吳 寧

云南省老年病醫(yī)院檢驗(yàn)科，云南昆明 650011

肌酐是一種肌酸代謝的終末產(chǎn)物，其是由磷酸肌酸通過脫磷酸基，并閉合成環(huán)從而形成的一種內(nèi)脫水物。血中肌酐的濃度主要是與腎小球?yàn)V過率有關(guān)，因而血清肌酐濃度的測(cè)定是評(píng)價(jià)臨床腎功能的重要指標(biāo)[1]。目前實(shí)驗(yàn)室血清肌酐的常規(guī)檢測(cè)方法主要有兩種：堿性苦味酸法和酶法[2]。本研究對(duì)本單位采用的酶法和堿性苦味酸法檢測(cè)肌酐的差異進(jìn)行了比較，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 檢測(cè)儀器

采用日立7020和美國(guó)貝克曼DXC600全自動(dòng)的生化分析檢測(cè)儀。

1.2 檢測(cè)和分析的方法

（1）酶法X于日立7020的 儀器進(jìn)行檢測(cè)；堿性苦味酸法Y于貝克曼DXC600 儀器上進(jìn)行檢測(cè)。（2）每天隨機(jī)抽取8 份臨床樣本，分別用兩種方法進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)，一共檢測(cè)5 d。（3）對(duì)檢測(cè)的結(jié)果進(jìn)行記錄（Xij 和Yij），對(duì)每個(gè)檢測(cè)樣本的結(jié)果的均數(shù)（Xi 和Yi） 進(jìn)行計(jì)算、樣本經(jīng)重復(fù)檢測(cè)后的值間差值的絕對(duì)值（Dxi 和Dyi）和這兩種不同的檢測(cè)方法檢測(cè)的結(jié)果的均數(shù)之間的差值（Yi-Xi）。對(duì)進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)樣本得到的檢測(cè)值間的差值（Dxi 和Dyi）的均值進(jìn)行計(jì)算。對(duì)兩種不同檢測(cè)方法檢測(cè)結(jié)果均值間差值（Yi-Xi）的均值進(jìn)行計(jì)算。如果判斷大于平均數(shù)的4倍時(shí)，為無(wú)效的檢驗(yàn)結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用Kappa常數(shù)（k）來評(píng)價(jià)兩者結(jié)果的一致性。Kappa值的判定標(biāo)準(zhǔn)：K＜0弱；0～0.2 差；0.21～0.40尚好；0.41～0.60中度；0.61～0.80高度；0.81～1最強(qiáng)。

2 結(jié)果

部分患者樣本檢驗(yàn)結(jié)果見表1。所有樣本重復(fù)測(cè)定值間的差值均未超過兩種方法測(cè)定結(jié)果均值間差值的平均數(shù)，所有結(jié)果均有效。計(jì)算兩種方法測(cè)定患者血清樣本肌酐濃度結(jié)果，經(jīng)Kappa檢驗(yàn)，K=0.9237，一致性較好。

利用直線相關(guān)方程對(duì)兩法在不同肌酐濃度作預(yù)期偏倚和相對(duì)偏差。兩種方法的回歸線性方程是：Y=0.9987X+15.953，（相關(guān)系數(shù)r =0.997 9），以1/4 CLIA'88= 3. 75% 為判斷方法間的偏差臨床是否可接受的允許值， 結(jié)果顯示在低值和高值時(shí)苦味酸法與酶法的偏差不能接受。見表2。

表1 患者樣本檢驗(yàn)結(jié)果

表2 兩種方法測(cè)定血肌酐預(yù)期偏倚、相對(duì)偏差及臨床可接受性

3 討論

目前肌酐測(cè)定方法主要包括化學(xué)法（堿性苦味酸法）、酶法、電極法、毛細(xì)管電泳法及高效液相層析法等。堿性苦味酸法的成本較低，操作較簡(jiǎn)便，是一種測(cè)定肌酐的經(jīng)典方法，但存在一定的缺陷，其受維生素C、乙酰乙酸、丙酮酸以及青霉素G、頭孢唑啉等能與苦味酸起反應(yīng)的假肌酐物質(zhì)的干擾，因而結(jié)果特異性不高[3]。

