陳萬勝

(河南省許昌市食品藥品檢驗(yàn)所 河南許昌 461000)

乳酸環(huán)丙沙星注射液細(xì)菌內(nèi)毒素檢驗(yàn)方法分析

陳萬勝

(河南省許昌市食品藥品檢驗(yàn)所 河南許昌 461000)

目的 探討研究乳酸環(huán)丙沙星注射液細(xì)菌內(nèi)毒素檢驗(yàn)方法。方法 采用鱟試劑細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法進(jìn)行乳酸環(huán)丙沙星注射液細(xì)菌內(nèi)毒素檢驗(yàn)。結(jié)果 0.1%乳酸環(huán)丙沙星注射液對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素檢查無干擾;5批樣品家兔熱原檢查結(jié)果均為陰性,與細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法檢查結(jié)果相同。結(jié)論 乳酸環(huán)丙沙星注射液采用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法(BET)進(jìn)行熱原檢查,該方法簡(jiǎn)便快速,可以取代家兔法檢查熱原。鱟試劑檢驗(yàn)方法更簡(jiǎn)便、快速、靈敏、準(zhǔn)確。

乳酸環(huán)丙沙星注射液 細(xì)菌內(nèi)毒素 檢驗(yàn)方法 分析

乳酸環(huán)丙沙星注射液是臨床常用的廣譜抗生素,已得到臨床廣泛應(yīng)用。根據(jù)鱟試劑能與細(xì)菌內(nèi)毒素發(fā)生非常靈敏的特異性反應(yīng)機(jī)理[1],我們對(duì)0.1%乳酸環(huán)丙沙星注射液的細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)方法進(jìn)行了研究。

1 臨床材料

1.1 一般材料

鱟試劑(動(dòng)態(tài)濁度法專用),福建省福州東方鱟試劑廠生產(chǎn)的批號(hào):990820,靈敏度:0.5EU/mL,裝量:0．5mL/支。細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水,批號(hào):000313,裝量:2mL/支,湛江海洋生物制品廠生產(chǎn)。細(xì)菌內(nèi)毒素國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品,批號(hào):981,裝量:9000EU/支,中檢所制。乳酸環(huán)丙沙星注射液:廣西裕源藥業(yè)有限公司國(guó)藥準(zhǔn)字H20033501,批號(hào):201012856 201035846 201052321 201003656 201045741,每瓶100mL。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料

器皿自動(dòng)旋渦混合器:天津藥典標(biāo)準(zhǔn)儀器廠;DC-3型干式恒溫器:南京三愛斯技術(shù)有限開發(fā)公司;試管、吸管等所需器皿均經(jīng)250℃lh除去外源性內(nèi)毒素。

2 方法與結(jié)果

2.1 細(xì)菌內(nèi)毒素限值的確定

乳酸環(huán)丙沙星注射液熱源檢查劑量按家兔體重每1kg注射3mL。靜脈給藥時(shí)無任何不良反應(yīng)的內(nèi)毒素閾劑量K=5Eu/Kg,依據(jù)2000年版藥典規(guī)定本品熱原檢查注射液劑量M=12mL/kg[2],本品細(xì)菌內(nèi)毒素理論限值L=0.417Eu/mL。

2.2 最大有效稀釋倍數(shù)

L值確定后,根據(jù)所用鱟試劑的λ b值確定樣品的稀釋倍數(shù)。最大有效稀釋倍數(shù)MVD=L/λ b[3],本實(shí)驗(yàn)采用λ b為0.5Eu/mL的鱟試劑,0.1%乳酸環(huán)丙沙星注射液MVD=1.2。

2.3 抑制增強(qiáng)試驗(yàn)

我們采用λ=0.5.5Eu/mL的鱟試劑做抑制增強(qiáng)試驗(yàn)[4]。用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水將乳酸環(huán)丙沙星注射液稀釋3.2倍;將內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品用乳酸環(huán)丙沙星注射液稀釋液樣品溶液溶解,在旋渦混合器上進(jìn)行混合15min,然后制備成合適的稀釋濃度,1.0Eu/mL, 0.5Eu/mL,0.25Eu/mL,0.125Eu/mL;進(jìn)行抑制增強(qiáng)試驗(yàn),乳酸環(huán)丙沙星注射液稀釋液樣品溶液代替水為陰性對(duì)照,測(cè)的了批樣品的反應(yīng)結(jié)果一致;說明0.1%乳酸環(huán)丙沙星注射液對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素檢查無干擾,具體見表1。

表1 抑制增強(qiáng)試驗(yàn)結(jié)果

2.4 樣品的細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)

將5批樣品與0.5Eu/mL鱟試劑混合后,按細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法檢查,均為陰性。5批樣品家兔熱原檢查結(jié)果(按照中國(guó)藥典1995年版操作)均為陰性,與細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法檢查結(jié)果相同。

3 結(jié)語

中國(guó)藥典200年版規(guī)定,乳酸環(huán)丙沙星注射的熱原檢查采用家兔檢查法[5];通過我們對(duì)本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,0.1%乳酸環(huán)丙沙星注射液采用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法(BET)進(jìn)行熱原檢查,該方法簡(jiǎn)便快速,可以取代家兔法檢查熱原。鱟試劑檢驗(yàn)方法更簡(jiǎn)便、快速、靈敏、準(zhǔn)確[6]。

[1]曲道杰．20%、25%、50%葡萄糖注射液細(xì)菌內(nèi)毒索檢驗(yàn)方法的試驗(yàn)研究[J]．藥物分析雜志,2006,15(3):305～308．

[2]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)[M]．北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:附錄86,204．

[3]中國(guó)藥品生物制品檢定所．中國(guó)藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范[M]．北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2001:389．

[4]黃俊.乳酸環(huán)丙沙星注射液細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法的建立［J］.廣西醫(yī)學(xué),2009,31(5):875.

[5]陳銘軍.鱟實(shí)驗(yàn)法檢查乳酸環(huán)丙沙星注射液的細(xì)菌內(nèi)毒素限量［J］.廣西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2000,17(1):53.

[6]黃清泉,夏振民.藥品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)［J］．中國(guó)藥學(xué)雜志,2007,32(2):72.

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2010-11-30