秦 雪， 何志義

動(dòng)脈粥樣硬化的形成和發(fā)展是心腦血管疾病、糖尿病等重要的病理生理基礎(chǔ)，而炎癥反應(yīng)在動(dòng)脈粥樣硬化的形成過(guò)程中具有重要的意義［1］。表達(dá)于動(dòng)脈粥樣硬化病變處的一些趨化因子在單核細(xì)胞遷移和巨噬細(xì)胞分化過(guò)程中可以起強(qiáng)大的介質(zhì)作用。RANTES不僅對(duì)多種細(xì)胞具有趨化作用，還可以激活淋巴細(xì)胞，參與炎癥反應(yīng)的發(fā)生，調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)與分化，參與HIV的感染。研究表明，RANTES可能在動(dòng)脈粥樣硬化疾病的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，本文就近年國(guó)外這方面的研究結(jié)果綜述如下。

1 RANTES的生物學(xué)特點(diǎn)

RANTES為分子量為7.8kDa的小分子蛋白，屬于趨化性細(xì)胞因子CC亞足成員(CCL5)［2］，其N端無(wú)糖基化位點(diǎn)，有2個(gè)并列的半胱氨酸殘基，活性形式主要為單體，但pH值提高時(shí)可發(fā)生多聚化。人RANTES基因定位于17q11.2-q12染色體上，與巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1α(macrophage inflammatory protein 1α，MIP-1α)和MIP-1β有較高同源性，包含3個(gè)外顯子及2個(gè)內(nèi)含子，其長(zhǎng)度為8.8kb［3］，編碼91個(gè)氨基酸殘基，包括23個(gè)氨基酸組成的信號(hào)肽和68個(gè)氨基酸組成的成熟蛋白。RANTES來(lái)源廣泛，可由T細(xì)胞、血小板、上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等分泌［3，4］，其特異性受體為7次跨膜G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR 類)，包括 CCR1、CCR3、CCR4 和 CCR5，RANTES與受體高親和力特異性結(jié)合，激活細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，導(dǎo)致胞漿內(nèi)鈣離子釋放以及蛋白激酶C(PKC)活化，從而發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)［5，6］。

RANTES的主要作用是對(duì)多種白細(xì)胞具有趨化和(或)刺激作用，包括趨化單核細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、嗜酸性/嗜堿性粒細(xì)胞等，具有多個(gè)結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子的潛在位點(diǎn)，是急慢性炎癥的重要介質(zhì)［7～9］。研究發(fā)現(xiàn)，RANTES在動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程中兩個(gè)關(guān)鍵的初始階段發(fā)揮作用:(1)趨化白細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞壁移動(dòng);(2)誘導(dǎo)白細(xì)胞跨內(nèi)皮遷移［10］。在體及體外實(shí)驗(yàn)均證明，在動(dòng)脈粥樣硬化的早期環(huán)節(jié)，RANTES沉積于管腔內(nèi)側(cè)面激活單核細(xì)胞，趨化其向內(nèi)皮細(xì)胞募集粘附并穿入至內(nèi)皮下［11，12］。有學(xué)者分別在病變斑塊處單核細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和成肌纖維細(xì)胞檢測(cè)到高度表達(dá)的RANTES蛋白和mRNA［13，14］，均提示其在動(dòng)脈粥樣硬化中是介導(dǎo)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)的重要介質(zhì)。在已有動(dòng)脈粥樣硬化損傷的大鼠模型中，通過(guò)人工修飾得到的 RANTES 受體拮抗劑 Met-RANTES［10，12］和［44AANA47］-RANTES［15］可以特異性抑制 RANTES 對(duì)單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、T細(xì)胞等的趨化作用，減少巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)及脂質(zhì)沉積，從而延緩了動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展。以上結(jié)果均證明，RANTES在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的重要介質(zhì)作用。

2 RANTES基因多態(tài)性與動(dòng)脈粥樣硬化

近年來(lái)國(guó)外文獻(xiàn)中報(bào)道的關(guān)于CCL5基因的7個(gè)SNP位點(diǎn):有4個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)位于基因啟動(dòng)子區(qū):-403(G→A)，-109(T→C)、-28(C→G)、-105(C→T);2 個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)位于第一內(nèi)含子內(nèi):In1.1T/C、In1.2G/A;1個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)位于3’非翻譯區(qū):3’222T/C。而常見(jiàn)的RANTES突變是指RANTES上游啟動(dòng)區(qū)單核苷酸多態(tài)性(SNP)，即在RANTES基因上游-403位點(diǎn)的G堿基突變?yōu)锳堿基和-28位點(diǎn)的C堿基突變?yōu)镚堿基。這兩個(gè)位點(diǎn)的突變都可能影響RANTES基因的表達(dá)水平［16，17］:-403位點(diǎn)G-A的變異，恰好在啟動(dòng)子區(qū)形成反轉(zhuǎn)錄因子γ-GATA的DNA結(jié)合位點(diǎn)，有可能對(duì)基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生影響，從而影響疾病的發(fā)生發(fā)展;而在-28位點(diǎn)DNA序列附近存在大量轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)，所以-28位點(diǎn)的堿基改變，很有可能對(duì)RANTES啟動(dòng)子的活性產(chǎn)生影響，進(jìn)而影響基因表達(dá)。

