陳魁敏 沈春紅 郝 偉 余秋穎*

（1 沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院機(jī)能實(shí)驗(yàn)室，遼寧 沈陽(yáng) 110034；2 沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院沈洲醫(yī)院，遼寧 沈陽(yáng) 110002）

止嗽立效丸是由麻黃、石膏、葶藶子、苦杏仁、甘草、嬰粟殼所組成的中藥復(fù)方制劑，具有止咳平喘、抗炎、提高機(jī)體免疫力的作用，臨床應(yīng)用療效可靠?，F(xiàn)將其抗炎、調(diào)節(jié)免疫力的實(shí)驗(yàn)報(bào)道如下。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 材料

止嗽立效丸由赤峰天奇制藥有限公司提供，批號(hào)080713；消咳喘由哈爾濱松花江制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)061213；阿司匹林山東興華制藥廠生產(chǎn)；角叉菜膠由沈陽(yáng)藥科大學(xué)購(gòu)入。

1.2 動(dòng)物

昆明種小鼠，體質(zhì)量l8～24g，Wistar大鼠，體質(zhì)量150～200g，雌雄兼用，均由沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 小鼠二甲苯耳腫脹法

取小鼠50只，隨機(jī)分成5組：生理鹽水對(duì)照組，阿司匹林6g/kg和止嗽立效丸1.5、3.0、6.0g/kg組，空白對(duì)照組。止嗽立效丸組每天灌胃給藥1次，連續(xù)2d。阿司匹林第2天灌胃給藥1次，于第2天給藥1h，右耳兩面滴二甲苯0.05mL/只，致炎30min后頸椎脫白致死，用直徑6mm打孔器取左右兩面耳同一部位圓耳片，用分析天平稱(chēng)重，以?xún)啥亓恐顬槟[脹度進(jìn)行t檢驗(yàn)。結(jié)果：止嗽立效丸6g/kg組和阿司匹林6g/kg組對(duì)小鼠耳腫脹有抑制作用。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 止嗽立效丸對(duì)小鼠耳腫脹度的影響[n＝10，（±s）]

表1 止嗽立效丸對(duì)小鼠耳腫脹度的影響[n＝10，（±s）]

注：與對(duì)照組比較※P＜0.05，※※P＜0.01

組別 劑量（g/kg） 耳腫脹度（mg）等量生理鹽水 9.18±1.28止嗽立效丸 1.5 9.43±2.19止嗽立效丸 3.0 8.56±1.32止嗽立效丸 6.0 6.34±2.33※阿司匹林 6.0 5.31±2.03※※

2.2 大鼠角叉菜膠致炎作用

取體質(zhì)量200g左右大鼠40只，雌雄兼用，隨機(jī)分為鹽水對(duì)照組，阿司匹林已知藥對(duì)照組，止嗽立效丸1.5、3.0、6.0g/kg劑量組。每組8只大鼠，禁食不禁水12h后，分別ig給予不同藥物，給藥后30min分別在大鼠右后肢足趾皮下注射1%角叉菜膠0.1mL/只致炎[1]。用玻璃容積法及足趾容積測(cè)量器測(cè)量各鼠致炎前和致炎后lh、2h、4h、6h的足趾容積，并計(jì)算出足趾腫脹度（致炎前后容積之差）。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 角又菜膠對(duì)大鼠足趾腫脹度的影響[n=8，（±s）]

表2 角又菜膠對(duì)大鼠足趾腫脹度的影響[n=8，（±s）]

注：與對(duì)照組比較※P＜0.05，※※P＜0.01

足趾腫脹度（mL）1h 2h 4h 6h等量生理鹽水 16.7±6.71 18.8±2.55 19.3±0.84 18.3±2.34止嗽立效丸 1.5 13.2±40.7 16.5±6.06 16.3±8.97 15.4±2.23止嗽立效丸 3.0 14.8±2.15 13.1±10.0 13.6±7.42※ 12.2±5.67※止嗽立效丸 6.0 11.2±3.78※ 9.8±5.70※※ 13.2±6.73※ 12.1±3.348※※阿司匹林 6.0 9.50±5.89※ 9.90±4.64※※ 12.8±5.17※※ 10.6±5.96※※組別 劑量(g/kg)

