于學(xué)壽

(山東省萊陽衛(wèi)生學(xué)校醫(yī)學(xué)影像教研室 山東萊陽 265200)

小鼠是常用的哺乳類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,常用于放射學(xué)、免疫學(xué)以及腫瘤白血病等的研究。良好的麻醉效果是實(shí)施動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵,其中麻醉劑及麻醉方式的選擇尤為重要。在進(jìn)行影像學(xué)檢查時(shí),特別是MRI檢查對(duì)小鼠麻醉藥物及麻醉方式的選擇提出了更高的要求。氯胺酮(Ketamine)是臨床常用的鎮(zhèn)痛麻醉藥,具操作方便,誘導(dǎo)迅速,安全性高,麻醉后蘇醒快等優(yōu)點(diǎn)。我們選擇氯胺酮的腹腔及肌肉2種常用注射方式對(duì)小鼠進(jìn)行麻醉效果觀察。比較2種麻醉方式的起效時(shí)間、維持時(shí)間及麻醉前后呼吸、體溫等生命體征的變化,旨在為小鼠MRI檢查尋找安全可靠得麻醉方法。

1 資料與方法

1.1 一般資料

健康BALB/c小鼠30只,雄性♂,5～6周齡,20～24g,由山東省動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。

1.2 藥品

鹽酸氯胺酮注射液,上海中西藥業(yè)股份有限公司,生產(chǎn)批號(hào):KH060501。

1.3 麻醉方法

30只BALB/c小鼠隨機(jī)分成2組,每組15只,分別按100mg/kg體重鹽酸氯胺酮,腹腔注射組于左下腹中線旁腹腔內(nèi)注射,肌肉注射組選擇左后肢內(nèi)側(cè)行肌內(nèi)注射。

1.4 觀察指標(biāo)

(1)起效時(shí)間:自注射氯胺酮后至BALB/c小鼠出現(xiàn)翻正反射消失時(shí)間。(2)維持時(shí)間:自BALB/c小鼠初次出現(xiàn)翻正反射消失至蘇醒爬動(dòng)的時(shí)間。(3)麻醉期間呼吸、體溫等生命體征及其他變化:觀察、測(cè)量麻醉期間的小鼠呼吸頻率(次/min)及體溫的變化,并記錄小鼠在麻醉過程中有無異常表現(xiàn),注射局部的改變以及對(duì)外界刺激的反應(yīng)等。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SSPS 10.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理分析,組間比較用t檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 氯胺酮麻醉BALB/c小鼠的起效及維持時(shí)間

氯胺酮經(jīng)腹腔及肌肉注射麻醉,2組均能達(dá)到較為理想的麻醉效果。2組起效時(shí)間及維持時(shí)間,見表1。

2.2 麻醉期間小鼠呼吸、體溫等生命體征及其他變化

在氯胺酮對(duì)2組小鼠麻醉過程中,2組小鼠均沒出現(xiàn)因麻醉致死現(xiàn)象,30只小鼠麻醉結(jié)束蘇醒后均能正常進(jìn)食飲水。但在麻醉初期及蘇醒后2組小鼠均不同程度出現(xiàn)煩躁現(xiàn)象,以肌肉注射組較為明顯。麻醉過程中2組小鼠呼吸頻率及體溫,無顯著性差異P>0.05(表2)。另外,肌肉注射組在麻醉過程中發(fā)現(xiàn)其注射部位可較早出現(xiàn)左后肢肌張力增高及運(yùn)動(dòng)障礙。當(dāng)2組小鼠出現(xiàn)翻正反射消失后,麻醉成功,此時(shí)小鼠基本能保持靜止不動(dòng)的狀態(tài),且持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng),對(duì)聲、光、痛等刺激無明顯反應(yīng),基本可以滿足影像學(xué)檢查的要求。

表1 氯胺酮麻醉B A L B/c小鼠的起效及維持時(shí)間（±s）

表1 氯胺酮麻醉B A L B/c小鼠的起效及維持時(shí)間（±s）

注:起效時(shí)間2組比較P>00.5,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;維持時(shí)間2組比較P<00.5,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

