鄧震亭，馬 瑛，劉 芳，柴士偉（天津中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院，天津市 300193）

煎劑是中藥的傳統(tǒng)劑型之一，是臨床醫(yī)師辨證論治、隨方加減治療疾病的重要手段。長期以來，煎劑的制備以采用飲片手工煎煮為主，但隨著人們生活方式的改變，中藥煎藥機得到越來越廣泛的應用，特別是在醫(yī)院中已經(jīng)被普遍的應用[1]。煎藥機分為2種類型：常壓和高壓。這兩種煎煮方法對中藥煎劑造成的質量差異一直缺乏全面、系統(tǒng)的評價；目前，文獻多是以某一種主要成分作為指標對不同的煎煮方法進行比較，所得結果比較片面，不能全面的反映不同煎煮方法的特點[2，3]。因此，筆者在化瘀通脈煎劑的指紋圖譜研究的基礎上，采用指紋圖譜技術對采用不同煎煮方法的化瘀通脈煎劑的質量差異進行全面的評價[4～6]。

1 儀器與試藥

Waters 600E高效液相色譜儀，配有UV檢測器、四元梯度泵、在線脫氣裝置、自動進樣器，EMPOWER工作站（美國Waters公司）；AX205分析天平（瑞士Mettler-Toledo公司）。

丹酚酸 B（批號：880200010）、阿魏酸（批號：110773-200611）對照品均購于中國藥品生物制品檢定所；丹參、川芎、當歸、雞血藤均購于河北美威中藥材有限公司，經(jīng)天津中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院馬瑛主任藥師鑒定為真品；甲醇、乙腈為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 對照品溶液的制備

精密稱取阿魏酸對照品5 mg，置于25 mL量瓶中，用體積分數(shù)為50%的甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

精密稱取丹酚酸B對照品5 mg，置于25 mL量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.2 供試品溶液的制備

2.2.1 高壓煎煮溶液的制備 取同一批化瘀通脈處方飲片5份，加10倍量水，浸泡20 min后放入高壓煎煮機煎煮40 min，溶液定容至1 000 mL，備用。

2.2.2 常壓煎煮溶液的制備 取同一批化瘀通脈處方飲片5份，加10倍量水，浸泡20 min后放入常壓煎煮機煎煮40 min（先武火，溶液沸騰后改用文火），溶液定容至1 000 mL，備用。

2.3 色譜條件

色譜柱：大連依利特Hypersil ODS2 C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：乙腈-0.05%甲酸溶液，線性梯度洗脫（0→40→60→80 min，乙腈的比例為10%→20%→80%→90%；0.05%甲酸溶液的比例為90%→80%→20%→10%）；流速：1.0 mL·min-1；檢測波長：280 nm；柱溫：30 ℃。

2.4 精密度試驗

分別吸取阿魏酸、丹酚酸B對照品溶液各20 μL，按“2.3”項下色譜條件連續(xù)進樣測定5次。結果，色譜峰的保留時間的RSD分別為1.96%、2.32%，相對峰面積積分值的RSD分別1.23%、2.47%，n均為5，表明儀器精密度良好。

2.5 穩(wěn)定性試驗

取同一常壓煎煮供試品溶液20 μL，分別在 0、4、8、12、24、48 h進樣6次。結果，14個共有峰相對保留時間的RSD平均為2.13%，相對峰面積積分值的平均RSD為2.56%，n均為6，表明供試品溶液48 h內穩(wěn)定性良好。

2.6 重復性試驗

取同一批次的化瘀通脈煎劑9份，按“2.2.1”項下方法，取供試品溶液20 μL，照“2.3”項下色譜條件進樣分析。結果，14個共有峰保留時間的RSD平均為2.41%，相對含量的RSD平均為3.72%，n均為9，表明方法重復性良好。

2.7 指紋圖譜的建立

在前期試驗中，筆者對不同批次12份高壓煎煮樣品進行檢測，建立了化瘀通脈煎劑的共有模式指紋圖譜，包含14個共有峰，其中6號峰為阿魏酸，9號峰為丹酚酸B，相似度均在0.92以上。色譜見圖1。

圖1 高效液相色譜圖Fig 1 HPLC chromatograms

2.8 樣品溶液的測定

分別將上述2種供試品溶液減壓濃縮至干，加50%甲醇溶解，定容至25 mL。進樣前用0.45 um濾膜過濾，按上述色譜條件進樣測定，圖譜見圖2。

圖2 常壓、高壓下煎劑指紋圖譜比較Fig 2 Comparison of fingerprints of decoctions under atmospheric and high pressure

由圖2可知，常壓煎煮所得煎劑中6號峰（阿魏酸）、8號峰比高壓煎煮含量稍高，而9號峰（丹酚酸B）含量明顯增加；高壓煎煮煎劑中1、2、3、4、7號峰含量比常壓煎煮含量增加明顯，其中11號峰增加最顯著；兩種煎煮方法對12、13、14號峰影響不明顯。

3 討論

分析兩種煎煮方法所造成的煎劑的質量差異：高壓煎煮中9號峰（丹酚酸B）含量降低可能是由于丹酚酸B不穩(wěn)定，在高壓煎煮過程中降解所導致；11號峰增加明顯推測可能為丹酚酸B的降解產物。

利用指紋圖譜比較兩種煎煮方法的化瘀通脈煎劑的質量差異，總體上看：高壓煎煮后有些共有峰的含量有所提高，但臨床療效還需要進一步進行臨床試驗，以期為中藥選擇煎煮方法提高臨床療效提供指導。

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[2] 于忠興，唐風雷，范正達.自動煎藥與傳統(tǒng)煎煮法對白芍湯劑質量的影響[J].抗感染藥學，2006，3（2）：81.

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[4] 孫國祥，池劍玲，宋宇晴.HPLC指紋圖譜控制復方丹參片質量[J].沈陽藥科大學學報，2009，25（12）：971.

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