陳柏君，馬云淑，熊 磊

(云南中醫(yī)學(xué)院，云南 昆明 650500)

蒼艾香熏油系以熊磊教授預(yù)防上呼吸道感染的臨床效驗(yàn)方為基礎(chǔ)，選用蒼術(shù)、艾葉、藿香等含揮發(fā)油成分較多、氣味清香、抗菌力強(qiáng)的中藥組方。方中蒼術(shù)、艾葉芳香化濕、避穢解毒為君;藿香芳香化濕、解表祛暑為臣，諸藥合用，共奏芳香化濁、避穢解毒之功。本研究將蒼艾復(fù)方制成新型鼻腔給藥吸入劑，通過水蒸氣蒸餾法提取復(fù)方中的揮發(fā)油，觀察蒼艾香薰油的穩(wěn)定性并用氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用 (GC－MS)法對(duì)其主要化學(xué)成分進(jìn)行分析鑒定，用歸一法計(jì)算各組分的相對(duì)百分含量，考察提取工藝的可行性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)蒼艾香薰油提取工藝可行，能較好的保留組方藥物的主要有效成分，現(xiàn)報(bào)道如下:

1 儀器與藥材

儀器:揮發(fā)油提取器、冷凝管、調(diào)溫電熱套(北京中興偉業(yè)儀器有限公司)，萬能粉碎機(jī) (中草藥萬能粉碎機(jī)FW177型，天津市泰斯特儀器有限公司)，氣相色譜儀 (美國氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用儀Agilent Technologies公司HP5890)，氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用儀 (美國 Agilent Technologies公司HP6890GC/5973MS)。

藥材:蒼術(shù)為菊科植物北茅術(shù) (Atractylodes chinensis(DC．)Koidz．)的干燥根莖 (產(chǎn)品批號(hào):20090301，毫州雙華中藥飲片廠);艾葉為菊科多年生植物艾葉 (Artemisia argyi Levl．et Vant．)的干燥葉 (產(chǎn)品批號(hào):20090301，毫州雙華中藥飲片廠);藿香為唇形科植物廣藿香 (Pogostemon cablin(Blanco)Benth．)的干燥地上部分 (產(chǎn)品批號(hào):20090204，鴻翔中草藥有限公司)。 (均購自昆明一心堂藥業(yè)，經(jīng)云南中醫(yī)學(xué)院中藥學(xué)院藥植鑒定教研室楊樹德教授鑒定備用。)

2 蒼艾香薰油提取

將蒼術(shù)、艾葉粗粉;精確稱取蒼術(shù)、艾葉各100g，其余組方藥各50g;將其置于5000mL的圓底燒瓶中，采用水蒸汽蒸餾法，選用揮發(fā)油提取器，按照2010版藥典附錄XD揮發(fā)油測(cè)定法－甲法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，每次加入8倍量水，浸泡8～10h，提取7h，收集到的蒼艾香薰油為金黃色油狀液體，密度＜1，用無水硫酸鈉除去其中多余的水分，保留在棕色瓶放入2～8℃的冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

3 氣質(zhì)色譜分析

3.1 待測(cè)樣品

1#:為水蒸氣提取后加入無水硫酸鈉除去多余的水分所得蒼艾香薰油

2#:為水蒸氣提取后繼續(xù)回流提純，300℃加熱30min所得蒼艾香薰油

3.2 GC條件

HP－5MS石英毛細(xì)管色譜柱 (30m×0.25mm×0.25μm)，柱溫80～240℃，程序升溫3℃/min;柱流量為1.0mL/min;進(jìn)樣口溫度250℃，柱前壓100kPa，進(jìn)樣量0.05μl;分流比40∶1，載氣為高純氦氣。

3.3 MS條件

電離方式 El，電子能量70eV，離子源溫度250℃，離子源溫度230℃，四級(jí)桿溫度150℃，質(zhì)量范圍35～500，采用wiley7n.1標(biāo)準(zhǔn)庫計(jì)算機(jī)索定性。

