李雷花

梅毒是一種由梅毒螺旋體(TP)引起的全身各器官病變的性傳播疾病，其傳染力強(qiáng)、危害性大。據(jù)世界衛(wèi)生組織(WTO)報(bào)告，成年人每年新發(fā)梅毒1200萬(wàn)，已成為嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題［1］。梅毒的診斷需依據(jù)病史，臨床表現(xiàn)及血清學(xué)診斷，由于梅毒早期的臨床表現(xiàn)并不典型，有些患者對(duì)病史陳述缺乏真實(shí)性，故血清學(xué)檢測(cè)是診斷梅毒的主要手段之一。目前，臨床實(shí)驗(yàn)室常用的血清學(xué)診斷TP的有甲苯胺紅不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)(TRUST)，膠體金法，ELISA法、TPPA法等等不同的檢測(cè)方法都有其特殊的臨床應(yīng)用價(jià)值，選擇有效的方法對(duì)梅毒早期診斷、預(yù)防和控制梅毒的傳播，避免因錯(cuò)誤的檢測(cè)結(jié)果引起不必要的醫(yī)療糾紛有著重要意義。

本文對(duì)255例患者的血清就我院檢驗(yàn)科常用的TRUST法膠體金法ELISA法以下方法學(xué)評(píng)價(jià)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2011年1月至12月皮膚科患者255例，年齡19-70歲。男性125例，女性:89例。

1.2 試劑與儀器 TRUST試劑、膠體試劑均為英科新創(chuàng)公司產(chǎn)品，ELISA試劑為上?？迫A生物工程股份有限公司產(chǎn)品，TPPA試劑由日本富士株式會(huì)社產(chǎn)品:

全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)(RMP200)振漏器、離心機(jī)等。

1.3 檢測(cè)方法 所有受試者均空腹抽血5ml，4000r/min離心5min后分離血清，血清標(biāo)本不能及時(shí)檢測(cè)則置于4℃冰箱，避免反復(fù)凍融，均采用TRUST法，ELISA法，膠體金法與TPPA對(duì)所選擇標(biāo)本按各種方法試劑盒說(shuō)明進(jìn)行檢測(cè)。前三種方法所檢測(cè)結(jié)果均與TPRA進(jìn)行比較。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 每種方法與TPPA法檢測(cè)結(jié)果之間采用χ2檢驗(yàn)，均以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

對(duì)255例皮膚科門(mén)診患者用四種梅毒抗體血清學(xué)檢測(cè)，以TPPA試驗(yàn)為金標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)TRUST法，膠體金法，ELISA法進(jìn)行評(píng)價(jià)，其結(jié)果表明，TRUST、膠體金、ELISA的敏感度分別73.56%、95.4%、98.8%，特異度分別為 97.0%、98.9%、100%，ELISA法，膠體金法與TPPA法比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，而TRUST與TPPA法比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，見(jiàn)表1。

表1 三種血清學(xué)方法檢測(cè)結(jié)果的評(píng)價(jià)

3 討論

人感染梅毒螺旋體后，可存于患者的血液及腦脊液中，3～6周可產(chǎn)生非特異性抗類脂抗體和特異性抗螺旋體抗體IgM和IgG、IgG終身存在于人體內(nèi)，可終身檢出陽(yáng)性［2］。臨床梅毒檢測(cè)常用血清學(xué)試驗(yàn)分為非梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)(如TRUST、RPR)和梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)(TPPA，ELISA等)。

TRUST是采用牛心中提取的心脂肪，同固醇、孵磷脂組成性病研究室VDRL抗原重地含有特制的甲苯胺紅溶液制成，檢測(cè)血漿或血清中的反應(yīng)素，在梅毒感染初期，由于反應(yīng)素不足，無(wú)法用TRUST檢測(cè)到，一般為陰性。4周后陽(yáng)性率10%～30%，6～8周后大多100%，經(jīng)治愈由25%自然轉(zhuǎn)陰［3］。很多時(shí)候易受到某些傳染病或自身免疫性疾病的影響，常出現(xiàn)生物學(xué)假陽(yáng)性，主要見(jiàn)于懷孕、SLE、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。由于TRUST試驗(yàn)在梅毒診斷上出現(xiàn)較高的假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果，許多學(xué)者以為T(mén)RUST已不適合作為梅毒篩選試驗(yàn)，但是TRUST試驗(yàn)滴度與病程有關(guān)，由于非特異性性抗體是TP破壞患者組織，后釋放的物質(zhì)刺激機(jī)體產(chǎn)生的，TP在人體的活動(dòng)程度基本上與此抗體的滴度成正比，所以TRUST是梅毒經(jīng)診斷后，觀察療效和判斷復(fù)發(fā)的指標(biāo)［4］。

臨床上常用的檢測(cè)特異性抗的試驗(yàn)有膠體金，ELISA，TPPA試驗(yàn)，膠體金法是一種應(yīng)用現(xiàn)代生物工程技術(shù)制備的高度純化的單克隆TP的基因工程抗原，具有快速操作簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確的特點(diǎn)，而且不需要特殊設(shè)備，結(jié)果易判讀，但其法也存在一定的假陽(yáng)性。在TP潛伏期時(shí)易漏診，所以只能作為急診或術(shù)前的一般篩查。TPPA是將梅毒的精制菌體成分包被在人工載體明膠粒上，對(duì)梅毒特異性抗體檢測(cè)具有高度特異性和敏感性，是目前公認(rèn)的確認(rèn)實(shí)驗(yàn)，但TPPA法操作復(fù)雜，結(jié)果判定需人工而不能用于自動(dòng)化，限制了其用于大批量標(biāo)本的篩查。ELISA法是用雙抗原夾心法測(cè)血清中的特異性抗體，對(duì)各期梅毒的檢出率較高，其特異性和敏感性與TPPA非常接近，并且具有操作簡(jiǎn)便，可自動(dòng)化，標(biāo)準(zhǔn)化的優(yōu)點(diǎn)，能大批量同時(shí)檢測(cè)，但ELISA結(jié)果陽(yáng)性只能說(shuō)明正在或曾經(jīng)感染過(guò)梅毒，而不能判斷梅毒的活動(dòng)情況，故不能用于療效觀察，梅毒復(fù)發(fā)或再感染的診斷。

綜上所述，根據(jù)梅毒螺旋體的生物學(xué)及免疫學(xué)特性，結(jié)合臨床上不同的檢測(cè)目的，采用ELISA法對(duì)臨床標(biāo)本進(jìn)行大批量標(biāo)本的篩查，膠體金法用急診或術(shù)前篩選，用TPPA法進(jìn)行確診，以TRUST法進(jìn)行療效判斷是較理想的實(shí)驗(yàn)室梅毒血清學(xué)檢驗(yàn)組合。

［1］薛大奇.關(guān)于當(dāng)前梅毒診治中的幾個(gè)問(wèn)題的探討.中國(guó)性科學(xué)，2008，8(17):23-25.

［2］阮豪驥.兩種梅毒檢驗(yàn)方法比較的初步研究.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2005，17(2):180.

［3］楊林.楊健等早期梅毒治療前位血清學(xué)分析.臨床皮膚科雜史，2002，27(5):314-315.

［4］吳薇.試析TPHA與TRUST在梅毒血清學(xué)診斷中的應(yīng)用.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2003，13(2):235.