聶紅峰，張 萍，檀增憲，趙 發(fā)

（1.河北省邢臺(tái)市人民醫(yī)院胃腸腫瘤外科，河北邢臺(tái) 054031；2.河北省邢臺(tái)市人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科，河北邢臺(tái) 054031；3.河北省邯鄲市中心醫(yī)院放射科，河北邯鄲 056001，4.河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院肛腸科，河北石家莊 050051）

大鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型建立及COX-2、MMP-9的表達(dá)

聶紅峰1，張 萍2，檀增憲3，趙 發(fā)4

（1.河北省邢臺(tái)市人民醫(yī)院胃腸腫瘤外科，河北邢臺(tái) 054031；2.河北省邢臺(tái)市人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科，河北邢臺(tái) 054031；3.河北省邯鄲市中心醫(yī)院放射科，河北邯鄲 056001，4.河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院肛腸科，河北石家莊 050051）

目的建立大鼠潰瘍性結(jié)腸炎（u1cerative co1itis，UC）細(xì)胞免疫反應(yīng)性動(dòng)物模型，觀察環(huán)氧合酶-2（cyc1ooxygenase-2，COX-2）、基質(zhì)金屬蛋白酶-9（matrixmeta11oproteinase9，MMP-9）在腸黏膜的表達(dá)。方法應(yīng)用復(fù)合法（2，4-二硝基氯苯+乙酸）制備細(xì)胞免疫反應(yīng)性UC大鼠模型；觀察大鼠一般狀態(tài)，結(jié)腸質(zhì)量變化，大體形態(tài)黏膜損傷程度評(píng)分，HE染色病理、掃描電鏡觀察腸黏膜損傷程度，免疫組織化學(xué)染色觀察COX-2、MMP-9的表達(dá)。結(jié)果模型組大鼠結(jié)腸質(zhì)量，大體形態(tài)黏膜損傷程度評(píng)分較對(duì)照組顯著增加（P＜0.05），COX-2、MMP-9的表達(dá)水平顯著升高（P＜0.01）。結(jié)論復(fù)合法建立UC大鼠模型是一種較理想的UC模型，腸黏膜COX-2、MMP-9表達(dá)增加，其可能是UC的發(fā)病機(jī)制之一。

結(jié)腸炎，潰瘍性；環(huán)氧化酶-2；基質(zhì)金屬蛋白酶9

潰瘍性結(jié)腸炎（u1cerative co1itis，UC）是一種慢性非特異性腸道炎癥，病程遷延，治愈困難，其病因及發(fā)病機(jī)制目前尚不完全清楚，與遺傳、環(huán)境、免疫等因素密切相關(guān)，尤其免疫因素更顯重要，成為目前研究熱點(diǎn)。UC的患病率和發(fā)病率均呈增高趨勢(shì)，被世界衛(wèi)生組織列為現(xiàn)代疑難病之一，尤其近15年，我國(guó)UC的患病數(shù)已過(guò)20萬(wàn)［1］。因而，建立理想的UC動(dòng)物模型，探討UC的發(fā)病機(jī)制是目前亟需解決的問(wèn)題。本研究利用復(fù)合法成功建立細(xì)胞免疫反應(yīng)性UC大鼠模型，并且研究了環(huán)氧合酶-2（cyc1ooxygenase-2，COX-2）和基質(zhì)金屬蛋白酶-9（matrixmeta11oproteinase 9，MMP-9）在大鼠腸黏膜的改變，探討UC的發(fā)病機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物：清潔級(jí)8周齡Wistar大鼠30只，雌雄各半，體質(zhì)量（270±20）g，購(gòu)自河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，合格證號(hào)，冀醫(yī)動(dòng)字第04084號(hào)。

1.2 試劑和藥品：2，4-二硝基氯苯（2，4-ch1orodinitrobenzene，DNCB），硫化鈉（Na2S）均為天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所產(chǎn)品。丙酮為北京化工廠產(chǎn)品。乙酸（acetic acid，AA）為天津市化學(xué)試劑一廠產(chǎn)品。免疫組織化學(xué)染色所用試劑均購(gòu)于北京中山生物技術(shù)有限公司，其中一抗COX-2（H-62）SC-7951為兔抗大鼠多克隆抗體，一抗MMP-9（C-20）SC-6840為山羊抗大鼠多克隆抗體，均為美國(guó)SANTA CRUZ公司產(chǎn)品。

