胡愛(ài)根，李清祥，周美英，雷 震

（1.豐城礦物局職工總醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西 豐城 331141；2.南昌市第三醫(yī)院檢驗(yàn)科，南昌 330009；3.南昌市第九醫(yī)院檢驗(yàn)科,南昌 330002）

矽肺是由于長(zhǎng)期吸入含二氧化硅粉塵導(dǎo)致肺組織彌漫性纖維化而引發(fā)的一種慢性疾病，其發(fā)病機(jī)制尚未完全清楚。肺損傷纖維化是一個(gè)復(fù)雜的病理過(guò)程，早期特征是肺泡炎性水腫，繼之出現(xiàn)肺間質(zhì)增生和肺纖維化，最終導(dǎo)致呼吸功能的完全喪失[1],許多細(xì)胞因子參與其反應(yīng)，但這方面的研究多限于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)[2]。為此，本研究檢測(cè)矽肺患者血清白介素－8（IL-8）和血小板衍生生長(zhǎng)因子-AA（PDGF-AA）含量，探討其在矽肺發(fā)病機(jī)制中的作用，為尋找新的療效觀察指標(biāo)和治療途徑提供依據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選擇2008年1月至2012年6月在豐城礦物局職工總醫(yī)院進(jìn)行體檢、住院及門診隨訪者為研究對(duì)象。以健康體檢者為對(duì)照組（n=110），年齡（49.6±5.3）歲。某鑄造廠接觸矽塵作業(yè)、工齡在1年以上者211名（清砂工88例、型砂工100例、其他工種23例）接塵工人為接塵組，年齡（50.2±5.9）歲。矽肺患者155例為矽肺組，其中Ⅰ期矽肺74例、Ⅱ期56例，Ⅲ期25例清砂工120例、型砂工26例、其他工種9例，年齡（51.6±6.4）歲。48例非矽肺患者為作業(yè)觀察對(duì)象（0＋）（觀察對(duì)象組，即指粉塵作業(yè)人員健康檢查發(fā)現(xiàn)X射線胸片有不能確定的塵肺樣影像學(xué)改變，其性質(zhì)和程度需要在一定期限內(nèi)進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察者），清砂工27例、型砂工13例、其他工種8例，年齡（53.0±5.2）歲。各組對(duì)象均為男性。剔除心臟病、高血壓病、糖尿病、腎臟病、肝臟病、血液病、風(fēng)濕免疫系統(tǒng)疾病、腫瘤患者等。所有研究對(duì)象均未從事過(guò)各類輻射和有毒作業(yè)，也未長(zhǎng)期接觸過(guò)各類農(nóng)藥和毒物；營(yíng)養(yǎng)和消化吸收功能良好，在受檢前1個(gè)月內(nèi)均未服用維生素C、銀杏葉制劑和茶多酚等抗氧化藥物。各組對(duì)象的年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）,具有可比性。

采用問(wèn)卷調(diào)查方法，了解研究對(duì)象的粉塵接觸史、吸煙史、既往史、家族史。由研究人員填寫問(wèn)卷。

1.2 矽肺的診斷

根據(jù)國(guó)家塵肺X線診斷標(biāo)準(zhǔn)，參考受檢者的系列胸片和該單位矽肺發(fā)病情況，由豐城礦物局總醫(yī)院塵肺診斷小組依據(jù)GBZ70-2002和 GBZ70－2009《塵肺病診斷標(biāo)準(zhǔn)》[3－4]進(jìn)行診斷、分期。

1.3 試劑與儀器

ELISA檢測(cè)試劑盒（美國(guó)Biosource公司），全自動(dòng)生化分析儀（美圍Beckman公司），spiro IabⅡ型便攜式肺功能儀（意大利MIR公司）。

1.4 IL-8和PDGF-AA的檢測(cè)

清晨空腹抽取外周靜脈血5 mL。置于EDTA的干燥試管中，立即混勻。 2 500 r·min－1離心 10 min，分離血清，于-80℃保存待測(cè)。所有操作步驟由專人完成，嚴(yán)格按照試劑盒提供的方法操作。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

與對(duì)照組比較，接塵組、觀察對(duì)象組和矽肺組IL-8水平明顯升高（P<0.01）；與接塵組比較，觀察對(duì)象組和矽肺組IL-8水平明顯升高（P<0.05或P<0.01）。與對(duì)照組和接塵組比較，觀察對(duì)象組和矽肺組PDGF-AA水平明顯升高（P<0.05或P<0.01）。見(jiàn)表1。

表 1 各組對(duì)象 IL-8和PDGF-AA 的比較 ±s，ρ/ng·L－1

表 1 各組對(duì)象 IL-8和PDGF-AA 的比較 ±s，ρ/ng·L－1

△P＜0.01與對(duì)照組比較，#P＜0.05與對(duì)照組和接塵組比較。

組別 n IL-8 PDGF-AA對(duì)照組 110 6.55±1.94△ 26.38±10.14接塵組 211 49.66±5.42△ 27.31±12.22觀察對(duì)象組 48 111.07±10.08△ 56.26±14.35#矽肺組 155 226.45±19.03△ 65.16±11.94#

