苑振新

(泰安市腫瘤防治院，山東 泰安 271000)

二氧化碳結合力是指血漿中以碳酸氫根離子形式存在的二氧化碳含量的多少。測定血二氧化碳結合力，在于觀察機體內堿儲備，以了解機體內酸堿平衡情況。酸過多可引起酸中毒，堿過多則引起堿中毒，臨床上酸中毒較堿中毒多見?？梢娝釅A平衡對機體生命活動是十分重要的。

血清二氧化碳結合力(CO2CP)測定的方法很多，如電極法、滴定法、 酶法、 量積法、血氣分析儀法、 熱導法等等。我院使用快速無水銀二氧化碳結合力測定器(量積法)[1]檢測大量非急診標本的CO2CP，用美國貝克曼(Beckman)公司的 CX5檢測急診或單個零散標本的 CO2CP。為了了解兩者的差異，判斷同一標本在兩臺儀器上用不同方法進行檢測時其結果的偏差是否可為臨床所接受，是否具有臨床可比性，筆者參照美國國家實驗室標準委員會(NCCLS)的 EP9-A 文件進行了方法學比較試驗與偏差評估。現報告如下。

1 材料與方法

1.1標本 我院住院患者新鮮血清120份。

1.2材 料

1.2.1儀器 美國貝克曼公司生產的 CX5生化分析儀；快速無水銀二氧化碳結合力測定器。

1.2.2試劑 原裝 Beckman CX5 試劑及其標準品及質控品，標準品批號：1208122(低值)，1208135(中值)，1208142(高值)，質控品批號：M612431(低值)，M612432(中值)，M612433(高值)；快速無水銀二氧化碳結合力測定器質控品(由 RANDOX朗道公司生產)批號：429UN，286UE。試劑為20%乳酸辛醇混合液。

1.3方 法

1.3.1標本選取 每天選取 12 份臨床患者無溶血、脂血、 黃疸的新鮮血清標本，病種多樣化以保證其二氧化碳含量分布范圍足夠寬。

1.3.2操作 常規(guī)開機CX5 以原裝定標液三點定標。每天用 Beckman 和 RANDOX 質控品分別對2 臺儀器進行測定，保證儀器在全面的質量控制下。嚴格按照實驗室操作規(guī)程，將標本一分為二，分別用兩種方法并同時在2 臺儀器上測定其二氧化碳結合力，測定順序為 1→12，12→1，連續(xù)測定15 天，共 120 份標本。

1.4統計學方法 利用 SPSS10.0 統計學軟件建立數據庫，進行統計學分析，采用配對t檢驗、直線回歸與相關分析等。

1.5數據處理

1.5.1離群點檢查 以電極法結果為 X，量積法結果為 Y，計算每份樣本兩種方法測定結果的均值(Xi 和 Yi)；樣本重復測定值間差值的絕對值(DXi 和 DYi)及平均數，兩種方法測定結果均值間差值(Yi-Xi)及其平均數。標本數至少為 40 例。

1.5.2繪制散點圖 以電極法測定值為 X，量積法測定值為分析Y 作圖，并標出斜率為 1 通過零點的直線。如果實驗結果線性關系良好，則繼續(xù)處理。如果呈非線性趨勢，尋找修正點，使余下的部分呈線性趨勢，若去掉非線性部分后，范圍過小，無應用價值，則應停止評價。

1.5.3標本內二氧化碳結合力值分布寬度是否適當 檢驗計算相關系數r，若r≥0.975 或r2≥0.950，則認為分析物含量分布寬度合適，直線回歸統計的斜率和截距可靠；若r<0.975，則說明實驗精密度較差和(或)分析物含量分布不合適，直線回歸統計的斜率和截距不可靠，需擴大數據范圍或改善方法的精密度后再重新實驗。

1.5.4直線回歸分析 計算直線回歸方程 Y=a+bX。a 為回歸直線在 Y 軸上的截距，代表恒定誤差大??；b 為回歸系數，即直線的斜率，代表比例誤差大小。如果兩方法表示某分析物量具有相同的計量單位時，理想狀態(tài)的回歸式應為 Y=X，即a=0，b=1，b≠1，a≠0 分別表示兩方法間的測定標本時的比例誤差和恒定誤差。

1.5.6配對t檢驗 本試驗的數據屬于配對資料，因此可以進行配對t檢驗。

1.5.7計算預期偏差和相對偏差 預期偏差 Bc=a+(b-1)Xc，Xc 即醫(yī)學決定水平端點[根據臨床使用要求，將 CO2CP給定的兩個醫(yī)學決定水平濃度值 Xc1(20 mmol/L)和 Xc2(30 mmol/L)；相對偏差(SE%)=Bc/Xc×100%〗。

1.5.8臨床可接受性評價 按照 Tonks 的理論計算允許總誤差%=±(1/4)[(參考值上界 - 參考值下界)/ 參考值均值〗×100%[2]。由方法學比較評估的 SE%≤1/2 允許總誤差(%)屬臨床可接受水平，即兩種方法間的檢測結果具有可比性[3]。

