丁 華,劉和錄,陳偉光,何 ,何維娜,梁 鴻

(廣州醫(yī)學(xué)院附屬深圳沙井醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東深圳518104)

輪狀病毒(RV)分為A 、B、C 三組,僅A、B 組引起人類嚴(yán)重發(fā)病,A組致嬰幼兒腹瀉,B組與成人腹瀉有關(guān),C組雖可引起人類腹瀉但較少[1],其中以A組最為常見,其感染率在腹瀉病原體中位于首位,已成為世界范圍內(nèi)兒童急性腹瀉病最重要的病原之一,全球每年約有87萬兒童死于RV感染,并且主要在發(fā)展中國(guó)家[2]。為了解本地區(qū)嬰幼兒輪狀病毒腹瀉與年齡和季節(jié)的關(guān)系以及感染現(xiàn)狀,更加及時(shí)有效采取預(yù)防和治療措施,我們對(duì)2006年-2008年秋冬季節(jié)的腹瀉患兒進(jìn)行RV抗原檢測(cè),現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料和方法

1.1 標(biāo)本來源 自2006年1月至2008年12月在我院就診的腹瀉患兒1 760例,其中男性901例,女性859例,年齡在25天-5歲。對(duì)照組為200例健康嬰幼兒,年齡1-5歲。

1.2 試劑 A群輪狀病毒診斷試劑盒由北京萬泰生物藥業(yè)有限公司提供,具體操作嚴(yán)格按說明書要求進(jìn)行。

1.3 方法 用清潔滅菌小瓶收集新鮮大便,并記錄其性狀,鏡檢后采用膠體金法進(jìn)行輪狀病毒抗原檢測(cè),具體操作如下:取適量糞便樣品放于容器內(nèi),加入9倍體積生理鹽水,攪拌混勻2 min,離心后在測(cè)試卡加樣處滴加3-4滴(約150 μ l)糞便上清液,平置于室溫,10min內(nèi)判斷結(jié)果,陽性(出現(xiàn)兩條紅色線),陰性(只出現(xiàn)1條紅色質(zhì)控線),無效(不出現(xiàn)紅色線)。

2 結(jié)果

2.1 在對(duì)照組中,200例嬰幼兒糞便RV抗原檢測(cè)全部為陰性。

2.2 1 760例腹瀉患兒標(biāo)本中RV檢測(cè)結(jié)果見表1。

表1 不同性別腹瀉患兒中RV陽性率(%)

1 760例腹瀉患兒中有852例RV結(jié)果陽性,總陽性率為48.41%,其中男性901例,陽性率為46.06%,女性859例,陽性率為50.87%,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,χ2=1.32,P＞0.05,說明男、女患兒陽性率無顯著性差異。

2.3 1 760例腹瀉患兒不同年齡組RV陽性結(jié)果見表2。

表2 不同年齡組腹瀉患兒中RV陽性率(%)

應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,P＜0.008 3。

2.4 秋冬季節(jié)不同月份腹瀉患兒RV檢測(cè)結(jié)果見表3。

表3 秋冬季節(jié)RV檢出數(shù)

