白直成 魯 萍
(湖州市中心醫(yī)院,浙江 湖州 313000)
乳房外paget's病又稱乳房外濕疹樣癌(Extramammary paget's disease EMPD),是一種少見的皮膚頂泌腺惡性腫瘤,多見于老年人,常見于肛門生殖區(qū)和其他大汗腺分布區(qū)[1]。該病的病因和發(fā)病機(jī)制尚不明確。表皮生長因子受體2(HER-2/neu)是一種磷酸化受體蛋白,與腫瘤細(xì)胞的增殖、分化和轉(zhuǎn)移相關(guān)[2],其在EMPD中的研究鮮有報(bào)道?,F(xiàn)收集乳房外paget's病20例,探討HER-2/neu在EMPD中的表達(dá)。
1.1 材料 20例標(biāo)本均取自2005年1月~2011年6月湖州市中心醫(yī)院病理科存檔的石蠟標(biāo)本。其中男19例,女1例,年齡59~81歲,平均(69.6±6.2)歲。部位∶腹股溝 2例,陰囊 11例,肛周 2例,陰莖4例,外陰1例,其中外陰1例伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,陰囊1例局部復(fù)發(fā)。另取本院男性包皮環(huán)切術(shù)患者20例,年齡49~60歲,平均(56±5.5)歲,切除的包皮組織無皮膚病(如皮炎、真菌感染等),經(jīng)組織病理切片證實(shí)為正常皮膚組織,女性外陰部正常皮膚組織未能獲得,故正常對(duì)照組僅為男性。兩組年齡、性別比等一般資料具有可比性(P>0.05)。所有組織經(jīng)10%中性福爾馬林固定,石蠟包埋切片,分別進(jìn)行免疫組織化學(xué)和HE染色。
1.2 方法 采用免疫組化SP法檢測HER-2/neu的表達(dá)。其中單克隆鼠抗人抗HER-2/neu抗體和SP試劑盒購自福建邁新公司。實(shí)驗(yàn)按試劑盒說明書分步驟進(jìn)行。脫蠟水洗后的組織染色前先經(jīng)微波處理,修復(fù)抗原。用已知HER-2/neu蛋白陽性的乳腺癌標(biāo)本作陽性對(duì)照,以PBS緩沖液代替一抗作為空白陰性對(duì)照。DAB顯色,蘇木素復(fù)染,樹膠封固。
1.3 結(jié)果判定 HER-2/neu癌基因表達(dá)定位于細(xì)胞膜,或伴有部分細(xì)胞漿著色,僅胞漿著色均為非特異染色;陽性強(qiáng)度評(píng)分按照美國FDA推薦的DAKO公司Hercept Test的標(biāo)準(zhǔn)∶所有細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞漿均未出現(xiàn)棕黃色為(-);≤10%細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞漿出現(xiàn)輕度棕黃色,染色間斷,未完全包繞胞膜為(±);>10%細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞漿出現(xiàn)輕度棕黃色,染色間斷,未完全包繞胞膜為(+);>10%細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞漿出現(xiàn)輕度至中度棕黃色,且染色連續(xù),環(huán)繞整個(gè)胞膜和/或胞漿為(++);>10%細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞漿出現(xiàn)重度棕黃色,且染色連續(xù),環(huán)繞整個(gè)胞膜和胞漿為(+++)。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,并采用continuity correction的卡方檢驗(yàn)。
HER-2/neu的陽性表達(dá)主要定位于細(xì)胞膜,少數(shù)為細(xì)胞漿表達(dá)(見第468頁圖1)。HER-2/neu在正常組織中均無表達(dá)(見第468頁圖2),而20例EMPD中有8例陽性表達(dá),陽性率為40%,兩者比較,有顯著性差異(χ2=7.656,P=0.006)。本組EMPD病例中,36.8%的男性(7/19)陽性表達(dá)HER-2/neu蛋白,其中1例陰莖(+),1例腹股溝(++),4例陰囊(+~++),1例肛周(+++);而僅有的1例女性外陰淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織也陽性表達(dá)HER-2/neu蛋白,且陽性強(qiáng)度為(+++),見表1。
HER-2/neu蛋白是原癌基因c-erBb2的表達(dá)產(chǎn)物,具有酪氨酸激酶活性,185KD大小,屬于表皮生長因子受體(EGFR)家族,也稱為HER-2/neu或ErbB-2家族,與乳腺癌、胃癌、肺癌等多種腫瘤的發(fā)展及預(yù)后有關(guān)[3-4]。Her-2/neu與EMPD的相關(guān)性研究甚少。EMPD自1888年由Crocker首先報(bào)道,發(fā)病機(jī)制尚不清楚,無明顯誘因,也無季節(jié)規(guī)律。EMPD的發(fā)生是一個(gè)多因素、多階段、多基因變異積累的過程。
表1 20例EMPD患者的臨床資料及HER-2/neu的表達(dá)情況
在正常組織中HER-2/neu基因常以單拷貝存在,表達(dá)水平較低,參與細(xì)胞的分化調(diào)節(jié),當(dāng)受到致癌因素作用后,其結(jié)構(gòu)或表達(dá)調(diào)控失常,發(fā)生惡變[5]。本研究中,20例EMPD病例有8例HER-2/neu蛋白呈陽性表達(dá),陽性表達(dá)率為40%,與Tanskanen[6]等和Chio[7]等報(bào)道的結(jié)果類似,而HER-2/neu在正常包皮組織中未見表達(dá),兩者比較有顯著性差異(P<0.01),提示EMPD中HER-2/neu的陽性表達(dá)可能與皮膚組織的癌變及EMPD的形成有密切的關(guān)系。此外,本中男性19例,女性1例,男性似乎占據(jù)發(fā)病的主體,不過尚還需大量標(biāo)本和實(shí)驗(yàn)來證實(shí)。
總之,HER-2/neu在EMPD的形成中起重要作用,但與EMPD的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的關(guān)系還有待進(jìn)一步深入研究,以便對(duì)EMPD的分子靶向治療提供新的依據(jù)及思路。
[1]聶延芬,周之海.乳房外Paget病免疫組化研究進(jìn)展.國際皮膚性病學(xué)雜志,2007,33(5)∶308
[2]Varshney D,Zhou Y Y,GellerS A,et al.Determination of HER-2 status and chromosome 17 polysomy in breast carcinomas comparing herceptest and path vysion FISH assay.Am J Clin Pathol,2004,121(1)∶70
[3]Radovi S,Babi M,Dori M,et al.Non-small cell lung carcinoma∶cyclin D1,bcl-2,p53,Ki-67 and HER-2 proteins expression in resected tumors.Bosn J Basic Med Sci,2007,7(3)∶205
[4]盧洪勝,王雙珠,周濤,等.HER-2、E-cadherin在非小細(xì)胞肺癌中聯(lián)合表達(dá)的意義.實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2010,26(7)∶1154
[5]Tsutsui S,Ohno S,M urakami S,et al.Prognostic value of c-erbB2 expression in breast cancer.J Surg Oncol,2002,79(4)∶216
[6]Tanskanen M,Jahkola T,Asko-Seljavaara S,et al.HRE-2 oncogene amplification in extramammary Paget's disease.histopathology,2003,42(6)∶575
[7]Chio Y D,Cho N H,Park Y S,et al.Lymphovascular and marginal invasion as useful prognostic indicators and the role of c-erbB-2 in patients with male extramammary Paget'sdisease∶a study of 31 patients.J Urol,2005,174(2)∶561