卞 琴，沈自尹，王擁軍

1 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)

1867年，德國(guó)病理學(xué)家 Cohnheim在研究創(chuàng)傷愈合時(shí)，提出了骨髓中可能存在非造血組織干細(xì)胞的觀(guān)點(diǎn)。1974年，F(xiàn)riedenstein等證實(shí)了這種觀(guān)點(diǎn)，他們首先報(bào)道了骨髓標(biāo)本中小部分貼附細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中能夠分化形成類(lèi)似骨或軟骨的集落，推測(cè)這種細(xì)胞可能是間質(zhì)細(xì)胞的前體細(xì)胞，并將之稱(chēng)為“骨髓多能基質(zhì)干細(xì)胞”［1］。1987年，Owen等在分離培養(yǎng)時(shí)發(fā)現(xiàn)這些細(xì)胞形狀呈成纖維細(xì)胞樣，因而稱(chēng)其為“成纖維細(xì)胞集落形成單位”(Colony.forming unifibroblastic，CFU-F)。1988 年，Mamiatopoulos等首次報(bào)道鼠骨髓基質(zhì)在體外培養(yǎng)能形成鈣化的骨樣組織，經(jīng)X線(xiàn)衍射分析確定形成的鈣化物具有羥基磷灰石結(jié)構(gòu)，證明體外培養(yǎng)的骨髓基質(zhì)具有成骨能力。1989年，Benakyahu等將MSC體外培養(yǎng)獲得具有典型的成骨細(xì)胞特性的細(xì)胞:具有較高的堿性磷酸酶活性，只產(chǎn)生I型膠原，在條件培養(yǎng)液中可以產(chǎn)生礦化的細(xì)胞外基質(zhì)。1991年Caplan將其命名為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)。隨著研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)其對(duì)骨髓血系細(xì)胞具有支持誘導(dǎo)作用且又來(lái)自骨髓基質(zhì)，故將其稱(chēng)為“骨髓基質(zhì)細(xì)胞(Bone marrow stromal cell，BMSCs)”。特別是在 1999 年，Pittenger在《Science》上發(fā)表文章宣布其分離到骨髓來(lái)源的單個(gè) MSC，產(chǎn)生了極大反響，對(duì)其認(rèn)識(shí)及研究也更加深入并成為熱點(diǎn)。

研究深入后發(fā)現(xiàn)，MSC在不同的誘導(dǎo)條件下，具有向中胚層組織細(xì)胞分化的能力，故又稱(chēng)其為“間充質(zhì)干細(xì)胞”、“間充質(zhì)祖細(xì)胞”(Mesenchymal progenitor cell)、骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(Bone marrow stromal stem cell)和基質(zhì)祖細(xì)胞(Stromal precursor cell)。2001年 Minguell等將 MSCs概括為:存在于骨髓基質(zhì)內(nèi)的非造血細(xì)胞來(lái)源的細(xì)胞亞群，可在體外擴(kuò)增，體外經(jīng)誘導(dǎo)后可分化為成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、肌腱細(xì)胞、肌管、神經(jīng)細(xì)胞與支持造血干細(xì)胞的基質(zhì)細(xì)胞。

2 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性

2.1 鑒定

目前為止，還沒(méi)有1個(gè)特異性的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)志。由于目前相關(guān)的命名很多，國(guó)際細(xì)胞治療委員會(huì)(International Society for Cellular Therapy，ISCT)推薦命名為“多潛能間充質(zhì)細(xì)胞(multipotent mesenchymal stromal cells，MSC)，并且定義了鑒定 MSC的最低標(biāo)準(zhǔn)，主要包括以下3方面［2］:(1)在正常培養(yǎng)條件下，可以貼附在塑料表面;(2)流式細(xì)胞儀檢測(cè):＞95%的 MSC群表達(dá)CD73(ecto 5’nucleotidase，5’核 苷 酸 酶)，CD90(Thy-1)和 CD105(endoglin，內(nèi)皮因子);同時(shí)，＞98%的MSC不表達(dá)造血干細(xì)胞表面抗原:CD45(白細(xì)胞標(biāo)志)CD34(造血干細(xì)胞祖細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志)、CD11b或者CD14(單核細(xì)胞標(biāo)志)、CD19或者CD79a(B細(xì)胞標(biāo)志)以及HLA家族2;(3)在適當(dāng)?shù)恼T導(dǎo)條件下，具有向成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞分化的潛能。

