林信富,朱亨癤,施 菱,武一曼,陳素娟,鄭雪花,林曉暉

(1.福建中醫(yī)藥大學中西醫(yī)結(jié)合學院，福建 福州 350108；2.福建省中醫(yī)藥研究院,福建 福州 350003;3.福建中醫(yī)藥大學附屬人民醫(yī)院，福建 福州 350003)

急性腦血管病發(fā)病率、病死率及致殘率都很高，且本病發(fā)病率不斷攀升，嚴重威脅人類健康。急性腦缺血損傷的機制非常復雜，炎癥反應在其中起重要作用。腦缺血的炎癥反應是在各種細胞因子介導下的按順序進行的連續(xù)動態(tài)反應過程，也就是所謂的炎癥瀑布反應或稱炎癥級聯(lián)反應。而白細胞介素6(IL-6)、白細胞介素6(IL-6)作為前炎癥細胞因子，在腦缺血炎癥級聯(lián)反應中發(fā)揮重要作用。

1 材料與方法

1.1 試驗藥物 中風Ⅱ號(由黃芪、丹參、水蛭、赤芍、川芎、鉤藤、地龍、生大黃等組成)，含生藥2 g/mL，由福建省中醫(yī)藥研究院屏山制藥廠監(jiān)制。

1.2 實驗動物 健康雄性SD大鼠49只，由福建醫(yī)科大學實驗動物中心提供，體質(zhì)量250～280 g。

1.3 試劑 IL-17、IL-6試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.4 方法

1.4.1 動物分組與給藥 實驗動物隨機分為:1)對照組(假手術組)7只；2)缺血組21只(缺血6 h組、缺血24 h組、缺血72 h組各7只)；3)治療組21只(缺血6 h治療組、缺血24 h治療組、缺血72 h治療組各7只)。治療組在術前連續(xù)3 d(每天2次)及術后每6 h予中風Ⅱ號1 mL灌胃，缺血組于同時間點灌胃生理鹽水1 mL。

1.4.2 MCAO大鼠模型制備 參照Longa等[1]線栓法制作大鼠大腦中動脈缺血模型。按時間點6、24、72 h分別處死取腦。假手術組僅手術切開頸部皮膚，分離出頸內(nèi)動脈、頸外動脈后即逐層縫合皮下組織、皮膚。

1.4.3 神經(jīng)功能缺損評分 各組動物在處死前分別進行神經(jīng)功能缺損評分：0分，無神經(jīng)功能障礙；1分，提尾見癱瘓側(cè)前肢回收屈曲不能；2分，除1級體征外，向癱瘓側(cè)推時感覺阻力明顯降低；3分，大鼠爬行時向癱瘓側(cè)旋轉(zhuǎn)或傾斜；4分，不能自發(fā)行走或處于昏迷狀態(tài)。

1.4.4 生化指標測定 在規(guī)定時間將各組大鼠斷頭處死，快速取腦，制備10%腦組織勻漿保存。采用雙抗體夾心ELISA法測定腦組織IL-17、IL-6含量，按試劑盒說明書進行操作。

2 結(jié)果

2.1 神經(jīng)功能缺損評分分值 見表1。

表1 中風Ⅱ號對MCAO大鼠神經(jīng)功能缺損評分的影響±s)

2.2 腦組織勻漿IL-17、IL-6含量比較 見表2。

3 討論

表2 中風Ⅱ號對MCAO大鼠腦組織IL-17、IL-6含量的影響±s，n=7) pg/mL

IL-6由多種細胞產(chǎn)生，正常腦內(nèi)IL-6表達的量很少，多位于海馬、下丘腦、皮質(zhì)。腦缺血后IL-6表達則明顯增加，而且具有神經(jīng)毒性作用。資料[5-7]顯示,腦缺血后極早期即有腦內(nèi)、血漿和腦脊液IL-6水平的升高，且其水平與神經(jīng)功能和梗死范圍有緊密的關系。故有學者提出細胞因子IL-6是腦梗死的獨立預測因子。本研究結(jié)果也顯示，大鼠局灶性腦缺血后腦組織IL-17、IL-6含量明顯高于對照組,且隨缺血時間而逐漸增加，與其他學者的研究結(jié)果一致。

急性腦缺血屬于中醫(yī)“腦卒中”的范疇，其發(fā)病多與風、火、氣、瘀、虛等有關。中風Ⅱ號由黃芪、丹參、水蛭、赤芍、川芎、鉤藤、地龍、生大黃等組成，具有益氣活血通絡、清熱平肝熄風的功效。臨床與實驗研究[8-11]表明，中風Ⅱ號可增強腦組織對缺血、缺氧的耐受性，保護SOD及GSH-Px，清除自由基，減輕腦缺血再灌注損傷；并可抑制血小板CD54、CD62P的異?；罨?，抑制血小板聚集，改善腦梗死患者的細胞免疫功能;改善腦組織和神經(jīng)功能損傷，減少患者病死率和致殘率。本實驗結(jié)果表明,治療組IL-17、IL-6含量明顯低于對應時間點缺血組，差異有統(tǒng)計學意義。筆者認為，中風Ⅱ號可能通過抑制促炎性細胞因子IL-17的過高表達，進而減少其下游細胞因子IL-6的含量,抑制炎癥級聯(lián)反應，從而發(fā)揮保護神經(jīng)細胞、改善神經(jīng)功能、防治腦缺血損傷的作用。

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