岳振華，崔茂杰

(山東方明藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，山東 東明 274500)

熱原是指能引起恒溫動(dòng)物體溫異常升高的某些微生物的尸體及其代謝產(chǎn)物，主要是細(xì)菌的一種內(nèi)毒素，致熱作用最強(qiáng)的是革蘭陰性桿菌的代謝產(chǎn)物。臨床應(yīng)用時(shí)注入人體的輸液中含熱原量達(dá) 1 μg·kg－1［1，2］時(shí)，就能引起熱原反應(yīng)，病人在40 min左右便會(huì)出現(xiàn)發(fā)冷、顫抖、發(fā)熱、出汗、昏暈、嘔吐等癥狀，嚴(yán)重者可出現(xiàn)虛脫現(xiàn)象，有時(shí)甚至有生命危險(xiǎn)?，F(xiàn)從熱原的基本性質(zhì)、注射劑熱原污染途徑等幾個(gè)方面來(lái)探討注射劑生產(chǎn)中控制熱原的方法。

1 熱原基本性質(zhì)

1.1 熱原主要具有耐熱性、濾過(guò)性、水溶性、不揮發(fā)性。

1.1.1 耐熱性 熱原在121℃、30 min可被破壞。

1.1.2 濾過(guò)性 熱原的體積小，約為1～50 μm之間，普通過(guò)濾器無(wú)法有效截留。

1.1.3 水溶性 熱原分子中因含有磷脂、脂聚體及蛋白質(zhì)，所以能溶于水。

1.1.4 不揮發(fā)性 熱原本身不具有揮發(fā)性，但具有水溶性，在蒸餾時(shí)被未汽化的水滴帶入蒸餾水中、溶媒或制劑中。

1.2 熱原能被強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、強(qiáng)氧化劑、機(jī)械力及超聲波等破壞。

1.3 熱原帶有正、負(fù)電荷，因此可采用離子交換法去除熱原。

1.4 熱原能與血管壁細(xì)胞的磷脂強(qiáng)力結(jié)合，在臨床上使人體產(chǎn)生熱原反應(yīng)。

1.5 干燥的熱原提取物在較長(zhǎng)時(shí)期內(nèi)仍很穩(wěn)定，就是熱原水溶液保存幾年也很少失活。

2 注射劑熱原污染途徑

注射劑生產(chǎn)中，熱原引入的途徑通常至少包括以下幾個(gè)方面。

2.1 環(huán)境 藥品生產(chǎn)環(huán)境是藥品質(zhì)量的基礎(chǔ)條件，在藥品生產(chǎn)中，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)生產(chǎn)環(huán)境的監(jiān)測(cè)，確保生產(chǎn)環(huán)境的符合性，特別是藥品暴露區(qū)域更應(yīng)保證區(qū)域內(nèi)的微生物數(shù)和塵粒數(shù)符合要求;除此之外，與生產(chǎn)環(huán)境相關(guān)的保障設(shè)施如空調(diào)凈化系統(tǒng)應(yīng)加強(qiáng)巡檢和維護(hù)，確保及時(shí)發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，解決潛在的危害，消除不良的影響。

2.2 人員 人員作為生產(chǎn)環(huán)境最大的污染源，應(yīng)養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習(xí)慣和行為習(xí)慣，減少生產(chǎn)區(qū)的污染，特別是與藥品直接接觸時(shí)，更應(yīng)做好消毒等防護(hù)措施。

1.2.2 臨床資料調(diào)查 對(duì)納入研究對(duì)象年齡、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、孕周、妊娠期高血壓史、糖尿病史、分娩次數(shù)、胎盤(pán)粘連、吸煙史、前置胎盤(pán)、巨大兒、宮縮乏力等方面進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查。

2.3 溶媒 注射劑中溶媒主要是注射用水，合格的注射用水如果貯存時(shí)間較長(zhǎng)或貯存方式不當(dāng)，會(huì)產(chǎn)生大量熱原。

2.4 原輔料 原輔料質(zhì)量不好或處理不當(dāng)都會(huì)產(chǎn)生熱原，原輔料包裝不嚴(yán)密，貯存不當(dāng)，均有可能被細(xì)菌污染產(chǎn)生細(xì)菌內(nèi)毒素。