2.2 MSC分離

原代MSC的分離主要是利用其黏附在塑料表面的特性，然而這種分離程序相對(duì)耗時(shí)，無(wú)法排除異種細(xì)胞的污染。因此，近年也陸續(xù)報(bào)道了新的分離方法。如利用MSC與細(xì)胞外基質(zhì)的親和力來(lái)分離和擴(kuò)增，常用的有 I型膠原和纖維蛋白［3、4］。此外，表面抗體也常用來(lái)分離 MSC和造血干細(xì)胞，包括CD49a、CD 105、Stro-1［5、6］，雙標(biāo)記抗體有 Stro-1 和V-CAM。這些方法比單純的塑料表面貼壁法得到的 MSC 要多出 1000倍［7］。

2.3 組織來(lái)源

除了骨髓來(lái)源外，這種多潛能間充質(zhì)細(xì)胞還可從出生后及成人的臍帶血、胎盤(pán)、外周血、骨骼肌、皮膚、脂肪組織、滑膜、心臟、靜脈和動(dòng)脈壁上分離獲得［8、9］。事實(shí)上，MSC 幾乎存在于胚胎的所有組織中，包括腦、脾臟、肝臟、腎臟、肺、胰臟、胸腺等［10］。除了胎盤(pán)和臍帶血，皮下脂肪抽吸被認(rèn)為是獲得MSC的另一種簡(jiǎn)便和損傷性相對(duì)較小的方法，且脂肪組織中的MSC比例高。對(duì)59位平均年齡49歲的志愿者研究發(fā)現(xiàn)，MSC占有核細(xì)胞的2%［11］，而在骨髓組織中僅占到0.01%，且MSC在骨髓中的比例與年齡密切相關(guān)。出生時(shí)MSC與有核細(xì)胞的比例是 1∶10000，10 歲左右是 1∶00000，30 歲是 1∶250000，50 歲是 1∶400000，到80 歲是1∶2000000(見(jiàn)圖1)［12］。200ml的脂肪抽吸可獲得 100萬(wàn)個(gè)干細(xì)胞，是 40ml骨髓抽吸的 40倍左右［11］。

圖1 人骨髓內(nèi)BMSCs與有核細(xì)胞比例隨年齡變化趨勢(shì)

雖然MSC與其他細(xì)胞表面抗原沒(méi)有明顯的差異，但是有學(xué)者提議全基因表達(dá)譜是深入研究MSC特性的有效方法［13］。從脂肪、臍帶和骨髓中分離出的MSC，由于個(gè)體來(lái)源不同，因此許多基因的表達(dá)也不同。如骨髓來(lái)源的MSC與滑膜來(lái)源的MSC進(jìn)行基因芯片比較后發(fā)現(xiàn)，2組表面抗原非常相似，但是268個(gè)細(xì)胞因子受體轉(zhuǎn)錄因子中有46個(gè)出現(xiàn)差異［14］。此外，基因表達(dá)在MSC傳代到3～6代內(nèi)都保持穩(wěn)定［15］。

2.4 定向分化誘導(dǎo)劑

成骨細(xì)胞:在培養(yǎng)基中加一定濃度的地塞米松、抗壞血酸，beta甘油磷酸鹽合用，或者單獨(dú)加細(xì)胞因子BMP2，特異的成骨細(xì)胞標(biāo)志檢測(cè)包括:茜素紅染色、ALP、Cbfa1/Runx2、Osteopontin、Osteocalcin、ColI等。

軟骨細(xì)胞:3D-藻酸鹽培養(yǎng)，在高糖DMED培養(yǎng)基中加入地塞米松、抗壞血酸-2-磷酸鹽、脯氨酸、TGF-beta3、BMP-6。特異的軟骨細(xì)胞檢測(cè)標(biāo)志包括阿爾辛蘭染色、aggrecan、ColII、Sox-9 等。

