溫 敏 李艷萍 趙 競 方 路 馬克堅(jiān) 肖小河 (云南省中醫(yī)中藥研究院,昆明650223)

過去將近20年的時(shí)間里高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療(Highly active antiretroviral therapy,HAART)在HIV-1感染者及艾滋病(AIDS)患者中的廣泛使用,很大程度上控制大多數(shù)感染者HIV-1病毒的復(fù)制,同時(shí)使CD4+T細(xì)胞升高,在臨床上顯著降低了AIDS[1]。但目前普遍認(rèn)為抗病毒治療無法根除HIV-1,因?yàn)镠IV-1病毒存儲(chǔ)庫的存在。研究發(fā)現(xiàn)HAART治療時(shí)間長達(dá)5年成功抑制HIV-RNA的患者外周血仍可以檢查出HIV-1前病毒DNA[2]。HIV-1前病毒DNA的下降可以成為預(yù)示長期HAART對(duì)HIV-1病毒存儲(chǔ)庫的作用和長期抗病毒治療有效性的指標(biāo)[3-7]。目前我國HAART臨床實(shí)踐已經(jīng)取得一定進(jìn)展,但尚無HIV-1 RNA被有效抑制狀態(tài)下T淋巴細(xì)胞和外周血中HIV-1前病毒DNA相關(guān)性的研究報(bào)道。本研究對(duì)云南地區(qū)90例確診為AIDS HAART持續(xù)治療時(shí)間超過6個(gè)月,血漿HIV RNA＜50個(gè)拷貝/ml的患者進(jìn)行研究,考察其CD4+、CD3+、CD8+、CD4+CD28+、CD4+CD45RA+、CD4+CD45RO+和CD8+CD38+、CD38+T細(xì)胞與外周血中HIV-1前病毒DNA的相關(guān)性,了解經(jīng)過HAART治療后HIV-1 RNA被有效抑制狀態(tài)下的T細(xì)胞亞群與HIV-1前病毒DNA數(shù)量的相互關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 90例病例均來自云南騰沖,經(jīng)采用國際通用的HAART組合用藥方案治療的連續(xù)治療6個(gè)月以上,其血漿HIV RNA載量經(jīng)2次試驗(yàn)測定均小于50 copies/ml的AIDS患者。90例AIDS患者的一般情況:男性54人,女性36人,年齡21～77歲,平均年齡(41±12)歲;均為性傳播途徑感染HIV-1;HAART平均治療時(shí)間6～52個(gè)月,平均持續(xù)治療時(shí)間為(25.6±13.5)個(gè)月。將90例經(jīng)過HAART治療后CD4+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)根據(jù)《中國艾滋病和艾滋病病毒感染診斷標(biāo)準(zhǔn)》分為A(CD4+＜200 cells/μ l)、B(200≤CD4+≤349 cells/μ l)、C(CD4+≥350 cells/μ l)3組,分組情況為A組31人,年齡(43±12.7)歲,HAART治療時(shí)間(24±12.5)個(gè)月,HAART治療前CD4+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)(70±58.1)cells/μ l;B組13人,年齡(41±11.8)歲,HAART治療時(shí)間(26±13.7)個(gè),HAART治療前CD4+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)(78±67)cells/μ l;C 組13人,年齡(38±10.4)歲,HAART治療時(shí)間(25±12.6)個(gè)月,HAART治療前CD4+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)(110±83)cells/μ l。所有感染者均簽定知情同意書,經(jīng)單位倫理委員會(huì)同意。

1.2 主要儀器與試劑 FC500流式細(xì)胞分析儀(Beckman Coulter公司);GeXP多重基因表達(dá)遺傳分析系統(tǒng)(美國Beckman Coulter);單克隆熒光抗體和Optilyse C溶血素(Beckman Coulter公司);COBAS AMPLICOR自動(dòng)載量儀及配套試劑盒測定病毒載量(美國Roche公司);DNA提取試劑盒(QIAamp DNA Blood Mini Kit,QIAGEN,Germany);GeXP多重基因表達(dá)試劑盒(GenomeLab GeXP Start Kit);Taq酶(Thermo-Start DNA Polymerase with separate 25 mmol/L MgCl2)。

