孫小姍

姜是多年生草本植物，作為藥食兩用在我國已經有悠久的歷史。姜精油是從姜根莖中用水汽蒸餾的方法提取出來的揮發(fā)性油分，主要成分為倍半萜烯類碳水化合物50%～60%，氧化倍半萜烯17%，其余主要是單萜烯類碳水化合物和氧化單萜烯類。據文獻報道，生姜有抗氧化、抗腫瘤、增強免疫等作用[1]。四氯化碳是肝臟毒理學中親肝性毒物之一，對肝臟具有較強的損傷作用，可導致細胞的變性、壞死、脂肪變等，并可導致大鼠免疫機能的損傷[2]。本研究以不同濃度的生姜提取物給小鼠灌胃后進行四氯化碳急性染毒，觀察生姜提取物對四氯化碳所致的小鼠肝臟脂質過氧化損傷的保護作用。

1 材料和方法

1.1 生姜提取物的制備

采用市售鮮姜切碎后經水蒸汽蒸餾，獲得黃色、透明、具有濃郁芳香氣味的油狀液體。

1.2 實驗藥品與器材

四氯化碳（上海申鶴化學品有限公司）；上海產722光柵分光光度計（上海第三分析儀器廠）；日本產UV-260型紫外分光光度計；日本產MTX-150型低溫高速離心機； 丙二醛試劑盒、超氧化物歧化酶試劑盒、谷胱甘肽過氧化酶試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。

1.3 動物分組及處理

選用昆明小鼠50 只，雌雄各半，體質量（ 25±2） g，觀察1周后隨機分成5組，每組10只。各組分別是A組為陰性對照組（ 未染毒組），B組為陽性對照組（ 單純染毒組） ，C組為高劑量生姜提取物組，D組為中劑量生姜提取物組，E組為低劑量生姜提取物組，A、B組用4.2mL/kg體質量色拉油灌胃，C、D、E組分別用8.4mL/kg體質量、4.2mL/kg體質量、2.1mL/kg體質量生姜提取物灌胃，B、C、D、E組小鼠灌胃后6h經口給予10%的CCl4染毒，劑量0.2mg/10（g·bw），A組給予植物油。染毒24h后，將小鼠脫臼處死，取肝臟。

1.4 測定指標及方法

各組小鼠于染毒后24h，脫臼處死。取肝臟，將肝組織切碎，冰浴下勻漿，3600 轉/分離心5min，分光光度法測上清液的SOD 、GSHPx酶的活性和MDA的含量。

1.5 統(tǒng)計方法

方差分析，檢驗水準0.05（雙側）。

2 結 果

由表1可以看出，陽性對照組的SOD、GSH- Px活性明顯低于陰性對照組，MDA含量明顯高于陰性對照組；高劑量組的SOD、GSH- Px活性明顯低于其他各組，MDA含量明顯高于其他各組；低劑量組的SOD、GSH- Px活性明顯高于陽性對照組和高劑量組，MDA含量明顯低于陽性對照組和高劑量組。

3 討 論

SOD酶能夠清除超氧陰離子自由基，對機體的氧化與抗氧化平衡起著至關重要的作用，機體清除氧自由基的能力與SOD活性的高低密切相關，SOD酶活性變化與體內自由基的變化呈負相關[3]。MDA是脂質過氧化的產物，MDA含量的高低間接反映了機體細胞受自由基攻擊的嚴重程度[4]。GSH-Px是體內廣泛存在的特異催化還原型谷胱甘肽對過氧化氫的還原反應的酶，可以起到保護細胞膜結構和功能完整的作用[5]。

表1 生姜提取物對CCl4損傷小鼠肝臟脂質過氧化影響（±s）

表1 生姜提取物對CCl4損傷小鼠肝臟脂質過氧化影響（±s）

n=10，a: compared with A，P＜0.05；b: compared with B，P＜0.05；c: compared with C，P＜0.05；d: compared with D，P＜0.05

Group SOD(NU/mgprot) MDA(Nmol/mgprot) GSH-Px(U/mgprot)A 140.33±10.20 53.25± 5.18 7.51±0.78 B 109.23± 7.26a 68.48± 5.74a 6.27±0.91a C 87.34±11.47ab 88.12±11.49ab 3.12±0.58ab D 131.84±12.77bc 70.48±11.79ac 6.41±0.53ac E 127.19± 8.86abc 41.37±10.31bcd 9.75±1.03bcd

實驗中陽性對照組SOD和GSH-Px酶活性明顯低于陰性對照組，MDA含量明顯高于陰性對照組，可能是由于CCl4導致小鼠體內自由基增加，大量消耗SOD酶，同時小鼠肝臟脂質過氧化作用增加，MDA含量也明顯增加。高劑量組SOD和GSH-Px酶活性明顯低于陽性對照組，MDA含量明顯高于陽性對照組，表明生姜提取物在高劑量時對小鼠肝臟抗氧化系統(tǒng)無保護作用，并有可能與CCl4協(xié)同增強了小鼠體內的脂質過氧化作用，其機制有待進一步研究。中、低劑量組SOD和GSH-Px酶活性均明顯高于陽性對照組，低劑量組MDA含量明顯低于陽性對照組，說明在中、低劑量時生姜提取物能夠降低CCl4引起的小鼠肝臟的脂質過氧化作用，保護肝細胞免受脂質過氧化的損傷，對CCl4的造成的肝損傷起保護作用。

結合各抗氧化指標的變化可以看出中低劑量生姜提取物可以促使小鼠肝臟抗氧化系統(tǒng)恢復，抑制脂質過氧化作用的發(fā)生，減少肝細胞的破壞和使肝細胞功能活躍。說明適量生姜提取物可通過保護小鼠抗氧化系統(tǒng)，減少自由基對小鼠肝細胞的損傷，拮抗CCl4對小鼠肝臟的損傷作用。

[1] 劉寧,霍貴成,張玲等.生姜對高血脂大鼠脂質過氧化作用的研究[J] .衛(wèi)生研究,2003,32 (1): 22-23.

[2] 王丙云,陳龍,毛鑫智等.四氯化碳誘導的肝損傷對大鼠免疫機能的影響[J].中國病理生理雜志,2001,16(7):665-666.

[3] 張全武,孫少華,楊迪.慢性甲醛吸入對小鼠肝臟的氧化性損傷[J].現代預防醫(yī)學,2003,30 (6): 767- 768.

[4] 潘洪志,邱向紅,王軍等.南瓜提取物對慢性苯染毒小鼠抗氧化酶的影響[J] .現代預防醫(yī)學,2005,32 (11): 1446-1447.

[5] 吳媚,張遵真,葉叢茂等.60Coγ射線對小鼠組織細胞氧化損傷的研究[J] .現代預防醫(yī)學,2005,32 (10) : 1267-1269.