脂肪細(xì)胞:過(guò)氧化物酶體增殖激活受體gamma(PPARgamma)激動(dòng)劑(如羅格列酮);合用氫化可的松、異丁甲基黃嘌呤、吲哚美辛。特異的脂肪細(xì)胞檢測(cè)標(biāo)志包括油紅染色、LPL、PPARgamma 等［16、17］。

2.6 細(xì)胞株

除了原代MSC外，常用的細(xì)胞株有小鼠間充質(zhì)祖細(xì)胞系C3H10T1/2和分化系明確的細(xì)胞株如前脂肪細(xì)胞 3T3L1、前成骨細(xì)胞 3T3-E1［18］。

3 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在中醫(yī)理論中的歸屬

3.1 “髓”

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的特性之一就是向成骨分化，這一特性與中醫(yī)“腎藏精，精生髓，髓生骨”的理論有較高的吻合。因?yàn)楣撬栝g充質(zhì)干細(xì)胞主要來(lái)自于骨髓(髓)，而在特定環(huán)境下能向成骨轉(zhuǎn)化，即實(shí)現(xiàn)“髓生骨”。許多補(bǔ)腎藥物對(duì) BMSCs的增殖和成骨分化都有促進(jìn)作用，從而證實(shí)了“腎”、“髓”、“骨”之間的關(guān)聯(lián)?！澳I主骨”可能是通過(guò)補(bǔ)腎藥物作用到“髓”中的干細(xì)胞，促使其成骨分化來(lái)實(shí)現(xiàn)的，因此BMSCs屬中醫(yī)“髓”的范疇。

筆者對(duì)近5年文獻(xiàn)檢索結(jié)果進(jìn)行了總結(jié)。復(fù)方研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)腎壯骨功效的骨康含藥血清能抑制BMSCs的成脂化［19］。具有補(bǔ)肝腎強(qiáng)筋骨功效的透骨消痛顆粒含藥血清可促進(jìn)BMSCs向軟骨細(xì)胞分化［20］。單味中藥研究發(fā)現(xiàn)，龜板、杜仲的含藥血清可以促進(jìn)BMSCs的增殖，成骨分化有利于細(xì)胞脫氧核糖核酸(DNA)合成［21］。有效組分研究發(fā)現(xiàn)，龜板中十四酸甾醇酯和十六酸甲酯具有促BMSCs增殖的作用［22］。

3.2 “精”

3.2.1 先天之精 張進(jìn)等認(rèn)為，受精卵作為全能干細(xì)胞蘊(yùn)藏了全部先天之精，是精的來(lái)源。將全能干細(xì)胞與多種成體干細(xì)胞的功能與“先天之精”的繁衍生殖、生長(zhǎng)發(fā)育等功能相比較，“先天之精”與干細(xì)胞的基本屬性較相似。

具有補(bǔ)腎填精作用的地黃飲子、三甲復(fù)脈湯、龜板、刺五加、熟地黃的有效成分地黃多糖可體外誘導(dǎo)BMSCs轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)干細(xì)胞、神經(jīng)元樣細(xì)胞，闡釋了“腎藏精、精生髓、腦為髓之?！钡睦碚?《靈樞·海論》?！端貑?wèn)·五臟生成》:諸髓者，皆屬于腦［23、24］。補(bǔ)腎藥通過(guò)作用于 BMSCs(精)，使其轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)干細(xì)胞(精生髓)，即腦髓內(nèi)神經(jīng)細(xì)胞的來(lái)源(腦為髓之海)。

3.2.2 脾腎相關(guān) 具有補(bǔ)脾益損功效的強(qiáng)肌健力口服液能促使BMSCs的增殖和向成肌細(xì)胞分化，說(shuō)明 BMSCs來(lái)源于先天腎之精，在后天一定條件下可以向“脾”轉(zhuǎn)化［25、26］。補(bǔ)脾法能促使干細(xì)胞的生長(zhǎng)，為“后天濟(jì)先天”提供了一定依據(jù)。BMSCs可能是“脾腎相關(guān)”細(xì)胞層次的表達(dá)形式，但究其實(shí)質(zhì)仍屬于“先天之精”范疇。