2.5 工器具 生產(chǎn)注射劑用的配制罐、管道、工器具等清潔消毒不嚴(yán)格或滅菌不徹底也會(huì)產(chǎn)生熱原。

3 去除熱原的方法

因熱原具有耐熱性、過(guò)濾性、水溶性、不揮發(fā)性及能被強(qiáng)酸強(qiáng)堿破壞的性質(zhì)，故可通過(guò)以下方法將其去除。

3.1 高溫法 凡能經(jīng)受高溫加熱處理的容器、用具(如玻璃器具等)，在洗凈后，于250℃加熱45 min以上，可以破壞熱原。

3.2 酸堿法 玻璃容器、用具用重鉻酸鉀硫酸清潔液浸泡處理或用稀氫氧化鈉溶液煮沸30 min以上，可將熱原破壞。

3.3 吸附法 常用的吸附劑為藥用炭，具有助濾、脫色作用，常用量為0.1% ～0.2%，個(gè)別品種可增加至0.5%，但藥用炭的臨界吸附溫度為40～50℃，并需維持一定時(shí)間，一般做法是先煮沸一定時(shí)間后再冷卻至40～50℃后濾過(guò)脫炭。

3.4 超濾法 一般要控制超濾薄膜的孔徑在3.0～15 nm，而且在操作時(shí)要嚴(yán)格注意過(guò)濾時(shí)藥液的溫度與壓力。

3.6 離子交換法 用301型弱堿性陰離子交換樹(shù)脂10%與122型弱堿性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂8%能成功地除去丙種胎盤(pán)球蛋白注射液中的熱原。

3.7 其他 微波也可用于密閉容器內(nèi)液體藥物的滅菌，同時(shí)也能破壞其中熱原，但藥物須對(duì)微波的照射穩(wěn)定;用反滲透法通過(guò)三醋酸纖維膜除去熱原，是近幾年發(fā)展起來(lái)的有實(shí)用價(jià)值的新方法。

4 生產(chǎn)過(guò)程的熱原控制

4.1 注射用水的熱原控制 注射用水是注射劑的主要溶媒，其熱原的控制非常關(guān)鍵，具體要抓好以下兩點(diǎn)。

4.1.1 生產(chǎn)時(shí)要盡量使用新鮮的注射用水、若需儲(chǔ)存時(shí)則必須按照《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》的要求使其溫度保持在70℃以上并處于循環(huán)狀態(tài)。

4.1.2 對(duì)注射用水的儲(chǔ)罐及其管道要進(jìn)行定期消毒以防微生物的滋生，同時(shí)儲(chǔ)罐的通氣口應(yīng)安裝不脫落纖維的疏水性除菌濾器，避免注射用水直接與外界相通。

4.2 生產(chǎn)用貯罐、管道及工器具的熱原控制 貯罐、管道系統(tǒng)及工器具應(yīng)采用適宜的清洗方法清洗干凈。由于熱原溶于水，用低內(nèi)毒素限度的注射用水不斷沖洗管道，可能會(huì)稀釋和置換并帶走一部分熱原，必要時(shí)用一定濃度的酸堿洗滌以破壞熱原。據(jù)報(bào)道，酸、堿等破壞熱原的最低有效濃度分別為 0.04 mol·L－1和 0.06 mol·L－1;其次是制定嚴(yán)格的清洗、消毒滅菌措施、規(guī)定適宜的清洗、消毒滅菌周期。每批生產(chǎn)結(jié)束后，罐、管道系統(tǒng)及工器具應(yīng)清洗和消毒，清洗后的罐、管道系統(tǒng)采用純蒸汽熱壓滅菌或近似巴氏滅菌原理消毒，以殺死(滅)細(xì)菌，控制細(xì)菌的生長(zhǎng);同時(shí)對(duì)配制、灌封等工序所用器具、針頭、管道等也必須嚴(yán)格按照要求進(jìn)行滅菌和消毒，以防其污染藥液引入熱原。在濕熱狀態(tài)下，熱原的耐熱性變差，因此對(duì)一些不耐高溫的器具、濾芯等可用濕熱滅菌法除去熱原，從而可達(dá)到控制熱原污染的目的。

