王中霞 季旭明 王文蘋 劉 超
山東中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,濟(jì)南250355
目的:研究保元解毒湯含藥血清對(duì)小鼠成肌細(xì)胞C2C12萎縮模型中Ubiquitin、E214kmRNA及蛋白表達(dá)的影響,深入探討保元解毒湯干預(yù)肌肉蛋白降解的機(jī)制。方法:建立腫瘤壞死因子-α(TNF-α)誘導(dǎo)的肌細(xì)胞萎縮模型,顯微鏡下觀察不同時(shí)間點(diǎn)的形態(tài)學(xué)變化。實(shí)驗(yàn)分為正常對(duì)照組,TNF-α模型組,含藥血清組。含藥血清干預(yù)6h后,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測肌細(xì)胞中Ubiquitin、E214kmRNA表達(dá)。含藥血清干預(yù)72h后,Western blotting檢測肌細(xì)胞中Ubiquitin、E214k蛋白表達(dá)。結(jié)果:TNF-α誘導(dǎo)后,肌細(xì)胞明顯萎縮,肌肉纖維變細(xì),橫徑減小。與正常對(duì)照組比較,模型組細(xì)胞中Ubiquitin、E214kmRNA及蛋白表達(dá)水平明顯升高(P<0.05),與模型組比較,含藥血清組細(xì)胞中Ubiquitin、E214kmRNA及蛋白表達(dá)水平明顯降低(P<0.05)。結(jié)論:保元解毒湯含藥血清可能通過下調(diào)Ubiquitin、E214kmRNA及蛋白表達(dá)抑制肌細(xì)胞萎縮。為深入研究保元解毒湯干預(yù)癌性惡病質(zhì)細(xì)胞因子-UPP激活所致的肌肉萎縮機(jī)制奠定基礎(chǔ)。