3.2.2 精血同源 活血化瘀法對(duì)BMSCs的增殖尤其是分化具有促進(jìn)作用。如具有活血化瘀功效的桃紅四物湯，能抑制激素誘導(dǎo)下的BMSCs成脂分化［27］;調(diào)節(jié)“腦中血?！钡闹兴幠X脈 1號(hào)，可促進(jìn)BMSCs向局灶性腦缺血模型大鼠移植后的血管再生［28］;復(fù)方丹參注射液可體外誘導(dǎo)大鼠BMSC分化為成軟骨細(xì)胞、神經(jīng)元樣細(xì)胞［29、30］。丹參有效成分丹酚酸B誘導(dǎo)BMSCs向心肌樣細(xì)胞分化，有效改善BMSCs移植后的血管微環(huán)境;其預(yù)處理的內(nèi)皮祖細(xì)胞聯(lián)合BMSCs的移植，促進(jìn)急性心梗模型大鼠左心室功能的恢復(fù)［31～33］。三七有促進(jìn) BMSCs增殖并向血管內(nèi)皮細(xì)胞分化的作用［34］;三七總皂苷、參三七皂苷Rg，預(yù)適應(yīng)在體外可顯著刺激5-氮胞苷誘導(dǎo)的鼠BMSCs向心肌細(xì)胞轉(zhuǎn)化和增殖，改善細(xì)胞形態(tài)，刺激細(xì)胞內(nèi)鈣離子增加，與5-氮胞苷產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)［35、36］。銀杏內(nèi)酯B可促進(jìn)MSCs向神經(jīng)樣細(xì)胞分化，且具有神經(jīng)元基本電生理功能［37］。

但是關(guān)于這部分的理論解釋基本是從活血化瘀治療相關(guān)疾病如心梗、腦缺血等角度展開(kāi)的，沒(méi)有就BMSCs的作用深入分析。筆者認(rèn)為，在這些研究中，BMSCs扮演的仍然是“精”的角色，BMSCs取自于骨髓，與造血干細(xì)胞是一個(gè)來(lái)源，這兩種干細(xì)胞相互影響、相互作用，形成干細(xì)胞龕(微環(huán)境)。這些活血化瘀中藥除了對(duì)BMSCs本身具有促進(jìn)作用外，還改善了其移植后的微環(huán)境。雖然實(shí)驗(yàn)研究是從BMSCs向其他細(xì)胞分化，而不是造血干細(xì)胞，但最終改善的都是缺血微環(huán)境，因此說(shuō)“精血同源”。

3.2.3 精氣互化 大量的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，具有益氣功效的中藥復(fù)方、單味和有效同樣能促進(jìn)BMSCs的增殖和向其他細(xì)胞的分化。如具有益氣養(yǎng)陰功效的心復(fù)康聯(lián)合BMSCs移植，較單純細(xì)胞移植對(duì)急性心梗大鼠模型具有更顯著的保護(hù)作用［38］。芪丹通脈片含藥血清誘導(dǎo)BMSCs向內(nèi)皮細(xì)胞分化，修復(fù)血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡［39、40］。益氣活血方可誘導(dǎo) BMSCs向神經(jīng)元特異性烯醇化酶細(xì)胞和膠質(zhì)纖維酸性蛋白分化［41］。黃芪含藥血清可誘導(dǎo) BMSCs分化為心肌樣細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞［42］。黃芪甲苷可在體外誘導(dǎo)大鼠BMSCs定向分化為心肌樣細(xì)胞［43］;人參莖葉皂苷、人參皂苷Rb1對(duì)小鼠BMSC具有生長(zhǎng)促進(jìn)作用，并可誘導(dǎo)分化為心肌樣細(xì)胞和神經(jīng)元樣細(xì)胞［44、45］。