1.3 主要儀器：石蠟切片機(jī)，型號(hào)LEICARM2125，由河北醫(yī)科大學(xué)組織胚胎學(xué)教研室提供；北航醫(yī)學(xué)圖像分析管理系統(tǒng)，真彩色病理圖像分析系統(tǒng)版本4.0，由河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院實(shí)驗(yàn)中心提供；掃描電鏡（scanning e1ectron microscope，SEM），型號(hào)，日立S-3500N，噴金噴鍍儀，型號(hào)IB-3（H-7500），均由河北醫(yī)科大學(xué)電鏡室提供。

1.4 動(dòng)物模型制備與分組：應(yīng)用復(fù)合法（DNCB+ AA）制備細(xì)胞免疫反應(yīng)性UC大鼠模型［2］。取30只健康成年Wistar大鼠，隨機(jī)抽取10只為對(duì)照組，其余20只造模。適應(yīng)性喂養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)飼料1周后，模型組大鼠頸背部用10%Na2S脫毛后，連續(xù)14d，每天以20 g/LDNCB丙酮液滴背1次，每次每鼠0.3mL，第15天用直徑3mm橡膠導(dǎo)尿管經(jīng)肛門插入結(jié)腸8cm處，注入0.04mmo1/L（0.1%）DNCB乙醇（50%）液0.25mL，第16天同部位注入8%AA溶液2mL，15s后再用5mL生理鹽水沖洗。造模完成1～2周后，大鼠均出現(xiàn)糞便稀溏和黏液膿血便等UC常見癥狀。取已造模成功Wistar大鼠10只為模型組，2周后檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)，其余10只造模成功大鼠，繼續(xù)動(dòng)態(tài)觀察一般狀態(tài)持續(xù)時(shí)間。

1.5 標(biāo)本的制備：造模成功2周后，對(duì)照組及模型組大鼠均給予10%水合氯醛（350mg/kg體質(zhì)量）腹腔注射麻醉，剖取距肛門2～10cm處結(jié)腸，共8cm沿腸系膜緣剪開腸腔，用等滲生理鹽水漂洗結(jié)腸組織，去除結(jié)腸黏膜表面黏附的糞便、分泌物及血液，稱結(jié)腸質(zhì)量，而后平展于8倍放大鏡下，肉眼觀察結(jié)腸黏膜損傷程度并做形態(tài)學(xué)評(píng)分。然后，用消毒鋒利刀片切取5mm×10mm大小的結(jié)腸組織（模型組包括部分結(jié)腸潰瘍創(chuàng)面在內(nèi)），浸泡于4%多聚甲醛，用于HE及免疫組織化學(xué)染色。另外，切取3mm×3mm大小結(jié)腸組織（模型組包括部分結(jié)腸潰瘍創(chuàng)面在內(nèi)），浸泡于2%（pH 7.2～7.4）戊二醛中固定，置于4℃冰箱，用于SEM樣品制備。

