陳治芳， 王文橋， 韓秀英， 張小風(fēng)， 趙建江， 馬志強

（1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院農(nóng)藥系，保定 071001；2.河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所／河北省農(nóng)業(yè)有害生物綜合防治工程技術(shù)研究中心，保定 071000）

新殺菌劑對番茄灰霉病菌的室內(nèi)毒力及田間防效

陳治芳1，2， 王文橋2＊， 韓秀英2， 張小風(fēng)2， 趙建江2， 馬志強2

（1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院農(nóng)藥系，保定 071001；2.河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所／河北省農(nóng)業(yè)有害生物綜合防治工程技術(shù)研究中心，保定 071000）

室內(nèi)采用菌絲生長速率法、孢子萌發(fā)法和黃瓜子葉法測定了咯菌腈、抑霉唑、福美雙、吡唑醚菌酯和嘧霉胺對番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea）的抑制作用。結(jié)果表明，菌絲生長速率法和孢子萌發(fā)法的測定均以咯菌腈毒力最高，EC50分別為0.005 2μg／mL和0.087 6μg／mL；黃瓜子葉法測定以抑霉唑毒力最高，其EC50為0.675 3μg／mL。田間藥效試驗結(jié)果表明：50%咯菌腈可濕性粉劑90g／hm2對番茄灰霉病的田間防效達(dá)到90%以上，顯著高于對照藥劑50%啶酰菌胺水分散粒劑300g／hm2和40%嘧霉胺懸浮劑480g／hm2的防效。

黃瓜子葉法； 殺菌劑； 番茄灰霉病菌； 毒力； 田間藥效試驗

番茄灰霉病是由灰葡萄孢（Botrytis cinereaPersex Fr.）引起的一種世界性病害。在我國北方保護(hù)地中因灰霉病造成番茄平均減產(chǎn)20%～40%，嚴(yán)重可達(dá)60%以上［1］。番茄灰霉病以化學(xué)防治為主要防治手段。目前，苯并咪唑類、二甲酰亞胺類和苯胺基嘧啶類等常用殺菌劑對灰霉病的防治效果均因灰霉病菌抗藥性的產(chǎn)生而大大降低［2－4］，生產(chǎn)中亟需篩選新的有效防治藥劑?？┚妫╢ludioxonil）、抑霉唑（imazalil）、吡唑醚菌酯（pyraclostrobin）和福美雙（thiram）等殺菌劑對灰霉病菌作用機制特異，與苯并咪唑類、二甲酰亞胺類和苯胺基嘧啶類等常用殺菌劑之間無交互抗性關(guān)系。為此，本研究采用黃瓜子葉法測定了嘧霉胺（pyrimethanil）、咯菌腈、抑霉唑、吡唑醚菌酯和福美雙等5種殺菌劑對番茄灰霉病菌的室內(nèi)毒力，并進(jìn)行了咯菌腈、啶酰菌胺和嘧霉胺的田間藥效試驗，旨在為選擇有效控制田間番茄灰霉病的殺菌劑提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 供試菌株

番茄灰霉菌菌株（DLX2），2009年采自河北省定州市趙村鄉(xiāng)西甘德村，經(jīng)分離、純化后保存在試管培養(yǎng)基上。

1.1.2 供試品種

在溫室花盆中裝入蛭石，播種黃瓜（品種為‘新泰密刺’），1粒∕盆，子葉充分展開后選擇長勢一致的幼苗子葉備用。

1.1.3 供試藥劑

98%福美雙原藥，河北冠龍農(nóng)化有限公司；50%福美雙可濕性粉劑，河北冠龍農(nóng)化有限公司；98%抑霉唑原藥，浙江一帆化工有限公司；22.2%抑霉唑乳油，美國仙農(nóng)有限公司；99%咯菌腈原藥，沈陽化工研究院；50%咯菌腈可濕性粉劑，先正達(dá)（中國）投資有限公司；95%吡唑醚菌酯原藥、25%吡唑醚菌酯乳油，巴斯夫歐洲公司；95%嘧霉胺原藥，河北冠龍農(nóng)藥有限公司；40%嘧霉胺懸浮劑，德國拜耳有限公司；50%啶酰菌胺水分散粒劑，巴斯夫（中國）有限公司。

1.2 試驗方法

1.2.1 室內(nèi)毒力測定

采用菌絲生長速率法［5］和孢子萌發(fā)法［6］使用供試原藥、黃瓜子葉法［7］使用供試制劑分別測定了咯菌腈、抑霉唑、吡唑醚菌酯、福美雙和嘧霉胺等5種殺菌劑對番茄灰霉病菌的室內(nèi)毒力。

1.2.2 田間藥效試驗

2010年4－5月在河北徐水縣田村鋪村進(jìn)行田間防治番茄灰霉病的藥效試驗。番茄品種 ‘東勝太保’。處理及有效成分劑量見表4，另設(shè)清水對照。采用隨機區(qū)組排列，4次重復(fù)，每小區(qū)面積24m2。