但在這些文獻(xiàn)中均沒(méi)有涉及BMSCs的中醫(yī)歸屬。《素問(wèn)·陰陽(yáng)應(yīng)象大論》云:“氣歸精……精化為氣?！泵鳌埦霸馈额?lèi)經(jīng)》注釋:“精化為氣，謂元?dú)庥删病簧衔募仍茪鈿w精，是氣生精也，而此又曰精化氣，是精生氣也。二者似乎相反，而不知此正精氣互根之妙，以應(yīng)上文天地云雨之義也?！闭f(shuō)明精、氣互化。此理論可解釋補(bǔ)氣促使 BMSCs(先天之精)轉(zhuǎn)化為五臟(心肌樣細(xì)胞、神經(jīng)元樣細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞)之精氣。

3.3 移植BMSCs與“熱毒”

上述研究大多關(guān)注補(bǔ)益藥物對(duì)BMSCs功能的影響，也包括對(duì)BMSCs移植后微環(huán)境改變和干細(xì)胞本身分化的作用。然而“干細(xì)胞移植”在中醫(yī)理論的概念中是沒(méi)有的，如果歸屬可能屬“外邪”范疇。由于移植后帶來(lái)排斥反應(yīng)的證候類(lèi)似于溫病，因此也屬“熱毒”范疇。研究發(fā)現(xiàn)，具有解痘毒、消炎腫作用的木豆葉含藥血清對(duì)大鼠BMSCs有促增殖作用［46］。大黃苷元可使腦缺血再灌注損傷大鼠微血管基底膜 ColIV降解減少，通透性降低，并與BMSCs有協(xié)同作用，可使其早期的作用提前及中、后期作用增強(qiáng)，其作用機(jī)制可能與增加TIMP-1表達(dá)以調(diào)節(jié) MMP-9 和纖溶酶平衡有關(guān)［47、48］。這里的BMSCs與精、髓的關(guān)聯(lián)性都不大。

綜上所述，BMSCs在中醫(yī)理論中歸屬“精”、“髓”范疇。BMSCs轉(zhuǎn)分化為其他成體干細(xì)胞功能與先天之精化生后天之精類(lèi)似。在此基礎(chǔ)上，衍生出“腦為髓之?！?、“脾腎相關(guān)”、“精血同源”、“精氣互化”等。BMSCs主要來(lái)源于骨髓，是成骨細(xì)胞系的前體，與“髓生骨”較相同。因此，利用國(guó)際前沿的干細(xì)胞技術(shù)如BMSCs研究中醫(yī)相關(guān)理論，將為中醫(yī)研究打開(kāi)新局面。

［1］ Friedenstein AJ，Defiglasova UF，Kuhgina NW，et a1.Precurmrs for fibroblasts in different populations of hematopietic cells as detected by the in vito colony assay method［J］.Exp Hematol，1974，2:83-92.

［2］ Dominici M，Blanc KL，et al.Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells.The International Society for Cellular Therapy position statement［J］.Cytotherapy.2006，8:315-317.

［3］ Heckmann L，F(xiàn)iedler J，et al.Mesenchymal progenitor cells communicate via alpha and beta integrins with a threedimensional collagen type Imatrix［J］.Cells Tissues Organs.2006，182:143-54.

［4］ Kassis I，Zangi L，et al.Isolation of mesenchymal stem cells from G-CSF-mobilized human peripheral blood using fibrin microbeads［J］.Bone Marrow Transplant.2006，37:967-76.

［5］ Aslan H，Zilberman Y，et al.Osteogenic differentiation of noncultured immunoisolated bone marrow-derived CD105+cells［J］.Stem Cells.2006，24:1728-37.

［6］ Zannettino AC，Paton S，et al.Multipotential human adiposederived stromal stem cells exhibit a perivascular phenotype in vitro and in vivo［J］.J Cell Physiol.2008，214:413-21.

［7］ Martens FP，See F，et al.Mesenchymal lineage precursor cells induce vascular network formation in ischemic myocardium［J］.Nat Clin Pract Cardiovasc Med.2006，3(Suppl 1):S18-22.

［8］ Shih DT，Lee DC，et al.Isolation and characterization of neurogenic mesenchymal stem cells in human scalp tissue［J］.Stem Cells.2005，23:1012-20.

［9］ Covas DT，Orellana MD，Siufi JL，Silva WA Jr，et al.(2005)，Mesenchymal stem cells can be obtained from the human saphena vein［J］.Exp Cell Res.2005，309:340-4.