1.3 方法

1.3.1 HIV-1前病毒DNA檢測

1.3.1.1 DNA提取 使用QIAGEN公司的全血DNA提取試劑盒(QIAamp DNA Blood Mini Kit,QIAGEN,Germany)按照產(chǎn)品說明書上的操作步驟提取全血DNA。

1.3.1.2 引物設(shè)計(jì) 應(yīng)用GeXP Express軟件,在NCBI(www.ncbi.nlm.nih.gov/),HIV-Datebase數(shù)據(jù)庫(http://www.hiv.lanl.gov/content/index)分別針對(duì)HIV-1的gag 、env、pol設(shè)計(jì)引物,由上海Invitrogen公司合成,所用引物序列見表1。

1.3.1.3 基因擴(kuò)增 檢測的基因有g(shù)ag、env、gagpol,以Kanr為內(nèi)參基因(1.5×104copies/ml)。逆轉(zhuǎn)錄引物終濃度為500 nmol/L,PCR引物濃度為200 nmol/L,使用 GenomeLab GeXP Start Kit(Beckman Coulter,USA)擴(kuò)增,20 μ l體系中包含4 μ l 25 mmol/L MgCl2,3.5 U Thermo-Start DNA Polymerase(Thermo,USA),0.2 μ mol/L Custom PCR Primer Plex,15 ～ 50 ng DNA 模板 ,4 μ l GeXP Start Kit Buffer(Containing universal tags)。擴(kuò)增(Applied Biosys 9700tem,USA)95℃10分鐘,94℃30秒,55℃30秒,68℃1分鐘,總共35個(gè)循環(huán)。對(duì) PCR產(chǎn)物稀釋(10 mmol/L Tris-HCl pH8.0 為 1∶4)。40 μ l上樣體系中包含 1 μ l PCR 反應(yīng)樣品 ,0.5 μ l DNA Size Standard-400,38.5 μ l Sample Loading Solution和1滴礦物油。在Genome Lab GeXP(Beckman Coulter,USA)上檢測并做Fragment Analysis分析。

1.3.1.4 被測樣本HIV-1前病毒DNA相對(duì)拷貝數(shù)計(jì)算 數(shù)據(jù)經(jīng)GeXP多重基因表達(dá)系統(tǒng)的express軟件自動(dòng)和已知產(chǎn)物分析可以得到各個(gè)PCR擴(kuò)增的大小和濃度后每個(gè)被測基因PCR產(chǎn)物熒光信號(hào)和內(nèi)參基因KanrRNA比較,得到被檢測基因的相對(duì)表達(dá)值(copies/ml)和各個(gè)基因的基因表達(dá)圖譜,最后計(jì)算以HIV-1 DNA的gag、env、gag-pol 3個(gè)基因的平均值作為患者外周血的HIV-1前病毒的相對(duì)表達(dá)值。

1.3.2 T淋巴細(xì)胞亞群細(xì)胞檢測 用FC500流式細(xì)胞分析儀(Beckman Coulter公司)進(jìn)行熒光抗體標(biāo)記檢測。所用單克隆抗體(購自美國Beckman Coulter公司)及其組合為:CD3/CD16±CD56/CD45/CD38/CD8;CD45RA/CD45RO/CD28/CD4/CD45。加入20 μ l試劑和 100 μ l Flow-Count熒光微球至管底 ,加入100 μ l混合均勻的受試對(duì)象抗凝全血至管底,輕柔振蕩混勻后室溫避光孵育15分鐘,加入450 μ l FACS Lysing solution溶解紅細(xì)胞,室溫溶血6～12分鐘。1 700 r/min離心5分鐘,倒掉上清,用1%小牛血清洗液2ml洗滌,1 700 r/min離心5分鐘后,倒掉上清,加入 600 μ l 1%多聚甲醛固定液,上機(jī)檢測。每份樣品經(jīng)五色流式細(xì)胞儀檢測和Coulter MXP/CXP分析法對(duì)T和NK淋巴細(xì)胞進(jìn)行絕對(duì)計(jì)數(shù)和相對(duì)計(jì)數(shù)測定。絕對(duì)計(jì)數(shù)是加入濃度已知的標(biāo)準(zhǔn)微球與標(biāo)本一起測定,流式細(xì)胞儀控制軟件在設(shè)置后能自動(dòng)計(jì)算出濃度。流式細(xì)胞儀獲取數(shù)據(jù)后,由各目標(biāo)群的含量,可以計(jì)算出相對(duì)含量(%)。T細(xì)胞亞群(cells/μ l)=(要計(jì)數(shù)的細(xì)胞總數(shù)/flow count微球總計(jì)數(shù))×flow count微球濃度;T細(xì)胞亞群相對(duì)計(jì)數(shù)(%)=T細(xì)胞數(shù)/淋巴細(xì)胞數(shù)。

