秘春燕

（山西省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，山西 太原030013）

幽門螺桿菌（Hp）為微需氧菌，是一端有鞭毛的螺旋形革蘭陰性菌。已有研究證實(shí)，該菌與慢性胃炎、消化性潰瘍、胃黏膜相關(guān)性淋巴瘤（MALT）及胃癌密切相關(guān)［1-2］。臨床上由于根除Hp的指征掌握不嚴(yán)格，Hp根除在消化不良治療中的不恰當(dāng)應(yīng)用，廣泛使用抗生素，使得Hp的耐藥率逐年上升，因此Hp耐藥性的研究在臨床診斷和治療中有重大意義。為了選擇最佳的治療方法和減少繼發(fā)性耐藥的產(chǎn)生，我們將600例患者的Hp藥敏試驗(yàn)分析如下，以期為臨床正確用藥提供指導(dǎo)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

Hp菌株均來源于我院2006年6月-2007年12月胃鏡室送檢的快速尿素酶試驗(yàn)Hp陽性患者的胃竇部活檢黏膜標(biāo)本720份，分離成功600株。其中男348例，女 252例；年齡 12歲～88歲，平均（49.36±5.62）歲；其中慢性淺表性胃炎273例，十二指腸球炎56例，胃潰瘍113例，十二指腸球部潰瘍95例，胃癌32例，復(fù)合性潰瘍18例，胃息肉13例。

1.2 方 法

1.2.1 標(biāo)本采集與培養(yǎng) 對(duì)Hp快速尿素酶試驗(yàn)陽性的患者再取胃黏膜標(biāo)本2塊，放入Hp運(yùn)送培養(yǎng)基，24 h內(nèi)轉(zhuǎn)種于Hp分離培養(yǎng)基，在微氧環(huán)境恒溫培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)3 d～7 d。菌落經(jīng)革蘭染色、尿素酶試驗(yàn)、過氧化氫酶和過氧化物酶試驗(yàn)鑒定為Hp菌株。于保存培養(yǎng)基內(nèi)-80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 藥敏試驗(yàn) 參照WHO推薦的K-B法進(jìn)行檢測。將通過鑒定的Hp菌株經(jīng)2～3代培養(yǎng)后以布氏肉湯稀釋至1×1012CFU/L濃度的懸液，取100 μL上述懸液滴于直徑90 mm，厚度為（4±0.5）mm的血瓊脂平皿上，用L型玻棒涂布均勻后貼藥敏紙片，37℃、濕度>90%、微需氧袋內(nèi)培養(yǎng)72 h后，記錄抑菌環(huán)直徑，其判斷標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)中國藥品生物制品檢定所抗菌藥物細(xì)菌耐藥性監(jiān)測中心印發(fā)的 《抗菌藥物敏感實(shí)驗(yàn)判斷標(biāo)準(zhǔn)》［3］。藥敏紙片左氧氟沙星、克拉霉素、阿莫西林、四環(huán)素、呋喃唑酮、甲硝唑，由OXID公司提供，在效期內(nèi)使用。

2 結(jié)果

2.1 6種抗生素藥敏試驗(yàn)結(jié)果比較

結(jié)果見表1。

表1 6種抗生素藥敏試驗(yàn)結(jié)果比較 ［株（%）］

由表1可以看出，Hp對(duì)阿莫西林、甲硝唑、克拉霉素、左氧氟沙星、四環(huán)素、呋喃唑酮的耐藥率分別為 4.0%、32.0%、10.0%、24.0%、6.0%和 0%； 高敏率分別為 56.0%、38.0%、52.0%、40.0%、54.0%和66.0%。結(jié)果顯示本地區(qū)幽門螺桿菌對(duì)呋喃唑酮、阿莫西林、四環(huán)素、克拉霉素的敏感性較高；對(duì)甲硝唑、左氧氟沙星的耐藥率較高，這可能與本地區(qū)其他疾病較多使用左氧氟沙星有關(guān)。