［10］ da Silva Meirelles L，Chagastelles PC，et al.Mesenchymal stem cells reside in virtually all post-natal organs and tissues［J］.J Cell Sci.2006，119:2204-13.

［11］ Strem BM，Hicok KC，et al.Multipotential differentiation of adipose tissue-derived stem cells［J］.Keio J Med.2005，54:132-41.

［12］ Caplan AI.Adult mesenchymal stem cells for tissue engineering versus regenerative medicine［J］.JCell Physiol.2007，213:341-7.

［13］ Wagner W， Wein F， et al. Comparative characteristics of mesenchymal stem cells from human bone marrow，adipose tissue，and umbilical cord blood［J］.Exp Hematol.2005，33:1402-16.

［14］ Djouad F，Bony C，et al.Transcriptional profiles discriminate bone marrow-derived and synovium-derived mesenchymal stem cells［J］.Arthritis Res Ther.2005，7:R1304-15.

［15］ Tsai MS，Hwang SM，et al.Functional network analysis of the transcriptomes of mesenchymal stem cells derived from amniotic fluid，amniotic membrane，cord blood，and bone marrow［J］.Stem Cells.2007，25:2511-23.

［16］ Migratory chondrogenic progenitor cells from repair tissue during the later stages of human osteoarthritis［J］.Cell Stem Cell.2009，4:324-335.

［17］ De-Zhi Tang，Wei Hou，Quan Zhou，Minjie Zhang，Jonathan Holz，Tzong-Jen Sheu，Tian-Fang Li，Shao-Dan Cheng，Qi Shi，Stephen E. Harris， Di Chen， Yong-Jun Wang. Osthole Stimulates Osteoblast Differentiation and Bone Formation by Activation ofβ-Catenin-BMP Signaling.J Bone Miner Res［J］.Publish online Jan 2010.25.

［18］ A role for chemistry in stem cell biology［J］. Nature Biotechnology.2004，22(7):833-840.

［19］ 徐無(wú)忌，莊 洪.骨康含藥血清對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化的影響.中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù)［J］，2008，12(43):8434-8438.

［20］ 劉獻(xiàn)祥，李明波，陳文列，等.透骨消痛顆粒對(duì) BMSCs向軟骨細(xì)胞分化的影響［J］.福建中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，19(4):33-37.

［21］ 曾建春，樊粵光，劉建仁，等.杜仲含藥血清誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向分化的實(shí)驗(yàn)研究［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2009，20(9):2136-2138.

［22］ 陳 薇，曾和平，王春燕，等.中藥龜板提取物化學(xué)成分及其調(diào)控鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(rMSCs)增殖活性的實(shí)驗(yàn)研究［J］.化學(xué)學(xué)報(bào)，2007，65，3:265-270.

［23］ 高艷霞，劉黎青.刺五加注射液體外誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)分化機(jī)制的研究［J］.山東中醫(yī)雜志，2008，27(6):406-407.

［24］ 蔡光先，劉柏炎，林 琳，等.地黃多糖誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為神經(jīng)細(xì)胞最佳濃度探索［J］.中國(guó)中醫(yī)急癥，2007，16(2):206-208.

［25］ 陳凱佳，肖 瑩，劉小斌，等.強(qiáng)肌健力口服液含藥血清對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成肌分化的影響［J］.現(xiàn)代醫(yī)院，2009，9(8):15-16.

［26］ 陳凱佳，劉小斌，邱仕君，等.強(qiáng)肌健力口服液含藥血清對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外增殖的影響［J］.中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2008，15(2):23-25.

［27］ 李樹(shù)強(qiáng)，齊振熙，仲衛(wèi)紅，等.活血化瘀中藥對(duì)激素誘導(dǎo)骨間充質(zhì)干細(xì)胞l型膠原mRNA表達(dá)的影響［J］.福建中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，19(4):38-40，43.

［28］ 郭建文，李俊雅，黃 燕.調(diào)節(jié)“腦中血?！狈?lián)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)大鼠缺血腦組織血管再生的影響［J］.中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào)，2009，7(8):763-768.

