梁東霞綜述 張彥娜審校

宮頸癌是1種常見的女性惡性腫瘤。目前我國的宮頸癌發(fā)病呈總體下降但年輕患者增加的趨勢。分子流行病學(xué)研究已經(jīng)證實：人乳頭瘤病毒(HPV)的感染與宮頸癌有著十分密切的關(guān)系。宮頸癌的篩查可以降低宮頸癌發(fā)生的危險，卻不能阻止HPV的感染。目前對HPV的感染尚無確切治療方法，但是已有研究采用HPV的疫苗來預(yù)防和治療該病毒的感染，以此來預(yù)防宮頸癌的發(fā)生。有大規(guī)模研究證實，應(yīng)用HPV疫苗的獲益大于風(fēng)險[1，2]。因此，研究HPV和宮頸癌的關(guān)系對于宮頸癌的預(yù)防及治療都有重要意義。

1 HPV是宮頸癌的病因之一

1.1 HPV及其型別

HPV是種嗜上皮性DNA病毒，其DNA包括早期基因區(qū)(E)，晚期基因區(qū)(L)和長控制區(qū)(LCR)3個部分。早期基因區(qū)可以編碼E1，E2，E4，E5，E6，E7等早期蛋白，其功能與病毒的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯調(diào)控和細(xì)胞轉(zhuǎn)化有關(guān)，其中E6，E7是主要的致癌基因。晚期基因區(qū)可以編碼主要衣殼蛋白L1和次要衣殼蛋白L2。長控制區(qū)含有HPV基因組DNA的復(fù)制起始點和基因表達(dá)所必須的控制元件，調(diào)控病毒基因的轉(zhuǎn)錄復(fù)制。

目前已知的HPV型別有100多種，其中約35種涉及生殖道感染，約20種與腫瘤相關(guān)。根據(jù)HPV型別與子宮頸癌發(fā)生危險性高低分為低危型HPV和高危型HPV。低危型HPV包括HPV1、6，11、42、43等，常引起生殖道疣等良性病變。高危型HPV包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68等，與子宮頸癌及子宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)相關(guān)[3]。HPV感染的亞型分布具有一定的地域性差異[4]，在亞洲國家中，除了16和18型之外，58和52型引起的宮頸癌所占比例較西方國家及非洲國家多。

1.2 宮頸癌發(fā)展與HPV的關(guān)系

在細(xì)胞學(xué)檢查正常的婦女中HPV的感染率為10.2%～40.0%，低級別鱗狀上皮內(nèi)病變(low grade squamous intraepithelial lesion，LGSIL)中HPV感染率為64.4%～90.9%，高級別鱗狀上皮內(nèi)病變(high grade squamous intraepithelial lesion，HGSIL)中HPV感染率為73.3%～100%，宮頸癌患者中，HPV感染率為88.4%～99.7%[5]。我國的類似研究也得出了相同的結(jié)論，從宮頸炎到宮頸癌的患者中，HPV的感染率隨著病變級別的升高逐漸上升，HPV多型感染率隨宮頸病變程度加重而升高，宮頸癌組的多型感染率最高[6～8]。

一項研究評估了1952～1992年之間的宮頸癌自然發(fā)展史，有60%病例CIN I消退，30%持續(xù)，10%進(jìn)展為CINⅢ，其中1%發(fā)展為浸潤性癌。最近的資料評估，47%LSIL消退為正常，21%發(fā)展為高度鱗狀上皮內(nèi)損害(HSIL)，0.15%將發(fā)展為癌[3]。HPV感染持續(xù)存在1～2年可引起輕微病變；LGSIL在2～4年中有15%～20%轉(zhuǎn)化為HGSIL；HGSIL發(fā)展到癌前病變需9～10年；癌前病變發(fā)展到浸潤癌需4～5年。即從HPV感染開始至發(fā)展為宮頸癌的時間間隔為15年[9]。多項研究結(jié)果均表明，高危型HPV的持續(xù)感染是宮頸癌進(jìn)展的重要原因，而病毒載量是影響宮頸病變及發(fā)展的重要因素[10]。

對宮頸癌組織標(biāo)本的研究發(fā)現(xiàn)，99%以上的宮頸癌有HPV感染，其中HPV16和18型的感染率最高，約70%。HPV16型感染多見于宮頸鱗癌，而18型多見于宮頸腺癌[11]。

