趙俊芳，李桂珍，趙宏麗，李孟娟

（天津市中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院，天津300120）

特應(yīng)性皮炎（atopic dermatitis,AD）是皮膚科常見的過敏性疾病之一，與遺傳因素相關(guān)，患者及家族成員多具有異位素質(zhì)，可伴哮喘、過敏性鼻炎、枯草熱等病，尚有血清IgE增高及外周血EOS增高等特征，其發(fā)病機(jī)制尚不清楚。在這類疾病中，EOS被各種因素激活并釋放某些強(qiáng)堿性顆粒蛋白，主要有嗜酸細(xì)胞陽離子蛋白(eosinophil cationicprotein，ECP)、主要堿性蛋白（myelin basic protein,MBP）等，其中ECP的毒性作用最強(qiáng)，是EOS激活和過敏性疾病病情活動的標(biāo)志之一[1]。但ECP在AD患者中是否增高及其與病情、IgE和外周EOS增高是否相關(guān)，各家報(bào)道不一。本研究通過測定AD患者ECP 水平，及血清總 IgE（total IgE,tIgE）、特異性 IgE（specific IgE,sIgE）、外周血EOS計(jì)數(shù)水平，探討其在AD發(fā)病中的作用及其臨床應(yīng)用中的意義。

1 對象與方法

1.1 對象 AD患者101例，均來自我院2008年6月—2009年10月門診及住院患者，其中男48例，女53例，平均年齡（31.2±11.7）歲，病期 5個月～35年，平均（15.3±11.5）年，均符合AD診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]。AD病情嚴(yán)重度分值標(biāo)準(zhǔn)參照歐洲AD特別工作組確定的SCORAD（severe scoring of atopic dermatitis）系統(tǒng)，觀察其主要癥狀（包括瘙癢、睡眠、皮損面積、皮損嚴(yán)重程度），記錄SCORAD積分。人選患者20d內(nèi)未用過糖皮質(zhì)激素或其他抗組胺類藥物，無寄生蟲感染史，無自身免疫性疾病等。40名健康獻(xiàn)血者為正常對照組，均無過敏史，于2008年10月取血,男21名，女19名，年齡在4～71歲之間，平均年齡（35.21±12.21）歲。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 血清ECP測定 真空管靜脈取血3mL，室溫下放置60min后，3 000r/min離心15 min，血清放-20℃冰箱保存。采用美國ADL公司的ECP雙抗夾心ELISA檢測試劑盒進(jìn)行檢測。

1.2.2 血清tIgE檢測 采用天津沃克生物技術(shù)公司IgE雙抗夾心試劑盒對AD患者及正常對照組進(jìn)行血清tIgE的檢測。

1.2.3 EOS計(jì)數(shù) 采用EOS直接計(jì)數(shù)法。

1.2.4 血清sIgE的檢測 采用德國MEDIWISS公司出品的變應(yīng)原檢測試劑盒，體外半定量免疫印跡法分析檢測，可同時獨(dú)立的檢測各種常見的變應(yīng)原。Ⅰ級以上即為陽性，分級標(biāo)準(zhǔn)見表1。

表1 sIgE的分級標(biāo)準(zhǔn)

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS10.0軟件，患者的ECP、tIgE、EOS測定值用±s表示，兩樣本測定值比較采用均數(shù)t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)，血清ECP與tIgE值、EOS、sIgE、SCORAD積分之間的關(guān)系采用相關(guān)性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 AD患者及正常對照組血清ECP、tIgE、EOS檢測結(jié)果 見表2，經(jīng)組間t檢驗(yàn)顯示AD患者的血清ECP值明顯高于正常對照組（P<0.01），血清tIgE亦明顯高于正常對照組（P<0.05），均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而101名AD患者EOS計(jì)數(shù)結(jié)果為0.05～0.75×109/L，與正常對照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.2 血清sIgE檢測結(jié)果 見表3。101例患者中69例患者至少對一種變應(yīng)原呈陽性反應(yīng)（68.31%），有45例患者檢出對2～7種變應(yīng)原呈陽性反應(yīng)（44.56%），正常對照組的sIgE檢測全部為陰性，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=10.96，P<0.05）。吸入性變應(yīng)原中，戶塵螨（35.64%），柏、蟑螂的陽性率（20.79%）較高，而食物變應(yīng)原中腰果（18.82%）的陽性率較高。另外，吸入性變應(yīng)原陽性率高于食物變應(yīng)原陽性率（χ2=8.73，P<0.05）。

表2 AD患者的ECP、tIgE、EOS檢測結(jié)果 （±s）

表2 AD患者的ECP、tIgE、EOS檢測結(jié)果 （±s）

組別AD患者組正常對照組t ECP（ng/mL）15.33±6.03 8.96±3.74 9.32 TIgE（IU/mL）213.44±64.67 201.5±20.21 2.03 EOS(×109/L)0.296±0.171 0.305±0.181 0.166