3.4 方法

考察香薰油的質(zhì)量以及在高溫加熱后的穩(wěn)定性。

3.5 結(jié)果

3.5.1 蒼艾香薰油的穩(wěn)定性變化高溫加熱后蒼艾香薰油的體積無明顯變化，顏色變化較為明顯，由原來的金黃色變成了紅褐色，性狀無明顯改變，但是流動(dòng)性明顯增強(qiáng)了。見表1。

3.5.2 氣質(zhì)色譜分析

經(jīng)氣質(zhì)色譜分析，本實(shí)驗(yàn)提取的揮發(fā)油共檢測(cè)出37種化學(xué)成分，鑒定了其中13種主要化學(xué)成分及含量，見圖1、表2所示。1號(hào)樣品的大部分化學(xué)成份的含量均高于2號(hào)樣品。說明高溫加熱后對(duì)藥物化學(xué)成分的含量有一定的影響，能降低其大部分有效成分的含量，產(chǎn)生刺鼻的香氣，顏色更深，但還不能肯定有無成份的變化。因此，我們選擇質(zhì)量和氣味更佳的1號(hào)樣品進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。

表2 蒼艾香薰油主要成份及含量

4 討論

4.1 制劑工藝研究

目前，藥用植物中揮發(fā)油的提取方法研究報(bào)道較多，主要有:水蒸氣蒸餾法、有機(jī)溶劑提取法、吸收法、壓榨法、酶法、破碎提取法、超臨界流體萃取 (SFE)、微波膠囊—雙水相萃取、超臨界二氧化碳萃取—分子蒸餾、超聲波輔助提取法等[1]。由于水蒸氣蒸餾法具有設(shè)備簡單、容易操作、成本低、提油率高等優(yōu)點(diǎn)，故本實(shí)驗(yàn)采用此方法，且參考前期研究結(jié)果[2]，確定制劑工藝為加水8倍，浸泡8～10h，提取7h，且共同蒸餾提取的揮發(fā)油對(duì)URI常見菌株抑菌作用較單味提取后混合的效果好?？赡芤?yàn)閺?fù)方藥物在共同煎煮的過程中其各味中藥之間可能存在一些理化反應(yīng)，產(chǎn)生協(xié)同作用提高臨床療效，但是要區(qū)分出其中的化學(xué)成分來自某藥就有難度，可能同時(shí)有幾種藥物都含有，因此不能確定該化學(xué)成分就一定是某種藥物提取出來的，只能推測(cè)可能來自組方中的某藥。

4.2 現(xiàn)代藥理研究

蒼艾香熏油以熊磊教授臨床用藥經(jīng)驗(yàn)為基礎(chǔ)，選用蒼術(shù)、艾葉、藿香等含揮發(fā)油成分較多、氣味清香、抗菌力強(qiáng)的中藥為組方?，F(xiàn)代藥理研究表明，蒼術(shù)主要成分為揮發(fā)油，約5%～9%油中主要成分為蒼術(shù)醇;蒼術(shù)醇為β－桉葉油醇和茅術(shù)醇的混合物，兩者含量比約為6∶4[3]，此外還有反式石竹烯、γ欖香烯、月桂烯醇[4]等化合物。蒼術(shù)煙熏對(duì)結(jié)核桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草桿菌及銅綠假單飽桿菌有顯著的滅菌效果，與福爾馬林相似，而優(yōu)于紫外線及乳酸的消毒[5]。茅蒼術(shù)中果聚糖酸對(duì)白色酵母感染的小鼠有明顯的預(yù)防作用，可以延長小鼠存活時(shí)間[6];艾葉主要含揮發(fā)油及甾醇類、多糖類、微量元素等成分[7]，其揮發(fā)油主要含桉油精、β－檸檬烯醇、沉香醇[8]、樟腦、龍腦、芳樟醇、β－石竹烯、α－水芹烯、莰烯等[9]具有較強(qiáng)的抗菌作用[10]、抗病毒作用、抗呼吸道合胞病毒、增強(qiáng)網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞的吞噬功能[11]，此外，蒼術(shù)艾葉香熏后 SIgA含量明顯提高[12];藿香其莖葉中含有豐富的揮發(fā)油，含有較多的單萜烯、倍半萜烯、醇類、酮類醛類和烷酸類化合物[13]，廣藿香醇、丁香烯，β－蒎烯、α－莪術(shù)烯、γ－芹子烯、α－蒎烯[14－15]等，其水提物對(duì)金黃色葡萄球菌、枯草桿菌、綠膿桿菌、腸炎球菌等有較強(qiáng)抑菌作用[16]。另外，藿香揮發(fā)油有防腐作用，利于制劑的保存[17]。