但是，HPV感染率高低是否是宮頸癌病變進(jìn)展的確切指標(biāo)，哪些亞型的HPV導(dǎo)致宮頸癌進(jìn)展的可能更大，宮頸癌的轉(zhuǎn)歸、宮頸癌的病理分型與HPV的亞型是否有對應(yīng)關(guān)系，HPV的各亞型有怎樣的協(xié)同作用，哪些患者的病變更容易進(jìn)展為癌，目前尚無定論。

2 HPV的致病機(jī)制

2.1 與E6，E7相關(guān)的致病機(jī)制

HPV有嚴(yán)格的嗜組織性，主要侵犯皮膚及黏膜鱗狀上皮。HPV DNA在宿主細(xì)胞中有2種存在方式，即整合狀態(tài)和游離狀態(tài)(染色體外的附加體形式)。在癌前期組織中，病毒常位于染色體之外，而在癌癥進(jìn)展期，病毒DNA以單拷貝或多拷貝串聯(lián)方式整合于宿主細(xì)胞DNA中，其結(jié)合位點多位于E2附近，結(jié)果導(dǎo)致HPV E2基因?qū)6、E7基因啟動的負(fù)相調(diào)節(jié)作用的缺失，使E6、E7基因表達(dá)異常而導(dǎo)致細(xì)胞生長失控。

在病毒復(fù)制過程中起關(guān)鍵作用的是病毒的E6和E7蛋白，實驗已經(jīng)證明這兩種蛋白可以與許多蛋白分子相互作用，并引起細(xì)胞的無限增殖和惡性轉(zhuǎn)化[11]。E6、E7蛋白通過與細(xì)胞周期調(diào)節(jié)因子p53和Rb蛋白結(jié)合發(fā)揮其致癌作用。

p53是重要的腫瘤抑制蛋白，在細(xì)胞生長周期中起負(fù)調(diào)控作用。當(dāng)DNA損傷時，p53基因表達(dá)顯著上調(diào)，通過促進(jìn)其下游靶基因p21基因的轉(zhuǎn)錄，增加p21的合成，誘導(dǎo)細(xì)胞停滯在G 期來發(fā)揮其抑制細(xì)胞增殖的作用。E6蛋白能與細(xì)胞內(nèi)E6相關(guān)蛋白(E6-AP)形成復(fù)合物，特異性地結(jié)合p53，并通過依賴蛋白酶系統(tǒng)將其水解，使其對細(xì)胞生長負(fù)調(diào)節(jié)功能喪失，從而引起細(xì)胞無限增生并向惡性轉(zhuǎn)化[11，12]。作為1種多功能蛋白，它還可通過激活端粒酶使正常細(xì)胞永生化。研究發(fā)現(xiàn)E6還與其它蛋白(如靶蛋白1，干擾素調(diào)控因子3，p21等)有相互作用，同時還與凋亡有關(guān)。

E7蛋白是HPV的主要轉(zhuǎn)化蛋白，與控制細(xì)胞周期有關(guān)的腫瘤抑制蛋白視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白(Rb)親和力極高，E7與Rb結(jié)合使Rb-E2F復(fù)合物解離，E2F被游離，從而發(fā)揮其轉(zhuǎn)錄因子的作用，導(dǎo)致細(xì)胞周期失控而發(fā)生永生化[11]。另外，E7還可以抑制p21CIP1和p27KIP1，促進(jìn)cyclin A，E的表達(dá)，使得G1/S節(jié)點失控，導(dǎo)致突變累積。

2.2 其他相關(guān)的研究進(jìn)展

RASSF1A(Ras association domain family lA)基因是2000年發(fā)現(xiàn)并克隆出來的新型候選抑癌基因，位于人染色體3p21.3。Cohen等[13]用實時甲基化特異聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)方法檢測20例宮頸腺癌，其RASSF1A啟動子甲基化率為45%，3l例鱗癌中未檢測出啟動子甲基化，認(rèn)為RASSFlA的失活可能在宮頸腺癌的發(fā)展中起重要作用。Lee等[14]報道的258例子宮頸癌中，RASSF1A甲基化率在鱗癌中為7.1% ，腺癌中為92.9% ，并且RASSF1A的甲基化與HPV18顯著相關(guān)(P<0.001)。這些結(jié)果說明，RASSF1A可能是位于3p21區(qū)的宮頸癌相關(guān)腫瘤抑制基因，且與高危型HPV 存在一定的相關(guān)性，但RASSF1A失活與高危型HPV感染的關(guān)系和確切機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