由此表可見秋冬季節(jié)11、12月份RV陽性率最高,分別為64.7%(385/595)、60.3%(283/469)。

3 討論

輪狀病毒為呼腸病毒科RV屬,主要生長(zhǎng)于小腸上皮細(xì)胞內(nèi),并在腸道復(fù)制。傳染源為RV感染者、隱性感染者和帶毒者,癥狀出現(xiàn)前一天開始排毒,RV經(jīng)糞-口及人人接觸途徑傳播,是引起嬰幼兒秋、冬季急性腹瀉最常見的病原體,占所有腸道感染病因的50%以上,不同國(guó)家不同地區(qū)流行高峰的季節(jié)略有差異,但總是在每年較寒冷的月份出現(xiàn),基本上均發(fā)生在秋末、冬初或初春季節(jié)[3]。我們對(duì)1 760例嬰幼兒腹瀉患兒進(jìn)行了RV抗原檢測(cè),檢出陽性率為48.41%,與國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道相近[4],由表1可知,男、女患兒 RV陽性率分別為46.06%、50.87%,兩者陽性率比較無顯著性差異(P＞0.05)。由表2可知,各年齡組的發(fā)病率均不同,＜0.5歲、0.5-1歲、1-2歲、2-5歲各組陽性率分別為14.19%、69.96%、46.09%、21.60%,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理有顯著性差異(P＜0.008 3),其中0.5-1歲年齡組的陽性率最高,可能與此時(shí)母體帶來的抗體下降,自身的免疫力尚未完全建立,對(duì)各種病原感染的特異性IgM抗體產(chǎn)生不足有關(guān);＜0.5歲的嬰兒感染率最低,可能是由于該年齡段的嬰兒大多處于母乳喂養(yǎng)期,乳汁中大量sIgA可起到保護(hù)其腸道黏膜的作用,從母體獲得的免疫力尚在;而2歲以上的兒童自身sIgA含量增高,抵抗力逐漸增強(qiáng),所以感染率較低。在0.5-1歲年齡組中,其感染率高達(dá)69.96%,這應(yīng)當(dāng)引起臨床醫(yī)生的高度重視,特別是對(duì)蛋花樣或稀水樣便,鏡檢無或偶有少量白細(xì)胞或脂肪球者,需加做RV檢查,否則將有大量患兒漏檢[5]。由表3可知,秋冬季節(jié)的發(fā)病高峰是在每年的11、12月份,與文獻(xiàn)報(bào)道世界各國(guó)的流行情況相似,因此建議在秋冬寒冷的高發(fā)流行季節(jié),將RV抗原檢測(cè)作為急性腹瀉患兒糞便的常規(guī)檢查之一,從而避免臨床漏診和誤診。

RV抗原的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法較多,目前最普遍的為ELISA法,但因其操作步驟復(fù)雜,需要時(shí)間長(zhǎng),相對(duì)于快速檢測(cè)法并不是最好的。本文采用免疫層析雙抗體夾心法,能直接檢測(cè)糞便中的RV抗原,簡(jiǎn)便了操作程序,大大縮短了試驗(yàn)時(shí)間,同時(shí)每份標(biāo)本檢測(cè)過程中均設(shè)有標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照,保證了檢測(cè)質(zhì)量,因此該方法具有靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好,快速、準(zhǔn)確等特點(diǎn),適用于臨床早期診斷。

綜上所述,RV分布廣泛,且有明顯的季節(jié)性,隨著人們生活水平的提高,衛(wèi)生狀況的改善,仍有較高的陽性率,尤其是2歲以下嬰幼兒,所以應(yīng)當(dāng)引起高度重視,除了采取積極有效的預(yù)防措施(1.對(duì)兒童玩具和活動(dòng)場(chǎng)所要經(jīng)常消毒。2.接種RV疫苗,接種時(shí)間為每年的8月-10月,接種對(duì)象為0.5-2歲嬰幼兒)以外,及時(shí)有效的治療也尤為重要。若盲目地給患兒服用或輸入抗生素,結(jié)果不僅無效,還會(huì)使病情加重,因?yàn)榭股貧缌四c道正常菌群,造成菌群失調(diào),同時(shí)為病毒的大量復(fù)制創(chuàng)造了條件,使腹瀉越治越重,以至于出現(xiàn)脫水甚至危及生命,所以及時(shí)檢測(cè)腹瀉患兒RV抗原,為臨床提供可靠的診斷依據(jù),采取正確有效的治療措施是非常重要的。

[1]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第三版.東南大學(xué)出版社,2006,636.

[2]劉麗利,董永坤,魏群德,等.輪狀病毒感染的研究進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)綜述,2004,10(12):759.

[3]許春娣.小兒消化系統(tǒng)疾病[M].第一版.北京:科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社.2007,203-204.

[4]李 梅.南京兒童醫(yī)院腹瀉患兒輪狀病毒感染情況[J].實(shí)用兒科臨床雜志,2007,22(19):1463.

[5]許鐵軍,陳俊峰,喬春格.急性腹瀉患兒糞便中A群輪狀病毒的檢測(cè)結(jié)果分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2005,2(2):4.