1.3.3 HIV-1 RNA載量測定 用K3-EDTA抗凝采血管采集外周靜脈血10 ml,14小時(shí)內(nèi)分離血漿,分裝并保存于-80℃冰箱。嚴(yán)格按照病毒定量檢測儀和COBAS AMPLICORHIV-1MONITORTM 1.5版試劑盒操作說明要求進(jìn)行檢測。檢測范圍50～7 500 000 copies/ml。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS17.0軟件,Kolmogorov-Smirnov Test作正態(tài)適配度檢驗(yàn);單因素方差分析進(jìn)行組間多重比較;Spearman檢驗(yàn)進(jìn)行相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 HIV-1 RNA被有效抑制下各組外周血T細(xì)胞亞群結(jié)果 HIV-1/AIDS患者經(jīng)過HAART持續(xù)治療HIV-1 RNA有效抑制下B、C組的CD3+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)明顯高于A組(P＜0.01);C組的CD8+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)高于B組的(P＜0.05);B、C組的CD4+CD28+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)和相對(duì)計(jì)數(shù)明顯高于A組(P＜0.01),C組的CD4+CD28+絕對(duì)計(jì)數(shù)高于B組(P＜0.05);B、C組的 CD4+CD45RA+T細(xì)胞和CD4+CD45RO+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)明顯高于A組(P＜0.01),C組的CD4+CD45RA+T細(xì)胞和CD4+CD45RO+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)高于B組(P＜0.05),B、C組的CD4+CD45RO+T細(xì)胞相對(duì)計(jì)數(shù)低于A組(P＜0.05);B組、C組的CD8+CD38+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)高于A組(P＜0.05),B組的CD8+CD38+T細(xì)胞相對(duì)計(jì)數(shù)低于A組(P＜0.05);C組的CD38+絕對(duì)計(jì)數(shù)高于A組(P＜0.05)。數(shù)據(jù)見表2、3。

2.2 HIV-1 RNA被有效抑制下各組外周血HIV-1前病毒DNA檢測結(jié)果 A、B、C組的HIV-1前病毒DNA的log拷貝數(shù)分別為3.561±0.297 9,3.605±0.277 6,3.434±0.289 1(copies/ml),3組間無顯著性差異(P＞0.05)。

2.3 HIV-1 RNA被有效抑制下HIV-1前病毒DNA與T細(xì)胞亞群的相關(guān)性 HIV-1前病毒DNA的log拷貝數(shù)與CD4+CD45RA+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05),與CD4+CD45RA+T細(xì)胞相對(duì)計(jì)數(shù)呈明顯負(fù)相關(guān)(P＜0.01),r分別為-0.231、-0270;HIV-1前病毒DNA的log拷貝數(shù)與CD38+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)呈正相關(guān)(P＜0.05),r為0.250。數(shù)據(jù)見表4、圖 1。

表1 引物序列及大小Tab.1 Primer sequences and size

表2 HIV-1 RNA被有效抑制下各組外周血T細(xì)胞亞群絕對(duì)計(jì)數(shù)結(jié)果(cells/μ l)Tab.2 Comparison of T lymphocytes absolute count in different groups with persistently undetectable plasma HIV-1 RNA(cells/μ l)

表3 HIV-1 RNA被有效抑制下各組外周血T細(xì)胞亞群相對(duì)計(jì)數(shù)結(jié)果(%)Tab.3 Comparison of T lymphocytes relative count in different groups with persistently undetectable plasma HIV-1 RNA(%)

