牛春波,崔亞南,陳桂秋,王雪梅,王麗萍

(吉林大學中日聯誼醫(yī)院病理科,吉林長春130021)

乳腺癌是一種高度異質性的疾病,不同類型的乳腺癌在組織形態(tài)、生物學行為、治療效果以及預后等方面都存在著很大的差異。2000年Perou等[1]率先應用基因芯片技術開始了乳腺癌的基因表型研究,至目前[2]將乳腺癌分為五種基因亞型:腔A型(Luminal A):ER陽性,HER-2陰性;腔B型(Luminal B):ER和HER-2均陽性;HER-2過表達型(HER2 overexpressing):ER陰性,HER-2陽性;基底細胞樣型(basal like):ER和HER-2陰性,基底細胞相關基因陽性;正常乳腺樣型(normal breast like):ER、HER-2以及基底細胞相關基因均陰性。前三種類型大多能夠通過雌孕激素受體和HER-2蛋白表達分類,而后兩種由于雌孕激素和HER-2蛋白表達均陰性仍難于鑒別和診斷[3],因此BLBC的病理形態(tài)特征和免疫表型特點國內外均未完全形成一致的判定標準,成為目前乳腺癌研究領域的熱點之一。本研究通過分析乳腺基底細胞樣癌的病理形態(tài)特征和免疫表型特點,探討乳腺基底細胞樣癌多種相關蛋白表達在其病理診斷中的作用。

1 材料與方法

1.1材料

選擇吉林大學中日聯誼醫(yī)院 2009年 4月-2010年3月乳腺癌手術標本,標本均為10%中性福爾馬林液固定,常規(guī)石蠟包埋。檢測ER、PR及HER-2三陰者35例標本 CK5/6、CK14、Vimentin、P53及EGFR蛋白表達,選擇CK5/6或CK14和/或EGFR陽性表達(BLBC)者16例以及ER陽性HER-2陰性(管腔A型)20例進行觀察:根據Elston和Ellis法進行乳腺癌組織學分級及細胞核分級,并觀察癌組織排列結構、細胞形態(tài)、壞死、間質纖維化及淋巴細胞浸潤、淋巴結轉移等指標。

1.2方法

蛋白表達檢測及結果判定:應用免疫組化SP法檢測16例乳腺基底細胞樣癌各相關蛋白表達,ER、PR 、HER-2、CK5/6 、CK14、Vimentin、P53及 EGFR 均為即用型抗體,購自福州邁新生物技術開發(fā)有限公司,按試劑盒說明書步驟進行染色。用PBS代替一抗作陰性對照,用已知陽性組織作為陽性對照。ER、PR和P53均為細胞核陽性,CK14為細胞漿陽性,HER-2、CK5/6、EGFR和Vimentin為細胞膜陽性。

1.3統計學分析采用SPSS1010軟件進行統計分析,組間比較用 χ2檢驗。

2 結果

2.1乳腺基底細胞樣癌的病理形態(tài)特征16例BLBC13例為浸潤性導管癌Ⅲ級,3例為浸潤性導管癌Ⅱ級,其中1例局部伴磷化;核分級Ⅲ級15例,Ⅱ級1例;腫瘤細胞膜不清晰,細胞質少,核呈圓形或卵圓形,異型性大,核漿比例高,核分裂象和細胞凋亡多見;瘤細胞排列呈實性巢狀、片塊狀及緞帶狀結構;腫瘤周邊推擠式生長14例,浸潤性生長2例;16例均有不同程度的灶狀及片狀壞死,其中灶狀壞死7例,片狀壞死9例;15例見淋巴細胞浸潤及10例間質纖維化;淋巴結轉移7例,無轉移9例。與20例管腔A型乳腺癌形態(tài)特征對比分析(表1),結果發(fā)現兩種類型的乳腺癌在組織學分級、細胞核分級、生長方式以及片狀壞死方面存在顯著差異(P＜0.001)。

表1 BLBCs與腔A型乳腺癌的形態(tài)學特征

2.2乳腺基底細胞樣癌的免疫表型16例乳腺基底細胞樣癌ER、RP及HER-2均陰性,CK5/6陽性13例,陰性 3例;CK14陽性5例,陰性11例;EGFR陽性9例,陰性7例;P53陽性陽性12例,陰性4例;Vimentin陽性14例,陰性2例(表2)。結合形態(tài)學分析結果,CK5/6與CK14聯合應用能夠用于乳腺基底細胞樣癌的病理診斷。乳腺基底細胞樣癌常有EGFR、P53和Vimentin陽性表達。

表2 BLBCs與腔A型乳腺癌的免疫表型特征(n=16例)

