周永嘉，韓 翌，謝云崢

(上海市血液中心采供血技術(shù)部，上海 200051)

不同檢測(cè)方法在無(wú)償獻(xiàn)血篩選ALT中的應(yīng)用評(píng)價(jià)

周永嘉，韓 翌，謝云崢

(上海市血液中心采供血技術(shù)部，上海 200051)

［目的］尋求一種適合應(yīng)用于血液中心無(wú)償獻(xiàn)血血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)篩選的檢測(cè)方法，以達(dá)到節(jié)約血源，大幅度降低因ALT不合格造成的血液報(bào)廢。［方法］用MissionTMC100干式生化分析儀(艾康)、Reflotron plus快速全自動(dòng)干式生化分析儀(羅氏)、microlab 300半自動(dòng)生化分析儀(威圖)3種儀器分別測(cè)100例獻(xiàn)血者的ALT，并分別與日立7600－010全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行比較。［結(jié)果］與全自動(dòng)生化儀測(cè)試結(jié)果相比，艾康干式法χ2=2.25，相關(guān)性r=0.9550;羅氏 χ2=4.167，相關(guān)性r=0.9724;威圖半自動(dòng) χ2=0.25，相關(guān)性r=0.9695。［結(jié)論］威圖半自動(dòng)生化分析儀結(jié)果良好，相關(guān)性好，與日立7600－010相比無(wú)明顯差異;艾康與羅氏應(yīng)適當(dāng)調(diào)整臨界值，艾康應(yīng)調(diào)為35 U/L，羅氏應(yīng)調(diào)為34 U/L。

無(wú)償獻(xiàn)血;檢測(cè)方法;丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶;速率法;干化學(xué)法

血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)是診斷肝臟功能的重要指標(biāo)，在肝炎的臨床診斷及防治方面具有重要的臨床意義，同時(shí)也是《獻(xiàn)血者健康檢查要求》［1］規(guī)定的一項(xiàng)檢測(cè)項(xiàng)目。由于《中華人民共和國(guó)獻(xiàn)血法》的正式實(shí)施，近年來(lái)無(wú)償獻(xiàn)血的人數(shù)與日俱增，但其中由于ALT不合格而報(bào)廢的血液數(shù)量卻不容忽視。ALT缺乏特異性，體重指數(shù)、飲酒、運(yùn)動(dòng)、疲勞、服用藥物等均會(huì)影響其活性［2］，在不同性別以及年齡組間的差異亦具有顯著性意義［3］，因此由于ALT的報(bào)廢而造成的血源浪費(fèi)日益嚴(yán)重。為了節(jié)約血液資源和確保臨床用血安全，必須尋求一種檢測(cè)方法既能檢測(cè)出不合格的血液以減少輸血相關(guān)疾病的傳播又能合理利用血液資源使報(bào)廢血量減少?；诖四康?，本研究收集了250名獻(xiàn)血者的血液標(biāo)本，用3種不同的方法進(jìn)行了檢測(cè)并與全自動(dòng)生化儀的結(jié)果進(jìn)行比對(duì)，現(xiàn)將結(jié)果分析如下。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源

本實(shí)驗(yàn)250個(gè)血液標(biāo)本來(lái)自于上海市血液中心250名無(wú)償獻(xiàn)血者。

1.2 儀器與試劑

1.2.1 干化學(xué)試紙條法

本實(shí)驗(yàn)分別采用MissionTMC100干式生化分析儀和其專用試紙條(艾康生物技術(shù)有限公司試紙條批號(hào)200912019)以及Reflotron plus快速全自動(dòng)干式生化分析儀和其專用試紙條(德國(guó)羅氏公司試紙條)，分別按照操作要求吸取30μL血樣(血清或末梢血)到試紙條上，放入測(cè)試槽中，約2 min自動(dòng)讀取結(jié)果。

1.2.2 半自動(dòng)生化儀法(速率法)

用荷蘭威圖Microlab300半自動(dòng)生化分析儀和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定試劑盒(上海復(fù)興長(zhǎng)征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司試劑批號(hào)L090543)，測(cè)定波長(zhǎng)340 nm。