圖1 HIV-1 RNA被有效抑制下HIV-1前病毒DNA與T細(xì)胞亞群的相關(guān)性Fig.1 Correlation between T cell and HIV-1 proviral DNA in AIDS individuals with undetectable plasma HIV-1 RNA levels

表4 HIV-1 RNA被有效抑制下HIV-1前病毒DNA與T細(xì)胞亞群的相關(guān)性結(jié)果Tab.4 Correlation between T cell and HIV-1 proviral DNAin AIDS individuals with persistently undetectable plasma HIV-1 RNA levels

2.4 HIV-1 RNA被有效抑制下HIV-1前病毒DNA與HAART持續(xù)治療時(shí)間的相關(guān)性 HIV-1前病毒DNA拷貝數(shù)與HAART持續(xù)治療時(shí)間做相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)兩者無相關(guān)性(R=0.108,P=0.310)。

3 討論

HIV感染人體后CD4+T細(xì)胞成為主要靶細(xì)胞,導(dǎo)致機(jī)體主要免疫病理改變——包括CD4+T細(xì)胞數(shù)量的減少,細(xì)胞功能受損和異常免疫激活等。HAART治療不僅能有效地控制HIV-1 RNA的復(fù)制,延長HIV感染進(jìn)程,使AIDS患者的免疫功能得到一定程度的恢復(fù)。HIV復(fù)制被抑制是免疫重建的主要因素,因?yàn)镠IV儲(chǔ)存庫持續(xù)存在HAART不能根除病毒,免疫系統(tǒng)不可能完全恢復(fù)。本文論述了HIV-1 RNA被有效抑制下T細(xì)胞亞群和HIV-1前病毒DNA的相關(guān)性。

HIV-1前病毒DNA以嵌合或非嵌合的形式存在于T細(xì)胞核內(nèi),一旦停藥后患者血漿中的HIV-1拷貝數(shù)又明顯增高,即產(chǎn)生潛伏性感染。這些細(xì)胞不但成為HIV的保護(hù)屏障,而且作為病毒庫在一定條件下又可產(chǎn)生大量病毒并釋放到血漿中[8,9]。一些學(xué)者認(rèn)為在進(jìn)行1年抗病毒治療后DNA下降[10],而一些學(xué)者則認(rèn)為經(jīng)過幾年的抗病毒治療后DNA仍處于穩(wěn)定水平[11]。我們研究發(fā)現(xiàn)在AIDS患者在接受HAART治療長達(dá)52個(gè)月后外周血中仍可以檢測出HIV-1前病毒DNA,并且經(jīng)過HAART治療后雖然CD4+T細(xì)胞數(shù)量得到不同程度的提高但各組之間HIV-1前病毒DNA拷貝數(shù)沒有差異,同時(shí)HIV-1前病毒DNA拷貝數(shù)與HAART持續(xù)治療時(shí)間無相關(guān)性,提示經(jīng)過長時(shí)間HAART治療HIV-1前病毒DNA可能處于穩(wěn)定狀態(tài),進(jìn)一步結(jié)論需要對(duì)HAART后血漿HIV-1前病毒DNA拷貝數(shù)進(jìn)行動(dòng)態(tài)追蹤觀察。

在本次研究中我們同時(shí)監(jiān)測了HIV-1 RNA血漿拷貝數(shù)、T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)、T細(xì)胞相對(duì)計(jì)數(shù)。在HIV/AIDS臨床檢測中應(yīng)將HIV RNA病毒載量、T細(xì)胞亞群絕對(duì)計(jì)數(shù)和相對(duì)計(jì)數(shù)三者結(jié)合起來。例如在HIV RNA病毒載量保持在檢測限的情況下即使出現(xiàn)CD4+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)的較大下降,應(yīng)該參考其他相關(guān)數(shù)值例如CD4+T細(xì)胞相對(duì)計(jì)數(shù)和CD4/CD8比值,這些數(shù)值通常更穩(wěn)定,更少受到影響。