FHIT 是近年新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因。它位于染色體3p14.2 區(qū)域；覆蓋染色體3p上的脆弱位點FRA3Bt[3]。斷裂點及HPV16 整合點；有研究證實FHIT也許在宮頸的高度鱗狀上皮內(nèi)瘤變的惡性潛力預(yù)測中有價值。在宮頸上皮內(nèi)瘤變宮頸癌Ⅲ度(CINⅢ)病變和微浸潤性宮頸癌(MICA)中FHIT蛋白表達(dá)的減少和丟失分別為50%和78% ，而它們中的70%為LOH。FHIT基因的甲基化在宮頸癌的發(fā)生中也起到一定的作用，并有學(xué)者認(rèn)為FHIT表達(dá)狀態(tài)與宮頸癌的侵襲度密切關(guān)聯(lián)，由此認(rèn)為它可以用來判斷患者的預(yù)后情況[15]。

另外有研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌中Survivin mRNA的表達(dá)與HPV16/18感染呈正相關(guān)，由此推測前者可能在調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡過程中參與HPV介導(dǎo)的宮頸癌變過程[16]。

還有許多其他HPV相關(guān)的基因或者蛋白正在被研究，雖然我們尚不能確定目前所感興趣的這些基因或其他的研究熱點是否與HPV有很強(qiáng)的相關(guān)性，但是我們相信，對宮頸癌和HPV關(guān)系的研究將使得我們更加清楚這一疾病的進(jìn)展，對我們最終攻克這一疾病有很大幫助。

3 HPV與宮頸癌預(yù)后的關(guān)系

對于宮頸癌患者，對前哨淋巴結(jié)進(jìn)行HPV-DNA的檢測，可以發(fā)現(xiàn)有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)風(fēng)險的患者[17]。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否是很強(qiáng)的獨立預(yù)后因素，早期診斷淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移有利于患者的個體化治療，減少復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。淋巴結(jié)中檢測到HPV-DNA可能預(yù)示著轉(zhuǎn)移的存在，有實驗表明，宮頸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者HPV-DNA的陽性表達(dá)率顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，因此建議術(shù)后切除的淋巴結(jié)除了進(jìn)行病理檢查以外，輔以HPV-DNA的檢測可能更安全[18]。檢測宮頸癌旁組織，包括盆腔淋巴結(jié)組織中的HPV-DNA拷貝數(shù)及進(jìn)行亞型鑒定可能有助于發(fā)現(xiàn)癌旁微小轉(zhuǎn)移并指導(dǎo)術(shù)后治療，值得關(guān)注[19]。也有研究發(fā)現(xiàn)，VEGF過度表達(dá)者更容易發(fā)生盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，因此認(rèn)為聯(lián)合檢測高危型HPV和VEGF，有助于探討CIN及宮頸癌的發(fā)病機(jī)制及提高診斷率[16，20]。有研究顯示，HPV-16 DNA的整合狀況可能是有價值的宮頸癌預(yù)后指標(biāo)[21]，但其在臨床的應(yīng)用價值尚需隨訪研究證實。目前，我們尚未得到HPV相關(guān)的能準(zhǔn)確預(yù)示宮頸癌復(fù)發(fā)的指標(biāo)，這需要更多更深入的研究。

4 宮頸癌篩查

HPV感染是CIN、宮頸癌的明確病因，99%以上的宮頸癌有HPV感染。HPV檢測已成為宮頸癌的常用篩檢方法，通過HPV的篩查，可以發(fā)現(xiàn)宮頸癌早期病變的患者，或者具有高危因素的人群，有利于宮頸癌的早期發(fā)現(xiàn)和早期治療，對于宮頸癌的預(yù)防及治療以及降低宮頸癌的發(fā)病率和死亡率有著非常重要的意義。2003年衛(wèi)生部制定的《宮頸癌篩查及早診早治指南》建議有3年以上性行為或2l歲以上有性行為的婦女應(yīng)每年進(jìn)行1次細(xì)胞學(xué)檢查，連續(xù)2次細(xì)胞學(xué)正常可改至3年后復(fù)查；連續(xù)2次HPV檢測和細(xì)胞學(xué)正?？裳又?～8年后復(fù)查。

