍30醫(yī)院全軍中藥研究所，北京市00039；.昆明理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，昆明市 6504）

藥對(duì)即為對(duì)藥，是中藥配伍的最小單位，遵循中藥配伍的“七情合和”理論，經(jīng)歷代醫(yī)家精練提析所得，已經(jīng)成為相對(duì)固定的組合形式。其中黃連、吳茱萸藥對(duì)就是其具體應(yīng)用之一，早在朱丹溪《丹溪心法·火六》中，以黃連與吳茱萸6∶1的配伍比例——左金丸方已有記載。后世得左金丸方之啟發(fā)，調(diào)整2味藥配伍比例，分別得到主治暑氣證、寒痢證和胃寒證的甘露散（2∶1）、茱萸丸（1∶1）和反左金丸（1∶6）。以上4方均由黃連和吳茱萸2味藥組成，僅在配伍比例上略有變化，卻能產(chǎn)生完全不同的藥效作用，且有良好的治療效果，堪稱我國中藥寶庫的經(jīng)典名方。近年來，研究者對(duì)黃連、吳茱萸這一經(jīng)典藥對(duì)的化學(xué)成分、藥理作用以及臨床應(yīng)用方面進(jìn)行廣泛的研究，取得了一定的進(jìn)展，本文即綜述如下。

1 化學(xué)成分研究

通過對(duì)黃連、吳茱萸配伍后化學(xué)物質(zhì)的研究發(fā)現(xiàn)，生物堿部分是該藥對(duì)的主要活性成分，如小檗堿、藥根堿、吳茱萸堿等。因此，許多研究者圍繞生物堿部分進(jìn)行研究，考察其生物堿活性成分影響的因素。

1.1 化學(xué)活性成分溶出率研究

黃連、吳茱萸2味藥配伍后進(jìn)行煎煮，各種成分在溶劑間相互作用，可能會(huì)影響其中的活性成分溶出率，對(duì)此問題，已有大量的研究報(bào)道。潘浪勝等[1]將黃連水煎液和吳茱萸水煎液以10個(gè)不同比例配伍，100℃下加熱1 h后進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)吳茱萸中主要成分的相對(duì)峰面積未見明顯變化，而黃連生物堿的相對(duì)峰面積隨吳茱萸水煎液配比的增加呈線性下降。表明有吳茱萸組分存在時(shí)，可使黃連生物堿的溶解度下降。徐艷春等[2]對(duì)吳茱萸配伍黃連后的吳茱萸生物堿進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)配伍后吳茱萸堿和吳茱萸次堿含量明顯降低，但配伍不同比例的黃連對(duì)生物堿溶出率的影響不大。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，揮發(fā)油是吳茱萸的有效成分之一。

提取溶劑對(duì)黃連、吳茱萸藥對(duì)的活性成分的提取會(huì)產(chǎn)生一定的影響，改變提取溶劑可能會(huì)使各活性成分的溶出率發(fā)生變化，從而會(huì)使藥物的療效發(fā)生較大的變化。眾所周知，傳統(tǒng)中藥方劑通常是用水進(jìn)行煎煮的，通過改變提取溶劑，考察不同提取溶劑對(duì)黃連和吳茱萸藥對(duì)中的生物堿類活性物質(zhì)的溶出度的影響，目前已有研究者進(jìn)行了廣泛的研究。劉陶世等[3]以水、酸水、60%乙醇和95%乙醇對(duì)黃連、吳茱萸和左金丸復(fù)方不同配伍進(jìn)行提取，分別測定了提取液中小檗堿、巴馬汀、藥根堿、吳茱萸堿和吳茱萸次堿5種生物堿的溶出率的差異，發(fā)現(xiàn)左金丸以60%乙醇提取時(shí)小檗堿、巴馬汀等5種生物堿的提取率顯著高于黃連水提取、吳茱萸水提取、左金丸水提取和95%乙醇提取，與黃連和吳茱萸單獨(dú)用60%乙醇提取相似。左金丸酸水提取時(shí)小檗堿、巴馬汀等黃連類生物堿提取率略高于60%乙醇，但吳茱萸堿和吳茱萸次堿提取率顯著低于60%乙醇。從而說明了不同的提取溶媒，得到不同比例的化學(xué)組成。朱妙琴[4]用水和鹽酸甲醇溶液（1∶100體積比）分別對(duì)黃連、左金丸及反左金丸回流提取，測定了不同提取液對(duì)藥根堿、巴馬汀和小檗堿3種生物堿溶出率的差異。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與水提法相比，小檗堿的溶出率差異較大，水提取僅為醇提取的77%。同時(shí)用醇提取左金丸，其生物堿溶出率較水提取時(shí)為高。

