王金松 曾樹林

S100蛋白在大腸癌組織中的表達及其臨床意義

王金松 曾樹林

本文2010-09-20收到,2010-12-06修回,2010-12-06接受

結(jié)、直腸癌是最常見的惡性消化道腫瘤之一,其發(fā)病率和死亡率近年來呈上升趨勢。雖然在治療手段上取得一定進展,但早期診斷和根治方法尚無突破。如何預(yù)防和早期發(fā)現(xiàn)局部復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移成為提高生存率的重點。S100蛋白在大腸癌的輔助診斷和預(yù)后判斷、療效觀察、監(jiān)視腫瘤轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)等方面均有重要參考意義,其經(jīng)濟性也使其成為患者常規(guī)、定期的檢查指標(biāo)[1]。本研究應(yīng)用免疫組化方法檢測大腸惡性腫瘤不同病理分型和臨床分期S100蛋白的表達,分析S100蛋白的表達在患者不同年齡、腫瘤大小、有無轉(zhuǎn)移之間的差別。

1 資料與方法

1.1 對象

收集2005年1月～2010年1月本院普外科手術(shù)切除大腸癌臨床資料齊全的標(biāo)本88例(良性粘液腺瘤17例,低分化腺癌15例,中分化腺癌25例,高分化腺癌31例),大體形態(tài)分為腫塊型、潰瘍型及膠樣型;采用臨床Dukes分期標(biāo)準(zhǔn)[2]為Ⅰ期 18例、Ⅱ期25例、Ⅲ期25例、Ⅳ期20例;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肝轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移共64例,取癌旁正常組織18例作為對照。對88例大腸癌患者進行隨訪。

1.2 取材及染色

收集88例大腸癌組織以及18例大腸癌手術(shù)切除的癌緣5 cm以上組織,經(jīng)福爾馬林固定,石蠟包埋,常規(guī)連續(xù)切片(厚度4μm)后進行S100蛋白免疫組化染色(S-P法)。S100多克隆抗體購自南京德寶生化器材有限公司;S-P試劑盒、DAB染色劑均購自北京中山生物技術(shù)有限公司。

1.3 陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)[3]

以高倍鏡下計數(shù)100個上皮細胞和/或間質(zhì)細胞,連續(xù)數(shù)10個高倍視野,取其平均值。陰性(-):染色細胞數(shù)為0%～10%;陽性(+):染色細胞數(shù)為11%～35%,染色淺淡;中度陽性(++):染色細胞數(shù)36%～55%之間,染色強度中等;強陽性(+++):染色細胞數(shù)＞55%,染色較深。陰性對照無顯色;陽性染色為細胞呈現(xiàn)高于背景的棕黃色,著色位于胞膜和/或胞漿。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS10.0統(tǒng)計軟件,S100蛋白在癌旁組織和大腸癌組織中表達的比較、大腸癌不同病理類型和不同臨床分期之間的比較以及大腸癌患者各種病理參數(shù)間S100蛋白表達的比較均采用卡方檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 S100蛋白在大腸癌不同病理分型及臨床分期中的表達

與癌旁組織相比,大腸癌組織中S100蛋白的總陽性表達率明顯升高(χ2=8.72,P＜0.01)。不同病理類型之間總陽性率比較,S100蛋白的表達有明顯差異(χ2=6.46,P＜0.05)。不同臨床分期之間總陽性率比較,S100蛋白的表達亦有明顯差異(χ2=6.33,P＜0.05)。見表1。

2.2 S100蛋白的表達與大腸癌患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系從表2可以看出,與無轉(zhuǎn)移及轉(zhuǎn)移少于3個淋巴結(jié)的大腸癌患者比較,轉(zhuǎn)移超過3個者S100蛋白表達陽性率明顯升高(χ2=14.79,P＜0.01)。生存期超過5年的患者S100陽性率顯著低于生存期少于5年患者(χ2=10.04,P＜0.01)。同時統(tǒng)計結(jié)果表明,S100蛋白的表達在大腸癌患者年齡、腫瘤大小之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P均＞0.05)。

