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(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥材學(xué)院,吉林 長春 130118)
人參(RadixetRhizomaGinseng)、西洋參(RadixPanacisQuinquefolii)和三七(RadixetRhizomaNotoginseng)為五加科人參屬植物人參、西洋參和三七的干燥根或根莖。其活性成分雖相似,但確有著不同的性味和功能主治。中醫(yī)認為人參性微溫,西洋參性涼,二者多被用作扶正固本的“氣分藥”,其次才是“血分藥”,而三七性溫,多用作“血分藥”,有散瘀止血和消腫定痛的功效[1]。
有研究表明,人參總皂苷表現(xiàn)出較強的抑制血小板活性,三七次之,西洋參最差,抗血栓活性順序為三七、人參和西洋參。并且人參皂苷Rg1表現(xiàn)出強烈的抗血小板活性,甚至超過傳統(tǒng)抗血小板藥物阿司匹林[2]。三七中含有大量的人參皂苷Rg1,西洋參含量最少。并且Rg2等多種皂苷也表現(xiàn)出了一定的抗血小板活性[3]。人參、西洋參和三七的Rg1和Rg2含量[4]如表1所示。
表1 人參、西洋參和三七的Rg1和Rg2含量
血小板參與了全血的凝血過程和血栓的形成,血漿內(nèi)的各種凝血因子也參與了整個過程[5]。因此,本實驗測定了人參、西洋參和三七水總提物和人參皂苷Rg1和Rg2對血漿APTT、PT和TT的影響。
1.1 材料 實驗用藥材人參、西洋參和三七由吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥材學(xué)院提供,經(jīng)李長田副教授鑒定。全血和0.109 mol/L的枸櫞酸鈉按9∶1的比例混勻,3 000 r/min離心處理10 min,上清即為乏血小板血漿(PPP)。凝血指標(biāo)檢測單位為吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院血液室,凝血儀型號為BECKMAN ACL 9000。
1.2 方法
1.2.1 人參、西洋參和三七水提物的制備 分別取10 g人參、西洋參和三七粉末,加入10倍蒸餾水煎煮30 min,離心取上清液,藥渣重復(fù)煎煮2次,合并提取液并將其濃縮至浸膏。按1、0.5 mg/mL分別配置上述提取物的水溶液。
1.2.2 人參皂苷Rg1和Rg2的制備 人參皂苷Rg1和Rg2由本實驗室制備,并經(jīng)檢測純度超過98%。按1、0.5 mg/mL分別配置Rg1和Rg2的DMSO溶液。
1.2.3 人參、西洋參和三七水總提物及人參皂苷Rg1和Rg2抗凝血活性的測定 樣品組共分5組:1 mg/mL人參、西洋參和三七水提物溶液;0.5 mg/mL人參、西洋參和三七水提物溶液;1 mg/mL Rg1和Rg2 DMSO溶液;0.5 mg/mL Rg1和Rg2 DMSO溶液;水和DMSO。健康志愿者25例,分為5組,每組分別測定含有上述組別組分的抗凝血活性。每人取全血3 mL,制備成乏血小板血漿。0.45 mL血漿和0.05 mL相應(yīng)提取物溶液混勻,30 min內(nèi)測定含有提取物血漿APTT、PT、TT值[6]。
含人參、西洋參和三七水總提物有提取物血漿的APTT、PT、TT值如表1所示。含有不同濃度人參、西洋參和三七水總提物血漿的APTT、PT值均為人參水提物>三七水提物>西洋參水提物,且含量0.05 mg/mL值高于0.1 mg/mL,0.1 mg/mL的APTT值低于空白對照。提取物濃度0.05 mg/mL時,含提取物血漿的TT值為人參水提物>三七水提物≈西洋參水提物;提取物濃度0.1 mg/mL時,含提取物血漿的TT值為人參水提物<三七水提物≈西洋參水提物。含0.1 mg/mL人參水提物血漿的TT值低于0.05 mg/mL的值,西洋參和三七相反。