初見番茄灰霉病斑開始用藥（2010年4月16日），用背負(fù)式手動噴霧器噴藥，用藥液量為900L／hm2，共用藥2次。末次用藥后7d調(diào)查。每小區(qū)隨機取4點調(diào)查，每點調(diào)查2株，每株調(diào)查全部果實，記錄病果個數(shù)。病果分級采用如下標(biāo)準(zhǔn)。

0級：無病斑；

1級：殘留花瓣發(fā)病或柱頭發(fā)??；

3級：萼片腐爛或柱頭發(fā)病蔓延到果臍部；

5級：果臍部有浸潤斑但無霉層；

7級：果臍部有霉層但未擴(kuò)展到其他部位；

9級：果臍部霉層擴(kuò)展到其他部位。

藥效計算方法：

2 結(jié)果與分析

2.1 室內(nèi)毒力測定結(jié)果

從表1可以看出，5種殺菌劑中，咯菌腈對番茄灰霉病菌菌絲生長的抑制作用最強，EC50為0.005 2μg／mL；其次是抑霉唑，EC50為2.664 5μg／mL；福美雙、吡唑醚菌酯和嘧霉胺EC50分別為17.791 5、41.505 1μg／mL和78.861 7μg／mL。毒力最強的是咯菌腈。

表1 菌絲生長速率法測定5種殺菌劑對番茄灰霉病菌的室內(nèi)毒力

孢子萌發(fā)法測定6種殺菌劑對番茄灰霉病菌的室內(nèi)毒力結(jié)果（表2）表明：咯菌腈對番茄灰霉病菌分生孢子萌發(fā)的抑制作用最強，EC50為0.087 6μg／mL；其次是吡唑醚菌酯，EC50為0.135 8μg／mL；福美雙EC50為0.569 0μg／mL；抑霉唑和嘧霉胺EC50分別為1.073 8和5.418 6μg／mL。毒力最強的是咯菌腈。

由表3可見，活體測定的5種殺菌劑中，抑霉唑?qū)Ψ鸦颐共【秩军S瓜子葉的抑制作用最強，其EC50為 0.675 3μg／mL；其次是福美雙，EC50為0.689 4μg／mL；咯菌腈 EC50為1.274 0μg／mL；吡唑醚菌酯EC50為198.76μg／mL；嘧霉胺的EC50為235.88μg／mL。抑霉唑毒力最強，嘧霉胺毒力最小。

表2 孢子萌發(fā)法測定5種殺菌劑對番茄灰霉病菌的室內(nèi)毒力

表3 黃瓜子葉法測定5種殺菌劑對番茄灰霉病菌的室內(nèi)毒力

2.2 田間藥效試驗結(jié)果

田間藥效試驗結(jié)果（表4）表明：50%咯菌腈可濕性粉劑、50%啶酰菌胺水分散粒劑和40%嘧霉胺懸浮劑對番茄灰霉病的防效分別為74.46%～90.86%，68.80%～85.34%和52.39%。50%咯菌腈可濕性粉劑45、60g／hm2和90g／hm2的防效分別高于50%啶酰菌胺水分散粒劑150、200g／hm2和300g／hm2的防效；50%咯菌腈可濕性粉劑與50%啶酰菌胺水分散粒劑的防效均高于40%嘧霉胺懸浮劑（480g／hm2）的防效。50%咯菌腈可濕性粉劑90g／hm2的防效最好。各供試制劑按推薦用量使用對作物安全。

表4 咯菌腈和嘧霉胺對番茄灰霉病的田間防治效果1）

3 結(jié)論與討論

室內(nèi)試驗結(jié)果表明：采用菌絲生長速率法、孢子萌發(fā)法和黃瓜子葉法分別測定了5種殺菌劑對番茄灰霉病菌的毒力，發(fā)現(xiàn)咯菌腈對番茄灰霉病菌菌絲生長和孢子萌發(fā)的抑制作用均最強，抑霉唑次之。活體測定結(jié)果表明抑霉唑的抑制作用最強，其次是福美雙，兩者抑制番茄灰霉病菌的有效中濃度均小于1μg／mL；咯菌腈也有較強的抑制作用，有效抑制中濃度小于5μg／mL；但是吡唑醚菌酯和嘧霉胺抑菌作用很差，有效中濃度均大于100μg／mL。

田間藥效試驗結(jié)果表明：50%咯菌腈可濕性粉劑（90g／hm2）在用藥后7d對番茄灰霉病的防效最高，達(dá)90%以上，高于50%啶酰菌胺水分散粒劑（300g／hm2）和40%嘧霉胺懸浮劑的防效。在推薦濃度下使用均對作物安全。