3 討 論

S100蛋白是1965年在牛腦浸液中首先分離出來的一組可溶性、低分子量、高酸性的蛋白質(zhì)。因其在中性飽和硫酸胺溶液中溶解而命名,S100蛋白家族是一個有21個成員的鈣結(jié)合蛋白家族,S100蛋白通過對鈣離子的調(diào)節(jié)及與靶蛋白的相互作用,在體內(nèi)發(fā)揮多種生物學(xué)功能,如控制細胞周期、細胞分化、酶的活化、肌肉收縮等[2,4]。大量研究發(fā)現(xiàn),S100成員在多種腫瘤中表達異常,并與腫瘤的浸潤 、轉(zhuǎn)移有關(guān)[5～7]。

表1 S100蛋白在大腸癌不同病理分型及臨床分期中的表達

表2 S100蛋白的表達與大腸癌患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系

本次實驗結(jié)果表明,大腸癌組織中的S100蛋白的表達明顯高于癌旁組織(P＜0.05)。隨著大腸癌分化程度的增加,S100蛋白的表達明顯加強(P＜0.05);不同Dukes分期間大腸癌S100蛋白的表達比較,差異也有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05),提示S100蛋白的表達水平與大腸癌的分化、浸潤、轉(zhuǎn)移及預(yù)后有關(guān)。與Shimada等[5]和Stulik等[6]的報道一致。

S100蛋白在大腸癌組織中表達升高的可能機制有三:一是S100家族中大多數(shù)成員編碼基因位于21號染色體1q21區(qū),該區(qū)染色體穩(wěn)定性差,極易發(fā)生染色體重排,腫瘤在此區(qū)的基因發(fā)生頻繁重組,從而引起S100基因表達失控[7];二是腫瘤細胞分泌的細胞因子如血管內(nèi)皮生長因子-α(VEGF-α)、腫瘤生長因子-β(TGF-β)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)等刺激基質(zhì)細胞產(chǎn)生、分泌 S100,在直腸癌組織中高表達[8];三是S100蛋白之間化學(xué)結(jié)合形成二聚體在骨髓細胞分化早期和循環(huán)中的粒細胞、單核細胞、上皮細胞、炎癥病變早期滲出的炎性細胞中表達,對大腸癌的發(fā)生和發(fā)展起促進作用。S100還可作為化學(xué)引誘物便于腫瘤細胞定植,通過有絲分裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)介導(dǎo)的腫瘤偽足活性來增加循環(huán)腫瘤細胞動力[9]。

S100蛋白功能十分復(fù)雜,與腫瘤的關(guān)系還不是很清楚,有的研究結(jié)果甚至有相互矛盾的地方。S100對腫瘤既有促進又有抑制作用,但可能存在以某種作用為主,或者受某些重要因子的調(diào)控而有不同表現(xiàn)。因此,還需要進行大量工作,以利于其應(yīng)用于腫瘤診斷、治療及評估。

本文第一作者簡介:

王金松(1966～),男,漢族,副主任技師

1 Salama I,M alone PS,M ihaimeed F,et al.A review of the S100 proteins in can cer.Eu r Su rq Oncol,2008,34(4):357～364.

2 Bulk E,Sargin B,K rug U,et al.S100A 2 inducesmetastasis in non-small cell lung cancer.Clin Cancer Res,2009,15(1):22～29.

3 段瓊紅,呂美霞,盧祖洵,等.大腸癌中 IGF-2蛋白的表達及相關(guān)性研究.世界華人消化雜志,2006,14(1):83～86.

4 Lin J,Blake M,Tang C,et al.Inhibition of P53 transcriptional activity by the S100B calcium-binding protein.JBiot Chem,2001,276(37):35 037～35 041.

5 Shimada A,Kano J,Ishiyama T,et al.Establishment of an immortalized cell line from a precancerous lesion of lung adenocarcinoma,and geneshigh ly expressed in the early stages of lung adenocarcinom a development.Can cer Sci,2005,96(10):668～675.