1.2.3 全自動(dòng)生化分析儀法

用日立7600－010全自動(dòng)生化分析儀和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑盒(和光)，測(cè)定波長(zhǎng)340 nm。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 干化學(xué)試紙條法

取100名獻(xiàn)血者的毛細(xì)血管血30μL分別用上述艾康與羅氏干式生化分析儀測(cè)試ALT，再用全自動(dòng)生化儀測(cè)試該100名獻(xiàn)血者的血清ALT，以全自動(dòng)生化儀測(cè)試結(jié)果為準(zhǔn)，分別用艾康和羅氏的定性結(jié)果與全自動(dòng)生化儀的定性結(jié)果進(jìn)行比較。檢測(cè)值＞40 U/L為陽(yáng)性。

1.3.2 半自動(dòng)生化儀法(速率法)

用上述威圖半自動(dòng)生化分析儀測(cè)試另外100名獻(xiàn)血者的血清ALT，再用全自動(dòng)生化儀測(cè)試該100名獻(xiàn)血者的血清ALT，以全自動(dòng)生化儀測(cè)試結(jié)果為準(zhǔn)，用威圖半自動(dòng)定性結(jié)果與全自動(dòng)生化分析儀定性結(jié)果進(jìn)行比較。檢測(cè)值＞40 U/L為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用配對(duì)χ2檢驗(yàn)以及直線相關(guān)－回歸分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 干化學(xué)試紙條法結(jié)果

干化學(xué)試紙條法測(cè)試100份毛細(xì)血管血ALT結(jié)果見表1。

表1 干化學(xué)試紙條法與全自動(dòng)法測(cè)定ALT結(jié)果比較Tab 1 Dry chemistry method and full automatic method for the determination of ALT results comparison (n=100)

艾康干式法與和光全自動(dòng)法進(jìn)行配對(duì)χ2檢驗(yàn)，χ2=2.25，查表得出 0.100 ＜P＜0.250，艾康定性結(jié)果與和光結(jié)果差異無(wú)顯著性意義;羅氏干式法與和光全自動(dòng)進(jìn)行配對(duì) χ2檢驗(yàn)，χ2=4.167，查表得出0.025＜P＜0.05，差異有顯著性意義。

2.2 半自動(dòng)生化儀(速率法)結(jié)果

半自動(dòng)法測(cè)試100份血清ALT結(jié)果見表2。

表2 半自動(dòng)法與全自動(dòng)法測(cè)定ALT結(jié)果比較Tab 2 Semi automatic and fully automatic method for the determination of ALT results comparison (n=100)

用威圖半自動(dòng)法與和光全自動(dòng)法進(jìn)行配對(duì)χ2檢驗(yàn)，χ2=0.25，查表得出 0.500 ＜P＜0.750，威圖半自動(dòng)定性結(jié)果與和光全自動(dòng)法結(jié)果差異無(wú)顯著性意義。

2.3 干化學(xué)法相關(guān)－回歸分析

2.3.1 艾康干式法相關(guān)－回歸分析

以和光結(jié)果為X軸，艾康結(jié)果為Y軸作XY散點(diǎn)圖，見圖1，可見散點(diǎn)圖呈直線趨勢(shì)，相關(guān)系數(shù)r=0.9550。

圖1 艾康－和光散點(diǎn)圖Fig 1 ACON－WAKO scatter diagram

2.3.2 羅氏干式法相關(guān)－回歸分析

以和光結(jié)果為X軸，羅氏結(jié)果為Y軸作XY散點(diǎn)圖，見圖2，可見散點(diǎn)圖呈直線趨勢(shì)，相關(guān)系數(shù)r=0.9724。

圖2 羅氏－和光散點(diǎn)圖Fig 2 Roche－WAKO scatter diagram

2.4 半自動(dòng)法相關(guān)－回歸分析

以和光結(jié)果為X軸，威圖半自動(dòng)結(jié)果為Y軸作XY散點(diǎn)圖，見圖3，可見散點(diǎn)圖呈直線趨勢(shì)，相關(guān)系數(shù)r=0.9695。

