杜婷婷，陳 智

(濟南市第二人民醫(yī)院，山東 濟南 250001)

淫羊藿(Herba epimedii)是小檗科(Berberidaeeae)植物。據(jù)《中國藥典》記載，淫羊藿性味辛、甘、溫，歸肝、腎經(jīng)，具有補腎壯陽、強筋骨、祛風除濕的功效，可增強機體免疫力，降壓理氣。其在臨床主要用于治療老年腎虛陽痿、腰膝酸軟、風寒濕痹及老年冠心病、神經(jīng)衰弱、高血壓、慢性支氣管炎、病毒性心肌炎、外陰白斑、骨質(zhì)疏松、更年期綜合征、中年健忘等疾病。

淫羊藿苷為箭葉淫羊藿、柔毛淫羊藿、巫山淫羊藿等干燥莖葉的提取物，分子式為C33H40O15，相對分子質(zhì)量676.67，結(jié)構(gòu)上屬于8－異戊烯基黃酮醇苷類化合物［1］?，F(xiàn)代藥理學研究證明，淫羊藿苷具有抗癡呆、抗衰老、抗缺血性腦損傷以及神經(jīng)保護作用［2～5］。

1 淫羊藿苷分離提取及含量測定研究

目前，對淫羊藿苷的提取方法常采用醇提法、超聲法、微波法、高壓法等。其中醇提法較水提法不僅提取效率高、提取周期短，而且提取物不易發(fā)霉變質(zhì)，后期處理相對容易。不足之處是提取過程需要乙醇量較多，回收溶劑需要旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀等儀器，經(jīng)濟成本稍高。王欣等［6］以淫羊藿苷提取轉(zhuǎn)移率為考察指標，對不同提取方法和提取條件進行了考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)最佳提取工藝為滲漉法，即用60% ～75%乙醇為溶媒，收集滲濾液的量為藥材的8倍，淫羊藿苷提取轉(zhuǎn)移率為90%，提取效果較好。超聲提取方法，有效成分提取過程中損失較少，操作也比較簡便，省時省力，提高了檢驗效率。胡道德等［7］以淫羊藿苷的量為質(zhì)量控制指標，通過均勻設計法對淫羊藿苷提取工藝中乙醇體積分數(shù)、固液比和超聲提取時間等因素進行研究，以考察淫羊藿苷的最佳提取工藝，得出當以80%乙醇為溶劑、固液比為1∶20、提取時間為20 min，可使藥材中淫羊藿苷最大限度地浸出。戰(zhàn)佩英［8］采用微波提取法，通過正交試驗對提取溶媒用量、輻射時間、輻射頻率以及提取次數(shù)進行考察，得到最佳提取工藝，表明微波提取法可有效提取淫羊藿苷。

對淫羊藿苷含量的測定方法目前主要有薄層法、高效液相法及毛細管電泳法等，其中高效液相法較為常用。周憶新［9］采用HPLC法測定三子強腎膠囊中的淫羊藿苷含量。結(jié)果淫羊藿苷質(zhì)量濃度線性范圍良好。此方法簡便、準確、重復性好，適合淫羊藿苷的質(zhì)量控制。

2 淫羊藿苷的藥理學研究

2.1 對心、腦血管系統(tǒng)的作用 淫羊藿苷在心血管方面具有較強的藥理作用，表現(xiàn)為抗心肌缺血、促進血管生成、抗氧化、抗動脈粥樣硬化(athemsclerosis，AS)等作用。潘志偉等［10］采用體外培養(yǎng)的乳鼠心肌細胞，制備了缺氧/復氧損傷和氧化損傷心肌細胞兩種模型，考察了淫羊藿苷對心肌細胞損傷的影響，結(jié)果表明淫羊藿苷對心肌細胞具有明顯的保護作用。馬一君等［11］通過研究發(fā)現(xiàn)，淫羊藿苷對半胱氨酸(HCY)刺激平滑肌細胞的增殖作用有顯著的抑制作用，其影響了增殖平滑肌細胞的細胞周期，使S期細胞數(shù)量減少，促進增殖的兔血管平滑肌細胞凋亡，表明淫羊藿苷具有良好的抗動脈粥樣硬化的作用。