表3 101例AD患者血清sIgE檢測結(jié)果 例

2.3 AD患者疾病癥狀評分與ECP水平、tIgE、sIgE、EOS計(jì)數(shù)的相關(guān)性 AD患者SCORAD積分為48.12±13.24；tIgE與SCORAD積分的相關(guān)系數(shù)r=0.089；EOS與SCORAD積分的相關(guān)系數(shù)r=0.093；血清ECP與EOS相關(guān)系數(shù)r=0.065；它們之間的相關(guān)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。AD患者組血清ECP水平與SCORAD積分的相關(guān)系數(shù)r=0.612，說明ECP值與其癥狀體征評分呈正相關(guān)趨勢，且相關(guān)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。ECP與tIgE的相關(guān)系數(shù)r=0.210，其相關(guān)性也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），ECP與sIgE的相關(guān)系數(shù)r=0.571，說明ECP值與sIgE呈正相關(guān)趨勢，且相關(guān)具有顯著性意義（P<0.01）。

3 討論

AD是皮膚科常見的過敏性疾病之一，與遺傳因素相關(guān)，IgE、EOS和肥大細(xì)胞在其發(fā)病過程中起著十分重要的作用。

不少學(xué)者[3]認(rèn)為患者的ECP水平、病情與外周血的EOS數(shù)量無關(guān)，升高的ECP水平反映了整個EOS池的活化狀態(tài)，而在炎癥反應(yīng)部位聚集的EOS與升高的ECP水平有關(guān)，反映了皮膚的EOS的活化狀態(tài)。因此，血清ECP水平被認(rèn)為是一個更為有效而可靠的反映AD患者病情的指標(biāo)。本研究AD患者血清ECP較正常對照組顯著增高，與國外報(bào)道[4]結(jié)果一致，反映了AD患者外周血和皮損炎癥部位的EOS處于激活狀態(tài)，另外ECP可能參與了皮損的炎癥損傷過程。本研究還顯示，AD患者外周血EOS計(jì)數(shù)無明顯增高，而血清ECP水平較正常對照組顯著增高，且兩者的相關(guān)性無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示AD患者中ECP變化可能較EOS計(jì)數(shù)變化更靈敏，更能反映EOS的激活狀態(tài)和脫顆粒分泌蛋白的能力，ECP是EOS激活后分泌物質(zhì)的表達(dá)形式，同時局部炎癥部位的EOS浸潤也可能引起血清ECP水平的增高。

AD組血清tIgE雖比正常組升高，但與癥狀嚴(yán)重程度無相關(guān)性，表明tIgE不能反映機(jī)體已被致敏的程度，打破了傳統(tǒng)上認(rèn)為tIgE、EOS是變態(tài)反應(yīng)性疾病病情活動指標(biāo)的觀念。變應(yīng)原sIgE在AD的發(fā)病過程中起重要作用，Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的機(jī)制為變應(yīng)原通過皮膚、黏膜屏障進(jìn)入機(jī)體，刺激單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)，產(chǎn)生特異性反應(yīng)素IgE，后者吸附于肥大細(xì)胞或嗜堿粒細(xì)胞表面的IgE受體，使這些細(xì)胞處于致敏狀態(tài)，當(dāng)被致敏的肥大細(xì)胞再次暴露于同一致敏物時，則在肥大細(xì)胞或嗜堿粒細(xì)胞發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，細(xì)胞脫顆粒、釋放組胺等介質(zhì)，作用于靶器官，發(fā)生變態(tài)反應(yīng)，測定變應(yīng)原sIgE對該病的病因診斷和治療具有重要意義。我們研究發(fā)現(xiàn)，68.31%的患者對某種變應(yīng)原過敏，吸入性變應(yīng)原陽性率較高，而sIgE與ECP水平成正相關(guān)（P<0.05），說明sIgE與EOS的活化狀態(tài)密切相關(guān)。檢測變應(yīng)原sIgE可了解病因及發(fā)病機(jī)制，同時可使患者有目的地規(guī)避變應(yīng)原，從而得到更好的治療。

ECP與SCORAD積分呈正相關(guān)，說明ECP才真正可能作為AD病情活動及治療監(jiān)測的有效指標(biāo)。測定ECP血清濃度的增高和變化，有助于了解EOS的活化程度，干擾EOS的激活可能是改進(jìn)對這類疾病治療的一種方式。但Murat-Susic＇等[5]檢測AD患兒ECP水平、EOS、tIgE時發(fā)現(xiàn)AD嚴(yán)重程度與ECP水平、EOS、tIgE的相關(guān)性較弱，這些指標(biāo)只能作為病情監(jiān)測的輔助手段。故ECP水平與AD病情的相關(guān)性還有待于進(jìn)一步探討。

[1]Heil PM,Maurer D,Klein B,et al.Omalizumab therapy in atopic dermatitis:depletion of IgE does not improve the clinical course-a randomized,placebo-controlled and double blind pilot study[J].J Dtsch Dermatol Ges,2010,8:990-998.

[2]顧恒，金泓.特應(yīng)性皮炎診斷標(biāo)準(zhǔn)的評價[J].中華皮膚科雜志，2000，33(4):222-226.

[3]Kato M,Yamada Y,Maruyama K,et al.Serum eosinophil cationic protein and 27 cytokines/chemokines in acute exacerbation of childhood asthma[J].Int Arch Allergy Immunol,2010,152:62-66.

[4]Park JH,Choi YL,Namkung JH,et al.Characteristics of extrinsic vs.intrinsic atopic dermatitis in infancy:correlations with laboratory variables[J].Br J Dermatol,2006,155:778-783.