王三忠

甘肅省蘭州市紅古區(qū)窯街煤電集團(tuán)有限公司總醫(yī)院，甘肅 蘭州 730000

3－氯－7－氨基去乙酰氧基頭孢烷酸中殘留溶劑氣相色譜法分析

王三忠

甘肅省蘭州市紅古區(qū)窯街煤電集團(tuán)有限公司總醫(yī)院，甘肅 蘭州 730000

目的:探討氣相色譜法測定3－氯－7－氨基去乙酰氧基頭孢烷酸中殘留溶劑的效果。方法:采取了氣相色譜分析儀與氫火焰離子化測量儀與HP ChemStation軟件進(jìn)行分析，以30m×0.32mm、0.25μm的毛細(xì)管色譜柱進(jìn)行分析，柱溫度從70攝氏度開始，持續(xù)6分鐘，之后以每分鐘10攝氏度的速度加溫，直至160攝氏度，保持1分鐘。載體氣體為純度在99.99%以上的高純度氮?dú)?，測定雜質(zhì)含量。結(jié)果:樣品測定液進(jìn)樣，外標(biāo)法計(jì)算得丙酮?dú)埩袅繛?.0012%。因此7－ACCA樣品中殘留溶劑符合要求。討論:氣相色譜法能夠有效測定3－氯－7－氨基去乙酰氧基頭孢烷酸中雜質(zhì)的含量，對于殘留量控制具有極高的價(jià)值。

3－氯－7－氨基去乙酰氧基頭孢烷酸;殘留溶劑;氣相色譜法

本文通過氣相色譜分析法對7－ACCA中殘留的溶劑進(jìn)行檢測，對結(jié)果進(jìn)行分析。

1 資料與方法

1.1 儀器與試劑

本次研究采取了氣相色譜分析儀與氫火焰離子化測量儀與HP ChemStation軟件。研究中所有的水均為純凈水。7－ACCA藥物由浙江砝碼醫(yī)藥公司提供，其他殘留溶劑甲醇、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷、異丁醇、甲苯、吡啶、丁酮、二甲基甲酰胺、二甲亞砜均為分析純。

1.2 檢測方法

以30m×0.32mm、0.25μm的毛細(xì)管色譜柱進(jìn)行分析，柱溫度從70攝氏度開始，持續(xù)6分鐘，之后以每分鐘10攝氏度的速度加溫，直至160攝氏度，保持1分鐘。載體氣體為純度在99.99%以上的高純度氮?dú)猓魉僭O(shè)置為每分鐘1.0毫升，氣化室溫度為200攝氏度，檢測器溫度設(shè)置為250攝氏度，氫氣流蘇設(shè)置為每分鐘40毫升，空氣的流速為每分鐘400毫升，尾吹氣為氮?dú)猓魉贋槊糠昼?5毫升，分流比為10/1。進(jìn)樣方式為手動(dòng)，進(jìn)樣體積為1μl。

1.3 溶液制備

1.3.1 定位溶液

溶液1～8:吸取方式保持足夠的精密度，吸取630μl密度為0.79丙酮、380μl密度為0.79的甲醇、45μl密度為1.32的二氯甲烷、555μl密度為0.90的乙酸乙酯、620μl密度為0.81的異丁醇、20μl濃度為0.98的吡啶、內(nèi)標(biāo)400μl的丁酮、100μl密度為0.87的甲苯，分別將溶液放在100毫升的量瓶內(nèi)，加水稀釋，充分混合后獲得100毫升溶液，1～8號定位溶液的質(zhì)量濃度分別為每毫升5mg、3mg、0.6 mg、5 mg、5 mg、0.2 mg、0.32 mg、0.87 mg。

