任娟 耿祥飛

麻杏止咳片的薄層鑒別及HPLC含量測(cè)定研究

任娟1耿祥飛2

目的建立麻杏止咳片中麻黃的薄層鑒別及麻黃堿含量的測(cè)定方法。方法采用薄層色譜法對(duì)麻黃進(jìn)行鑒別;采用高效液相色譜法對(duì)麻黃堿進(jìn)行含量測(cè)定。結(jié)果在薄層色譜上供試品與對(duì)照品及對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上顯相同的顏色斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無相應(yīng)斑點(diǎn)。鹽酸麻黃堿HPLC測(cè)得中線性關(guān)系良好(r=0.9995)。結(jié)論本法簡便、可靠、準(zhǔn)確，可用于該制劑的質(zhì)量控制。

麻杏止咳片;薄層鑒別;高效液相色譜法

引言

麻杏止咳片主要由麻黃、苦杏仁、石膏、炙甘草等四味中藥組成，其功效是鎮(zhèn)咳，祛痰，平喘。麻杏止咳片中的含量影響到用藥安全問題，故對(duì)麻杏止咳片中麻黃堿的含量測(cè)定具有重要意義［1］。本實(shí)驗(yàn)選取麻黃建立一種簡單、方便、可行的薄層鑒定方法，對(duì)麻杏止咳片中的麻黃進(jìn)行鹽酸麻黃堿的HPLC含量測(cè)定，采用薄層色譜對(duì)方中君藥麻黃進(jìn)行鑒別和采用高效液相色譜法測(cè)定其鹽酸麻黃堿，為建立該制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了依據(jù)［2－3］。

1.材料與儀器

鹽酸麻黃堿對(duì)照品，購自中國藥品生物制品檢定所。

LC－2010C高效液相色譜儀(日本島津)，UV－2450紫外分光光度計(jì)，薄層板加熱器(瑞士Precisa);

2.方法與結(jié)果

(1)麻黃的薄層鑒別

①供試品溶液的制備

取本品8片，研細(xì)，加濃氨試液10滴與氯仿20ml，超聲處理20分鐘，濾過揮干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。

②陰性對(duì)照溶液的制備

按麻杏止咳片的工藝制成陰性樣品，再按“①”操作，得對(duì)照溶液。

③對(duì)照藥材的制備

取麻黃對(duì)照藥 1g，加甲醇 10ml，超聲處理20min，濾過蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。

④對(duì)照品溶液的制備

取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加甲醇制成溶液，作為對(duì)照品溶液。

⑤薄層層析及結(jié)果

照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液10μl、陰性對(duì)照溶液10μl、對(duì)照藥材溶液和對(duì)照品溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑鋪制的硅膠G薄層板上，以氯仿－甲醇－濃氨試液(20∶5∶0.5)為展開劑，噴以茚三酮試液，于105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜和對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗紅色斑點(diǎn)，陰性樣品無干擾(見圖1)。

圖1:(1－3.麻杏止咳片樣品;4.麻黃對(duì)照藥材;5.麻黃堿對(duì)照品;6.陰性對(duì)照品)

(2)鹽酸麻黃堿的含量測(cè)定

①色譜條件

色譜柱:Diamonsil C18(250mm ×4.6mm，5μm);流動(dòng)相:乙腈- 水(1mL·L－1磷酸和 1mL·L－1三乙胺)3:97;流速 1mL·min－1;檢測(cè)波長207nm。

②供試品溶液的制備

取本品10片，研細(xì)粉約0.5g加入濃氨試液1.5ml，振搖，加三氯甲烷 50ml，超聲(120W，40KHz)30min，至室溫，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液10ml，加0.1%鹽酸甲醇溶液2ml，搖勻，即得。

③對(duì)照品溶液的制備

稱取麻黃堿對(duì)照品10.04mg，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

④陰性對(duì)照品溶液的制備

按“②”供試品溶液的制備方法操作，制成陰性對(duì)照溶液。

⑤測(cè)定波長的選擇

麻黃堿對(duì)照品在207nm波長處有最大吸收，故選擇207nm為本品的測(cè)定波長(見圖2)。

圖2 鹽酸麻黃堿對(duì)照品紫外光譜圖(甲醇)

⑥系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)

與供試品溶液色譜和鹽酸麻黃堿對(duì)照品色譜比較，結(jié)果表明陰性樣品無干擾(見圖3)。

圖3 麻杏止咳片HPLC圖

注:A為鹽酸麻黃堿對(duì)照品色譜圖;B為供試品溶液色譜圖;C為陰性溶液色譜圖.

結(jié) 論

經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明，對(duì)麻杏止咳片中麻黃的薄層鑒別，其斑點(diǎn)清晰，展開效果好。采用HPLC法對(duì)鹽酸麻黃堿進(jìn)行含量測(cè)定，方法重復(fù)性好，靈敏度高，定量準(zhǔn)確，分離度高，可作為麻黃止咳片質(zhì)量控制方法之一，為麻杏止咳片的質(zhì)量控制和開發(fā)提供參考依據(jù)。

1 國家中醫(yī)藥管理局中華本草編委會(huì).中華本草(精選本)［M］.上海:上?？萍汲霭嫔?，1998:830.

2 吳貽清，郭長強(qiáng)，程琳，等.麻黃中麻黃堿薄層層析檢測(cè)方法選擇［J］.時(shí)珍國醫(yī)國藥，1999，10(7):553-554.

3 Haller CA，Benowitz NL.Adverse cardiovascular and central nervous system events associated with dietary supplements containing ephedra alkaloids［J］.N Engl J Med，2000，343(25):1833-1838.

1.100088 中國人民解放軍第二炮兵總醫(yī)院呼吸科北京2.Biosphere生物技術(shù)有限公司 北京