程志斌，廖啟順，蘇子峰

（1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)云南省動物營養(yǎng)與飼料重點實驗室，昆明 650201；2.云南農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，昆明 650031；3.大理大學(xué)生命科學(xué)與化學(xué)學(xué)院，云南 大理 671003）

豬乳中含有多種微量生物活性分子，例如胰島素、表皮生長因子和類胰島素生長因子等[1]。自從Sanguansermsri等在人乳和牛乳中發(fā)現(xiàn)腐胺、亞精胺和精胺3種多胺活性分子后，營養(yǎng)學(xué)家對乳中多胺的研究逐步深入[2]。目前已經(jīng)在人乳和大鼠、牛以及羊乳中均檢測出了多胺分子[2－4]。涉及豬乳多胺的研究較少，且測定豬乳中多胺濃度差異較大。為了正確掌握豬乳中多胺濃度的變化規(guī)律，分析了豬乳中3種多胺的濃度。

1 豬乳多胺濃度的測定

Kelly等研究表明，豬乳中含有亞精胺，不含有腐胺和精胺，哺乳期1～3周乳中亞精胺濃度低于5 μmol·L－1，3～7 周亞精胺濃度呈持續(xù)升高趨勢，至第 7 周達(dá)到峰值（≥ 20 μmol·L－1）[5]。Motyl等研究表明，豬乳中存在精胺和亞精胺，精胺濃度峰值（21.60 μmol·L－1）出現(xiàn)在第 1 周，最低值（5.16 μmol·L－1）出現(xiàn)在第 5 周，亞精胺濃度峰值（7.14 μmol·L－1）出現(xiàn)在第 2 周，最低值（2.05 μmol·L－1）出現(xiàn)在第 5周[6]。Loret等測定了4頭“長白×漢普夏”哺乳母豬第25天豬乳中多胺的濃度。結(jié)果顯示，豬乳中精胺濃度為 2.64μmol·L－1、亞精胺濃度為 23.62 μmol·L－1、腐胺濃度為 1.83 μmol·L－1[7]。Cheng等分別研究了初乳和常乳中多胺濃度，結(jié)果表明，豬初乳中精胺和亞精胺濃度持續(xù)升高，峰值分別為10.26和4.54μmol·L－1（24 h），然而腐胺濃度相對較低，且保持穩(wěn)定，無顯著差異（P＞0.05）。常乳中，精胺濃度在哺乳第1周迅速上升，7 d達(dá)到峰值 18.82μmol·L－1。隨后精胺濃度迅速降低，28 d 降至 4.28 μmol·L－1；精胺的濃度隨哺乳期延長持續(xù)升高，從 3 d的4.67μmol·L－1升至28 d的9.01μmol·L－1；常乳腐胺濃度保持穩(wěn)定，濃度范圍1.53～1.84 μmol·L－1，差異不顯著（P＞0.05）[8]。

2 豬乳中多胺濃度的分析

2.1 豬乳中應(yīng)該同時含有3種多胺

Kelly等的試驗結(jié)果顯示，亞精胺是唯一在常乳中能夠檢測出來的多胺，精胺和腐胺在任何樣品中都沒有檢測到[5]。Motyl等只研究和檢測了豬乳中的亞精胺和精胺，沒有設(shè)計對腐胺進(jìn)行試驗檢測。筆者認(rèn)為，豬乳中應(yīng)該同時具有腐胺、亞精胺和精胺3種多胺。主要原因包括以下幾點。Loret等和 Cheng等檢測豬乳，均發(fā)現(xiàn)了3種多胺，尤其是Cheng等用適合的檢測方法和試驗步驟，給出了豬初乳和常乳中3種多胺濃度隨哺乳時間延長的具體數(shù)值；在人乳和大鼠、牛以及羊乳中均檢測出了3種多胺分子，這也佐證了同為高等哺乳動物的豬，其豬乳中也應(yīng)該同時含有3種多胺[2－4]；O′Quinn等利用母豬乳腺組織細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)，證明了豬乳腺組織細(xì)胞可以通過多胺從頭合成途徑合成腐胺、亞精胺和精胺3種多胺分子，試驗還對這一合成途徑的關(guān)鍵酶活性進(jìn)行了測定[9]。Bardocz等證明，包括乳腺組織細(xì)胞在內(nèi)的所有哺乳動物細(xì)胞，腐胺是亞精胺和精胺合成的前體，腐胺通過丙胺基轉(zhuǎn)移反應(yīng)生成亞精胺，亞精胺再經(jīng)過丙胺基轉(zhuǎn)移反應(yīng)生成精胺，因此腐胺是所有高等哺乳動物細(xì)胞內(nèi)多胺從頭合成途徑的第1個多胺分子[10]。如果豬乳中能檢測到亞精胺或精胺，就應(yīng)該有其前體分子的存在，因為3種多胺都可以從豬乳腺組織細(xì)胞內(nèi)合成，外排進(jìn)入乳汁中，因此，豬乳中不應(yīng)該單單存在這一代謝途徑的某一種或者兩種分子，尤其不應(yīng)該只檢測到亞精胺這一連續(xù)反應(yīng)過程的中間合成的分子。研究證明，豬乳應(yīng)與其他哺乳動物的乳汁一樣含有3種多胺，其主要來自乳腺組織細(xì)胞內(nèi)的多胺從頭合成途徑。