1.2 分析方法的研究

對(duì)黃連、吳茱萸藥對(duì)的化學(xué)成分分析測定方法的研究也有文獻(xiàn)報(bào)道。李宇等[5]利用反相離子對(duì)液相色譜法，在色譜柱為Agilent ZOR-BAX SB-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）、流動(dòng)相為甲醇-乙腈-15 mmol·L-1十二烷基硫酸鈉（SDS）水溶液（20∶40∶40，pH 7.5）、檢測波長343 nm條件下測定了加味左金丸（黃連∶吳茱萸＝6∶1）中的鹽酸小檗堿和吳茱萸次堿的含量。結(jié)果顯示，該方法對(duì)測定加味左金丸中鹽酸小檗堿和吳茱萸次堿含量具有簡便、快速、準(zhǔn)確、回收率高的優(yōu)點(diǎn)。以上報(bào)道的分析方法，均能對(duì)生物堿部分化學(xué)成分的含量進(jìn)行準(zhǔn)確、快速、靈敏測定，拓寬了對(duì)生堿堿部分分析方法研究的思路，更有利于今后對(duì)黃連、吳茱萸這一藥對(duì)的進(jìn)一步分析研究。

2 藥理作用

黃連和吳茱萸配伍應(yīng)用的歷史非常悠久，在現(xiàn)代臨床應(yīng)用也非常廣泛，且有顯著的療效作用。近年來，許多學(xué)者在這方面進(jìn)行了深入且廣泛的研究，并取得了一定的研究進(jìn)展。

具體主要有以下幾個(gè)方面。

2.1 消化系統(tǒng)

2.1.1 抗?jié)冏饔茫何笣兪且环N多發(fā)病，它的形成和發(fā)展與胃液中胃酸和胃蛋白酶的消化作用有關(guān)。而傳統(tǒng)中醫(yī)主要用黃連、吳茱萸藥對(duì)來治療消化系統(tǒng)疾病。因此，人們對(duì)利用黃連、吳茱萸藥對(duì)治療潰瘍的作用效果及機(jī)制作了大量的工作。謝子英等[6]采用改良的冷束縛浸水復(fù)制大鼠胃潰瘍模型，觀察左金丸水煎液的低、中、高劑量組和雷尼替丁組對(duì)大鼠胃潰瘍抑制作用。該實(shí)驗(yàn)證明了左金丸能明顯對(duì)抗胃黏膜的損傷，在預(yù)防應(yīng)激性潰瘍和保護(hù)胃黏膜方面均有明顯的效果，并且在預(yù)防應(yīng)激性潰瘍的效果上與雷尼替丁無明顯差異。張紅梅等[7]采用改良束縛浸水法制作應(yīng)激性潰瘍模型，分別檢測下丘腦室旁核c-fos基因、下丘腦室旁核促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素mRNA（CRH mRNA）、血漿皮質(zhì)醇（CORT）和促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH），同時(shí)檢測胃液pH值、潰瘍指數(shù)（IU）等指標(biāo)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，模型組各指標(biāo)與正常組比較均有顯著性差異（P均＜0.01）；左金丸能夠顯著抑制下丘腦室旁核c-fos基因、CRH mRNA表達(dá)，下調(diào)CORT、ACTH，升高胃液pH值，降低IU（P均＜0.05）。雷尼替丁能夠顯著升高胃液pH值，降低IU（P均＜0.01）。從而更為深層說明左金丸有有效防治應(yīng)激性潰瘍作用。劉曉偉等[8，9]通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)左金丸組可明顯降低應(yīng)激性胃潰瘍的IU，提高胃液pH值，降低CORT與ACTH含量。認(rèn)為提高胃液pH值和調(diào)節(jié)胃黏膜防御因子與攻擊因子失衡是左金丸抗應(yīng)激性胃潰瘍主要的作用機(jī)制。周修森等[10]采用小鼠水浸應(yīng)激性、利血平性潰瘍2種實(shí)驗(yàn)方法復(fù)制實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍模型，研究顯示左金總生物堿能減少2種方法所制的潰瘍點(diǎn)數(shù)，說明左金總生物堿對(duì)實(shí)驗(yàn)性潰瘍模型具有保護(hù)作用。熊平等[11]采用鹽酸-乙醇復(fù)制大鼠急性胃潰瘍模型，觀察左金丸水煎液組和左金丸生物堿組對(duì)急性胃潰瘍的抑制作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，左金丸水煎液和生物堿（除水煎液低劑量組外）能明顯抑制胃黏膜損傷，組間無顯著性差異（P＞0.05），與生理鹽水組差異極顯著（P＜0.001）。