1.6 檢測(cè)指標(biāo)及方法：參照朱峰等［3］制定的急性炎癥大體形態(tài)損傷評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)標(biāo)本黏膜損傷程度進(jìn)行評(píng)分。具體標(biāo)準(zhǔn)如下，0分，正常，無(wú)黏膜充血，水腫，潰瘍；1分，輕度，輕度黏膜充血，水腫，無(wú)潰瘍；2分，輕～中度，黏膜充血，水腫，糜爛，無(wú)潰瘍；3分，中度，黏膜充血，水腫，糜爛，單一潰瘍；4分，重度，黏膜充血，水腫，糜爛，多發(fā)潰瘍。標(biāo)本經(jīng)脫水、包埋、切片及常規(guī)HE染色后，行普通光鏡觀察。應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色SP法檢測(cè)COX-2。具體步驟參照試劑盒中說(shuō)明書進(jìn)行。一抗COX-2用0.01moL/LPBS（pH 7.4）緩沖液1∶75稀釋，一抗MMP-9用0.01mo1/LPBS（pH 7.4）緩沖液1∶50稀釋，陰性對(duì)照用PBS替代一抗。實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定，以細(xì)胞出現(xiàn)棕黃色染色為陽(yáng)性。真彩色病理圖像分析系統(tǒng)處理，每一玻片任選5個(gè)視野，應(yīng)用真彩色病理圖像分析系統(tǒng)自動(dòng)檢測(cè)陽(yáng)性細(xì)胞平均灰度，陽(yáng)性細(xì)胞積分光密度，分別取其平均值，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。SEM樣品制備及腸黏膜損傷程度觀察，脫水，取出已固定好的樣品用雙蒸水清洗3次，10min/次；用乙醇“梯度脫水法”，逐步取代樣品中的水分，脫水劑的濃度由低至高依次為50%、70%、80%、90%、100%各1次，15min/次；將其置于75%叔丁醇溶液中10min，用100%叔丁醇沖洗10min，然后把樣品再放入100%叔丁醇中，置于冰箱冷凍室。干燥，將樣品置于IB-3真空鍍膜儀，抽真空2h。鍍膜，將干燥好的樣品黏于樣品臺(tái)上，用IB-3真空鍍膜儀噴金3min。觀察，應(yīng)用SEM觀察腸黏膜形態(tài)變化。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：應(yīng)用SAS 8.0軟件對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 模型組大鼠一般狀態(tài)：造模動(dòng)物于造模起1～2周，相繼出現(xiàn)局部皮膚炎癥損害及結(jié)痂，動(dòng)物毛色失去光澤，精神倦怠甚至萎靡，活動(dòng)及進(jìn)食明顯減少，體質(zhì)量下降等變化。造模完成后5～10d，所有造模動(dòng)物開始腹瀉，其肛周污穢、糞便惡臭，并出現(xiàn)黏液膿血便或糞便稀溏等UC常見癥狀，可持續(xù)12～16周。

2.2 各組大鼠大體形態(tài)，結(jié)腸質(zhì)量和腸黏膜損傷程度評(píng)分：大體形態(tài)觀察，對(duì)照組腸黏膜光滑，無(wú)水腫、出血、潰瘍、腸壁增厚等表現(xiàn)；模型組腸黏膜充血、水腫、糜爛、壞死、腸壁增厚、潰瘍形成。與對(duì)照組相比，模型組結(jié)腸質(zhì)量明顯增加（P＜0.05），腸黏膜損傷程度評(píng)分也明顯增加（P＜0.05），見表1。

表1 各組結(jié)腸質(zhì)量及大體形態(tài)損傷評(píng)分比較Table 1 TheResultsof colon weight and scoring of grossmorphologic damage（n=10，±s）

表1 各組結(jié)腸質(zhì)量及大體形態(tài)損傷評(píng)分比較Table 1 TheResultsof colon weight and scoring of grossmorphologic damage（n=10，±s）

*P＜0.01 vs contro1group by t test

Groups Co1on weight（m/g）Damage score（scrores）Contro1 1.74±0.14 0.44±0.21 Mode1 4.20±0.22*3.98±0.32*

2.3 HE染色病理觀察：對(duì)照組表現(xiàn)為正常結(jié)腸結(jié)構(gòu)，黏膜表面平滑，無(wú)環(huán)狀皺襞和絨毛，但有很多腸腺開口，固有層可見大量呈直管狀、緊密排列的腸腺和部分孤立淋巴小結(jié)；黏膜下層由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，含有較多淋巴細(xì)胞，可見血管、淋巴組織和神經(jīng)纖維；肌層由內(nèi)環(huán)行和外縱行兩層平滑肌組成；漿膜完整（圖1A，B）。模型組均為典型炎癥黏膜表現(xiàn)，可見黏膜、黏膜下層甚至肌層大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，潰瘍邊緣腺體增生或呈不典型增生，腺體破壞，結(jié)構(gòu)紊亂，杯狀細(xì)胞減少，隱窩膿腫形成，黏膜下層出血、水腫，毛細(xì)血管擴(kuò)張（圖1C，D）。

2.4 腸黏膜損傷SEM觀察：對(duì)照組表現(xiàn)為正常上皮，結(jié)腸黏膜表面為一層平滑似天鵝絨樣的微絨毛毯，被有序的凹溝分割，也可見規(guī)則構(gòu)型的隱窩開口，內(nèi)有黏液樣物質(zhì)，偶見杯狀細(xì)胞散布在腸上皮細(xì)胞之間，看似小點(diǎn)狀輕微凹陷的小腔（圖2A，B）。模型組為典型炎癥黏膜表現(xiàn)，正常表皮結(jié)構(gòu)嚴(yán)重破壞，腺隱窩明顯擴(kuò)大，杯狀細(xì)胞顯著排空，形成不規(guī)則火山口樣區(qū)域，表皮微絨毛毯嚴(yán)重缺損甚至消失（圖2C～E）。