圖3 威圖－和光散點(diǎn)圖Fig 3 VITALAB－WAKO scatter diagram

2.5 血清校準(zhǔn)法與和光全自動(dòng)結(jié)果比較

本實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析得出威圖半自動(dòng)法與全自動(dòng)生化法相比差異無(wú)顯著性意義，且相關(guān)性較好;艾康干式法與全自動(dòng)生化法相比差異無(wú)顯著性意義而羅氏干式法則與全自動(dòng)生化法結(jié)果間差異存在顯著性意義，但從相關(guān)性上來(lái)看，羅氏干式法的相關(guān)性卻又優(yōu)于艾康干式法。通過觀察實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn)，艾康干式法、羅氏干式法相對(duì)于全自動(dòng)生化法的結(jié)果普遍偏低，那么相應(yīng)的降低干式法的檢測(cè)臨界值便可以解決干式法的漏檢問題。

為了計(jì)算新的臨界值，本研究用干式血清法對(duì)兩種干式法進(jìn)行校準(zhǔn)，分別用艾康干式生化儀和羅氏干式生化儀再測(cè)定了50名和光檢測(cè)值處于臨界值附近的獻(xiàn)血者的血清ALT，結(jié)果見表3。

表3 血清校準(zhǔn)法與和光全自動(dòng)結(jié)果比較Tab 3 Serum calibration method and fully automatic result comparison (n=50)

對(duì)以上結(jié)果進(jìn)行配對(duì)χ2檢驗(yàn)，艾康χ2=16.056，P＜0.005，羅氏 χ2=13.067，P＜0.005，艾康與羅氏血清法均與和光全自動(dòng)法結(jié)果差異存在顯著性意義，兩種干式法的值均比和光全自動(dòng)的值偏低。

2.5.1 直線回歸分析

以和光全自動(dòng)的值為X軸，分別以艾康干生化和羅氏干生化的值為Y軸做XY散點(diǎn)圖，見圖4，圖5。

圖4 艾康－和光(血清)散點(diǎn)圖Fig 4 ACON－WAKO scater diagram(serum)

圖5 羅氏－和光(血清)散點(diǎn)圖Fig 5 Roche－WAKO scatter diagram(serum)

艾康干式法和羅氏干式法的值與和光全自動(dòng)的值呈直線相關(guān)。通過計(jì)算得出艾康－和光的直線回歸方程為：y=6.8444+0.6963x;羅氏－和光的直線回歸方程為：y= －4.4364+0.9481x，代入和光的臨界值40 U/L，可以計(jì)算出艾康的臨界值應(yīng)調(diào)整至35 U/L，羅氏的臨界值應(yīng)調(diào)整至34 U/L。

由于在實(shí)際工作中，獻(xiàn)血者不愿為了測(cè)試ALT等太長(zhǎng)時(shí)間以及測(cè)定血清ALT操作復(fù)雜費(fèi)時(shí)等等原因，測(cè)毛細(xì)血管血ALT仍是主流，將新的臨界值帶回之前毛細(xì)血管血的測(cè)定，得出結(jié)果見表4。

表4 新臨界值干化學(xué)法與全自動(dòng)法測(cè)定ALT結(jié)果比較(羅氏≤34艾康≤35)Tab 4 New critical value of dry chemicalmethod and fully automatic method for the determination of ALT results comparison

對(duì)此結(jié)果進(jìn)行配對(duì)χ2檢驗(yàn)，P＞0.05，兩種方法與和光全自動(dòng)法相比，差異均不再有顯著性意義。

3 討論

一項(xiàng)調(diào)查證實(shí)，ALT活性增高的原因甚至與血標(biāo)本存放的溫度、時(shí)間均有密切的關(guān)系［4］，由于ALT缺乏特異性，為此某些國(guó)家篩查獻(xiàn)血者時(shí)ALT為非必檢項(xiàng)目［5］;但由于ALT活性濃度的檢測(cè)彌補(bǔ)了肝炎病毒感染的“窗口期”抗體檢測(cè)漏檢問題，因此ALT的檢測(cè)對(duì)于降低輸血風(fēng)險(xiǎn)，預(yù)防肝炎傳播依舊具有積極的意義［6］。