2.2 患者性別、年齡對(duì)Hp耐藥率的影響

Hp耐藥率在性別方面除女性患者Hp對(duì)甲硝唑耐藥率顯著高于男性（P<0.05）外，其余抗生素的耐藥率比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），結(jié)果見表2。

表2 患者性別、年齡對(duì)HP耐藥率的影響 （株）

3 討 論

幽門螺桿菌是慢性活動(dòng)性胃炎、消化性潰瘍、胃癌和黏膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤的重要病因。根除Hp是防治上述各種疾病發(fā)生、發(fā)展以及復(fù)發(fā)的重要途徑，用于Hp根除治療的抗生素目前主要有甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林、四環(huán)素、呋喃唑酮等。隨著Hp根除治療的普及，Hp對(duì)抗生素的耐藥情況日益嚴(yán)重，而Hp對(duì)抗生素耐藥是導(dǎo)致Hp根除治療失敗的主要原因，而且Hp的耐藥率在不同國家或地區(qū)不盡相同。Hp耐藥性分為原發(fā)性耐藥和繼發(fā)性（獲得性）耐藥，原發(fā)性耐藥是由于遺傳性發(fā)生改變及經(jīng)過選擇過程產(chǎn)生的，原發(fā)性耐藥與同類藥物交叉耐藥有關(guān)，有明顯的地域差異并隨時(shí)間而改變；繼發(fā)性耐藥多為抗菌藥物誘導(dǎo)，過多的用藥，藥物選擇性壓力，使耐藥細(xì)菌占優(yōu)勢。在治療失敗時(shí)大約有1/3～1/2的菌株可對(duì)其產(chǎn)生耐藥性。繼發(fā)性耐藥會(huì)影響再次治療，并給抗菌藥物的選擇帶來相當(dāng)困難［4-5］。Hp感染實(shí)驗(yàn)室的診斷方法眾多，有分離培養(yǎng)、形態(tài)學(xué)、血清學(xué)、脲酶依賴性試驗(yàn)、分子生物學(xué)等方法。由于作為微需氧菌，培養(yǎng)條件較為嚴(yán)格，其它污染菌的過度增殖及其它污染物會(huì)抑制Hp的生長，應(yīng)用殺滅或抑制Hp的藥物同樣會(huì)抑制細(xì)菌生長，導(dǎo)致細(xì)菌培養(yǎng)不能獲得理想結(jié)果，成為實(shí)驗(yàn)室分離培養(yǎng)診斷中敏感度比較低的一種。對(duì)所分離培養(yǎng)的菌株進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)，根據(jù)藥敏結(jié)果指導(dǎo)臨床治療，對(duì)避免使用已經(jīng)產(chǎn)生耐藥的抗生素，提高Hp治療根除率，有重要的意義［6］。

Hp對(duì)甲硝唑的耐藥率為20%～80%（平均30%～40%），對(duì)克拉霉素的耐藥率為1%～20%，Hp對(duì)甲硝唑和克拉霉素的耐藥率正呈世界范圍上升趨勢［4］。治療方案的不規(guī)范、病人依從性差和抗生素的濫用，導(dǎo)致Hp的耐藥現(xiàn)象日趨嚴(yán)重。Hp的體外誘導(dǎo)耐藥試驗(yàn)和耐藥率監(jiān)測表明，甲硝唑耐藥率為49.7%，而在呋喃唑酮耐藥試驗(yàn)中，沒有一株Hp產(chǎn)生耐藥［5］，和我們的研究結(jié)果大體一致，提示Hp不容易對(duì)呋喃唑酮產(chǎn)生耐藥性?，F(xiàn)已有多項(xiàng)研究表明左氧氟沙星可安全、有效地初次和補(bǔ)救治療幽門螺桿菌，但對(duì)于左氧氟沙星耐藥情況鮮見報(bào)道。