2 結 果

2.1離群點檢查。見表 1。

表1 兩種方法測定值差值的均值及控制限

經檢查，無超出上述控制限的測定點值，無離群點產生，繼續(xù)評價。

2.2相關性分析

以電極法二氧化碳結合力測定值(mmol/L)為 X，量積法二氧化碳結合力值(mmol/L)為 Y ，其產生的線性回歸方程為：Y=0.958X+0.720，a=0.720，b=0.958檢測兩方法間的相關系數 =0.981，>0.975，說明回歸統計的斜率和截距可靠，可以繼續(xù)評價。用它們去估計不同檢測系統間的系統誤差，并以醫(yī)學決定水平處的系統誤差來判斷兩個檢測系統間是否具有可比性。

對相關系數r作t檢驗。tr=25.8，查t界值表得：t0.05(78)=1.990，t0.01(78)=2.639則tr>t0.05(78)，t0.01(78)，P<0.05，P<0.01，由此說明兩種方法測定值之間存在著高度相關關系。

2.3配對樣本均數的t檢驗 其中υ=n-1，d 為兩種方法測定值均值的差值，n為配對數，代入數值計算t=1.871，P>0.05，結果說明兩種方法測定值的差別無統計學意義。

2.4系統誤差計算與臨床可接受性判斷

表2 兩種方法結果的預期偏差與相對偏差

如表 2 所示，根據兩種方法的線性回歸方程 Y=0.958 X+0.720，a=0.720，b=0.958，在醫(yī)學決定水平 Xc1=20 mmol/L 和Xc2=30 mmol/L 時分別計算其預期偏差和相對偏差；Tonks 理論允許總誤差(%)=1/4(29-22)/25.5×100%=6.82%，取 1/2 為3.41%(其中 29 mmol/L 和 22 mmol/L 分別為 CO2CP 的參考值上限和下限)。在兩個醫(yī)學決定水平處，兩種實驗方法之間的相對偏差均小于允許偏差，說明兩種方法在本次試驗所得數據范圍內具有可比性，其結果的差異可為臨床所接受。

3 討 論

3.1因實際臨床工作的需要，檢驗科常常有多種儀器用不同方法來檢測相同的項目，各個檢測系統對同一份標本的同一項目檢測結果應具有可比性。臨床患者血清 CO2CP 在我科室由 2 臺儀器(快速無水銀二氧化碳結合力測定器和美國貝克曼 CX5 生化儀)、兩種方法(量積法和電極法)測定。那么如何確定這 2 臺儀器對 CO2CP 的結果具有可比性呢？根據對患者標本進行方法學比較的標準化途徑[4]，筆者對本科室檢測血清 CO2CP 兩種方法進行了比對，顯示兩種方法的檢測結果具有可比性，其差異能被臨床所接受。

3.2本試驗結果得出相關系數r=0.981，說明 X 取值范圍合適，直線回歸統計的斜率和截距可靠，可以繼續(xù)評價。本試驗還做了r的t檢驗，結果顯示實測相關系數確實和0之間有非常顯著的差異，而此差異并不是由抽樣誤差所造成的。由兩種方法的散點圖和直線回歸方程的計算也可以看到在 14.0～35.0 mmol/L 范圍內，相關性良好。

3.3對于允許偏差，現在一般是以 1/2CLIA88 為限值。針對 CLIA88 中目前沒有規(guī)定的項目，筆者選用了 Tonks 的理論，由于其允許偏差以參考值范圍表示，更有臨床實用意義，而且如果能用比較方法所確立的參考值范圍來計算，所得到的允許偏差值就更符合實際。本試驗結果顯示，在兩個醫(yī)學決定水平處 (20 mmol/L 和 30 mmol/L)，2 組結果的相對偏差為0.5%，1.7%，均小于允許偏差 3.41%，說明兩種方法在本次試驗所得數據范圍內具有可比性，其結果的差異可為臨床所接受。

3.4本試驗數據屬于配對資料，因此筆者還對兩者做了配對t檢驗，結果顯示差別并無統計學意義。

不同檢測系統可比性試驗也是申請 ISO/IEC 17025 和 ISO15189 實驗室認可必不可少的內容[5]。通過比對試驗，我們清楚地看到，不同的檢測系統之間是否存在偏倚，從而更準確有效地對結果進行分析。當同一個實驗室同一檢驗項目存在 2 個及以上的檢測系統時，應進行方法比對和偏差評估，判斷其臨床可接受性，以保證檢驗結果的可比性。

[1] 苑振新.無水銀二氧化碳結合力測定器的研制[J]，醫(yī)學檢驗與臨床，2012,23(3):277.

[2] 申子瑜，李萍.臨床實驗室管理學[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2003：46.

[3] 叢玉隆，馮仁豐，陳曉東,等.臨床實驗室管理學[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2004：117.

[4] National committee for clinical labortory standards.Method comparison and bias estimation using patient samples；approved guideline-second edition [S].NCCLS document EP9-A2.Wayne，PA:NCCLS，2002，22(19)：4-18.

[5] 中國實驗室國家認可委員會技術委員會醫(yī)學分委員會.醫(yī)學實驗室質量管理與認可指南[S].北京：中國計量出版社，2004：72-75.