劉繼倩 宋馳萍 駱玲飛 王海青 歐陽霖

兩種培養(yǎng)基在健康人群中沙門菌檢測的比較

劉繼倩 宋馳萍 駱玲飛 王海青 歐陽霖

目的比較沙門菌科瑪嘉顯色培養(yǎng)基(簡稱CAS)和傳統(tǒng)WS培養(yǎng)基在健康人群體檢中沙門菌檢測的效果。方法用上述兩種培養(yǎng)基對917件肛拭標本進行沙門菌的分離鑒定，比較其分離效果。結果從917件標本中，共分離出18株沙門菌，WS培養(yǎng)基的陽性率為0.55%，CAS培養(yǎng)基的陽性率為1.42%(χ2=6.13，P＜0.05)，二者差異有統(tǒng)計學意義。結論CAS培養(yǎng)基可提高沙門菌的檢出率，是理想的沙門菌選擇性培養(yǎng)基，推薦使用CAS作為分離沙門菌的培養(yǎng)基。

沙門菌;WS培養(yǎng)基;科瑪嘉顯色培養(yǎng)基(CAS)

沙門菌屬是腸桿菌科中一類重要的人畜共患病病原體，食品是其傳播主要媒介［1-3］。至2007年底，發(fā)現(xiàn)的感染沙門菌已近3000個血清型，我國共發(fā)現(xiàn)322個不同血清型。傳統(tǒng)的用于沙門菌分離的培養(yǎng)基都是依據(jù)其生化特性而制定的，如不發(fā)酵乳糖，產(chǎn)生硫化氫等。而法國科瑪嘉公司(CHROM agar)的沙門菌顯色培養(yǎng)基CAS，在其培養(yǎng)基上培養(yǎng)24 h后呈現(xiàn)紫色菌落，腸桿菌科其他菌落呈現(xiàn)無色或藍色。為提高沙門菌檢出率，本文用上述兩種培養(yǎng)基作為沙門菌分離的培養(yǎng)基，比較其分離效果。

1 材料與方法

1.1 標本來源 閔行區(qū)飲食服務及公共衛(wèi)生從業(yè)人員健康體檢，采集肛拭標本共917份。

1.2 培養(yǎng)基及試劑 CAS由法國科瑪嘉微生物技術有限公司(CHROM agar)提供;卡里-布萊爾轉運培養(yǎng)基(Cary Blair TransportMedium)、WS培養(yǎng)基、SF增菌液、腸道雙糖瓊脂等均由上海市疾病預防控制中心提供。沙門菌診斷血清56種，由衛(wèi)生部成都生物制品研究所制備。

1.3 實驗方法 依據(jù)WS 271-2007附錄B《感染性腹瀉診斷標準》。

1.3.1 增菌培養(yǎng) 將肛拭卡里于SF增菌液，37℃培養(yǎng)過夜。

1.3.2 平板分離 將增菌液轉種于WS培養(yǎng)基和科瑪嘉培養(yǎng)基兩種平板上，于37℃培養(yǎng)24 h。則在WS培養(yǎng)基菌落特點為無色半透明，中等大小、圓形、濕潤，邊緣整齊，中心黑色［4］。

1.3.3 生化試驗 挑取可疑菌落轉種到雙糖管作初步篩選，主要觀察生化指標，即葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，甘乳糖+，乳糖-，蔗糖-，硫化氫+，動力+。

1.3.4 血清學分型鑒定 沙門菌的分型鑒定主要采用血清學的方法，按照考夫曼-懷特沙門菌屬抗原表判定菌型鑒定的方法。從營養(yǎng)瓊脂斜面上挑取可疑菌落分別與A-F多價O血清和O因子血清及H因子血清進行玻片凝集試驗［5］，若凝集即為陽性，并用生理鹽水作陰性對照。