2.2 豬乳中腐胺的合理濃度

多胺的檢測方法很多，Kelly等的研究采用Seiler等建立的多胺檢測法，測定豬乳中多胺濃度[5]。這一方法主要用于測定組織器官的3種多胺濃度，而一般組織器官（細(xì)胞內(nèi)）的多胺比乳中（從乳腺組織細(xì)胞外排進(jìn)入乳汁中）豐富，這說明Seiler等方法對多胺檢測的靈敏度偏低，不適合低濃度多胺的檢測[11]。Cheng等的研究采用專門用于測定組織液和尿液中微量多胺的檢測方法，檢測出豬乳中含有腐胺[8]。此多胺檢測方法靈敏度優(yōu)于Seiler等，這可能是Kelly等無法檢測出腐胺的主要原因。

研究報道顯示，豬乳中多胺濃度的數(shù)值變異系數(shù)較大，說明多胺從乳腺組織細(xì)胞外排進(jìn)入乳汁的過程不穩(wěn)定。這一點與人乳、大鼠、牛以及羊乳中多胺濃度數(shù)值變異大的結(jié)果相符[2－4]。由此可見，試驗動物的個體差異和生理狀態(tài)影響乳中多胺的濃度。Kelly等試驗只是使用4頭母豬進(jìn)行測定研究，在試驗數(shù)據(jù)變異較大的情況下，4頭母豬的試驗設(shè)計從統(tǒng)計學(xué)角度考慮，處理重復(fù)數(shù)偏少，這樣的數(shù)據(jù)統(tǒng)計結(jié)果不足以得出有說服力的結(jié)論。

筆者認(rèn)為Loret等和Cheng等的腐胺檢測結(jié)果較一致且合理。Loret等測得哺乳25 d乳中腐胺濃度為 1.83 μmol·L－1，Cheng 等測得產(chǎn)后 24 h 內(nèi)豬初乳中腐胺濃度范圍 1.15～1.52 μmol·L－1，哺乳期3～28 d 常乳中腐胺濃度范圍 1.53～1.84 μmol·L－1。試驗均說明，無論豬初乳還是常乳中腐胺濃度均較低[7－8]。O′Quinn等檢測了體外培養(yǎng)的母豬乳腺組織細(xì)胞中多胺濃度，結(jié)果顯示，腐胺濃度較低，精胺和亞精胺濃度差異不顯著，約是腐胺的3～4倍[9]。O′Quinn等試驗還發(fā)現(xiàn)，母豬乳腺組織細(xì)胞內(nèi)鳥氨酸脫羧酶（ODC）活性高[9]。因此推測，腐胺在乳腺組織高ODC活性作用下，迅速轉(zhuǎn)化為精胺和亞精胺，造成乳腺細(xì)胞內(nèi)腐胺濃度降低，外排進(jìn)入乳汁的腐胺較少，結(jié)果致使豬乳中腐胺濃度持續(xù)偏低。

2.3 豬乳中亞精胺的合理濃度

Motyl等報道，0～35 d的哺乳期，豬乳中亞精胺濃度最大值為 7.14 μmol·L－1，出現(xiàn)在哺乳 14 d，隨后亞精胺濃度顯著降低[6]。Cheng等報道，哺乳14 d 亞精胺濃度為 5.64 μmol·L－1，數(shù)值雖然與Motyl等的結(jié)果接近，但隨后豬乳中亞精胺濃度呈顯著一次線性增加的趨勢[7]。顯然，對于哺乳14 d亞精胺濃度和整個哺乳期亞精胺濃度的變化趨勢，Motyl等與Cheng等存在一定差異。筆者認(rèn)為，這些差異可能與以下3個原因有關(guān)。

2.3.1 試驗?zāi)肛i窩帶仔豬數(shù)不同

Motyl等為了研究窩仔豬數(shù)與豬乳亞精胺濃度可能相關(guān)性，用7頭母豬進(jìn)行試驗，且這7頭母豬的窩仔豬數(shù)依次設(shè)定為7、8、9、10、11、12、13頭。試驗結(jié)果顯示，窩仔豬數(shù)與豬乳亞精胺濃度有極顯著的正相關(guān)性（r=0.94，P＜0.01）。這一結(jié)果說明，窩仔豬數(shù)多，乳腺組織細(xì)胞多胺合成加強，泌乳量高，乳腺細(xì)胞合成并外排進(jìn)入乳汁的多胺增多，因此乳汁中多胺的濃度升高[6]。Cheng等選取10頭妊娠母豬進(jìn)行試驗，且窩仔豬數(shù)調(diào)整為10頭。筆者推測，2篇報道由于試驗?zāi)肛i的窩帶仔豬數(shù)量不同，造成母豬泌乳量的個體差異，這可能是試驗測定結(jié)果不同的主要原因。

