覃 勇,趙國山,盧少坤

(1.廣西百色市動物疫病預防控制中心,廣西百色533000;2.廣西百色農(nóng)業(yè)學校,廣西百色533000)

豬瘟是由豬瘟病毒(CSFV)引起的嚴重危害養(yǎng)豬業(yè)的重要傳染病之一,具有高度接觸傳染性,流行廣泛,發(fā)病率和死亡率高。目前該病依然在世界很多國家和地區(qū)流行。我國豬瘟流行嚴重,每年因豬瘟造成的經(jīng)濟損失達數(shù)十億元。本市始終將豬瘟免疫工作作為防控該病的一項重要措施來抓,常年免疫密度保持在94%以上。因長期以來生豬多以農(nóng)村散養(yǎng)為主,飼養(yǎng)環(huán)境條件差,流通交易頻繁,豬瘟時有發(fā)生。首次對本市近幾年的豬瘟免疫抗體變化情況及CSFV感染情況進行統(tǒng)計,分析豬瘟在本市發(fā)生的主要病因,為有效預防和控制該病提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 樣品來源于2006～2009年本市12個縣(區(qū))每年秋季突擊免疫后1個月采集的2037份豬血清,其中規(guī)模場562份,農(nóng)村散養(yǎng)戶1475份;另統(tǒng)計2009年用豬瘟細胞苗(3個廠家生產(chǎn))和豬瘟兔源脾淋苗(2個廠家生產(chǎn))對12個縣(區(qū))49個規(guī)模豬場和325個農(nóng)村散養(yǎng)戶進行免疫后1個月采集的豬血清樣品720份。CSFV檢測病料來源于2006～2009年本市轄區(qū)內(nèi)61個規(guī)模豬場和94個農(nóng)村散養(yǎng)戶的病死豬,分別采集組織樣品141份和108份,由廣西動物疫病預防控制中心檢測。

1.2 方法 豬血清免疫抗體檢測采用正向間接血凝試驗(檢測方法參照《CSF診斷技術(shù)規(guī)程》(NY/SY156—2000),其步驟為在血凝板中每孔加入50 μ L稀釋液;取待檢血清、陽性血清、陰性血清各50 μ L 分別加入第 1 孔 ,混勻 6 ～ 8 次 ,吸 出 50 μ L加入第2孔再混勻 6～8次,依次按 1∶2、1∶4、1∶8……1∶1 024倍比稀釋,到11孔棄去50 μ L,之后加25 μ L豬瘟間接血凝診斷抗原,震蕩搖勻,置25℃或室溫環(huán)境作用1.5～2 h,判定結(jié)果。在標準陽性、陰性血清和稀釋液等對照結(jié)果成立的前提下,記錄各孔凝集情況,用“-、+、++、+++、++++”表示,觀察待檢血清各孔呈現(xiàn)(++)凝集的最高稀釋倍數(shù)為該份血清的抗體效價,接種豬瘟疫苗的豬群其血清中抗體效價達到≥1∶32(5log2)為免疫合格。病豬組織樣品CSFV檢測采用RT-PCR方法,參考羅廷榮等[1]方法進行。

1.3 試劑 豬瘟正向間接血凝抗原、陽性血清、陰性血清購自中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所。

2 結(jié)果

2.1 抗體檢測結(jié)果

2.1.1 2006～2009年豬瘟免疫抗體檢測結(jié)果2006～2009年本市農(nóng)村散養(yǎng)戶和規(guī)模豬場的豬瘟免疫抗體水平呈逐年上升趨勢,規(guī)模場的豬瘟抗體水平高于農(nóng)村散養(yǎng)戶。見表1。

表1 2006～2009年豬瘟免疫抗體檢測結(jié)果

2.1.2 不同種類和廠家生產(chǎn)的豬瘟疫苗對豬免疫效果分析 2009年使用5個廠家生產(chǎn)的2種豬瘟疫苗(豬瘟細胞苗和豬瘟兔源脾淋苗)對本市325個農(nóng)村散養(yǎng)戶和49個規(guī)模場的豬免疫后1個月進行免疫抗體檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn),規(guī)模場的豬瘟免疫效果優(yōu)于農(nóng)村散養(yǎng)戶,豬瘟細胞苗免疫效果優(yōu)于豬瘟兔源脾淋苗。1號廠家生產(chǎn)的豬瘟細胞苗免疫效果最好,規(guī)模場和農(nóng)村散養(yǎng)戶的免疫抗體合格率均在80%以上,5號廠家生產(chǎn)的豬瘟兔源脾淋苗免疫效果對農(nóng)村散養(yǎng)戶和規(guī)模豬場差異較大。見表2。