與文獻(xiàn)中單味藥揮發(fā)油提取出的化學(xué)成分進(jìn)行比較，組方中君藥的主要化學(xué)成份本復(fù)方揮發(fā)油中基本含有，說明蒼艾香薰油提取工藝可行，能較好的保留組方藥物中的主要有效成分。為將來制定蒼艾香薰油的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)打下基礎(chǔ)。

[1]王亞莉，張昆，方巖雄，等．現(xiàn)代分離技術(shù)在揮發(fā)油提取中的應(yīng)用研究 [J]．香料香精化妝品，2003，(10):27－29．

[2]明溪．蒼艾香熏油體外抑菌作用研究 [J]．云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，31(1):34－35．

[3]歐陽臻，江濤濤，繆亞東，等．蒼術(shù)的化學(xué)成分、道地性和藥理活性研究進(jìn)展 [J]．時(shí)珍國醫(yī)國藥，2006，17(10):2612－2616．

[4]劉曉東．蒼術(shù)揮發(fā)油成分的分析 [J]．分析測(cè)試學(xué)報(bào)，1998，17(3):56－57．

[5]江蘇新醫(yī)學(xué)院．中藥大辭典 [M]．上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1993:1006．

[6]Inagaki N，Komatsu Y，Sasaki H，et a1．Acidic polysaccharides from rhizomes of Atracty'lodes lancea as protective principle in Candida－lnfected mice．Planta Med，2001，67(5):428．

[7]徐新建，宋海，韓玉琦，等．艾葉揮發(fā)油化學(xué)成分的氣相色譜 －質(zhì)譜聯(lián)用分析 [J]，時(shí)珍國醫(yī)國藥，2007，18(11):2657－2658．

[8]丁林生，孟正木．中藥化學(xué) [M]．南京:東南大學(xué)出版社，2005:113．

[9]劉向前，陳素珍，倪娜．湖南產(chǎn)艾葉揮發(fā)油成分的GC－MS研究 [J]．中藥材，2005，28(12):1069．

[10]孫麗，席家寧，康麗君，等．對(duì)氨基水楊酸異煙肼對(duì)耐INH和PAS結(jié)核菌的耐藥實(shí)驗(yàn)觀察 [J]．中國防癆雜志，2001，23(2):110－111．

[11]梅全喜．艾葉的藥理作用研究概況 [J]．中草藥，1996，27(5):311－314．

[12]張其正，鄭志學(xué)，童葵塘，等．蒼術(shù)艾葉煙熏預(yù)防流感效果觀察 [J]．新醫(yī)學(xué)，1979， (9):412－415．

[13]張英，張金超，陳瑤，等．廣藿香生藥、化學(xué)及藥理學(xué)的研究進(jìn)展 [J]．中草藥，2006，37(5):786－790．

[14]Du Y M，Chen R Z，Hu B R．Research progress on chemical constituents and pharmacological function of Pogostemon cablin Benth[J]．Tradit Chin Drug Res Clin Pharmacol，1998，9(4):238 －241．

[15]Zhang G W，Ma X Q，Su J Y，et al．Analysis of flavonoids isolated from Pogostemon cablin Benth [J]．Chin Tradit Herb Drugs，2001，32(10):871 －874．

[16]羅超坤．廣藿香水提物的抗菌實(shí)驗(yàn)研究 [J]．中藥材，2005，28(8):700－701．

[17]Wang J H，F(xiàn)u H．Study on chemical constituents of the volatile oil ofCablin potchouli[J]．Lishizhen Med Mater Med Res，2000，11(7):579－580．