2.3.2 試驗?zāi)肛i的胎次不同

一般而言，母豬第3、4胎平均泌乳量顯著高于第1、2胎母豬。Cheng等試驗統(tǒng)一使用第3胎母豬，而Motyl等使用了1～3胎的母豬，未統(tǒng)一母豬胎次[6,8]。筆者推測兩篇報道由于試驗?zāi)肛i的胎次不同，造成母豬泌乳量的個體差異，因此豬乳中多胺濃度有差異。這可能是Motyl等與Cheng等試驗測定結(jié)果不同的另外一個主要原因。

2.3.3 哺乳0 d的定義不同

Cheng等定義每頭母豬的第一頭仔豬出生的當(dāng)天為 0 d，Motyl等定義每頭母豬的第一頭仔豬產(chǎn)后2～13 h吮吸初乳時間為0 d。由于母豬產(chǎn)仔一般在較安靜的中午或深夜這兩個時間段，這就可能造成Cheng等對0 d的時間點定義比Motyl等提早1 d。因此，雖然Cheng等測定14 d亞精胺濃度數(shù)值低于Motyl等14 d的數(shù)據(jù)，但按照Cheng等結(jié)果顯示的亞精胺濃度隨哺乳時間延長而逐步升高的趨勢分析，如果將Cheng等的試驗測定后延1 d，其結(jié)果就有可能與Motyl等的數(shù)據(jù)相符。

此外，對于豬乳中亞精胺濃度，Kelly等的報道與Cheng等試驗結(jié)果最接近。Kelly等測定的28 d豬乳中亞精胺濃度為5～10μmol·L-1，Cheng等測定結(jié)果為9.01 μmol·L-1；且 Kelly等報道 1～4周豬乳中亞精胺濃度呈升高趨勢[6]，這一趨勢與Cheng等的統(tǒng)計結(jié)果基本相符。

以上分析顯示，Kelly等、Motyl等與Cheng等對豬乳中亞精胺濃度的報道結(jié)果基本一致。然而，按以上3篇報道對豬乳中亞精胺濃度的描繪變化趨勢，在哺乳25 d，以上3篇報道的亞精胺濃度數(shù)值均小于Loret等的測定結(jié)果。這可能與試驗?zāi)肛i的品種不同有關(guān)。

2.4 豬乳中精胺的合理濃度

Kelly等未檢測出豬乳中精胺的存在，這可能主要與試驗過程有關(guān)。Kelly等是將采集的乳樣品先進(jìn)行冰凍儲存，待所有樣品采集完后的第3天才解凍乳樣品，統(tǒng)一進(jìn)行多胺的分析測定[5]。由于哺乳動物乳汁中普遍含有多胺氧化酶（PAO），PAO來源于乳腺細(xì)胞外排入乳汁，這個酶的作用是氧化分解精胺和亞精胺，降低精胺和亞精胺的濃度和含量。Kelly等將乳樣貯存時間過長，又經(jīng)過解凍過程，乳中多胺氧化酶可能將精胺和亞精胺部分甚至完全降解，致使無法檢出精胺。另外，Kelly等檢測多胺的方法靈敏度較低，這也是其未檢測出豬乳中精胺的另一個重要原因。這一推斷得到 Cheng等的證實。

排除Kelly等的試驗結(jié)果，Motyl等、Loret等和Cheng等均檢測出豬乳中含有精胺。Motyl等報道豬乳精胺濃度峰值為21.6μmol·L-1，出現(xiàn)在哺乳7 d，Cheng等測得豬乳中精胺濃度峰值為18.82 μmol·L-1，同樣出現(xiàn)在哺乳7 d，且兩篇報道均發(fā)現(xiàn)哺乳7 d后，豬乳中精胺濃度呈下降趨勢。這些結(jié)果證明，Motyl等和Cheng等測定的豬乳精胺濃度較合理。

雖然Loret等測得25 d豬乳中精胺濃度為2.64 μmol·L-1，從數(shù)值上較Motyl等和 Cheng等略低，但依據(jù)哺乳7 d后精胺濃度持續(xù)降低的趨勢以及這3篇報道的試驗?zāi)肛i品種差異，可以認(rèn)為Motyl等、Loret等和Cheng等對豬乳中精胺濃度的研究結(jié)果基本一致。

3 總結(jié)

豬乳中同時含有3種多胺分子，豬乳中腐胺的濃度相對較低；亞精胺的濃度隨哺乳期的延長呈持續(xù)升高；精胺濃度變化較復(fù)雜，尤其是哺乳后期乳汁中精胺濃度持續(xù)降低。豬乳中3種多胺濃度的不同變化規(guī)律暗示，多胺可能對幼齡仔豬腸道發(fā)育和成熟有重要影響，且不同多胺的影響和作用效果可能有差異。

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