2.5 COX-2，MMP-9免疫組織化學(xué)染色鏡檢及圖像分析結(jié)果：對(duì)照組僅可見腸黏膜上皮為輕度的COX-2免疫染色，偶見間質(zhì)細(xì)胞輕度染色；模型組腸組織可見黏膜上皮細(xì)胞為棕黃色深染，也可見部分深染的間質(zhì)細(xì)胞，另外，還發(fā)現(xiàn)某些腸組織肌層有深染的細(xì)胞，不能確定類型，上述陽(yáng)性細(xì)胞均為胞漿著色。與正常對(duì)照組比較，模型組COX-2免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞平均灰度值降低，積分光密度值明顯升高（P＜0.01），見表2。對(duì)照組可見腸黏膜腺細(xì)胞呈MMP-9免疫陽(yáng)性輕度染色，模型組可見腸黏膜腺細(xì)胞為棕黃色深染，也可見部分深染的間質(zhì)細(xì)胞。與對(duì)照組比較，模型組MMP-9免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞平均灰度值降低，積分光密度值明顯升高（P＜0.01）。見表3。表明COX-2和MMP-9表達(dá)水平顯著升高。

表2 平均灰度和積分光密度值（COX-2免疫組織化學(xué)染色）Tab le 2 Average gray scale and the integrated optical density（COX-2 IHC staining）（n=10，±s）

表2 平均灰度和積分光密度值（COX-2免疫組織化學(xué)染色）Tab le 2 Average gray scale and the integrated optical density（COX-2 IHC staining）（n=10，±s）

*P＜0.01 vs contro1group by t test

Groups Average gray sca1e Integrated optica1density Contro1 158.93±21.49 0.65±0.25 Mode1 71.06±13.29*1.78±0.28*

表3 平均灰度和積分光密度值（MMP-9免疫組織化學(xué)染色）Tab le3 Average gray scale and the integrated optical density（MM P-9 IHC staining）（n=10，±s）

表3 平均灰度和積分光密度值（MMP-9免疫組織化學(xué)染色）Tab le3 Average gray scale and the integrated optical density（MM P-9 IHC staining）（n=10，±s）

*P＜0.01 vs contro1group by t test

Groups Average gray sca1e Integrated optica1density Contro1 153.93±15.27 0.63±0.19 Mode1 76.06±10.91*1.74±0.24*

3 討 論

UC發(fā)病可能是遺傳、環(huán)境、免疫等多種病因?qū)е逻z傳易感性機(jī)體對(duì)腸道黏膜抗原免疫應(yīng)答失調(diào)所致，但其發(fā)病機(jī)制尚未完全清楚。在臨床上，UC具有慢性和消耗性的特征，可導(dǎo)致結(jié)腸癌危險(xiǎn)性增加。國(guó)內(nèi)外對(duì)UC的發(fā)病學(xué)和治療學(xué)研究日益受到重視。

