王芳芳,王麗君,趙京明,蔣捍東

(青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院,山東青島 266003)

支氣管哮喘(哮喘)是慢性氣道過(guò)敏性炎癥性疾病,以接觸過(guò)敏原后出現(xiàn)氣道反應(yīng)性增高、氣道阻塞、氣道炎癥為特征。哮喘發(fā)病經(jīng)歷誘導(dǎo)期、速發(fā)相哮喘反應(yīng)和遲發(fā)相哮喘反應(yīng)三個(gè)階段,每個(gè)階段都有特異趨化因子分泌和相互作用,這些趨化因子對(duì)各種炎癥細(xì)胞的特異性趨化和激活功能在哮喘發(fā)病中發(fā)揮重要作用[1]。研究表明,遺傳因素在哮喘發(fā)病中起一定作用,雙親中的一方患哮喘,其子女患哮喘的風(fēng)險(xiǎn)是正常兒童的2～3倍。因此,對(duì)有哮喘發(fā)病危險(xiǎn)因素的兒童進(jìn)行早期檢測(cè),能輔助早期診斷哮喘,控制病情,提高其生活質(zhì)量。IL-18是近年研究較多的細(xì)胞因子,可根據(jù)周?chē)?xì)胞因子環(huán)境促進(jìn)IFN-γ或 IL-4分泌,當(dāng)環(huán)境中并存 IL-12時(shí)可促進(jìn)IFN-γ分泌,否則可促進(jìn) IL-4和 IL-13表達(dá)[2]。嗜酸性粒細(xì)胞是哮喘的主要效應(yīng)細(xì)胞,IL-5對(duì)該細(xì)胞的激活、增殖、募集凋亡均可發(fā)揮作用。為探討新生兒臍血 IL-5、IL-18檢測(cè)診斷哮喘的臨床意義,我們進(jìn)行了相關(guān)研究?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇 2008年 4月 ～2009年8月在青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院住院哮喘產(chǎn)婦 30例(哮喘組),年齡(31.29±5.85)歲,孕期(39.28±1.22)周,孕前均有哮喘反復(fù)發(fā)作史,均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)哮喘學(xué)組制定的哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]?；颊叻置鋾r(shí)均在哮喘緩解期,孕期未用糖皮質(zhì)激素,無(wú)并發(fā)癥；其中 11例暴露于吸煙環(huán)境中。另選同期正常產(chǎn)婦 40例作為對(duì)照組,其年齡、孕期同哮喘組,均無(wú)哮喘、過(guò)敏性疾病史及其他系統(tǒng)疾病,其中暴露于吸煙環(huán)境中 13例。

1.2 檢測(cè)方法 胎兒娩出并結(jié)扎臍帶后,取近胎盤(pán)端臍血 5 ml,離心后取血清,分裝于 -20℃冰箱凍存,用 ELISA法、煙臺(tái)賽爾斯公司產(chǎn)試劑盒檢測(cè)臍血 IL-5、IL-18。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用 SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件,計(jì)量資料用±s表示,組間比較用 t檢驗(yàn)；哮喘組臍血IL-5與 IL-18水平用雙變量相關(guān)分析。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組臍血 IL-5、IL-18比較 哮喘組臍血 IL-5、IL-18分別為 (137.393±103.257)、(564.170±470.150)ng/L,對(duì)照組分別為(110.435±75.986)、(197.110±96.090)ng/L；與對(duì)照組比較,哮喘組臍血 IL-18明顯升高(P＜0.01),IL-5升高但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。

2.2 哮喘組臍血 IL-5與 IL-18水平的相關(guān)性 雙變量相關(guān)分析顯示,哮喘組臍血 IL-5與 IL-18水平無(wú)明顯相關(guān)性(r=-0.17,P＞0.05)。

3 討論

哮喘是由多種炎癥細(xì)胞(如嗜酸性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、T細(xì)胞)及結(jié)構(gòu)細(xì)胞(如成纖維細(xì)胞、氣道上皮細(xì)胞)參與的慢性氣道炎癥性疾病,這些細(xì)胞可產(chǎn)生多種細(xì)胞因子并相互作用,促進(jìn)氣道高反應(yīng)性、氣道阻塞和重塑發(fā)生。以往研究認(rèn)為,哮喘發(fā)病是由于 Th2型細(xì)胞因子分泌亢進(jìn),Th1型細(xì)胞因子相對(duì)不足及Th1/Th2失衡所致。新近研究表明,Th1、Th2型細(xì)胞因子并非單純互相拮抗,兩者在哮喘發(fā)病過(guò)程中起協(xié)同作用,只有 Th1存在時(shí),Th2才能有效地募集到肺組織內(nèi)；Th1不能減輕 Th2誘導(dǎo)的氣道高反應(yīng)性[4]。