6 Stulik J,Osterreicher J,Koupilova K,et al.The analysis of S100A 9 and S100A 8 expression in matched sets ofmacroscopically normal colon mucosa and colorectal carcinoma:the S100A 9 and S100A 8 positive cells underlie and invade tumo rmass.Electrophoresis,2008,20(425):1 047～1 054.

7 Ilg EC,Schafer BW,H eizmann CW.Exp ression pattern of S100 calcium-binding proteins in human tumors.Int JCancer,2008,68(3):325～332.

8 Kennedy RD,Gorski JJ,Quinn JE,et al.BRCA 1 and c-M y c associate to transcription ally repress psoriasis,a DNA damage indu cible gene.Cancer Res,2005,65(22):10 265～10 272.

9 Davies BR,Odonnell M,Du rkan GC,et al.Expression of S100A 4 protein isassociated with metastasisand reduced su rvival in human b ladder cancer.JPatho,2002,196(3):292～299.

S100蛋白在大腸癌組織中的表達及其臨床意義

王金松,曾樹林/湖北省武漢市武昌醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗科,武漢430063

目的:探討S100蛋白在人大腸癌組織中的表達及其臨床意義。方法:收集2005年1月～2010年1月間,本院普通外科手術(shù)切除的大腸癌組織,且臨床資料完整的石蠟標(biāo)本88例,包括粘液腺癌17例,低分化腺癌15例,中分化腺癌25例,高分化腺癌31例;臨床Dukes分期包括Ⅰ期18例,Ⅱ期25例,Ⅲ期25例,Ⅳ期20例;88例患者中淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肝轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移共64例。應(yīng)用組織石蠟切片進行免疫組化S-P染色,檢測其S100蛋白的表達情況,并與癌旁正常組織進行比較。結(jié)果:大腸癌組織S100蛋白的表達高于癌旁組織,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。大腸癌不同組織分化程度之間S100蛋白的表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);不同Dukes分期間大腸癌S100蛋白的表達比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肝轉(zhuǎn)移及不同生存期患者S100蛋白表達比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論:S100蛋白的表達與大腸癌的分化、浸潤、轉(zhuǎn)移及預(yù)后有關(guān),可作為判斷大腸癌惡性程度及預(yù)后的指標(biāo)。

Exp ression of S100 Protein in Colorec ta l Neop lasm and its Clinical Significance

Wang Jinsong,Zen Shulin/Department of Clinical Laboratory,W uchang Hospital,W uhan 430063

S100;Colorectal neop lasm;M etastasis

R735.3

A

1005-1740(2011)01-0037-03

湖北省武漢市武昌醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗科,郵政編碼 武漢430063

book=41,ebook=198

Objective:To investigate theexpression ofS100 protein in colorectal neoplasm and its clinical significan ce.Method:From Jan.1999 to Jan.2004,w e gathered 88 colorectal cancer paraffin im bed tissue samples w hich had been diagnosed accu rately from general su rgery of our hospital.The exp ression of S100 p rotein in 88 patien ts with colo rectal can cer and 18 normalpatien ts w eremeasured by using immunohisto chem icalstaining.Results:The positive ratesof S100 p rotein in colorectal cancer were significan tly higher than normal patients(P＜0.05).It was significantly higher in DukesⅢ,Ⅳ stage than inⅠ stage,Ⅰ+Ⅱ stage thanⅢ+Ⅳstage(P＜0.05).It w as significantly different,the positive ratesof S100 p rotein in colorectal cancer with lymph node o r liver metastasis were higher than those without(P＜0.05).It w as remarkably different between the cases with recu rrence and withou t(P＜0.05).Exp ressions of S100 was related to Duke's stage carcinoma position,pathology type,differentiation and infiltrate depth.Conclusion:S100 p rotein may serve as a usefulm arker in judging the degree of m alignancy and invasion of colo rectal neoplasm.

S100 大腸癌 轉(zhuǎn)移