2.3 對(duì)小鼠中性粒細(xì)胞吞噬活性的影響

取健康小鼠50只，雌雄兼用，體質(zhì)量18～42g，分組及給藥量見(jiàn)表3，各組小鼠連續(xù)ig給予各不同藥物7d，于第7天末次給藥1h后眼眶取血備用，另于一清潔玻璃上滴肝素抗凝劑2滴及NBT染液2滴，37C孵育15min再于室溫下放置15min，并輕輕混勻，在己制備好的載玻片上推成薄血涂片，干燥后用甲醇固定，Wright-Giensa染色，鏡檢，計(jì)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞中有還原NBT呈紫色沉淀物的白細(xì)胞數(shù)。結(jié)果可見(jiàn)，止嗽立效丸對(duì)小鼠中性粒細(xì)胞的吞噬指數(shù)無(wú)明顯影響，即止嗽立效丸具有無(wú)影響機(jī)體非特異性免疫功能的作用。結(jié)果見(jiàn)表3。

2.4 溶血空斑實(shí)驗(yàn)（PFC法）[1]

取小鼠50只，體質(zhì)量18～22g，雌雄兼用，分組及給藥劑量見(jiàn)表4，連賣(mài)ig給予不同藥物7d，于給藥第3天時(shí)間10%RSBC致敏小鼠0.2mL/只（含4×108個(gè)SRBC）ip，免疫4d后，處死小鼠，分離脾臟，剪碎，加入Hanks液2mL，混勻，過(guò)濾，1500r/min，離心10min，去上清液，Hanks液洗3次，將細(xì)胞沉淀懸于4.8mL Hanks液中，取0.2mL指示細(xì)胞懸液（SRBC+補(bǔ)體）+0.2mL（125×）脾細(xì)胞灌注小室用（l00μL/室），密封，37C培養(yǎng)30min，計(jì)數(shù)空斑，抗體產(chǎn)生細(xì)胞數(shù)=[脾細(xì)胞懸液總mL數(shù)（50mL）/注入小室脾細(xì)胞（mL）]×標(biāo)本PFC數(shù)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果與對(duì)照組比較進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢查，結(jié)果可見(jiàn)，止嗽立效丸可使溶血空斑生成減少，具有降低體液免疫功能。結(jié)果見(jiàn)表4。

表3 止嗽立效丸對(duì)小鼠中性粒細(xì)胞吞噬功能影響[n=10，（χ— ±s）]

表4 止嗽立效丸對(duì)小鼠抗體產(chǎn)生細(xì)胞總數(shù)的影響[n=10，（±s）]

表4 止嗽立效丸對(duì)小鼠抗體產(chǎn)生細(xì)胞總數(shù)的影響[n=10，（±s）]

注：與對(duì)照組比較※P＜0.01

組別 劑量 抗體產(chǎn)生細(xì)胞總數(shù)（個(gè)/只）等量生理鹽水 13.14±2.67止嗽立效丸 1.5（g/kg） 8.5±2.20※止嗽立效丸 3.0（g/kg） 8.63±1.85止嗽立效丸 6.0（g/kg） 11.5±2.98消咳喘 1.5（mg/kg） 3.1±12.33

3 討 論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示止嗽立效丸可抑制二甲苯所致小鼠耳腫脹癥及角叉菜膠致大鼠足腫脹炎癥。同時(shí)對(duì)小鼠中性粒細(xì)胞的吞噬功能無(wú)明顯影響，并便溶血空斑實(shí)驗(yàn)中抗體產(chǎn)生數(shù)減少，具有調(diào)節(jié)機(jī)體特異性免疫及非特異性免疫功能[2]。全方在平喘化痰、消炎、止咳基礎(chǔ)上可調(diào)節(jié)機(jī)體免疫反應(yīng)，對(duì)平喘、止咳、抗炎有較好的治療作用。

[1]徐叔云.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1985:532-533.

[2]陳奇.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1996:646.