1.3.2 限量對照溶液

溶液1～7:吸取方式保持足夠的精密度，吸取620μl丙酮、380μl甲醇、45μl二氯甲烷、555μl乙酸乙酯、620μl異丁醇、20μl吡啶、內(nèi)標(biāo)400μl的丁酮，分別將溶液放在100毫升的量瓶內(nèi)，加水稀釋，充分混合后獲得100毫升溶液為對照溶液1～7。溶液8:吸取方式保持足夠的精密度，吸取0.5ml甲苯注入50毫升量瓶，加DMF稀釋搖勻后獲得甲苯貯備液50毫升，精密吸取5毫升貯備液置入50毫升量瓶，加水稀釋搖勻，獲得對照溶液8。將對照溶液1～8精密吸取1毫升，置入1個(gè)10毫升量瓶，加水稀釋獲得10毫升限量對照溶液。

1.3.3 對照系列溶液

分別精密吸取 630μl丙酮、380μl甲醇、45μl二氯甲烷、555μl乙酸乙酯、620μl異丁醇、20μl吡啶、內(nèi)標(biāo)400μl丁酮、甲苯貯備溶液10 ml，置入1個(gè)10毫升量瓶，搖勻獲得對照液5;取對照液5稀釋5倍作為對照液4，取對照液4稀釋2倍作為對照液3，取對照液3稀釋l倍作為對照液2，取對照液2稀釋1倍作為對照液l。

1.3.4 試樣溶液

精密稱取樣品1g，置于10毫升量瓶，加水在超聲冰浴10分鐘后定容，以每分鐘3000轉(zhuǎn)進(jìn)行離心處理3分鐘，去上部清液。根據(jù)2010版中國藥典附錄第三法進(jìn)行測定。

2 結(jié)果

取定位溶液分別進(jìn)樣測定，獲得各有機(jī)溶劑的保留時(shí)間;然后，取限量對照溶液進(jìn)行系統(tǒng)適用性試驗(yàn)。各組分色譜峰的理論板數(shù)均＞70000，分離度＞1.5，與內(nèi)標(biāo)丁酮的相對保留時(shí)間 (RRT)與中國藥典 (2010)提供的參考值基本一致。逐步稀釋對照品溶液，按上述方法測定，當(dāng)信噪比為2時(shí)，測得檢測結(jié)果。樣品中各溶劑的檢出量遠(yuǎn)低于中國藥典規(guī)定量。樣品測定液進(jìn)樣，外標(biāo)法計(jì)算得丙酮?dú)埩袅繛?.0012%。因此，7－ACCA樣品中殘留溶劑符合要求。

3 討論

3－氯－7－氨基去乙酰氧基頭孢烷酸 (7－ACCA)是半合成頭孢類抗生素的一種重要中間體。是醫(yī)藥工業(yè)合成頭孢氨芐、頭孢拉定、頭孢克洛和頭孢羥氨芐等藥物不可缺少的中間體。而在合成過程中可能存在多種雜質(zhì)的殘留，在產(chǎn)品質(zhì)量控制的過程中需要保證有機(jī)殘留物的含量不超過標(biāo)準(zhǔn)。

由于生產(chǎn)過程中采用o—苯甘氨酸 (頭孢羥氨芐采用o—羥基苯甘氨酸)和7—氨基去乙酰氧基頭孢烷酸縮合的工藝，故成品中可能引入上述兩種物質(zhì)和其他雜質(zhì)?！吨袊幍洹酚帽由V法控制其限量，由于這些雜質(zhì)具o—氨基酸的性質(zhì)，可用茚三酮作顯色劑。測定p—內(nèi)酰胺類抗生素藥物含量測定的方法文獻(xiàn)報(bào)道很多，主要為理化測定方法。本章以《中國藥典》收載方法為主，討論酸堿滴定法、碘量法、汞量法，紫外分光光度法及高效液相色譜法等。

［1］馬麗，姚彤煒.氣相色譜法測定3－氯－7－氨基去乙酰氧基頭孢烷酸中殘留溶劑［J］.浙江大學(xué)學(xué)報(bào) (醫(yī)學(xué)版)，2011，40(1):40－43.

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