2.1.2 抑制胃酸分泌作用：沈祥春等[12]采用大鼠幽門結(jié)扎收集胃液的方法，觀察左金總生物堿對(duì)胃液、胃酸分泌、胃蛋白酶活力、胃黏膜前列腺素E2（PGE2）和胃泌素分泌的影響，發(fā)現(xiàn)左金總堿明顯抑制胃液、胃酸、胃泌素分泌和胃蛋白酶活性，增加PGE2分泌，從而認(rèn)為與其調(diào)控胃泌素和PGE2分泌有關(guān)。陳艷芬等[13]采用Shay氏大鼠幽門結(jié)扎模型方法，觀察左金丸和反左金對(duì)胃液分泌和黏液屏障的影響，發(fā)現(xiàn)1.4 g·kg-1和2.8 g·kg-1左金丸和反左金都能抑制胃液分泌、降低總酸排出量及胃蛋白酶活性，并都能增加胃壁結(jié)合黏液含量。

2.1.3 對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)的影響：沈祥春等[12]采用小鼠胃排空法及番瀉葉誘導(dǎo)的小鼠腹瀉模型方法研究左金總生物堿對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)的作用，發(fā)現(xiàn)能明顯延長胃排空和番瀉葉誘導(dǎo)小鼠排稀便的時(shí)間，減少稀便次數(shù)，說明左金總生物堿能顯著抑制胃腸運(yùn)動(dòng)。左金丸4、6 g·kg-1劑量能明顯抑制小鼠排空（均P＜0.05），加木香后則無此作用。左金丸2、4、6 g·kg-1明顯抑制小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)（P＜0.001），加木香可減輕此作用[14]。

2.1.4 鎮(zhèn)痛抗炎作用：有文獻(xiàn)[15]對(duì)黃連、吳茱萸藥對(duì)的鎮(zhèn)痛抗炎作用進(jìn)行了有意義的探討研究。采用熱板法，以左金丸6 g·kg-1·d-1給小鼠灌胃，連續(xù)5 d，可提高鎮(zhèn)痛閾值，與生理鹽水組比較有顯著差異；用扭體法，以左金丸6 g·kg-1·d-1給小鼠灌胃，連續(xù)5 d，對(duì)0.5%醋酸引起的扭體反應(yīng)有顯著抑制作用，與生理鹽水組比較有顯著差異。還能抗炎，以左金丸1 g·kg-1·d-1給大鼠灌胃，連續(xù)6 d，可抑制棉球肉芽組織增生，與生理鹽水組比較有顯著差異。周修森等[10]采用熱板法與醋酸扭體法檢測左金丸及左金總生物堿高、中、低劑量組的鎮(zhèn)痛作用，在左金總生物堿低劑量組0.04 g·kg-1的劑量下與對(duì)照組比較差異顯著（P＜0.01），說明左金總生物堿對(duì)熱板法與醋酸扭體法所致小鼠疼痛模型具有顯著的抑制作用。