IL-18是近年發(fā)現(xiàn)的分布廣泛的細(xì)胞因子,最初稱(chēng)為 IFN-γ誘導(dǎo)因子,屬于 IL-1家族,是先天性和適應(yīng)性免疫應(yīng)答的重要調(diào)節(jié)因子,主要由單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的細(xì)胞分泌,樹(shù)突狀細(xì)胞、皮膚角質(zhì)細(xì)胞、破骨細(xì)胞、腸黏膜細(xì)胞、腦組織等也能產(chǎn)生 IL-18[5]。IL-18有多種生物學(xué)功能,其通過(guò)與細(xì)胞表面 IL-18受體(IL-18R)結(jié)合而發(fā)揮作用,Th1、幼稚 T細(xì)胞和NK細(xì)胞可檢測(cè)到 IL-18R表達(dá),但 Th2不能表達(dá) IL-18R。IL-18的主要功能是促進(jìn) Th0細(xì)胞向 Th1細(xì)胞分化,誘導(dǎo) T、B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生 IFN-γ,降低血清IgE,抑制呼吸道黏膜中的嗜酸性粒細(xì)胞聚集及 Th2細(xì)胞增殖,減少 Th2細(xì)胞釋放炎癥介質(zhì)。研究表明,單用 IL-18時(shí)誘導(dǎo)產(chǎn)生的 IFN-γ較低,其與 IL-12等細(xì)胞因子聯(lián)用時(shí)誘導(dǎo)產(chǎn)生的 IFN-γ明顯增高[5]；無(wú)IL-12存在時(shí),IL-18還可促進(jìn) T細(xì)胞、NK細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞等表達(dá) Th2細(xì)胞因子[6]。有學(xué)者發(fā)現(xiàn),IL-18、IL-2聯(lián)用可促進(jìn)幼稚 T細(xì)胞分泌 IL-4；單用 IL-18可誘導(dǎo) NK細(xì)胞分泌 IL-13,但若與 IL-12聯(lián)用可促進(jìn)?！獑蜗导浯碳ひ蜃臃置?；IL-18與 IL-3聯(lián)用可促進(jìn)嗜堿性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞脫顆粒,釋放組胺；此外,IL-18還有抗細(xì)菌、病毒感染及抑制腫瘤等作用。國(guó)內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn),哮喘患者血清IL-18明顯高于正常組,且急性發(fā)作期較緩解期明顯升高,表明 IL-18參與并促進(jìn)哮喘的發(fā)生、發(fā)展。本研究顯示,哮喘組臍血 IL-18明顯高于對(duì)照組,說(shuō)明IL-18升高可增加哮喘發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。因此,對(duì)有高危因素的新生兒進(jìn)行早期 IL-18檢測(cè),可早期診斷和預(yù)防哮喘。

IL-5屬于 Th2型細(xì)胞因子,主要由 CD+4T細(xì)胞、肥大細(xì)胞、氣道上皮細(xì)胞等合成和分泌,在調(diào)控嗜酸性粒細(xì)胞的氣道浸潤(rùn)過(guò)程中發(fā)揮重要作用。IL-5是嗜酸性粒細(xì)胞必需的生長(zhǎng)因子,通過(guò)與細(xì)胞表面的特異性受體 IL-5受體結(jié)合發(fā)揮作用,促進(jìn)嗜酸性粒細(xì)胞分化、成熟、趨化和活化,使其釋放白三烯、血小板活化因子、嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白等炎癥介質(zhì),以及堿性顆粒蛋白等引起氣道炎癥的主要因子；并能抑制凋亡,延長(zhǎng)成熟嗜酸性粒細(xì)胞的存活時(shí)間[7]；還能協(xié)同 IL-4促進(jìn) B細(xì)胞生成 IgE,增加正常T細(xì)胞生長(zhǎng)和活性,刺激 B細(xì)胞產(chǎn)生 IgA和 IgM。多項(xiàng)研究證實(shí),哮喘患者血清 IL-5明顯升高,且其水平與哮喘嚴(yán)重程度相關(guān)。本研究證實(shí),兩組臍血IL-5無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,但哮喘組高于對(duì)照組,說(shuō)明臍血IL-5檢測(cè)對(duì)早期哮喘診斷可能有一定意義。此外,本研究表明臍血 IL-5與 IL-18水平無(wú)相關(guān)性,即 IL-18對(duì) IL-5分泌無(wú)促進(jìn)作用,其原因可能與 Th2細(xì)胞表面缺乏 IL-18R或內(nèi)環(huán)境中缺少與其協(xié)同促進(jìn) IL-5表達(dá)的細(xì)胞因子有關(guān)。

總之,本研究發(fā)現(xiàn)哮喘組新生兒臍血 IL-18明顯升高,其有望成為預(yù)測(cè)哮喘發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的指標(biāo)；IL-5對(duì)預(yù)測(cè)哮喘可能有一定意義。因此,檢測(cè)哮喘高危新生兒臍血 IL-5、IL-18,對(duì)其早期哮喘診斷及預(yù)防具有指導(dǎo)意義。

[1]趙茜.趨化因子與哮喘[J].國(guó)外醫(yī)學(xué):生理、病理科學(xué)與臨床分冊(cè),1997,17(1):89-92.

[2]Kenji N,Tomohiro Y.Interleukine-18 is a unique cytokine that stimulates both Th1and Th2 responses depending on its cytokine milieu[J].Cytokine and Growth Factor Review,2001,12(1):53-72.

[3]中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)哮喘學(xué)組.支氣管哮喘防治指南[J].中華結(jié)核與呼吸雜志,2008,31(3):817-822

[4]Randolph DA,Stephens R.Cooperation between Th1 and Th2 cells in a murine model of eosinophilic airway inflammation[J].The Journal of Clinical Investigation,1999,104(8):1021-1029.

[5]謝利波,王敏,劉敏,等.IL-18的生物學(xué)作用及其與哮喘的關(guān)系[J].臨床肺科雜志,2007,12(5):485-487.

[6]Christina H,Thomas T,Miriam M,et al.Endogenous IL-18 in experimentally induced asthma affects cytokine serum levels but is irrelevant for clinical symptoms[J].Cytokine,2008,42(3):298-305.

[7]趙成國(guó),許文龍.肺炎支原體感染后患兒血清 sIL-2R、IL-5、IL-10檢測(cè)及其臨床意義[J].蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2009,34(1):66-68.