在最近幾十年中，UC病因和發(fā)病機(jī)制領(lǐng)域最明顯的進(jìn)展來(lái)自對(duì)UC動(dòng)物模型的研究。目前，UC動(dòng)物模型制備方法較多［4］，主要包括以下幾種，化學(xué)法、免疫法、復(fù)合法［5］、基因型動(dòng)物模型制備、中醫(yī)證型造模法等，其中，基因型動(dòng)物模型，包括基因敲除型模型［6］、轉(zhuǎn)基因模型正在實(shí)驗(yàn)研究，有待進(jìn)一步改進(jìn)和完善。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用DNCB和AA復(fù)合法成功制備大鼠UC模型（其中單純DNCB法屬于免疫法，單純AA屬于化學(xué)法），為典型的胃腸道遲發(fā)過(guò)敏反應(yīng)性模型，具備以下特點(diǎn)，①造模大鼠臨床癥狀與人類UC相似，均出現(xiàn)黏液膿血便或糞便稀溏等。②病理變化符合UC特征，造模大鼠結(jié)腸組織大體觀察，可見腸黏膜充血、水腫、糜爛、壞死、腸壁增厚、潰瘍形成；HE染色病理觀察，可見黏膜、黏膜下層甚至肌層大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，潰瘍邊緣腺體增生或呈不典型增生，杯狀細(xì)胞減少，隱窩膿腫形成，黏膜下層出血、水腫，毛細(xì)血管擴(kuò)張。SEM可見典型炎癥黏膜表現(xiàn)，正常表皮結(jié)構(gòu)嚴(yán)重破壞，腺隱窩明顯擴(kuò)大，杯狀細(xì)胞顯著排空，形成不規(guī)則火山口樣區(qū)域，表皮微絨毛毯嚴(yán)重缺損甚至消失。上述病理變化均為人類UC典型組織學(xué)特征。③是一種典型的胃腸道遲發(fā)過(guò)敏免疫反應(yīng)模型。江學(xué)良等［2］在制備此模型時(shí)，監(jiān)測(cè)了UC的免疫指標(biāo)CD4+、CD29+T細(xì)胞亞群變化，發(fā)現(xiàn)較造模前明顯升高，符合免疫反應(yīng)模型的要求。且與人類CD4+、CD29+T亞群細(xì)胞變化一致。安曉霞等［7］應(yīng)用此法制備小鼠UC模型時(shí)，同樣證實(shí)CD4+、CD29+T細(xì)胞亞群變化與人類相似。④病程長(zhǎng)。本模型可持續(xù)16周，有急性發(fā)作和慢性發(fā)展過(guò)程。本模型克服了單純DNCB法病程短，自愈性強(qiáng)的特點(diǎn)。⑤成功率高，重復(fù)性好，簡(jiǎn)單易行。因而DNCB和AA復(fù)合法制備的大鼠UC模型是一種類似人類病變的理想的UC模型。

COX-2是一種和炎癥密切相關(guān)的誘導(dǎo)型環(huán)氧化酶，可將花生四稀酸代謝成各種前列腺素產(chǎn)物，參與機(jī)體炎癥病理過(guò)程?；ㄉ南┧岽x異常是炎癥腸病重要的致病環(huán)節(jié)。研究發(fā)現(xiàn)［8］COX-2在正常結(jié)腸組織未檢測(cè)到，在UC切除標(biāo)本高表達(dá)，定位于結(jié)腸表面上皮細(xì)胞和黏膜固有層單個(gè)核細(xì)胞。本研究結(jié)果顯示，COX-2蛋白表達(dá)在正常大鼠結(jié)腸上皮細(xì)胞中僅為低強(qiáng)度，在UC上皮細(xì)胞中則明顯增高，且形成高強(qiáng)度染色帶，固有層也可見高強(qiáng)度染色的間質(zhì)細(xì)胞，和上述研究結(jié)果相一致，這提示COX -2表達(dá)受炎癥介質(zhì)的誘導(dǎo)，這也可以解釋以前研究的發(fā)現(xiàn)，即UC患者黏膜和直腸滲液內(nèi)前列腺素E2（prostag1andin E2，PGE2）水平增高，PGE2引起炎性腸?。╥nf1ammatory bowe1disease，IBD）上皮細(xì)胞增殖、黏膜充血和血管擴(kuò)張的原因。Roberts等［9］應(yīng)用原位免疫雜交技術(shù)檢測(cè)UC患者COX-2定位，顯示COX-2定位于圍繞結(jié)腸平滑肌細(xì)胞和固有層炎癥細(xì)胞的間質(zhì)神經(jīng)叢神經(jīng)細(xì)胞。本研究也發(fā)現(xiàn)部分UC大鼠肌層可見高強(qiáng)度染色陽(yáng)性細(xì)胞，但未能確定細(xì)胞性質(zhì)。這就可以解釋IBD時(shí)結(jié)腸動(dòng)力學(xué)改變引起的疼痛和腹瀉等臨床癥狀，即在IBD時(shí)神經(jīng)叢神經(jīng)細(xì)胞COX-2表達(dá)增高，進(jìn)而引起前列腺素合成增多，導(dǎo)致上述癥狀。由上可見，阻斷COX-2可能是治療UC的一個(gè)有效途徑。