2.2 抑菌作用

采用平皿打孔法，加入左金丸溶液，對(duì)細(xì)菌培養(yǎng)24 h，左金丸對(duì)金黃色葡萄球菌、霍亂弧菌、乙型鏈球菌的抑制作用較強(qiáng)，對(duì)大腸桿菌、傷寒桿菌的抑制作用稍次，能殺滅幽門螺桿菌（HP），其原理主要是黃連能影響細(xì)菌的代謝，抑制丙酮酸的氧化過程。同時(shí)，左金丸還能增強(qiáng)人體白細(xì)胞及肝臟網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬能力[15]。陸永才[16]報(bào)道，左金丸中的吳茱萸能抑制HP在致病過程中釋放強(qiáng)力的炎性介質(zhì)，并使HP失去黏附于胃黏膜上皮的能力。

2.3 方證對(duì)應(yīng)實(shí)驗(yàn)研究

黃連性味苦、寒，吳茱萸性味辛、苦、熱，根據(jù)古代中醫(yī)藥理論組方的配伍原則，黃連、吳茱萸配伍屬寒熱配伍的經(jīng)典方之一，黃連、吳茱萸配伍比例變化可引起組方寒熱藥性的變化，從而引起功能主治的變化。以黃連、吳茱萸配伍的方劑主治胃腸道病證，按“寒者熱之，熱者寒之”的原理，建立寒、熱證模型[17]，觀察2藥的不同配比對(duì)治療寒、熱證的藥效作用。對(duì)這方面，現(xiàn)代學(xué)者已經(jīng)做了一些有意義的探索。檀德宏等[18]給小鼠靜脈注射氨茶堿復(fù)制潮熱模型和大鼠灌胃黨參+黃芪煎劑復(fù)制熱證模型，分別灌胃甘露散治療。結(jié)果表明，潮熱模型小鼠耳廓微循環(huán)微動(dòng)脈血流速度降低，微動(dòng)脈與微靜脈口徑縮??；熱證模型大鼠體溫和三磷酸腺苷（ATP）酶活性降低，甘露散對(duì)實(shí)驗(yàn)性更年期潮熱證具有治療作用。李盛青等[19]用黃連+黃芩和黨參+黃芪分別給大鼠灌胃復(fù)制寒、熱證模型，觀察左金丸、甘露散、茱萸丸3種不同配伍比例對(duì)寒、熱證的影響。結(jié)果表明，左金丸和甘露散有消除熱證和加重寒證的作用，而茱萸丸對(duì)寒、熱證的作用不明顯。通過實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，左金丸和甘露散能顯著降低實(shí)熱證和虛寒證大鼠紅細(xì)胞膜鈉泵（Na+-K+-ATP酶）和鈣泵（Ca2+-Mg2+-ATP酶）的活性，降低熱證大鼠血清白介素-6（IL-6）和促甲狀腺素（TSH）值（P＜0.05），而茱萸丸僅有減輕類熱證肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的作用。