CD28分子是T細(xì)胞的協(xié)同刺激信號(hào)受體,它通過與抗原提呈細(xì)胞上的B7分子結(jié)合,促進(jìn)T細(xì)胞增殖發(fā)揮特定功能。在T細(xì)胞實(shí)現(xiàn)其正常免疫功能中起著重要作用,若不表達(dá)CD28分子,T細(xì)胞則不能完成其正常的免疫功能,故CD28分子的表達(dá)比例可以作為CD4+T細(xì)胞功能的間接評(píng)價(jià)指標(biāo)[12]。正常人CD4+T細(xì)胞95%以上都表達(dá)CD28分子,AIDS疾病進(jìn)展過程中表達(dá)比例逐漸下降。研究表明經(jīng)過HAART治療后CD4+T細(xì)胞提高至200～349和大于350(cells/μ l)的AIDS患者的CD4+CD28+T細(xì)胞的絕對(duì)、相對(duì)計(jì)數(shù)明顯高于CD4+T細(xì)胞＜200(cells/μ l)的患者(P ＜0.01),同時(shí)CD4+T細(xì)胞 ≥350組的CD4+CD28+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)高于CD4+T細(xì)胞在200～349(cells/μ l)之間的患者(P＜0.01)的患者。結(jié)果提示我們AIDS患者經(jīng)過規(guī)律HAART后隨著CD4+T細(xì)胞的增加,CD4+CD28+T細(xì)胞的絕對(duì)計(jì)數(shù)和相對(duì)計(jì)數(shù)也隨之增加。同時(shí)可以推測CD28分子在CD4+T細(xì)胞上的表達(dá)和CD4+T細(xì)胞數(shù)呈正相關(guān)。

CD45RO和CD45RA是CD45分子的兩種異構(gòu)體。CD4+CD45RA+T細(xì)胞為初始 CD4+T細(xì)胞,CD4+CD45RO+T細(xì)胞為記憶CD4+T細(xì)胞。CD4+CD45RA+T細(xì)胞是未接觸過特異抗原刺激的T淋巴細(xì)胞,初始CD4+T細(xì)胞和記憶CD4+T細(xì)胞在正常人各占約50%,初始CD4+T細(xì)胞經(jīng)特異抗原刺激可變?yōu)橛洃浟馨图?xì)胞[13]。HIV感染進(jìn)程中CD4+初始T細(xì)胞亞群和記憶細(xì)胞亞群的變化十分復(fù)雜,總的趨勢是二者均在不同程度的丟失[14]。已有研究表明HAART開始后CD4+T細(xì)胞數(shù)量的恢復(fù)過程分為兩個(gè)時(shí)相:第一個(gè)時(shí)相發(fā)生在治療開始后的前兩個(gè)月,隨著病毒載量的快速下降主要為CD45RO+T細(xì)胞群增殖,同時(shí)可以觀察到較少的CD45RA+T細(xì)胞亞群增殖。第二時(shí)相發(fā)生在治療開始2～3個(gè)月后,CD4+T細(xì)胞數(shù)量將持續(xù)1年或更長緩慢而穩(wěn)定的上升,主要是初始CD4+T細(xì)胞的增加[15]。本研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)過HAART治療HIV-1 RNA被有效抑制后CD4+T細(xì)胞提高至200～349和CD4+T細(xì)胞≥350(cells/μ l)的患者的CD4+CD45RA+和CD4+CD45RO+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)明顯高于CD4+T細(xì)胞 ＜200(cells/μ l)的患者(P＜0.01);當(dāng)CD4+T細(xì)胞≥350(cells/μ l)時(shí)CD4+CD45RA+和CD4+CD45RO+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)高于CD4+T細(xì)胞在200～349(cells/μ l)之間的患者(P＜0.05);CD4+T細(xì)胞 在200～349之間和CD4+T細(xì)胞大于350(cells/μ l)的CD4+CD45RO+相對(duì)計(jì)數(shù)高于CD4+小于200(cells/μ l,P＜0.05)的患者。結(jié)果提示我們AIDS患者經(jīng)過規(guī)律HAART后隨著CD4+T細(xì)胞的增加,CD4+CD45RA+T細(xì)胞的絕對(duì)計(jì)數(shù)、CD4+CD45RO+T細(xì)胞的絕對(duì)計(jì)數(shù)和表達(dá)比例隨之增加。同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)HIV-1前病毒DNA的log拷貝數(shù)與CD4+CD45RA+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)和相對(duì)計(jì)數(shù)呈明顯負(fù)相關(guān)(P＜0.05,0.01),但各組之間HIV-1前病毒DNA拷貝數(shù)沒有差異,這提示我們HIV-1前病毒DNA拷貝數(shù)的降低可能只是CD4+CD45RA+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)和相對(duì)計(jì)數(shù)增加的原因之一,可能更多與CD4+T細(xì)胞絕對(duì)數(shù)量有關(guān)。