4.1 現(xiàn)有的HPV檢測方法

傳統(tǒng)的細(xì)胞學(xué)檢測方法有巴氏涂片法，薄層液基制片技術(shù)、計算機(jī)輔助檢測技術(shù)等(主要有：TCT法、PAPNET法)。目前所廣泛應(yīng)用的其他方法還有陰道鏡檢查，組織病理學(xué)檢查，血清學(xué)方法等[22]，但這些方法都有一定的缺點，因而促使我們不斷的開發(fā)新的檢測方法，以提高準(zhǔn)確率。

4.2 HPV-DNA檢測方法

目前所使用的方法有以下幾種：核酸雜交技術(shù)(如斑點雜交法，熒光原為雜交法，southern雜交法等)，聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(如通用引物PCR，熒光定量PCR，實時PCR，間接原位PCR等此外，尚有PCR—ELISA檢測，PCR結(jié)合雙向點雜交技術(shù)檢測，競爭性定量PCR ，單管巢式PCR和直接原位PCR)，基因芯片技術(shù)，雜交捕獲技術(shù)(其中第二代雜交捕獲試驗靈敏度和特異性均較好，更適合大范圍人群的篩查，目前已得到全世界的廣泛認(rèn)可，廣泛應(yīng)用于臨床)，SP法染色檢測HPV早期蛋白E6[22，23]等。這些技術(shù)在準(zhǔn)確率和特異性方面已經(jīng)取得很大進(jìn)步，但是仍然存在一定的缺陷，如，操作步驟繁雜，標(biāo)本的要求高，容易污染，部分方法不適宜大規(guī)模應(yīng)用于臨床，存在一定的假陽性，在準(zhǔn)確率和特異性方面也不夠理想，價格較為昂貴等，這就要求我們必須不斷發(fā)展新的檢測方法，并努力改進(jìn)現(xiàn)有的檢測方法，使得其檢測效能進(jìn)一步提高。

4.3 多種檢測方法的聯(lián)合應(yīng)用

鑒于單一方法檢測的缺點，臨床上多采用聯(lián)合多種檢測方法以提高準(zhǔn)確性，有研究報道，TCT法和HC-2法同時應(yīng)用于HPV-DNA的檢測，其陽性預(yù)測值可達(dá)99.9%[22]，美國和歐洲已將這兩種方法作為宮頸癌的早期篩查方法。

將HPV-DNA檢測和細(xì)胞學(xué)檢查聯(lián)合應(yīng)用進(jìn)行宮頸癌及CIN的篩查，其效率大為提高[24]，有研究結(jié)果顯示，聯(lián)合篩查檢測效率幾乎可達(dá)100%。目前也有相當(dāng)多的研究比較各種不同方法聯(lián)合檢測的優(yōu)劣，但是具體使用哪些檢測方法的聯(lián)合，還要考慮到經(jīng)濟(jì)成本，實驗室條件，檢測人員培訓(xùn)情況，以及患者的選擇等多個方面的因素，應(yīng)根據(jù)各地的具體情況決定。

5 宮頸癌的預(yù)防和HPV疫苗

5.1 HPV疫苗的原理

主要存在3種病毒蛋白可以誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答，包括：病毒癌基因E6，E7；其他早期蛋白，如E1，E2，E4，E5；病毒衣殼蛋白L1，L2。針對這3種蛋白可以制備多種病毒疫苗[17，19]。

目前的HPV疫苗可以分為預(yù)防性疫苗和治療性疫苗，其中，預(yù)防性疫苗多將衣殼蛋白L1和L2組成的VLPs作為靶抗原，誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性中和抗體，從而達(dá)到預(yù)防效果[25]。預(yù)防性疫苗不含有病毒DNA和癌蛋白，因而具有較高的免疫原性和安全性。治療性疫苗多將E6和E7蛋白作為靶抗原，理想的治療性疫苗可以使機(jī)體產(chǎn)生HPV特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)。目前研究的治療性疫苗主要有重組牛痘病毒疫苗，a病毒載體疫苗，腺病毒載體疫苗，細(xì)菌載體疫苗，基因疫苗，肽段疫苗，p16INK4a疫苗，融合蛋白疫，細(xì)胞疫苗等。