基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix meta11oproteinases，MMPs）是自然界進(jìn)化中高度保守的一類酶，因含有金屬（鋅，鈣）離子而得名，是細(xì)胞外基質(zhì)降解過(guò)程中必不可少的酶，因而在組織重塑、細(xì)胞遷移、血管形成、切口愈合、炎癥、腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移等各種生理病理過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。MMP-9是MMPs家族中的重要成員。MMP-9表達(dá)在IBD發(fā)病中的作用，目前研究較少。Tar1ton等［10］通過(guò)向嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷鼠轉(zhuǎn)染CD4（+）T淋巴細(xì)胞制備結(jié)腸炎模型，應(yīng)用凝膠電泳及原位酶譜分析絲氨酸蛋白水解酶和MMPs在IBD模型中的活性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在結(jié)腸炎組織，絲氨酸蛋白酶水平提高；同時(shí)MMP-9、MMP-2激活和表達(dá)提高，而且，蛋白水解作用主要發(fā)生于淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)區(qū)域，炎癥累及全層的結(jié)腸區(qū)域可見整個(gè)黏膜層、黏膜下層和肌層均顯示絲氨酸蛋白酶和MMPs水平提高。上述結(jié)果提示激活和表達(dá)增高的蛋白酶通過(guò)破壞結(jié)腸黏膜屏障功能導(dǎo)致IBD的進(jìn)展，同時(shí)也證明了絲氨酸蛋白酶是MMPs活化的關(guān)鍵酶。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)UC大鼠腸黏膜MMP-9的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)模型組平均灰度明顯低于對(duì)照組，模型組的積分光密度明顯高于正常對(duì)照組，反映了UC大鼠MMP-9的表達(dá)強(qiáng)度明顯高于正常大鼠。這些發(fā)現(xiàn)與Tar1ton等［10］在轉(zhuǎn)基因UC鼠模型的檢測(cè)結(jié)果相一致。提示MMP-9在UC潰瘍形成、組織破壞中起重要作用。

總之，本研究應(yīng)用復(fù)合法（DNCB+AA）建立了較理想的UC細(xì)胞免疫反應(yīng)性模型，可以用于探索UC發(fā)病的免疫學(xué)機(jī)制，同時(shí)通過(guò)檢測(cè)COX-2和MMP-9在UC大鼠結(jié)腸黏膜的變化，提示COX-2和MMP-9的表達(dá)增加可能是UC的發(fā)病機(jī)制之一。（本文圖見封二）

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（本文編輯：趙麗潔）

ESTABLISHMENT OF ULCERATIVE COLITISMODEL IN RATS AND EXPRESSION OF COX-2 AND MMP-9

NIE Hongfeng1，ZHANG Ping2，TAN Zengxian3，ZHAO Fa4
（1.Department of Gastrointestinal Cancer Surgery，the People's Hospital of Xingtai City，Hebei Province，Xingtai054031，China；2.Department of Respiratory Medicine，the People's Hospital of Xingtai City，Hebei Province，Xingtai054031，China；3.Department of Radiology，the Center Hospital of Handan City，Hebei Province，Handan 056001，China；4.Departmentof Coloproctology，the Third Hospital of HebeiMedical University，Shijiazhuang 050051，China）

Ob jective To estab1ish a ratmode1with ce11u1ar immunoreactive u1cerative co1itis（UC）and to investigate the expression of cyc1ooxygenase-2（COX-2）and matrixmeta11oproteinase 9（MMP-9）in the intestina1 mucosa of rat with UC.MethodsThe rats mode1 with ce11u1ar immunoreactive UC were induced by compound method（2，4-ch1orodinitrobenzene and acetic acid）. Measurement index inc1uded genera1 state，co1on weight，scoring of gross morpho1ogic damage in acute inf1ammation，patho1ogic observation of tissues by HE staining，observation under scanning e1ectron microscope（SEM），COX-2 and MMP-9 expression by immunohistochemistry staining.ResultsCompared with those in contro1 group，co1on weight，scoring of grossmorpho1ogic damage，expressions of COX-2 and MMP-9 weremarked1y higher inmode1group.ConclusionThe rat UCmode1induced by compoundmethod is an idea1mode1.The increased expression of COX-2 and MMP-9 might be invo1ved in the pathogenesis of UC.

co1itis，u1cerative；cyc1ooxygenase 2；matrixmeta11oproteinase 9

R574.62

A

1007-3205（2011）10-1130-05

2011-05-12；

2011-06-05

聶紅峰（1976-），男，河北沙河人，河北省邢臺(tái)市人民醫(yī)院主治醫(yī)師，醫(yī)學(xué)碩士，從事胃腸腫瘤外科疾病診治研究。

10.3969/j.issn.1007-3205.2011.10.006