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3 討論

表2 2組B A L B/c小鼠在氯胺酮麻醉過程中呼吸頻率及體溫的變化（±s）

表2 2組B A L B/c小鼠在氯胺酮麻醉過程中呼吸頻率及體溫的變化（±s）

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(1)氯胺酮化學(xué)名為2－(2－氯苯基)－2甲胺基－環(huán)己酮鹽酸鹽,為苯環(huán)己哌啶的衍生物,自Domino1965年引入臨床后,至今仍是非巴比妥類靜脈麻醉藥鎮(zhèn)痛效果較為確定的麻醉藥物之一。其主要作用機(jī)制是抑制丘腦－皮層系統(tǒng),選擇性阻斷痛覺沖動(dòng)向丘腦和皮層的傳導(dǎo)徑路,而不引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)深度麻醉,對(duì)動(dòng)物體表有明顯鎮(zhèn)痛作用。注射后小鼠能較快進(jìn)入穩(wěn)定的麻醉狀態(tài),肌肉松弛,但如角膜反射等保護(hù)性反射仍存在,有少量唾液分泌,呼吸平穩(wěn)通暢,麻醉過程中無嘔吐,不需禁食,操作方便,起效快,麻醉穩(wěn)定持久等優(yōu)點(diǎn),本實(shí)驗(yàn)小鼠蘇醒后連續(xù)觀察3d,活動(dòng)如常,無1例死亡。

(2)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)麻醉劑的選擇要考慮動(dòng)物的品系、實(shí)驗(yàn)時(shí)間的長(zhǎng)短以及手術(shù)大小等方面的因素。氯胺酮具有使用方便,價(jià)格便宜,起效迅速,麻醉維持時(shí)間穩(wěn)定持久以及安全可靠蘇醒后恢復(fù)快等優(yōu)點(diǎn),使其成為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究?jī)?yōu)良麻醉劑的合理選擇;而因小鼠體積較小,尾靜脈注射難度較大,使得腹腔及肌肉注射成為小鼠麻醉較為常用的2種注射方式,臨床上氯胺酮常用其鹽酸鹽溶液制成針劑,氯胺酮肌肉注射劑量范圍為22～44mg/kg體重。但我們?cè)谇捌趯?shí)驗(yàn)階段曾嘗試用22～44mg/kg體重氯胺酮肌肉注射麻醉,發(fā)現(xiàn)此劑量下小鼠麻醉較淺,無法滿足影像學(xué)檢查所需要的制動(dòng)及維持時(shí)間較長(zhǎng)等目的,氯胺酮腹腔注射用量較大,腹部注射100～150mg/kg可完成手術(shù)1h,160～260mg/kg可完成手術(shù)2h。故本實(shí)驗(yàn)選用與腹腔注射相同劑量100mg/kg行肌肉注射麻醉以此對(duì)照進(jìn)行麻醉效果的觀察。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看,氯胺酮經(jīng)腹腔及肌肉注射麻醉,起效時(shí)間無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,均能實(shí)現(xiàn)迅速起效的目的,這可能與腹腔及肌肉2種注射方式藥物吸收速度相當(dāng)有關(guān)。2種注射方式下小鼠麻醉維持時(shí)間均較為穩(wěn)定持久,基本能滿足影像學(xué)檢查所要求的制動(dòng)目的。但比較之下肌肉注射維持時(shí)間相對(duì)較腹腔注射長(zhǎng),二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,考慮可能是由于腹腔注射藥物吸收不完全所致。在實(shí)際實(shí)驗(yàn)操作過程中,為提高麻醉維持時(shí)間可以相應(yīng)增加腹腔注射的麻醉劑量。2種麻醉方式對(duì)小鼠呼吸、體溫等生命體征的影響無顯著性差異。因氯胺酮有能引起煩躁的副作用,本實(shí)驗(yàn)2組小鼠在麻醉前及蘇醒后均不同程度出現(xiàn)煩躁現(xiàn)象,以肌肉注射組較為明顯,可能與麻醉劑量相對(duì)較大有關(guān)。但在麻醉及實(shí)驗(yàn)檢查結(jié)束后仍能保證小鼠的存活、以及大多生命體征和生理指標(biāo)的基本正常?？傊?氯胺酮是小鼠麻醉劑的一種優(yōu)良選擇,應(yīng)用適合劑量的氯胺酮行腹腔或肌肉注射能為MRI等影像學(xué)檢查提供滿意的小鼠麻醉狀態(tài)。

[1]李曉清,楊曉玲,秦建群,等.氯胺酮在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉中的應(yīng)用分析[J].上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué),2001,21(3):169～170.

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