2.1 RANTES 與冠心病

Simeoni等［18］利用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性技術(shù)(Polymerase chain reaction-Restriction fragment length polymorphism technique，PCR-RFL P)針對(duì)德國(guó)白種人2694例冠心病患者和530例健康對(duì)照組進(jìn)行了RANTES基因的多態(tài)性研究發(fā)現(xiàn)，-403 A作為炎性標(biāo)記物與冠心病的發(fā)病率有顯著的相關(guān)性，經(jīng)過(guò)多因素回歸分析校正后-403A仍為冠心病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，可能增加冠心病的遺傳易感性。Vogiatzi等［19］為研究RANTES啟動(dòng)子區(qū)遺傳多樣性對(duì)冠心病和支架后狹窄(in stent restenosis，ISR)的遺傳易感性，將研究對(duì)象分為3組，即 PCI(percutaneous coronary intervention，PCI)術(shù)后無(wú)ISR的冠心病患者118例、存在ISR的冠心病患者74例及健康對(duì)照組146例，研究發(fā)現(xiàn)-403G/A基因多態(tài)性與冠心病間存在基因型-表型的相互作用，RANTES-403AA純合子不僅在冠心病組更常見(jiàn)，而且與-403GA雜合子和-403GG野生型純合子相比，-403AA純合子的患者其冠心病更為嚴(yán)重，病變血管的平均數(shù)目更多。由此得出結(jié)論:-403A等位基因與冠心病的發(fā)生和嚴(yán)重程度具有明顯相關(guān)性，且獨(dú)立于CAD的傳統(tǒng)因素外。而Jang等［20］所得結(jié)論與上述相反，其針對(duì)韓國(guó)人群553例冠心病患者和416例對(duì)照組研究發(fā)現(xiàn)，RANTES-403A等位基因與血清中RANTES濃度降低有關(guān)，因此降低了罹患冠心病的風(fēng)險(xiǎn)(OR=0.70，95%CI=0.54-0.92，P=0.011)。

2.2 RANTES與腦血管疾病

Um 等［21］進(jìn)行了 RANTES、白細(xì)胞介素-4(IL-4)可變串聯(lián)重復(fù)系列(variable number of tandem repeat，VNTR)基因多態(tài)性與腦梗死相關(guān)性的病例-對(duì)照研究，通過(guò)對(duì)320例腦梗死患者和481例對(duì)照者與RANTES基因表達(dá)相關(guān)的多態(tài)性位點(diǎn)的檢測(cè)，結(jié)果提示雖然RANTES的-403G/A基因型和等位基因型的分布在兩組間沒(méi)有差異，但RANTES-403A等位基因增加了未攜帶IL-4VNTR3等位基因者的腦梗死相對(duì)危險(xiǎn)性(OR=1.5，95%CI=1.03-2.25，P=0.035)。Ghilardi等［22］研究發(fā)現(xiàn)-403G等位基因頻率在頸內(nèi)動(dòng)脈嚴(yán)重狹窄(大于70%)的患者中明顯增高，得出結(jié)論RANTES可能在頸內(nèi)動(dòng)脈狹窄性疾病的發(fā)病機(jī)制及疾病進(jìn)展中起作用。在針對(duì)日本人群不同性別、伴有或不伴有傳統(tǒng)動(dòng)脈粥樣硬化危險(xiǎn)因素的動(dòng)脈血栓性腦梗死的基因多態(tài)性研究中，Yamaguchi等［23］檢測(cè)了包括RANTES在內(nèi)的152個(gè)候選基因的多態(tài)性，得出結(jié)果-403G/A多態(tài)性與高膽固醇血癥明顯相關(guān)。

2.3 RANTES 與糖尿病

Boger等［24］研究發(fā)現(xiàn)，攜帶 RANTES-403A 或 In1.1C 等位基因的2型糖尿病患者的心腦血管事件死亡率明顯高于對(duì)照組，由此得出結(jié)論2型糖尿病合并終末期腎病的患者，由于RANTES基因變異影響了其在動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)程中的基因表達(dá)，從而增加了心腦血管事件的發(fā)生率。

3 結(jié)語(yǔ)和展望

綜合上述的研究結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，雖然在體及體外實(shí)驗(yàn)證明RANTES在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起著重要的作用，但RANTES基因的多態(tài)性是否是動(dòng)脈粥樣硬化的易感基因，是否會(huì)增加相關(guān)疾病的患病風(fēng)險(xiǎn)，世界范圍內(nèi)仍無(wú)統(tǒng)一定論，提示對(duì)該基因進(jìn)一步詳細(xì)研究的必要性。分析結(jié)果差異的原因，一是可能因性別、種族、地域以及環(huán)境因素的不同而存在明顯差異;二是樣本數(shù)量、入選人群以及統(tǒng)計(jì)學(xué)處理的不同可能會(huì)造成結(jié)果的偏差。因此，為進(jìn)一步明確RANTES基因型-表型之間的關(guān)系，還應(yīng)針對(duì)不同種族、不同地區(qū)、不同性別、多個(gè)基因多態(tài)性位點(diǎn)的大樣本多中心的病例對(duì)照研究，這對(duì)于進(jìn)一步理解和研究RANTES在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制中的作用途徑及相關(guān)疾病的遺傳易感性具有重要的意義，不僅有助于確定相關(guān)疾病的高危人群，更重要的是可以進(jìn)而進(jìn)行早期的干預(yù)治療，從而降低此類疾病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。

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