4.3 生產(chǎn)過(guò)程對(duì)環(huán)境與人員的控制 首先是環(huán)境，對(duì)于配制、洗烘瓶、灌封等工序其空間潔凈度要求非常高，必須達(dá)到C級(jí)、B級(jí)或局部A級(jí)的凈化級(jí)別，為保證該區(qū)域的空間潔凈度能始終達(dá)到這一要求、我們必須對(duì)該區(qū)域環(huán)境進(jìn)行定期檢測(cè)，必要時(shí)應(yīng)進(jìn)行時(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)檢測(cè)，以防止因環(huán)境原因?qū)λ幰夯蚱骶咴斐晌廴?。其次是人員，對(duì)于配制、灌封、洗瓶等工序員工，必須嚴(yán)格按照要求穿戴工作服、做到毛發(fā)不外露且口罩蒙過(guò)口鼻，同時(shí)操作時(shí)不得裸手接觸藥液、安瓿、濾芯、灌注針頭等，從而防止因員工操作不當(dāng)使藥液污染熱原。

4.4 生產(chǎn)過(guò)程對(duì)藥液的熱原控制 對(duì)藥液的熱原控制應(yīng)重點(diǎn)做好以下幾點(diǎn)。

4.4.1 藥用炭吸附 藥液在配制過(guò)程中必須嚴(yán)格按照工藝要求使用新鮮注射用水并根據(jù)情況讓藥用炭吸附有足夠的時(shí)間，使熱原最大限度的被吸附。

4.4.2 控制藥液暴露 生產(chǎn)過(guò)程中藥液從配制到灌封整個(gè)過(guò)程應(yīng)最大限度的處于密閉狀態(tài)，對(duì)于工器具上的呼吸器濾芯應(yīng)及時(shí)滅菌或更換。

4.4.3 縮短藥液放置時(shí)間 藥液從配制到灌封、從灌封到滅菌其時(shí)間間隔必須嚴(yán)格控制，盡量縮短藥液的放置時(shí)間。灌封后的藥品應(yīng)及時(shí)滅菌不宜放置過(guò)長(zhǎng)、以防微生物的滋生。

4.4.4 藥液的過(guò)濾 對(duì)從配制到灌封藥液過(guò)濾系統(tǒng)的密封性要進(jìn)行定期檢查，破損的器具配件要及時(shí)更換;過(guò)濾藥液所用的濾芯每班生產(chǎn)結(jié)束后要及時(shí)清洗滅菌、并且在每批藥品生產(chǎn)前后都應(yīng)做泡點(diǎn)實(shí)驗(yàn)，確保濾芯完整性，從而保證過(guò)濾系統(tǒng)的穩(wěn)定有效，同時(shí)，應(yīng)做好濾芯使用次數(shù)記錄，當(dāng)濾芯達(dá)到了規(guī)定的使用次數(shù)，當(dāng)氣泡點(diǎn)試驗(yàn)合格，濾芯也應(yīng)進(jìn)行更換。

4.4.5 滅菌 滅菌設(shè)備要有完善的監(jiān)控系統(tǒng)，隨時(shí)監(jiān)測(cè)滅菌情況同時(shí)對(duì)滅菌設(shè)備進(jìn)行定期驗(yàn)證保證滅菌設(shè)備的完好與穩(wěn)定從而使其對(duì)藥品的滅菌安全徹底。

4.5 對(duì)原輔料的熱原控制 所用原輔料在儲(chǔ)存和運(yùn)輸過(guò)程中要防止外包不嚴(yán)或包裝破損等情況的發(fā)生，以防原輔料外露污染熱原。

4.6 安瓿的處理 對(duì)玻璃的熱原處理一般采用干熱滅菌，至少應(yīng)相當(dāng)于250℃、45 min的熱力效果。因此対安瓿的處理除用注射用水徹底清洗外，對(duì)其進(jìn)行高溫滅菌至關(guān)重要。必須對(duì)烘箱的溫度及安瓿通過(guò)烘箱的時(shí)間進(jìn)行監(jiān)測(cè)驗(yàn)證，以保證對(duì)安瓿滅菌的安全、有效。

5 結(jié)論

在注射劑生產(chǎn)中，只有按照生產(chǎn)全過(guò)程管理的要求去做，從各個(gè)方面來(lái)控制熱原的引入，才能有效確保產(chǎn)品的質(zhì)量。

［1］郭金轉(zhuǎn)，鄭秀端，陳定樣.基層醫(yī)院輸液熱原反應(yīng)及其預(yù)防［J］.臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2002，1(3):187 －188.

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