CD38和HLA-DR是處于激活狀態(tài)的T細(xì)胞表達(dá)的標(biāo)志性細(xì)胞膜表面分子。HIV感染后能誘導(dǎo)形成特異性細(xì)胞毒性,CD8+T細(xì)胞上的CD38和HLADR表達(dá)比例增高[16]。HIV感染后T細(xì)胞激活與病毒復(fù)制水平的升高可能是互相促進(jìn)的,一方面病毒復(fù)制速率越快產(chǎn)生的病毒抗原越多,為T細(xì)胞激活提供更多的刺激信號(hào);反過來T細(xì)胞的異常激活又為病毒復(fù)制提供更多的宿主細(xì)胞,促進(jìn)病毒的復(fù)制。另一方面激活的CD8+T細(xì)胞可以破壞HIV感染的CD4+T細(xì)胞,引起CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)的減少[17]。已有研究證實(shí)經(jīng)HAART有效治療的患者體內(nèi)T淋巴細(xì)胞亞群的CD38、HLA-DR表達(dá)減少[18]。我們的研究發(fā)現(xiàn)CD4+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)較大的 B、C組的CD8+CD38+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)高于CD4+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)較小的A組(P＜0.05);C組的CD38+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)高于A組(P＜0.05)。CD8+CD38+T細(xì)胞和CD38+T細(xì)胞的相對(duì)表達(dá)比例在各組間并未出現(xiàn)明顯的差異。意味著CD8+CD38+T細(xì)胞和CD38+T細(xì)胞的相對(duì)表達(dá)比例和CD4+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)可能沒有正相關(guān)性。同時(shí)我們研究發(fā)現(xiàn)HIV-1前病毒DNA的log拷貝數(shù)與CD38+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)呈正相關(guān)(P＜0.05),表明在HIV-1 RNA有效抑制的情況下機(jī)體免疫的異常激活與HIV-1前病毒DNA的持續(xù)表達(dá)有關(guān),意味著只有控制HIV-1前病毒DNA的表達(dá)才能控制CD8+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞等免疫細(xì)胞異?；罨AART后HIV-1 RNA被有效抑制下隨著CD4+T細(xì)胞的增加T細(xì)胞免疫激活和CD4+T細(xì)胞之間的關(guān)系有待我們深入研究。

HIV/AIDS患者在接受HAART治療后T淋巴細(xì)胞亞群在數(shù)量和功能上能得到一定程度的恢復(fù),血漿病毒載量得到有效控制,減少了機(jī)會(huì)性感染和腫瘤的產(chǎn)生。但現(xiàn)有的HAART治療策略包括早期介入、長期使用及HAART聯(lián)合IL-2等都無法清除HIV潛伏儲(chǔ)存庫,在HIV感染者及AIDS患者外周血和組織器官都能檢測出 HIV-1前病毒 DNA[19]。HAART是目前抑制HIV病毒復(fù)制和感染最有效的手段,那么如何實(shí)現(xiàn)抗病毒治療的最終目的即延長病人生命,同時(shí)盡可能保持最好的健康和生活質(zhì)量,如何綜合評(píng)價(jià)HAART治療過程中病毒學(xué)、免疫學(xué)和臨床標(biāo)準(zhǔn)的成功與否都是值得從事HIV/AIDS臨床工作者和藥物研究人員進(jìn)一步思索和關(guān)注的。

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