HPV嵌合疫苗也是目前的1個研究熱點，包括以下3種類型：同型HPV的不同期蛋白的嵌合，如將HPV16早期蛋白和衣殼蛋白嵌合；不同型別的HPV病毒蛋白的嵌合；HPV和其他種類的微生物的嵌合，如將HPV和HIV的嵌合[25]。

根據(jù)抗原肽種類的多少，還可以將HPV疫苗分為單價疫苗和多價疫苗。單價疫苗的靶抗原是單一的抗原肽，而多價疫苗可針對多種HPV型別的多個抗原肽或者蛋白片段。

5.2 研究現(xiàn)狀

目前已經(jīng)上市的預(yù)防性疫苗有：由GSK公司開發(fā)的HPV疫苗，為包含HPV16和HPV18的VLPs雙價疫苗，它是使用桿狀病毒感染的昆蟲表達(dá)體系表達(dá)重組的HPV16 L1 VLPs，并使用其專利佐劑AS04；另1種由Merck公司開發(fā)的HPV疫苗為四價疫苗，包含HPV16/18/11/6的VLPs，其用單一鋁鹽為佐劑。使用佐劑可以減少注射劑量和在冷藏時使疫苗穩(wěn)定。臨床試驗結(jié)果證明上述幾種疫苗均具有良好的耐受性，且沒有嚴(yán)重的不良反應(yīng)，抗體效價比自然感染HPV的患者高50倍[26，27]。

以E2作為靶抗原的重組MVA-E2 vV疫苗(屬于重組牛痘疫苗)可以有效清除病變，減少HPV負(fù)荷[26]。改造的E7腺病毒疫苗刺激的樹突狀細(xì)胞(DC)可誘導(dǎo)CD8 T細(xì)胞依賴的E7特異性抗腫瘤反應(yīng)。由HLA-A2呈遞，有2個HPV16 E7肽段構(gòu)成的疫苗與福氏佐劑免疫復(fù)發(fā)性或癌細(xì)胞殘存的宮頸癌患者，可誘導(dǎo)患者的腫瘤免疫。Nventa公司研發(fā)的HspE7屬1種融合蛋白疫苗，HspE7是HPV16型E7蛋白與牛分枝桿菌Hsp 65融合而成。臨床研究顯示，HspE7對由HPV引起的相關(guān)疾病有較好的治療作用。利用重組的全長E7刺激HPV16或HPV18陽性的宮頸癌患者自體DC，可以誘導(dǎo)特異性CTL殺傷自體腫瘤細(xì)胞。受E7刺激的DC不僅能誘導(dǎo)特異性CD4 T細(xì)胞增殖反應(yīng)，而且能增強(qiáng)CTL殺傷腫瘤細(xì)胞的能力[26]。

有研究提示，內(nèi)源性周期依賴性蛋白激酶抑制因子p16 INK4a可能誘導(dǎo)免疫應(yīng)答，不僅可以抗病毒癌基因E6和E7，還可以抗來自p16 INK4a蛋白的抗原肽。因此，p16 INK4a也許有望成為HPV相關(guān)癌癥治療性疫苗的1個候選因子。HPV16 E7 siRNA表達(dá)載體能有效地抑制宮頸癌CaSki細(xì)胞E7基因的表達(dá)，部分逆轉(zhuǎn)其惡性表型。因此它有望成為宮頸癌基因治療的新策略之一[28]。

目前還有很多種類的疫苗正在研究過程中，在動物實驗和體外試驗中取得了一些成果，同時也有很多新的研究不斷提出新的方向和策略。但是要達(dá)到我們找到安全可靠的宮頸癌疫苗的預(yù)期目標(biāo)，我們還需要更多更深入的研究。