3 討論

乳腺基底細胞樣癌(basal-Iike breast Carcinoma,BLBC)是近年通過基因分型新認識的一類乳腺癌,具有獨特的病理特征和生物學行為以及明顯的不良預后[4]。正常乳腺腺管系統主要由腺上皮細胞和肌上皮細胞構成,以往研究認為乳腺癌主要起源于腺上皮細胞,并一直根據受體和癌基因的蛋白表型指導治療和分析預后。直至2000年Perou等[1]率先應用基因芯片技術進行了乳腺癌的基因表型研究,他們檢測了42例乳腺癌的65份標本,篩選出由若干基因構成的乳腺癌“內在基因群”,并結合患者的預后采用聚類分析法將乳腺癌分為4種不同分子亞型。其后經過近幾年基因分型研究補充[5-7],完善為目前國內外公認的5種基因亞型:腔A型、腔B型、HER2過表達型、正常乳腺樣型及基底細胞樣型。為了使基因分型廣泛應用,開始了蛋白表達的替代診斷研究[8],其中基底細胞樣乳腺癌的蛋白替代診斷最為復雜[9]。正常乳腺腺上皮表達腺上皮型細胞角蛋白CK7、CK8、CK18和CK19等,而肌上皮細胞主要表達基底細胞型角蛋白 CK5/6、CK14和CK17,此外尚有 SMA、CD10、vimentin 及 p63,不表達腺上皮型角蛋白。目前蛋白表達替代基因型診斷的研究發(fā)現,乳腺基底細胞樣癌大多表達CK5/6、CK14和vimentin,很少表達CK17和其它肌上皮標記物SMA、p63及CD10,又由于vimentin對判斷基底細胞來源無特異性,因此CK5/6和/或CK14陽性表達可能成為其病理診斷的標準。

本研究以CK5/6和/或CK14陽性為診斷標準,選擇了16例乳腺基底細胞樣癌,通過觀察其病理形態(tài)特點,發(fā)現乳腺基底細胞樣癌大多為浸潤性導管癌Ⅲ級,MBNG多為Ⅲ級;腫瘤周邊推擠式生長,有不同程度的片狀壞死及淋巴細胞浸潤;瘤細胞排列呈實性巢狀、片塊狀及緞帶狀結構,腫瘤細胞膜不清晰,細胞質少,核呈圓形或卵圓形,異型性大,核漿比例高,核分裂象多見,以上形態(tài)特點與文獻報道一致,表明CK5/6和/或CK14陽性可以用于乳腺基底細胞樣癌的病理診斷。同時發(fā)現乳腺基底細胞樣癌多數表達Vimentin和P53,也可表達EGFR,可作為病理診斷的參考指標。P53基因突變是人類乳腺癌最常見的抑癌基因突變,目前研究報道有25%-45%的乳腺癌發(fā)生P53基因突變,且其突變與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展及預后密切相關[10-11]。本研究顯示乳腺基底細胞樣癌P53突變表達率為75%,顯著高于普通類型乳腺癌,可作為診斷基底細胞型乳腺癌的參考指標,同時是其預后不良的標志。

乳腺基底細胞樣癌雌孕激素受體及HER-2均陰性,抗雌孕激素及抗HER-2治療均無效,有研究認為其化療反應好于其他類型乳腺癌,但其總體預后仍比其它類型乳腺癌差。乳腺基底細胞樣癌做為一種獨立的乳腺導管癌亞型,正在被逐步認識和深入研究,分析其獨特的病理形態(tài)特征和免疫組化特點,是乳腺基底細胞樣癌診斷治療和分析預后的依據。

[1]Perou CM,Sorlie T,Eisen MB,et al.Molecular portraits of human breast tumours[J].Nature,2000,406(6797):747.

[2]Sassi F,Benazzi C,Castellani G,et al.Molecular-based tumour subtypes of canine mammary carcinomas assessed by immunohistochemistry[J].B MC Vet Res,2010,28(6):1045.

[3]Lerma E,Barnadas A,Prat J.Triple negative breast carcinomas:similarities and differences with basal like carcinomas[J].Appl Immunohistochem Mol Morphol,2009,17(6):483.

[4]楊光之,皋嵐湘,丁華野.乳腺基底細胞樣癌[J].診斷病理學雜志,2007,14(4):241.

[5]Russnes HG,Tronnes S,Maelandsmo GM,et al.Molecular profiling and characterization of luminal-like and basal-like in vivo breast cancer xenograft models[J].Mol Oncol,2009,3(5):469.

[6]Schnitt SJ.Classification and prognosis of invasive breast cancer:from morphology to molecular taxonomy[J].Mod Pathol,2010,23(2):60.

[7]Seal MD,Chia SK.What is the difference between triple-negative and basal breast cancers?[J].Cancer J,2010,16(1):12.

[8]Weigelt B,Reis-Filho JS.Histological and molecular types of breast cancer:is there a unifying taxonomy?[J].Nat Rev Clin Oncol,2009,6(12):718.

[9]Thike AA,Cheok PY,Jara-Lazaro AR,et al.Triple-negative breast cancer:clinicopathological characteristics and relationship with basal-like breast cancer[J].Mod Pathol.2010,23(1):123.

[10]郭歡續(xù),白 歐.乳腺癌ER、PR、Her-2表達與臨床病理特征[J].中國實驗診斷學,2008,12(11):1390.

[11]Lialiaris TS,Georgiou G,Sivridis E,et al.Prognostic and predictive factors of invasive ductal breast carcinomas[J].J BUON.2010,15(1):79.