梁 寧 潘得云 楊和錦
廣西中醫(yī)學(xué)院,廣西南寧 530001
節(jié)節(jié)草別名筆筒草、通氣草等,木賊科木賊屬筆筒草的全草,性微寒,味甘苦,有祛風(fēng)清熱、除濕利尿等功效,可治療目赤腫痛、翳膜遮睛、淋濁、便血、尿血等,近年藥理研究發(fā)現(xiàn)該科植物具有抗心肌缺血,降血壓、血脂、血糖,鎮(zhèn)痛及抗腫瘤等作用[1]。但節(jié)節(jié)草降血糖作用的研究未見報道,為此筆者進(jìn)行了研究。
清潔級昆明種小鼠。節(jié)節(jié)草采自廣西南寧老虎嶺并經(jīng)鑒定;格列喹酮片(天津藥物研究院,H10970124);二甲雙胍片(北京京豐制藥有限公司,H11021518);血糖檢測試劑盒(四川省邁克科技有限責(zé)任公司)。
將節(jié)節(jié)草粉碎,用10倍體積65%乙醇回流2 h,過濾,回收乙醇,濃縮至4 g/mL,4℃冷藏。
1.2.1 節(jié)節(jié)草醇提物急性毒性實驗[2]取18~22 g昆明種小鼠20只隨機分組,各10只(雌雄各半)。禁食供水12 h,灌胃給藥,40 mL/kg,給藥總量為240 g/kg。給藥后觀察14 d內(nèi)小鼠的外觀行為、進(jìn)食排泄等情況。第14天稱重,計算增重率并頸椎脫臼處死小鼠,觀察各臟器的病變情況,并測量最大耐受量(MTD)。
1.2.2 節(jié)節(jié)草醇提物對四氧嘧啶所致糖尿病小鼠血糖的影響 80只雄性小鼠禁食供水12 h后,尾靜脈注射四氧嘧啶(60 mg/kg)。末次給藥后72 h,眼球靜脈叢取血,葡萄糖氧化酶法測FPG。FPG>11 mmol/L并多飲、多食、多尿則造模成功。取造模成功的小鼠60只,隨機分為模型組、陽性對照組(二甲雙胍0.6 g/kg)、節(jié)節(jié)草大、中、小劑量組,各10只。每天灌胃給藥1次,連續(xù)3 周。模型組灌胃等容積蒸餾水。
1.2.3 節(jié)節(jié)草醇提物對正常小鼠血糖的影響 50只(20±2)g雄性小鼠按體重隨機分為空白對照組,格列喹酮組(0.15 g/kg)和節(jié)節(jié)草大(40 g/kg)、中(20 g/kg)、小(10 g/kg)劑量組,各 10只。格列喹酮組和節(jié)節(jié)草各給藥組每日灌胃1次,空白對照組給予等體積蒸餾水,給藥容量為20 mL/kg體重,連續(xù)7 d。末次給藥前小鼠禁食供水12 h,末次給藥1 h后小鼠靜脈叢取血,離心3 000 rpm×10 min,分離血清,測血糖。
用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行x2檢驗和t檢驗。
節(jié)節(jié)草醇提物MTD>5 g/kg(相當(dāng)于生藥材240 g/kg)。給藥后14 d內(nèi)小鼠外觀、行為、進(jìn)食排泄均未見異常,無死亡;給藥后各小鼠體重增長正常,雌性小鼠增重(9.15±1.73)g,增重率為 46.5%;雄性小鼠增重(11.21±1.54)g,增重率為51.2%;14 d后處死小鼠,各臟器病變情況未見異常。
節(jié)節(jié)草各劑量組均能降低四氧嘧啶所致糖尿病小鼠血糖。與模型組比,大、中劑量組差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);小劑量組用藥后1周差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),第2周差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),第3周則差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。
表1 節(jié)節(jié)草對四氧嘧啶所致糖尿病小鼠血糖影響(±s)
表1 節(jié)節(jié)草對四氧嘧啶所致糖尿病小鼠血糖影響(±s)
注:與正常組比較,▲P < 0.01;與模型組比較,△P < 0.05,﹟P < 0.01
血糖(nmol/L) 正常組 模型組 陽性組 大劑量組 中劑量組 小劑量組給藥前 5.20±0.21 20.17±2.50▲ 19.80±1.91▲ 21.23±2.13▲ 20.08±2.26▲ 19.90±2.45▲給藥后1周 5.18±0.34 21.33±2.41▲ 10.80±2.10﹟ 10.78±2.41﹟ 11.23±2.31﹟ 14.56±2.21﹟給藥后2周 5.25±0.14 19.01±2.30▲ 11.47±1.68﹟ 9.56±1.02﹟ 12.23±1.30﹟ 16.87±0.87△給藥后3周 5.10±0.21 18.12±2.01▲ 12.45±1.42﹟ 11.23±1.21﹟ 14.21±2.36﹟ 17.41±1.41
表2 節(jié)節(jié)草對正常小鼠血糖影響(±s)
表2 節(jié)節(jié)草對正常小鼠血糖影響(±s)
注:與正常組比較,▲P <0.01
血糖(mmol/L) 正常組 陽性組 大劑量組 中劑量組 小劑量組給藥前 5.59±0.32 5.60±0.31 5.50±0.43 5.58±0.46 5.61±0.25給藥后7 d 5.50±0.36 4.66±0.28▲ 5.56±0.58 5.42±0.35 5.65±0.27
節(jié)節(jié)草醇提物對正常小鼠的血糖無影響,陽性藥格列喹酮能降低正常小鼠血糖水平,陽性組與正常組比較差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見表2。
四氧嘧啶是一種特異性β細(xì)胞毒劑,可選擇性破壞多種動物胰島β細(xì)胞致實驗性糖尿病,這與臨床Ⅰ型糖尿病發(fā)病機制相近。四氧嘧啶糖尿病小鼠是研究糖尿病治療藥物療效的常用動物模型。本實驗組研究節(jié)節(jié)草醇提物對糖尿病小鼠的影響,結(jié)果表明節(jié)節(jié)草醇提物大、中劑量組降糖效果優(yōu)于小劑量組,有一定量效關(guān)系,但對正常小鼠血糖無影響。節(jié)節(jié)草醇提物成分復(fù)雜,其降血糖有效部位是什么以及通過何種途徑修復(fù)受損胰島β細(xì)胞,今后實驗中有待進(jìn)一步闡明。
[1] 李淑惠,李德坤,李平亞,等.木賊科植物研究概況-化學(xué)成分研究[J].中草藥,2000,31(7):12-14.
[2] 徐叔云,卞如濂,陳修.藥理實驗方法學(xué)[M].第3版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2001:273.