表2 不同種類和廠家生產(chǎn)的豬瘟疫苗對豬免疫效果分析

2.2 CSFV感染情況調(diào)查 對2006～2009年本市轄區(qū)內(nèi)61個規(guī)模豬場的病死豬組織樣品141份和94個農(nóng)村散養(yǎng)戶的病死豬組織樣品108份進行CSFV檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn),規(guī)模豬場有7個場檢出CSFV,占總場數(shù)的11.5%,病料中11份為CSFV陽性,陽

性率為7.8%;農(nóng)村散養(yǎng)戶有8戶檢出CSFV,占總戶數(shù)的8.5%,病料中10份為CSFV陽性,陽性率為9.3%。2006年發(fā)病場(戶)檢出率和病料陽性率均最高,以后呈逐年下降。見表3。

2.3 豬瘟免疫抗體合格率和病料CSFV陽性率關(guān)系為了更好的分析區(qū)域內(nèi)豬瘟免疫抗體是否與CSFV感染存在關(guān)系,筆者將表1豬瘟免疫抗體合格率與表3病死豬病料CSFV陽性率進行比較,結(jié)果發(fā)現(xiàn),無論是規(guī)模場還是農(nóng)村散養(yǎng)戶,隨著豬瘟免疫抗體合格率的不斷提高,病料CSFV的陽性率也呈逐漸下降。見圖1。

表3 2006～2009年病死豬組織樣品CSFV檢測結(jié)果

圖1 2006～2009年豬瘟免疫抗體合格率與CSFV陽性率比較

3 討論

3.1 2006年豬“高熱病”在全國多個省、市流行,本

市也出現(xiàn)了一些相似病例。所以2006年從病死豬的病料檢出CSFV陽性比較多,但隨著國家提高豬瘟疫苗的劑量標準(2007年前豬瘟細胞苗每頭份含750RID,現(xiàn)在普遍達到7 500 RID以上),同時本市進一步加大對豬瘟的免疫力度,免疫效果逐步得到提高,豬瘟疫情也逐漸減少。從檢測結(jié)果可以看出,規(guī)模豬場免疫抗體檢出率和合格率均高于農(nóng)村散養(yǎng)戶,主要是因為規(guī)模豬場能夠按照免疫程序開展豬瘟免疫工作,有部分規(guī)模豬場通過免疫抗體監(jiān)測,有針對性地進行豬瘟補免工作,同時規(guī)模場的飼養(yǎng)環(huán)境條件比較好,并加強對多種疫病,特別是一些免疫抑制病的防控,使豬瘟的凈化工作不斷得到加強。而農(nóng)村散養(yǎng)戶的防疫工作多數(shù)由村級動物防疫員開展,群眾主動接受防疫意識不強,豬瘟免疫工作多在閹割時或春秋兩季突擊防疫時開展,無法避免母源抗體干擾或因免疫空檔導致隱性感染疾病等因素對豬瘟免疫效果的影響,所以豬瘟防控應以預防為主,加強管理,逐步進行疫病凈化為主。

3.2 2009年通過對本市使用的5個廠家生產(chǎn)的豬瘟疫苗免疫效果進行檢測,發(fā)現(xiàn)不同廠家生產(chǎn)的豬瘟疫苗免疫效果存在一定差異。原因有以下幾個方面:一是不同廠家疫苗的生產(chǎn)工藝差異(主要是疫苗劑量、佐劑、人員操作等);二是疫苗的運輸、保存條件等多方面因素的影響。筆者通過幾年的檢測發(fā)現(xiàn),2007年以前使用的普通豬瘟細胞苗免疫效果的確不理想,豬瘟疫情時有發(fā)生,給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大經(jīng)濟損失。2007年國家提高豬瘟疫苗劑量標準后,豬瘟免疫抗體水平不斷得到提高,豬瘟疫情逐漸下降,疫苗免疫起了很大的作用。

總之,選擇高效的豬瘟疫苗,制定合理、有效的免疫程序,改善飼養(yǎng)環(huán)境、加強飼養(yǎng)管理是提高群體免疫抗體水平的技術(shù)保障,是當前控制豬瘟的最有效方法之一。

[1]羅廷榮,孫敬鋒,莫揚,等.RT-PCR檢測健康豬扁桃體和流產(chǎn)死胎豬瘟病毒的應用及 RFLP分析[J].中國預防獸醫(yī)學報,2004,26(3):192-195.