［29］ 湯治黎，章漢平，李 源，等.丹參注射液誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為成軟骨細(xì)胞的研究［J］.湖北中醫(yī)雜志，2008，30(6):11-12.

［30］ 余 勤，連俊蘭，郭 瑩.丹參注射液誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合急救雜志，2006，13(4):210-213.

［31］ 華聲瑜，范英昌，馬軼文，等.丹酚酸B對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化過(guò)程中Desmin、α-actin mRNA表達(dá)的影響［J］.天津中醫(yī)藥，2009，26(2):145-148.

［32］ 李慶雯，譚俊珍，南亞昀，等.丹酚酸 B干預(yù) EPCs對(duì) BMSCs移植的AMI大鼠心肌VEGF、bFGF蛋白表達(dá)的影響［J］.天津中醫(yī)，2009，26(1):57-59.

［33］ 南亞昀，李慶雯，譚俊珍，等.丹酚酸 B預(yù)處理 EPCs聯(lián)合BMSc移植對(duì) AMI大鼠心功能的影響［J］.天津中醫(yī)藥，2009，26(1):60-62.

［34］ 楊博華.黃芪和三七對(duì)下肢缺血患者骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外分化的影響［J］.中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù)，2008，12(51):10189-10192.

［35］ 李志泉，冼紹祥，汪朝暉，等.三七總皂苷對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖和向心肌樣細(xì)胞分化的影響［J］.廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，24(6):470-475.

［36］ 宋 清，張曉文，戶(hù)新政，等.參三七皂苷Rg預(yù)適應(yīng)對(duì)5一氮胞苷誘導(dǎo)大鼠骨髓問(wèn)充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞轉(zhuǎn)化的干預(yù)［J］.中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù)，2007，11(24):4693-4697.

［37］ 蘇 平，黃建華，雒曉東，等.銀杏內(nèi)酯 B誘導(dǎo)骨髓問(wèn)充質(zhì)干細(xì)胞分化為神經(jīng)樣細(xì)胞的功能［J］.廣東醫(yī)學(xué)，2008，29(11):1783-1784.

［38］ 李廣斌，蘇金玲，姜希娟，等.中藥心復(fù)康聯(lián)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)大鼠急性心肌梗死后心功能的影響［J］.天津中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，28(2):78-80.

［39］ 李 靜，王宗仁，王 文.芪丹通脈片含藥血清聯(lián)合骨髓問(wèn)充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中華現(xiàn)代醫(yī)學(xué)與臨床，2006，4(9):75-78.

［40］ 王 文，張金洲，李 靜，等.芪丹通脈片含藥血清體外誘導(dǎo)MSCs分化為內(nèi)皮細(xì)胞的作用［J］.現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2006，6(11):20-21.

［41］ 張運(yùn)克，車(chē)志英.益氣活血方體外誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞的分化［J］.中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù)，2009，13(6):1171-1175.

［42］ 楊慶有，冼紹祥，孫慧茹，等.黃芪含藥血清誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為心肌樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究［J］.遼寧中醫(yī)雜志，2008，35(6):832-834.

［43］ 冼紹祥，楊忠奇，汪朝暉，等.黃芪甲苷體外誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為心肌樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究［J］.廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，24(1):37-40.

［44］ 郭少三，黃 暢，韓大良，等.人參莖葉皂苷對(duì)體外條件下小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和粒-巨噬系祖細(xì)胞增殖的影響［J］.中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2007，13(6):6-8.

［45］ 韓大良，黃 暢，郭少三，等.人參皂苷Rb對(duì)體外條件下小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和粒一巨噬系祖細(xì)胞增殖的影響［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2008，26(6):1192-1193.

［46］ 劉 紅，袁 浩.含藥血清對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外增殖的影響［J］.Chinese Journal of the Practical Chinese with Modern Medicine.2005，18(9):1396.

［47］ 李建生，劉敬霞，孫 捷，等.大黃苷元對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植腦缺血大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶的影響［J］.中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào)，2008，6(8):810-816.

［48］ 李建生，劉敬霞，孫 捷，等.大黃苷元對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植腦缺血大鼠血腦屏障的作用與機(jī)制［J］.中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2008，24(12):1628-1633.