含人參皂苷Rg1和Rg2血漿的APTT、PT、TT值如表2所示。含有不同濃度人參皂苷Rg1和Rg2血漿的APTT、PT值均為Rg2>Rg1,且含量0.05 mg/mL的值高于0.1 mg/mL。濃度為0.05 mg/mL時,含人參皂苷Rg1和Rg2血漿的TT值為Rg2>Rg1;濃度0.1 mg/mL時,Rg2 表2 人參、西洋參和三七水提物抗凝血活性 表3 人參皂苷Rg1和Rg2抗凝血活性 人參、三七均表現(xiàn)出較強的抗血小板活性和抗血栓活性,西洋參最弱,并且在3項凝血指標(biāo)的測定中發(fā)現(xiàn),除提取物終濃度為0.1 mg/mL血漿的TT值西洋參最大外,其它含同濃度提取物血漿的APTT、PT和TT均為西洋參最短。另外,人參皂苷Rg1和Rg23項指標(biāo)中均表現(xiàn)出較強的抗凝血活性。三七在3項凝血指標(biāo)的測定中,表現(xiàn)出較強的抗凝血活性,雖然多項指標(biāo)次于人參,但三七中2種單體皂苷特別是Rg1的含量最高,加之Rg1表現(xiàn)出強烈的抗血小板和抗血栓活性,甚至超過了阿司匹林,因此通常被用于“血分藥”。西洋參表現(xiàn)出的抗凝血活性最弱,Rg1的含量也最少。人參2種皂苷的含量遠不及三七,但在抗血小板和3項凝血指標(biāo)測試中,人參多表現(xiàn)出了最強的活性[8-9]。因此,雖然人參和西洋參同被用作扶正固本的“氣分藥”,但在用藥方式和適用范圍上也不完全相同,西洋參比人參更寬泛,且較少出現(xiàn)不良反應(yīng)[10]。 在3項凝血指標(biāo)的測試中含人參、西洋參和三七水總提物和人參皂苷Rg1和Rg2血漿的APTT和PT值均為終濃度0.05 mg/mL高于0.1 mg/mL,而含人參水提物和Rg2血漿的TT值為終濃度0.05 mg/mL低于0.1 mg/mL。這是由于3種藥材中人參的Rg2含量是最低的,因此,Rg2的這種性質(zhì)對人參TT值影響更小。 由于本實驗為體外實驗,筆者認為,僅通過體外實驗判定某種物質(zhì)的藥理活性是不全面的。關(guān)于人參、西洋參和三七的體內(nèi)抗凝血活性還有待進一步研究。 [1]李萍.生藥學(xué)[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2005:296. [2]武源,郭宏寶,王鐵軍,等.幾種中藥組分對家兔體外血小板聚集作用的比較[J].中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué),2007,12(9):1047-1051. [3]田建明,宋麗晶,李浩,等.人參皂苷Rg2對大鼠體內(nèi)血栓形成及血小板聚集的影響[J].上海中醫(yī)藥雜志,2009,43(11):79-81. [4]張崇喜.人參、西洋參和三七化學(xué)成分的研究[D].吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)博士論文,2004:40-109. [5]王鴻利.出血、凝血與止血(1)——正常止血、凝血和纖溶機制[J].外科理論與實踐,2000,5(1):1-7. [6]吳俊玲,宋小莉.中藥單味藥及有效成分對血液系統(tǒng)藥理學(xué)實驗研究[J].長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2010,26(3):443-444. [7]白篧,徐華建,李勝發(fā),等.凝血3項生物參考區(qū)間驗證的實驗探討[J].重慶醫(yī)學(xué),2009,38(19):2426-2427. [8]龍奉璽,蔣力生.喻嘉言《寓意草》辨證應(yīng)用人參之探討[J].吉林中醫(yī)藥,2008,28(10):773-774. [9]何紅暉.人參雖補也需慎用[J].長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2009,25(1):33. [10]莊文選,孫莉華,蔣曉琴.人參與西洋參的臨床應(yīng)用比較[J].時珍國醫(yī)國藥,2003,14(8):486-487.3 討論