5.3 存在的問題及展望

目前HPV疫苗研究中所遇到的問題大概可以分為以下幾方面:部分疫苗的免疫原性較弱，不足以引起機(jī)體的抗腫瘤反應(yīng)；細(xì)胞疫苗的制備過程復(fù)雜，成本較高，難以規(guī)?；a(chǎn)和使用；基因疫苗的整合具有潛在危險，安全性有待觀察；各種載體疫苗都有可能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生針對載體的抗體，導(dǎo)致該疫苗的應(yīng)用受限；疫苗的免疫效應(yīng)期限較短，且應(yīng)用于臨床的時間不長，不利于一些小概率的不良反應(yīng)的觀察；關(guān)于疫苗的安全性問題也是我們關(guān)注的焦點，目前常見的副反應(yīng)是局部的紅腫、疼痛，頭痛和低燒，尚無更嚴(yán)重副反應(yīng)的相關(guān)報道[29]；對于疫苗的接種對象，接種時間間隔以及最適劑量，免疫途徑等問題還需要更多的臨床研究，接種后如何進(jìn)行后續(xù)的檢測也是需要研究的問題之一；HPV疫苗對于男性的保護(hù)作用還有待研究和觀察；HPV的型別較多，單獨篩選某些型別的HPV疫苗比較困難；雖然目前有試驗證明，HPV疫苗在孕婦和哺乳期婦女的應(yīng)用未對胎兒和嬰幼兒造成影響，但是我們?nèi)孕韪嗟难芯亢陀^察來證實這一結(jié)論。

基于目前研究資料的總結(jié)，我們有理由相信，HPV疫苗的應(yīng)用對婦女的健康是安全且有效的[1，3，30]。針對目前研究中存在的問題，我們還有大量的研究工作要做，但是隨著HPV研究的進(jìn)一步深入和科技發(fā)展的進(jìn)步，HPV疫苗將更加安全可靠，并將造福于更多的人。

綜上所述，HPV和宮頸癌的發(fā)生，發(fā)展，治療和預(yù)防都有著密不可分的關(guān)系，對于HPV的深入研究將有利于我們加深對于宮頸癌的認(rèn)識，最終使得宮頸癌的治療取得更大進(jìn)展，宮頸癌的篩查可以早期發(fā)現(xiàn)宮頸癌患者，而HPV疫苗的研究將使得宮頸癌的預(yù)防成為可能。

[1] 張 穎，郎景和.人乳頭狀瘤病毒疫苗在子宮頸病變預(yù)防與治療中的應(yīng)用〔J〕.中華婦產(chǎn)科雜志，2006，41(3):214.

[2] Agorassstos T，Chatzigeorgiou K，Brotherton JM，et al.Safety of human papillomavirus (hpv) vaccines:A review of the international experience so far〔J〕.Vaccine，2009，27(52):7270.

[3] 劉光明，許廷貴.HPV感染與宮頸癌〔J〕.Chinese Medical Science&Heath，2007，4(4):65.

[4] Woodman CB，Collins S，Winter H，et al.Natural history of cervical human papillomavirus infection in young women:a longitudinal cohort study〔J〕.Lancet，2001，357(9271):1831.

[5] Sellors JW，Mahony LB，Kaczorowski J，et al.Prevalence and predictors of human papilomavirus infection in women in Ontario，Canada.Survey of HPV in Ontario Women (SHOW) Group〔J〕.CMAJ，2000，163(5):503.

[6] 馬 哲.宮頸癌及癌前病變與HPV感染的關(guān)系〔J〕.中國誤診學(xué)雜志，2006，6(22):4353.

[7] 吉耀華，陸春雪，周偉強(qiáng)，等.人乳頭瘤病毒感染與宮頸疾病關(guān)系的研究〔J〕.中國婦產(chǎn)科臨床雜志，2008，9(6):462.

[8] 李 萍，李亞里，張 全，等.人乳頭瘤病毒檢測在宮頸疾病診斷中的意義〔J〕.中國婦產(chǎn)科臨床雜志，2008，9(2):94.

[9] Josefsson AM，Magnusson PK，Ylitalo N，et al.Viral load of human papilloma vires 16 as a determinant for development of cervical carcinoma in situ ：a nested case—control study〔J〕.Lancet，2000，355(9222)：2189.