2.4 生物熱力學(xué)研究

生物熱力學(xué)是以熱力學(xué)第二定律（研究熱與其他形式能量之間相互轉(zhuǎn)化的方向和限度的規(guī)律）為指導(dǎo)，研究生物體的能量轉(zhuǎn)化及熱效應(yīng)的一門學(xué)科。從某種意義上講，生命體系就是一個(gè)熱力學(xué)系統(tǒng)，在生物體內(nèi)機(jī)械能、化學(xué)能、熱能及光、電等各種能量相互轉(zhuǎn)變過程中，不可避免地有一部分能量以熱的形式散發(fā)出來。熱力學(xué)主要采用宏觀研究方式，依據(jù)系統(tǒng)的初態(tài)、終態(tài)及過程進(jìn)行的外部條件對(duì)系統(tǒng)的變化規(guī)律進(jìn)行研究，而不涉及物質(zhì)的微觀結(jié)構(gòu)和過程，這與中藥的“整體觀念，以平為期”和“宏觀研究”的理論相一致。當(dāng)中藥的藥效物質(zhì)作用于機(jī)體，與生物機(jī)體之間有相互作用，這種相互作用的發(fā)生必定伴隨著能量的轉(zhuǎn)移和熱變化，均遵循熱力學(xué)定律。利用生物熱力學(xué)的方法研究刻畫生命體系統(tǒng)狀態(tài)變化規(guī)律，有助于評(píng)判中藥的藥效物質(zhì)對(duì)機(jī)體的藥效作用?；谝陨系睦碚摷把芯克悸罚呀?jīng)有研究者對(duì)部分藥材[20]及方劑[21]做了一些探索性的研究。對(duì)黃連、吳茱萸不同配伍組方的生物熱力學(xué)研究也有報(bào)道。周韶華等[22]利用微量熱法測定大腸桿菌在左金丸和反左金水煎液作用下的生長熱譜曲線和相應(yīng)的生物熱動(dòng)力學(xué)參數(shù)，綜合分析二者的藥性差異。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，溫?zé)崴幏椒醋蠼鹗辜?xì)菌指數(shù)生長期的生長速率常數(shù)顯著減小，生長代謝過程中熱量釋放顯著增加。寒涼藥方左金丸則使細(xì)菌指數(shù)生長期的生長速率常數(shù)增加；生長代謝過程中熱量釋放有所減小。二者存在較穩(wěn)定的藥性差異。

3 臨床應(yīng)用

對(duì)于黃連、吳茱萸藥對(duì)或與其它中西藥合用治療多種疾病的臨床應(yīng)用已有多篇文獻(xiàn)報(bào)道，例如用其治療幽門螺桿菌感染、胃食管反流病、肝膽病、便秘、妊娠惡阻、尿毒癥、嘔吐、巔頂痛、眩暈、梅核氣、重癥不寐等癥狀，均顯示出較好的治療效果，從而也進(jìn)一步說明了黃連、吳茱萸藥對(duì)治療作用譜的廣泛。

4 結(jié)語

黃連、吳茱萸這一經(jīng)典寒熱藥對(duì)，其用藥簡單，不同配伍比例能產(chǎn)生完全不同的療效作用，且能起到較好的治療效果，自古以來有廣泛的應(yīng)用?，F(xiàn)代研究者從多角度對(duì)這一藥對(duì)進(jìn)行了大量的研究，如不同配伍的化學(xué)成分、藥理作用、藥效學(xué)等方面，并且取得了較大的進(jìn)展，使我們對(duì)這一藥對(duì)產(chǎn)生了進(jìn)一步深入的認(rèn)識(shí)。值得一提的是，近幾年有研究者利用生物熱學(xué)的方法對(duì)黃連、吳茱萸不同配伍進(jìn)行研究，以中藥的整體觀為出發(fā)點(diǎn)，從藥性的理論討論這一寒熱藥對(duì)的作用機(jī)制，已經(jīng)取得了一定的成果，也為我國傳統(tǒng)中藥的研究提供了新的思路和方法。

在取得以上研究進(jìn)展的同時(shí)，目前應(yīng)繼續(xù)對(duì)不同配伍比例的黃連、吳茱萸活性成分的作用機(jī)制、臨床應(yīng)用范圍、利用生物熱力學(xué)這一新的研究方法等方面進(jìn)行深入研究。另外，至今還未見有關(guān)藥動(dòng)學(xué)的研究報(bào)道，這方面可以作為研究者下一步研究的方向。相信隨著黃連、吳茱萸藥對(duì)研究工作的不斷開展，對(duì)這一經(jīng)典藥對(duì)的認(rèn)識(shí)會(huì)達(dá)到新的高度，從而為傳統(tǒng)中藥的研究奠定新的基礎(chǔ)，也將對(duì)我國中草藥資源開發(fā)以及中藥現(xiàn)代化的發(fā)展產(chǎn)生重要的影響。

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