雖然酶法的實(shí)驗(yàn)試劑價(jià)格較貴，但是基質(zhì)效應(yīng)對(duì)肌酐酶法的影響較小，測(cè)試結(jié)果穩(wěn)定，有很好的重復(fù)性，特異性高，越來越受到實(shí)驗(yàn)室的歡迎。同時(shí)肌酐酶法的線性范圍寬，是目前一種比較理想的肌酐檢測(cè)方法。而當(dāng)血腫肌酐的濃度超出一定范圍時(shí)苦味酸法就比較難準(zhǔn)確的進(jìn)行測(cè)定了。相關(guān)研究表明堿性苦味酸測(cè)定方法的線性上限是2 210μmmol/L，而肌酐酶法的線性上限則可高達(dá)8 840μmmol/L[1]。本研究對(duì)分別采用肌酐酶法和堿性苦味酸法兩種不同的方法測(cè)定血清中肌酐含量的結(jié)果作了比較和偏倚的評(píng)估。肌酐酶法作為對(duì)照的方法，評(píng)估了Jaffe's 速率法，經(jīng)Kappa檢驗(yàn)，兩種不同方法檢測(cè)的結(jié)果一致性較好。隨著血中肌酐濃度的不斷增大，相對(duì)預(yù)期偏倚隨之減小?？梢杂弥本€回歸方程評(píng)估方法間的系統(tǒng)偏倚。兩種方法的回歸線性方程是：Y=0.998 7X+15.953 （相關(guān)系數(shù)r =0.997 9），以1/4 CLIA'88= 3.75% 為判斷方法間的偏差臨床是否可接受的允許值， 由結(jié)果得知低值和高值時(shí)苦味酸法與酶法的偏差不能接受，當(dāng)血清肌酐濃度為100.00 μmmol/L、500.00 μmmol/L和900.00 μmmol/L時(shí)，Jaffe's 速率法的偏倚分別為11.78%、2.64%、6.51%，與徐國(guó)賓等[4]、陳雪梅等[5]的研究結(jié)果相同。

苦味酸法的測(cè)定結(jié)果與真值之間存在偏差， 當(dāng)SCr＜100 μmmol/L， 實(shí)驗(yàn)結(jié)果假性偏高，大約偏高5%～10%，但 SCr＞200 μmmol/L 時(shí)，測(cè) 試 結(jié) 果 則 假 性 偏 低，約10%～15%。亦有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道當(dāng)血清Cr ＜ 80 μmol/ L 時(shí)，兩種方法的測(cè)定值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P＜0. 05） ，同時(shí)酶法的測(cè)定值普遍較苦味酸法低，甚至比正常參考值的低限低：當(dāng)血清Cr＜200 μmol/ L 時(shí)，兩種方法的測(cè)定結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05） ：但當(dāng)血清Cr＞200 μmol/L 時(shí)，兩者檢測(cè)結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，酶法的測(cè)定值均較苦味酸法的的高[6]。因此可以看出，酶法的靈敏度高，是一種理想的血清肌酐測(cè)定方法?；厥赵囼?yàn)中酶法的平均回收率均高于苦味酸法的平均回收率[6]。

以上研究結(jié)果提示，當(dāng)用不同的方法檢測(cè)同一份標(biāo)本的血肌酐濃度水平時(shí)，不同的檢測(cè)的方法，檢測(cè)的結(jié)果并不相同[7]。因此在測(cè)定中，因?yàn)楦鶕?jù)測(cè)定方法的不同建立不同的參考范圍，對(duì)比校正不同的檢測(cè)方法，才能給臨床準(zhǔn)確一致的檢測(cè)結(jié)果。

[1]張東玲.肌酐測(cè)定的方法學(xué)進(jìn)展[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2006，27（6）：521-523.

[2]張建平，王治國(guó).肌酐檢測(cè)的準(zhǔn)確性問題研究[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2008，29（6）：501-503.

[3]武強(qiáng)，王龍武，申春梅.肌氨酸氧化酶法測(cè)定健康成人血清肌酐參考值的建立 [J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)， 2009，24（1）：69-70.

[4]徐國(guó)賓，李志艷.應(yīng)重視實(shí)驗(yàn)室檢查在慢性腎病早期診斷中的應(yīng)用[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2006，29（11）：961-965.

[5]陳雪梅，王亞平，王芳. 兩種測(cè)定血清肌酐方法偏倚的比較[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2010，28（5）：512-513.

[6]屈引婷， 王鴻. 兩種不同方法檢測(cè)血清肌酐結(jié)果的比較[J]. 現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2005 ，20 （4） ： 82.

[7]張建平，王治國(guó).肌酐檢測(cè)的準(zhǔn)確性問題研究[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2008，29（6）：501-503.