本研究采用不同方法對(duì)250例血液樣本進(jìn)行ALT測(cè)定，結(jié)果提示：威圖半自動(dòng)生化分析儀結(jié)果良好，相關(guān)性好，與日立7600－010全自動(dòng)生化分析儀相比無(wú)明顯差異;艾康干式法與羅氏干式法應(yīng)適當(dāng)調(diào)整臨界值，艾康應(yīng)調(diào)為35 U/L，羅氏應(yīng)調(diào)為34 U/L，這樣既能檢測(cè)出不合格的血液以減少輸血相關(guān)疾病的傳播又能合理利用血液資源使報(bào)廢血量減少，具有良好的社會(huì)效益，適用于血液中心ALT初篩。

［1］中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn).獻(xiàn)血者健康檢查要求［S］.GB18467－2001.

［2］Lee DH，Ha MH，Christiani DC.Body weight，alcohol consumption and liver enzyme activity－a 4－year followstudy［J］.Int JEpidemiol，2001，30(4)：766 －770.

［3］Dufour DR，Lott JA，Nolte FS，et al.Diagnosis and monitoring of hepatic injury.Ⅱ.Re－Commendation for use on laboratory tests in screening，diagnosis，and monitoring［J］.Clin Chemi，2000，46(12)：2050 －2068.

［4］劉正敏，李健.血樣標(biāo)本存放溫度和時(shí)間對(duì)ALT檢測(cè)結(jié)果的影響［J］.中國(guó)輸血雜志，2005，18(2)：123 －125.

［5］Van del pocl C，Noel L，Bar Bara J，etal.ISBA working party on transmissible diseases：report on workshop infectious diseas testing ane quality contro［J］.Vox Sang，1996，70：53.

［6］許友山，余偉.檢測(cè)血清ALT四種不同方法的比較分析［J］.實(shí)用醫(yī)技雜志，2006，13(20)：3603 －3604.

Evaluation of different inspection methods for ALT screening in blood donation

ZHOU Yong－jia，HAN Li，XIE Yun－zheng
(Blood Collecting and Supplying Technical Department，Shanghai Blood Center，Shanghai200051，China)

［Objective］Through comparing the results of different inspectionmethods，seeking a suitable inspectionmethod for ALT screening in blood centre for blood donation，to save the blood and greatly reduce the number of blood scrap caused by ALT unqualified.［Methods］Use MissionTMC100 biochemical analyzer，Reflotron plus biochemical analyzer and microlab 300 semiautomatic biochemistry analyzer each to inspect 100 blood donors＇ALT，then compare each results with Hitachi7600－010 automatic biochemistry analyzer.［Results］Compared with Hitachi 7600－010 automatic biochemistry analyzer，MissionTMC100 biochemical analyzerχ2=2.25，relevancer=0.9550;Reflotron plus biochemical analyzerχ2=4.167，relevancer=0.9724;microlab 300 semiautomatic biochemistry analyzer χ2=0.25，relevancer=0.9695.Conclusion：Microlab 300 semiautomatic biochemistry analyzer has a good result and it has a good correlation with Hitachi 7600－010 automatic biochemistry analyzer as well;MissionTMC100 biochemical analyzer and Reflotron plus biochemical analyzer are suggested to adjust critical value，MissionTMC100 biochemical analyzer is suggested to adjust to 35，while Reflotron plus is suggested to 34 U/L.

blood donation;inspection methods;IFCC;dry chemical apparatus examination

R446.1

A

1671－7295(2012)03－0293－04

2011－12－27;

2012－04－01

周永嘉(1972－)，女，江蘇吳縣人，主管技師。E－mail：angelajiayong@sohu.com