2.2 對體外培養(yǎng)成骨細胞增殖、分化的作用 淫羊藿苷可增強成骨細胞活性，促進骨形成，從而起到“健骨”的作用。淫羊藿苷能顯著促進人成骨細胞的增殖和分化，與提高人成骨細胞的堿性磷酸酶(ALP)比活性，升高人成骨細胞BMP－2mRNA的表達有關(guān)［12］。郭海玲等［13］選用淫羊藿苷為代表，采用細胞學研究的方法，探討淫羊藿苷促人骨形成能力的可能作用機制，結(jié)果發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷實驗組具有促進人成骨細胞增殖的作用，并呈明顯的量效關(guān)系，即隨著淫羊藿苷濃度的增高，其促人成骨細胞增殖的能力逐漸增強。于波等［14］也發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷對成骨細胞的生長增殖有促進作用。鮑加榮等［15］通過切除大鼠卵巢建立骨質(zhì)疏松模型，以不同濃度淫羊藿苷喂食大鼠，考察淫羊藿苷對骨影響，結(jié)果表明淫羊藿苷能增強去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠抗外力沖擊的能力，可有效抑制卵巢切除大鼠的骨量丟失，防止骨質(zhì)疏松的發(fā)生?，F(xiàn)代藥理學研究證實淫羊藿苷促進成骨細胞增殖，促進骨折傷口愈合，并且對血液流變學有一定作用［16］。翟遠坤等［17］通過體外成骨細胞培養(yǎng)技術(shù)，考察淫羊藿苷對成骨細胞生長增殖和分化的影響，結(jié)果顯示，不同濃度含藥血清均可提高ALP活性，淫羊藿苷經(jīng)口服后的代謝產(chǎn)物可促進成骨性分化，提示其代謝產(chǎn)物是發(fā)揮骨質(zhì)疏松活性的重要成分。劉海江等［18］發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷能促進犬骨髓基質(zhì)細胞(BMSCs)增殖、促進BMSCs合成堿性磷酸酶(ALP)從而增強其成骨能力。

2.3 對內(nèi)分泌系統(tǒng)的影響 淫羊藿苷對內(nèi)分泌系統(tǒng)有明顯作用，其可明顯促進幼年小鼠附睪及精囊的發(fā)育，對離體培養(yǎng)的大鼠睪丸間質(zhì)細胞睪酮的基礎分泌和環(huán)磷酸腺苷的生成也有促進作用，表現(xiàn)為性激素樣作用。蔣兆健等［19］采用立體平滑肌張力記錄法，觀察了淫羊藿苷對家兔陰莖海綿體平滑肌的舒張效應及機制，結(jié)果表明淫羊藿苷的壯陽機制與影響NO－cGMP信號通路有關(guān)，主要通過提高陰莖海綿體平滑肌中cGMP的濃度，從而舒張海綿體，增強陰莖勃起功能。并且有文獻報道，淫羊藿苷可緩解腎陽虛小鼠睪酮及性腺激素受體基因的表達下調(diào)［20］。

2.4 免疫調(diào)節(jié)作用 趙連梅等［21］通過環(huán)磷酰胺對小鼠骨髓及免疫抑制造成損傷，然后考察淫羊藿苷對其免疫系統(tǒng)影響，實驗結(jié)果表明淫羊藿苷對機體的體液免疫和細胞免疫都具有良好的促進和恢復作用，并且可以改善骨髓造血，通過造血系統(tǒng)功能的保護而進一步改善小鼠的免疫力。趙連梅等［22］通過觀察淫羊藿苷處理人子宮內(nèi)膜癌耐藥細胞前后的細胞增殖和周期的變化，以及CIK細胞對其殺傷活性和免疫表型的影響發(fā)現(xiàn)不同濃度淫羊藿苷可抑制 B－MD－CI(ADR+/+)細胞的生長，導致細胞增殖的抑制，為淫羊藿苷與過繼免疫治療相結(jié)合，為更有效提高惡性腫瘤的治療提供新的手段。汪海東等［23］通過實驗發(fā)現(xiàn)，增齡導致脾CD4+T淋巴細胞凋亡加速，而淫羊藿苷能夠降低凋亡速率，對維持淋巴細胞的數(shù)量，重塑失衡的免疫功能穩(wěn)態(tài)，延緩免疫衰老具有積極的意義。