[10] 梁 雯.高危型人乳頭瘤病毒DNA載量在宮頸病變中的應(yīng)用〔J〕.臨床合理用藥，2009，2(15):22.

[11] 李 華，高國蘭.HPV與宮頸癌的研究進(jìn)展〔J〕.實用癌癥雜志，2007，22(4):420.

[12] 李素紅，王全紅.HPV與宮頸癌的研究進(jìn)展〔J〕.腫瘤研究與臨床，2005，17(6):430.

[13] Cohen Y，Singer G，Lavie O，et al.The RASSF1A tumor suppressor gene is commonly inactivated in adenocarcinoma of the uterine cervix〔J〕.Clin Cancer Res，2003，9(8):2981.

[14] Lee JM，Kim HS，Jung YH，et al.Hypermethylation of RASSFIA and mutations in BRAF and KRAS showing exclusive relationship in adenocarcinoma of uterine cervix〔C〕.AACRMTG，2006，11:760.

[15] 秦積龍，古力娜爾·庫爾班，顧 霞，等.FHIT和HPV與宮頸癌的研究進(jìn)展〔J〕.解剖科學(xué)進(jìn)展，2009，15(2):233.

[16] 施錚錚，朱 華，鄭飛云，等.Livin，Survivin 及HPV16/18 在宮頸癌及癌前病變中的表達(dá)和相關(guān)性研究〔J〕.溫州醫(yī)學(xué)院學(xué)報，39(3):230.

[17] Coutant C，Barranger E，Cortez A，et al.Frequency and prognostic significance of HPV DNA in sentinel lymph nodes of patients with cervical cancer〔J〕.Ann Oncol，2007，18(9):1513.

[18] 劉國炳，劉 欣，龐戰(zhàn)軍，等.宮頸癌患者盆腔淋巴結(jié)HPV—DNA檢測的臨床意義〔J〕.第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，2005，25(10):1236.

[19] 趙銀鈴，耿曉星.高危HPV檢測在宮頸癌篩查防治及判斷預(yù)后中的意義〔J〕.實用腫瘤學(xué)雜志，2008，22(5):497.

[20] 姜 星，曾子華，周序瓏.HPV和VEGF在子宮頸癌及癌前病變中的表達(dá)研究〔J〕.中國婦產(chǎn)科臨床雜志，2007，8(2):103.

[21] 鄭 瑩，彭芝蘭，樓江燕，等.宮頸癌及癌前病變HPV-16存在狀態(tài)檢測的研究〔J〕.中國腫瘤臨床，2006，33(17):961.

[22] 牛淑芳，吳素慧.人乳頭瘤病毒檢測的研究進(jìn)展〔J〕.實用腫瘤學(xué)雜志，2006，20(2):143.

[23] 陳琪珍，唐龍英，孫延慰.HPV-DNA檢測及其在宮頸癌篩查中的臨床價值〔J〕.中華現(xiàn)代婦產(chǎn)科學(xué)雜志，2005，2(7):600.

[24] 高 娜，姚嘉斐.宮頸癌篩查中HPV檢測、傳統(tǒng)涂片及液基制片法的比較研究〔J〕.現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展，2007，16(11):857.

[25] 陳 俊.宮頸癌與HPV疫苗〔J〕.醫(yī)學(xué)綜述，2007，13(7):512.

[26] 陽 帆，萬艷平.人乳頭瘤病毒疫苗研究進(jìn)展〔J〕.微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展，2009，37(1)：52.

[27] Wang KL.Human papillomavirus and vaccination in cervical cancer〔J〕.Taiwan J Obstet Gynecol，2007，46(4):352.

[28] 王丹青，彭芝蘭，尹如鐵，等.HPV16 E7 siRNA 表達(dá)載體對宮頸癌CaSki 細(xì)胞增殖及成瘤性的影響〔J〕.現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展，2007，16(3):186.

[29] 姜志欣，吳玉鱗.HPV感染及預(yù)防性HPV疫苗研究〔J〕.中國計劃生育學(xué)雜志，2008，16(5):315.

[30] Poland GA，Jacobson RM，Koutsky LA，et al.Immunogenicity and reactogenicity of a novel vaccine for Human papillomavirus 16:a 2-Year randomized controlled clinical trial 〔J〕.Mayo Clin Proc，2005，80(5):601.