2 結果

2.1 兩種培養(yǎng)基陽性率比較 用WS培養(yǎng)基檢出沙門菌的陽性率為0.55%，用CAS培養(yǎng)基檢出沙門菌的陽性率為1.42%，結果表明CAS培養(yǎng)基比傳統(tǒng)的WS培養(yǎng)基檢出沙門菌的陽性率高，(見表1)。

2.2 兩種培養(yǎng)基的可疑陽性率比較 WS培養(yǎng)基可疑陽性率比較為10.91%，CAS培養(yǎng)基可疑陽性率為2.51%，表明WS培養(yǎng)基可疑陽性率明顯高于CAS培養(yǎng)基可疑陽性率，(見表2)。

2.3 可疑陽性中檢出真陽性率5.00%，CAS培養(yǎng)基真陽性率為56.50%，(見表3)。

表2 兩種培養(yǎng)基的可疑陽性率比較(例)

3 討論

3.1 陽性檢出率比較 經(jīng)本次用兩種不同培養(yǎng)基對健康人群肛拭標本中的沙門菌進行檢測，結果是WS培養(yǎng)基的陽性率為0.55%，CAS培養(yǎng)基的陽性率為1.42%，表明用CAS培養(yǎng)基檢測沙門菌的陽性率明顯高于WS培養(yǎng)基，顯示了CAS培養(yǎng)基不僅可提高陽性率，還對于臨床及早發(fā)現(xiàn)傳染源，切斷傳播途徑，防止食物中毒的發(fā)生提供依據(jù)。

3.2 兩種培養(yǎng)基在實際中的應用 目前應用于沙門菌分離培養(yǎng)的培養(yǎng)基很多，絕大多是大腸埃希菌、枸菌菌株在這些培養(yǎng)基上發(fā)育良好，而沙門菌的陽性率偏低。另一方面，用傳統(tǒng)WS培養(yǎng)基分離時，各種菌落形態(tài)、顏色單調(diào)，須憑經(jīng)驗鑒別，特別是不能區(qū)別緩慢發(fā)酵乳糖的菌株，使得可疑菌落太多。

CAS培養(yǎng)基克服了上述諸多的不足，在培養(yǎng)基上形成紫色或紫紅色直徑1 mm的特征性菌落，明顯區(qū)別于其他雜菌，本次試驗沙門菌的可疑陽性率為2.51%，可疑陽性中檢出的真陽性率為56.50%。因此用CAS培養(yǎng)基代替?zhèn)鹘y(tǒng)WS培養(yǎng)基可以減少可疑菌落的挑取，并且可避免對遲緩發(fā)酵乳糖的沙門菌造成的漏檢，還可以提高沙門菌的陽性率。

［1］ 曾曉芳.蓄產(chǎn)品中沙門氏菌污染的檢測與控制.四川畜牧獸醫(yī)，2003，30(4):28-29．

［2］ 王章云.腸炎沙門氏菌引起的食物中毒細菌學調(diào)查.中國人蓄共患病雜志，1999，15(3):155．

［3］ 吳和平.不容忽視的沙門氏菌.國外畜牧科技，1992，19，(2): 50-51．

［4］ 張繆偉，邵燕，吳建中.利用WS瓊脂特殊菌落挑取沙門氏菌.中國衛(wèi)生檢驗雜志，2000，10(2):236．

［5］ 何曉青.衛(wèi)生防疫細菌檢驗.新華社出版社，1989:301-317．

201101上海市閔行區(qū)疾病預防控制中心

表3 可疑陽性中檢出真陽性率比較(例)

注:χ2檢驗χ2=35.68，P＜0.05

培養(yǎng)基 標本數(shù) 陽性數(shù) 可疑陽性率% WS培養(yǎng)基100 5 5.00 CAS培養(yǎng)基 23 13 56.50合計123 18 14.63

根據(jù)上述表和表3，可以判斷出WS培養(yǎng)基可疑陽性率高于CAS培養(yǎng)基可疑陽性率，但從可疑陽性中檢出沙門菌真陽性率要比CAS培養(yǎng)基低。