3 討論

正常情況下，肺泡上皮細(xì)胞接受來(lái)自環(huán)境的顆粒和微生物刺激，巨噬細(xì)胞和上皮細(xì)胞分泌化學(xué)增活素和細(xì)胞因子以調(diào)節(jié)粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞聚集、滲出，清除各種刺激影響，但廣泛的組織損傷可導(dǎo)致肺組織炎癥、異常組織修復(fù)、纖維化發(fā)生。矽肺目前在我國(guó)接塵工人中發(fā)病率很高，危害嚴(yán)重[1]。矽肺的發(fā)生機(jī)制目前還不十分清楚，但SiO2刺激機(jī)體分泌多種細(xì)胞因子等生物活性物質(zhì)導(dǎo)致肺組織纖維化是肯定的，如果能夠早期檢測(cè)到這些細(xì)胞因子的變化，并找到某個(gè)或某些細(xì)胞因子作為相對(duì)特異的觀察指標(biāo)，將對(duì)矽肺的早期監(jiān)測(cè)及接塵人群的普查具有重要意義[5]。 已有研究[6]表明，多種細(xì)胞因子參與了塵肺病的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程，其中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（transforming growth factor β1,TGF β1）、胰島素樣生長(zhǎng)因子（insulinlike growth factor,IGF1）和結(jié)締組織生長(zhǎng)因子（connective tissue growth factor,CTGF）等對(duì)調(diào)控肺成纖維細(xì)胞的分裂、增殖及膠原蛋白的合成與降解起著十分重要的作用。

本研究發(fā)現(xiàn)，矽肺患者血清IL-8和PDGF-AA水平升高在肺纖維化的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中起著重要作用。IL-8可趨化單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞在誘導(dǎo)素（如刀豆素A）作用下合成與釋放，并且具有時(shí)間和劑量依賴性，不同細(xì)胞類型對(duì)誘導(dǎo)劑反應(yīng)各異，以單核細(xì)胞產(chǎn)量最高。另外，PDGF是刺激細(xì)胞生長(zhǎng)的主要致分裂原，對(duì)成纖維細(xì)胞有趨化作用，PDGF具有多種形式的二聚體結(jié)構(gòu)，通常所說(shuō)的PDGFI即PDGF-AA可以與肺成纖維細(xì)胞及肺內(nèi)其他多種細(xì)胞PDGFα亞單位受體相結(jié)合，從而誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞的趨化、分裂[7]。因此，接塵工人、觀察對(duì)象以及矽肺患者的IL-8和PDGF-AA呈較高水平。接觸矽塵作業(yè)工人的防護(hù)措施不當(dāng)導(dǎo)致SiO2刺激機(jī)體，使細(xì)胞因子相互作用，造成肺纖維化，觀察對(duì)象組介于矽肺的發(fā)病前期。本研究結(jié)果提示觀察對(duì)象組和矽肺組的IL-8和PDGF-AA明顯高于接塵組，表明接塵工人中在X線胸片未達(dá)到矽肺診斷標(biāo)準(zhǔn)的“觀察對(duì)象”時(shí)，即可出現(xiàn)IL-8和PDGF-AA含量升高，提示IL-8和PDGF-AA含量可作為矽肺早期生物標(biāo)志物之一。由于血清IL-8和PDGF-AA含量采用ELISA測(cè)定，方法成熟、簡(jiǎn)便可靠，標(biāo)本易于取得，具有良好的可重復(fù)性和可操作性，適合在基層單位及職業(yè)健康監(jiān)護(hù)中使用。

[1] Brown T.Silica exposure，smoking，silicosis and lung cancer-complex interactions[J].Occup Med（Lond），2009，59（2）:89-95.

[2] 高曉方，崔社懷.干擾素γ對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠肺纖維化的治療作用及機(jī)制的初步研究[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2005,27（2）:143-145.

[3] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.GBZ 70-2002．塵肺病診斷標(biāo)準(zhǔn)[S]．北京：人民衛(wèi)生出版社，2002.

[4] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.GBZ 70-2009塵肺診斷標(biāo)準(zhǔn)[S].北京：人民衛(wèi)生出版社，2009.

[5] 張雪濤，倪為民,繆榮明，等．矽肺患者氧化應(yīng)激指標(biāo)及外周血單核細(xì)胞NF-κB的變化[J]．中華勞動(dòng)衛(wèi)生職業(yè)病雜志，2011,29（4）:251-253.

[6] Wintersberger E.Regulation and biological function of thymidine kinase[J].Biochem Soc Trans，1997，25（1）：303-308.

[7] Reist R H，Dey R D，Durham J P，et al.Inhibition of proliferative activity of pulmonary fibroblasts by tetrandrine[J].Toxicol Appl Pharmacol，1993,122（1）:70-76.