2.5 抗腫瘤作用 王謙等［24］研究表明，淫羊藿苷可明顯抑制HepG 2.2.15細胞的增殖，抑制作用呈時間依賴關(guān)系;同時可下調(diào)HepG 2.2.15細胞FasL的表達。淫羊藿苷處理的T淋巴細胞凋亡率有明顯下降，在一定程度阻斷了HepG 2.2.15細胞對T淋巴細胞通過Fas/FasL途徑的攻擊。因此推斷淫羊藿苷可逆轉(zhuǎn)肝癌細胞通過Fas/FasL途徑的免疫逃逸作用，并且提高其對免疫效應細胞的殺傷敏感性，這將為抗腫瘤提供新的途徑。

2.6 增強記憶作用 鄧煒等［25］研究發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷對血管性癡呆大鼠有學習記憶保護作用。劉東華等［26］研究發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷可明顯改善快速老化小鼠SAMP8腦線粒體結(jié)構(gòu)和功能。并且淫羊藿苷可明顯改善皮質(zhì)氧化應激快速老化小鼠SAMP8 抗氧化能力［27］。

3 淫羊藿苷現(xiàn)代給藥系統(tǒng)的研究

淫羊藿苷的給藥方式有多種，現(xiàn)代主要有口服給藥、經(jīng)皮給藥、黏膜給藥等。口服給藥是臨床最易被患者所接受的給藥方式，目前中藥及其生物活性成分大部分以傳統(tǒng)粗制劑生產(chǎn)，口服制劑中有效成分如果無法很好地穿透腸膜屏障，將不能發(fā)揮應有的療效，甚至加重患者的負擔。淫羊藿苷脂溶性過強，口服不易吸收，藥效發(fā)揮不佳。新型給藥系統(tǒng)脂質(zhì)體粒徑一般介于 10 ～500 nm 之間［28，29］，其在改善藥物ADME/Tox特性等方面顯示出獨特的優(yōu)勢，可以將不易穿透腸膜細胞的有效成分包裹于脂質(zhì)體中。李仁杰等［30］制作了淫羊藿苷元脂質(zhì)體，利用大鼠腸灌流模型，通過骨髓基質(zhì)細胞培養(yǎng)模型對淫羊藿苷元及脂質(zhì)體的抗骨質(zhì)疏松活性進行考察，對脂質(zhì)體和游離藥物腸吸收情況進行比較。研究結(jié)果顯示，淫羊藿苷元脂質(zhì)體能顯著促進骨髓基質(zhì)細胞增殖，增強細胞內(nèi)堿性磷酸酶活性，并在一定程度上抑制脂肪細胞伴生現(xiàn)象，顯著增加其體內(nèi)消除。

4 小結(jié)

綜上所述，淫羊藿苷的提取分離方法已經(jīng)較為成熟，且藥理作用廣泛，具有多種生物學效應，是極其重要并有很大開發(fā)利用價值的中藥材成分。目前，對淫羊藿的藥理研究由研究淫羊藿總黃酮深入到淫羊藿苷的單體，其研究范圍主要集中在對骨系統(tǒng)、免疫調(diào)節(jié)和延緩衰老、生殖系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)等方面。因此有待于進一步利用現(xiàn)代科學的研究方式，探索高效的淫羊藿苷提取分離方法，通過多種途徑在已有研究基礎上改造淫羊藿苷的結(jié)構(gòu)并測定其藥理活性，通過研制不同的淫羊藿苷劑型，共同為淫羊藿屬植物的開發(fā)利用開辟一條新的道路。并且有必要進一步探索淫羊藿苷的用量控制和吸收方式以及毒性和保護作用的確切機制。淫羊藿苷的分離提取工藝以及含量測定、藥理學等多方面的深入研究將為我們今后開發(fā)新的治療藥物、科學用藥以及合理用藥提供重要的理論依據(jù)。

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