我們通過幽門螺桿菌培養(yǎng)及藥物敏感試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)Hp對(duì)阿莫西林、甲硝唑、克拉霉素、左氧氟沙星、四環(huán)素、呋喃唑酮的耐藥率分別為4.0%、32.0%、10.0%、24.0%、6.0%和0%；高敏率分別為56.0%、38.0%、52.0%、40.0%、54.0%和66.0%。本組資料結(jié)果顯示，本地區(qū)幽門螺桿菌對(duì)呋喃唑酮、阿莫西林、四環(huán)素、克拉霉素的敏感性較高；對(duì)甲硝唑、左氧氟沙星的耐藥率較高，這可能與本地區(qū)其他疾病較多使用左氧氟沙星有關(guān)。因此，本地區(qū)根除Hp方案中應(yīng)首選呋喃唑酮、阿莫西林、四環(huán)素、克拉霉素等。

有研究報(bào)道，抗生素耐藥還與性別和年齡有關(guān)，女性與耐藥明顯相關(guān)，抗生素不耐藥隨年齡增加而增加，而70歲后則明顯下降［7］。本研究結(jié)果表明女性患者Hp對(duì)甲硝唑耐藥率高于男性（P<0.05），其余抗生素在性別方面的耐藥率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；并沒有發(fā)現(xiàn)年齡與抗生素耐藥率之間有必然的聯(lián)系（P>0.05）；各抗生素耐藥與疾病種類亦無關(guān)。

隨著抗生素長期廣泛應(yīng)用，必然產(chǎn)生Hp耐藥株，其耐藥性逐漸增強(qiáng)。為了減少Hp耐藥菌株的產(chǎn)生，在臨床上選擇抗生素時(shí)，應(yīng)根據(jù)患者的不同年齡和不同體質(zhì)選擇不同的藥物。嚴(yán)格掌握Hp根除治療的適應(yīng)證；聯(lián)合用藥，避免單一抗生素的使用，盡可能選擇耐藥率較低的抗生素組合進(jìn)行治療；避免使用對(duì)Hp耐藥的抗生素，有條件時(shí)最好能在治療前先做藥物敏感試驗(yàn)；治療規(guī)范化，普及和推廣正規(guī)的治療方案，選擇合理的劑量和療程等，對(duì)提高根除率，降低復(fù)發(fā)率，減少耐藥菌株的產(chǎn)生有著十分重要的意義［8］。

［1］康白.微生態(tài)學(xué)原理［M］.2 版.大連：大連出版社，2002：126.

［2］胡文華.幽門螺桿菌菌株的7種藥物體外藥敏試驗(yàn)研究［J］.第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，1996，18（2）：457-458.

［3］梁曉，劉文忠，陸紅，等.幽門螺桿菌體外誘導(dǎo)耐藥試驗(yàn)和耐藥率監(jiān)測［J］.中華消化雜志，2003，23（3）：146-149.

［4］王世嶺，楊珺，周亮，等.酪酸梭菌、雙歧桿菌膠囊對(duì)健康受試者腸道菌群的影響［J］.中國臨床藥理學(xué)雜志，2005，21（6）：449.

［5］成虹，胡伏蓮.北京地區(qū)幽門螺桿菌耐藥情況及其變化趨勢［J］.中華醫(yī)學(xué)雜志，2005，85（1）：2 754-2 757.

［6］姚創(chuàng)利，朱建偉，李建平.2005年西安地區(qū)幽門螺桿菌耐藥性分析［J］.實(shí)用醫(yī)技雜志，2006，13（4）：3 590-3 591.

［7］張曉光，胡品津，陳為，等.廣東地區(qū)幽門螺桿菌耐藥的調(diào)查［J］.胃腸病學(xué)，2001，6（suppl）：A66.

［8］許珂，魏萍.益生菌作用機(jī)制的研究進(jìn)展［J］.中國微生態(tài)學(xué)雜志，2009，21（1）：90.