咯菌腈和抑霉唑均為作用機制較新穎的藥劑，不同于常規(guī)使用的嘧霉胺、腐霉利、多菌靈，但生產(chǎn)中抑霉唑用于水果保鮮及番茄葉霉病防治，尚未正式用于灰霉病的防治，而咯菌腈登記來防治花卉作物灰霉病僅有1年時間，啶酰菌胺是應(yīng)用于防治灰霉病的新型高效殺菌劑，引進(jìn)近1年，并未普遍使用；福美雙作為使用時間較長的多作用位點保護(hù)性殺菌劑，其抑菌作用仍出色，有望成為與咯菌腈、抑霉唑和啶酰菌胺等殺菌劑混配使用的拌藥；吡唑醚菌酯雖然是甲氧基丙烯酸酯類新藥劑，但對番茄灰霉病的防效較差；苯胺基嘧啶類殺菌劑嘧霉胺作為常規(guī)殺菌劑，曾經(jīng)在灰霉病的防治中發(fā)揮重要作用，但在全國大部分地區(qū)產(chǎn)生抗性現(xiàn)象，已不適于防治番茄灰霉病。

本研究結(jié)果明確了咯菌腈可作為番茄灰霉病防治的首選藥劑，抑霉唑和福美雙可作為防治番茄灰霉病的有效藥劑。田間使用50%咯菌腈可濕性粉劑防治時，建議使用劑量為90g／hm2，施藥液量為900g／hm2。為了有效治理抗藥性，延長藥劑的使用壽命，抑霉唑、福美雙、咯菌腈和啶酰菌胺在防治番茄灰霉病時應(yīng)交替使用或混合使用。

［1］ 康立娟，張小風(fēng)，王文橋，等.灰霉菌的抗藥性與適合度測定［J］.農(nóng)藥學(xué)學(xué)報，2004（2）：39-42.

［2］ Kretschmer M，Hahn M.Fungicide resistance and genetic diversity ofBotrytis cinereaisolates from a vineyard in Germany［J］.Journal of Plant Diseases and Protection，2008，115（5）：214-219.

［3］ Myresiotis C K，Karaoglanidis G S，Tzavella-Klonari K.Resistance ofBotrytis cinereaisolates from vegetable crops to anilinopyrimidine，phenylpyrrole，hydroxyanilide，benzimidazole，and dicarboximide fungicides［J］.Plant Disease，2007，91（4）：407-413.

［4］ Moyano C，Gomez V，Melgarejo P.Resistance to pyrimethanil and other fungicides inBotrytis cinereapopulations collected on vegetable crops in Spain［J］.Journal of Phytopathology，2004，152（8／9）：484-490.

［5］ 馬建英，張小風(fēng)，王文橋，等.灰葡萄孢霉Botrytis cinerea對啶菌惡唑的敏感性和不同藥劑的交互抗性［J］.植物保護(hù)學(xué)報，2009，36（1）：61-64.

［6］ 趙建江，李紅霞，王文橋，等.番茄葉霉病菌對嘧菌酯的抗性檢測及抗性風(fēng)險評估［J］.華北農(nóng)學(xué)報，2008，10（1）：47-52.

［7］ Birchmore R J，F(xiàn)orster B.FRAC methods for monitoring the sensitivity ofBotrytis cinereato anilinopyrimidine fungicides developed by the anilinopyrimidine fungicide resistance action committee of GIFAP［J］.EPPO Bulletin，1996，26：181-197.

Fungicidal activity of new fungicides againstBotrytis cinereaand their field efficacy against tomato grey mould

Chen Zhifang1，2， Wang Wenqiao2， Han Xiuying2， Zhang Xiaofeng2， Zhao Jianjiang2， Ma Zhiqiang2
（1.Department of Pesticide Science，College of Plant Protection，Agricultural University of Hebei，Baoding071001；2.IPM Centre of Hebei Province，Institute of Plant Protection，Hebei Academy of Agricultural ＆Forestry Sciences，Baoding071000，China）

Inhibitory activity of fludioxonil，imazalil，thiram，pyraclostrobin and pyrimethanil toBotrytis cinereawas tested by conidial germination test，mycelial growth rate test and cucumber cotyledons spray inoculation test，respectively.It was found that the inhibitory activity of fludioxonil was the highest both in conidial germination test and in mycelial growth rate test.Their EC50values were 0.005 2 and0.087 6μg／mL，respectively.The inhibitory activity of imazalil was the highest in cucumber cotyledons spray inoculation test，and its EC50value was 0.675 3μg／mL.The results of field efficacy trials showed that field efficacy of fludioxonil 50%WP was above 90%and obviously higher than that of the control fungicides，boscalid50%WG and pyrimethanil 40%SC，when the treatment concentrations were 90，300 or 480 g／hm2.

cucumber cotyledons spray inoculation test； fungicide；Botrytis cinerea； fungicidal activity；field efficacy trial

S 482.2

A

10.3969／j.issn.0529-1542.2011.05.039

2010-10-08

2010-11-11

公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項（200803074）；“十一五”國家科技支撐計劃項目（2006BAD08A03）；河北省科技支撐計劃（08220302D）

＊ 通信作者 Tel：0312-5915659；E-mail：wenqiaow＠163.com